JoVE Logo

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • протокол
  • Обсуждение
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Номера для обрастания PEG силана монослоя десорбируется с индивидуально адресуемых электродов ITO на стекле путем применения восстановительного потенциала. Электрохимический зачистки ПЭГ-силана слой из микроэлектродов ITO позволило клеточной адгезии пройдет в пространственно-определенных моды, с сотовыми моделей соответствующих близко к электроду узоры.

Аннотация

Способность осуществлять точный пространственный и временной контроль над клеточной поверхности взаимодействия является важной предпосылкой для сборки многоклеточных конструкции, выступающей в качестве в пробирке имитирует родных тканей. В этом исследовании, фотолитографии и травления мокрые были использованы для изготовления индивидуально адресуемых оксида индия и олова (ITO) электродами на стеклянных подложках. Стеклянные субстраты, содержащие ITO микроэлектродов были изменены с поли (этиленгликоля) (ПЭГ) силана, чтобы сделать их белков и клеточных резистивный. Наличие изоляционного PEG молекул на поверхности электрода была проверена циклической вольтамперометрии использованием калий феррицианида в качестве окислительно-восстановительных молекулы репортер. Важно отметить, что применение восстановительного потенциал вызвало десорбции слоя PEG, в результате регенерации проводящей поверхности электрода и внешний вид типичного феррицианида окислительно-восстановительных пиков. Применение восстановительного потенциала также соответствовало переключение свойства ITO электродов из ячейки без клея на сотовые-клея. Электрохимический зачистки ПЭГ-силана слой из микроэлектродов ITO позволило клеточной адгезии пройдет в пространственно-определенных моды, с сотовыми моделей соответствующих близко к электроду узоры. Micropatterning из нескольких типов клеток было продемонстрировано на этих подложках. В будущем управление biointerfacial свойства предоставляемых с помощью этого метода позволит инженера сотовой микросреды через узел из трех или более типов клеток в точные геометрические конфигурации оптически прозрачной подложке.

протокол

Часть I: структурирование электродов

  1. Чистота и обезвоженной ITO покрытием стеклянные пластинки были покрыты положительными фоторезиста
  2. Поверхность выпекают при 100 ° С для удаления растворителей из сопротивляться
  3. После выпечки, поверхность подвергалась воздействию ультрафиолетового света через фотошаблон использованием Canon маски Aligner
  4. Подвергается регионах были сняты в разработчиком решения
  5. Поверхности было трудно запеченные для удаления оставшихся разработчиком решения
  6. ITO регионов не защищены фоторезиста структурирование травились прочь в кислоте травителя
  7. Оставшиеся фоторезиста удаляют sonicating в ацетоне с образованием ITO электродов

Часть II: Модификация поверхности

  1. Измененный электроды, очищаются в камеру плазмы и изменение с 2% ПЭГ силана в толуоле. Инкубационный осуществляется в течение 2 часов, после чего 2 часа выпечки.

Примечание: Этот процесс осуществляется в перчатке мешок с азотом, чтобы избежать присутствия влаги, как ПЭГ силан реактивного к нему.

Часть III: электрохимии

  1. Сталь провода крепятся к электроду колодки.
  2. PEG силана изменение электроды расположены в электрохимической ячейке для выполнения электрохимических экспериментов.
  3. PEG силана из взаимосвязанных регионов снято с помощью трех-электродной системы в PBS.

Часть IV: Сотовый паттерн

  1. Фибробласты инкубировали с недавно лишили субстратов. При инкубации, эти клетки прикрепляются к PEG силана лишил регионы, однако, клетки не будут связываться в другом месте на поверхности.
  2. Рисунком клетки инкубируют в пресной СМИ и визуализируется с помощью микроскопа.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Обсуждение

В этом видео, мы продемонстрировали, клетка структурирование на оптически прозрачные электроды индия олова. После изготовления ITO электродов с помощью фотолитографии, они были изменены с клеткой-резистивный монослой PEG силана. Это монослоя десорбируются использованием электрохимии переключени?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
Indium Tin OxideOtherDelta TechnologiesCB 40IN
PEG silaneReagentGelest Inc.SIM6492.66
Hydrochloric AcidReagentSigma-Aldrich320331
Nitric AcidReagentSigma-Aldrich258121
EthanolReagentSigma-Aldrich459836
AcetoneReagentSigma-Aldrich650501
TolueneReagentSigma-Aldrich34866
MediaReagentInvitrogen
CollagenReagentSigma-AldrichC3867
3T3 murine FibroblastsCell LineATCC

Ссылки

  1. Lee, J. Y., Jones, C., Zern, M. A., Revzin, A. Analysis of Local Tissue-Specific Gene Expression in Cellular Micropatterns. Analytical Chemistry. 78, 8305-8312 (2006).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

7

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены