إعادة البحث عن المخدرات في الفئران باستخدام نموذج تفضيل المكان مكيفة

Summary

ويصف هذا البروتوكول مكيفة مكان التفضيل (حزب الشعب الكمبودي) كنموذج للانتكاس. يسمح هذا الإجراء بقياس الانتكاس في الحيوانات المختبرية، والنظر في تأثير منبهات البيئية المرتبطة بالمخدرات كحنين والانتكاس في المدمنين الممتنعين حاليا تركيز برامج العلاج من تعاطي المخدرات.

Abstract

ويصف هذا البروتوكول مكيفة مكان التفضيل (حزب الشعب الكمبودي) كنموذج للانتكاس في إدمان المخدرات. في هذا النموذج، يتم تدريب الحيوانات أولاً للحصول على تفضيل مكان مكيفة في حجرة إقران المخدرات، وبعد الاختبار، وتكييف ما بعد أنها تؤدي عدة دورات لإخماد تفضيل المنشأة. حزب الشعب الكمبودي يسمح بتقييم آثار مكافأة مشروطة العظة العقاقير ذات الصلة بالبيئة. بعد ذلك، يمكن أن تعاد حزب الشعب الكمبودي إخماد قوة إدارة الوحدات غير فتيلة جرعة من المخدرات، والتعرض لمؤثرات ضاغطة. وسيتم شرح كل الطرق هنا. عند الحيوان رينيتياتيس الاستجابة السلوكية، يعتبر إعادة المكافأة مشروطة التي حدثت.

المزايا الرئيسية لهذا البروتوكول أنها غير الغازية، وغير مكلفة وبسيطة مع معايير صحة جيدة. وباﻹضافة إلى ذلك، فإنه يسمح دراسة التلاعب البيئية المختلفة، مثل الإجهاد أو النظام الغذائي والتي يمكن أن تعدل الانتكاس إلى المخدرات تسعى السلوكيات. حد واحد غير أن إذا كان الباحث يهدف إلى استكشاف الدوافع والآثار يعزز الأولية للمخدرات، فإنه ينبغي أن تستكمل بإجراءات الإدارة الذاتية، كما أنها تنطوي على ردود استثابي للحيوانات.

Introduction

نموذج تفضيل المكان مكيفة (حزب الشعب الكمبودي) يوفر طريقة بسيطة لتقييم مكافأة مشروطة الناجم عن حوافز متنوعة^1،2، وقد استخدمت على نطاق واسع لدراسة آثار مكافأة مشروطة للادمان المخدرات³ . ويستند على تكييف Pavlovian، لتقييم قيمة تحفيزية لمنبهات البيئية المرتبطة بالمخدرات للحفاظ على سلوك الإدمان⁴. في هذا النموذج، منبهات البيئية اكتساب خصائص مشهي الثانوي (آثار مكافأة مشروطة) عندما يقترن بنحوله الابتدائية³. على سبيل المثال، هو يقترن مكاناً محايدا في البداية (مثل لون حجرة واحدة في قفص حزب الشعب الكمبودي) الآثار المحددة للمخدرات للاعتداء أثناء بعض تكييف الدورات⁵، بينما حجرة أخرى ترتبط بحقن مركبة. بعد تكييف، إذا كانت الحيوانات تنفق المزيد من الوقت في حجرة سابقا المرتبطة بالمخدرات، فمن المفترض أن حزب الشعب الكمبودي قد وضعت³. ويتحقق إنشاء التفضيل عند الحيوان يعطي قيمة إيجابية للعظة البيئية المرتبطة بالمخدرات، والتي هي نحوّله الأولية. ونتيجة لذلك، سوف تؤدي الحيوانات الاستجابة السلوكية البحث عن المخدرات في الاستجابة لتلك الرموز السياقية⁶. يسمح نموذج حزب الشعب الكمبودي تقييم خصائص مجزية سوبثريشولد جرعة من المخدرات، وتبين ما إذا كانت الحيوانات في حالة معينة (مثلاً، التي عانت من هزيمة الاجتماعي سابقا) أقل مناعة وأكثر حساسية للجرعات التي يتم ليست فعالة في السذاجة الحيوانات⁷.

وقد استخدمت أيضا نموذج حزب الشعب الكمبودي لتقييم خطر الانقراض/إعادة كنموذج حيوان لدراسة³من الانتكاس، وهو الهدف من هذا البروتوكول. وهناك ثلاث مراحل مختلفة: اقتناء والانقراض، وإعادة (الشكل 1). في نموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي، اكتساب الحيوانات أولاً أن حزب الشعب الكمبودي لحجرة إقران المخدرات، ومن ثم أنها تؤدي عدة دورات انقراض. علينا أن نحدد الانقراض كلحظة الذي يقلل الحيوان استجاباته السلوكية لتقريب لحافز مجزية مكيفة التي تم إزالتها (مثلاً، المخدرات)⁸. خلال دورات انقراض، استكشاف الحيوانات المقصورات في الغياب عن المخدرات، حيث تكون الأفضلية المكتسبة تدريجيا الموهنة⁹. قضية هامة للنظر هو أن التغيير السلوكي الذي يسلك هذا الحيوان أثناء الانقراض (الانخفاض التدريجي في الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات) يمكن أن تكون نتيجة لعمليات التعلم الجديدة التي تتنافس مع استجابة المستفادة السابقة، أو إلى انخفاض في الحالة الداخلية تحفيزية ل الموضوع³. وأخيراً، سيكون إعادة تفضيل المكان عن طريق المخدرات أو سياق العظة نموذجنا لإعادة¹.

إدارة حقن المخدرات المرتبطة بها فتيلة يمكن إعادة التفضيل، التي تعتبر إعادة لتقريب العظة السياقية. إعادة فتيلة المخدرات تحدث بسبب الذاكرة المستمرة لآثار المخدرات، والتي بفعل حنين ويحفز الحيوانات التماس العظة البيئية المتصلة بمكافأة ممتعة.

بعض المزايا لنموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي، هي أن هذا الإجراء غير الغازية (على النقيض من الإدارة الذاتية، الأمر الذي يتطلب جراحة) وغير مكلفة وبسيطة. وبالإضافة إلى ذلك، هذا النموذج صلاحية هي معيار جيد، كما أنه يحاكي جيدا ما يحدث في البشر^10،11، الذي يحفز إعادة مع المحفزات التي تحفز الانتكاس، مثل التعرض لل^12،المخدرات¹³ أو نشدد على¹⁴.

وهناك تقنيات أخرى مثل الانقراض – نموذج إعادة الإدارة الذاتية عن طريق الحقن الوريدي. وهنا، اضغط الحيوانات رافعة سيلفادمينيستير المخدرات، والتي تسمح بتقييم الاستجابة استثابي الحيوان، كومبولسيفيتي، والدافع^14،،من¹⁵¹⁶. والميزة الرئيسية لحزب الشعب الكمبودي على إجراءات الإدارة الذاتية اعتبار أن إعادة حزب الشعب الكمبودي تعكس إعادة تنشيط قيمة الحافز تحفيزية للمحفزات السياق المقترنة مع المخدرات، وتتألف من ظهور نهج السلوك في سياق¹⁷. وعلاوة على ذلك، يمكن للمحفزات غير المخدرات، مثل الإجهاد، وأيضا حمل إعادة^18،19. على سبيل المثال، وصفت دراسة الإدارة الذاتية واحدة أي آثار على إعادة كمية الهيروين في الفئران بعد صدمة سيرا على الأقدام أو ضبط النفس التأكيد على²⁰. وناقش المؤلف أنه غير ناجح لأنه تم اختبار هذه الضغوطات خارج قاعة الإدارة الذاتية في سياق مختلف. وفي المقابل، عند استخدام نموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي، كان هناك إعادة إنشاء واضحة من حزب الشعب الكمبودي التي يسببها المورفين بعد استخدام نفس الإجهاد، وتطبيقها في سياق مختلف لأن حزب الشعب الكمبودي، وفي أوقات مختلفة (0 و 15 دقيقة بعد التأكيد على التعرض)¹⁸ .

وقد أظهرت عدة دراسات في الأدب طرقاً مختلفة للمخدرات وإعادة الناجمة عن الإجهاد. من ناحية، وقد تم الإبلاغ عن المخدرات التي يسببها إعادة في الجرذان والفئران باستخدام المورفين^5،21،،من²²²³، الكوكايين^24،25، الأمفيتامين^{26، 27}, الإيثانول^28،29، و 3 و 4 (ديوكسي)³⁰. من ناحية أخرى، قد يكون التعرض للتأكيد على عامل حاسم في التعرض لإساءة استعمال المخدرات. يعرف الإجهاد زيادة مجزية آثار المخدرات^7،،من³¹³² ودورهم في الانتكاس راسخة^33،34. على سبيل المثال، هزيمة في التفاعلات الاجتماعية مع كونسبيسيفيك طلابية المورفين والكوكايين حزب الشعب الكمبودي^18،19. وباﻹضافة إلى ذلك، الحيوانات المعرضة لتكرار الهزيمة الاجتماعية الأكثر تعرضا لآثار مكافأة مشروطة سوبثريشولد جرعة من الكوكايين، وإعادة الأفضلية بجرعات منخفضة جداً من الكوكايين⁷.

تطبيق نموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي الذي هو وسيلة مفيدة والحساسة لتقييم إمكانية التعرض لانتكاسة في الحيوانات، ويسمح بتقييم مختلف التلاعب البيئية خفية، وهي المشغلات الرئيسية التي تهدد البشرية الانتكاس، مثل إعادة الناجم عن المخدرات أو الإجهاد.

Protocol

جميع الإجراءات التي تنطوي على الفئران ورعايتهم من الامتثال للقوانين الوطنية والإقليمية والمحلية واللوائح، التي وفقا للتوجيه 2010/63/الاتحاد الأوروبي الصادر عن "البرلمان الأوروبي" والمجلس في 22 سبتمبر 2010 المتعلق بحماية الحيوانات المستخدمة الأغراض العلمية. استخدام الحيوان ورعاية اللجنة من جامعة فالنسيا وافق على هذا البروتوكول.

1-المواد والإعداد لمكان مكيفة الأفضلية:

1. التعامل مع الفئران 3 أيام قبل الاختبار لمدة 1-2 دقيقة. وينبغي اغتنامها قاعدة الذيل. وينبغي دعم الجسم إذا كان ذلك ممكناً. ويتم ذلك لتقليل الألم والكرب عند التعامل مع حيوان ومنع التدخل المتغيرات، مثل الإجهاد.
   ملاحظة: 1 الفئران الذكور كانوا يعملون 60 يوما (الشباب) تزن 35-40 غ في التجارب الحالية. يمكن أن يتم إعادة الناجمة عن المخدرات في الفئران من كلا الجنسين. ومع ذلك، فيما يتعلق بإعادة الناجمة عن الإجهاد، نموذج الهزيمة الاجتماعية صمم فقط للقوارض الذكور، كما تفعل الإناث لا تحفز استجابة عدوانية في الفئران المقيم.
2. لتكييف مكان، استخدم مربعات متطابقة مع مقصورات متطابقة اثنين (30.7 سم طويلة × 31.5 سم واسعة × 34.5 سم ارتفاع) مفصولة بمنطقة رمادية وسط أصغر (13.8 طويلة × 31.5 سم واسعة × 34.5 عالية).
   ملاحظة: قد المقصورات القوام الكلمة مختلفة وألوان الجدار (الكلمة سلس في حجرة سوداء وأرضية الخام في واحدة بيضاء). كل حجرة من المربع CPP يحتوي على أربعة أشعة ضوء الأشعة تحت الحمراء، وستة في المقصورة المركزية. يسمح هذا تسجيل المعابر بين المقصورات والموقف للحيوان.
3. تعيين حتى أضواء الغرفة (إيقاف أو تخفيض) كل يوم. استخدام أضواء حمراء (مستحسن)، كما الحيوانات لا يرون ذلك وأنه هو تخفيف المجرب (حوالي 40 لوكس قياس 1 متر فوق مستوى الكلمة).
4. قم بإعداد البرنامج لتسجيل 15 دقيقة لتكييف ما قبل وما بعد اختبار (انظر الجدول للمواد اللازمة للبرمجيات) (الشكل 2)
5. إعداد الكوكايين الحل المطلوب للتجربة كلها. حل هيدروكلوريد الكوكايين في 0.9% كلوريد الصوديوم (المالحة) في وحدة تخزين 0.1 مل/10 غرام من وزن الجسم. خليط دوامة ومخزن في 4 درجات مئوية حلول نهاية اليوم.
   ملاحظة: قد تختلف تركيزات الكوكايين تبعاً للغرض من الدراسة. إذا كان الهدف تقييم الجرعات سوبثريشولد من الكوكايين، يمكن استخدام تركيز 1 مغ/كغ، وهو غير فعال في مراقبة الحيوانات، كما يتضح من الدراسات السابقة^24،35. إذا كانت جرعة فعالة هو الغرض، يمكن أن يكون تركيز 6 مغ/كغ المختارة، التي هي فعالة ولكن الحث على عدم إعادة²⁴، أو تركيز 25 ملغ/كغ، وهي فعالة والحث على إعادة تفضيل¹⁹.
6. اختبار الحيوانات خلال تلك المرحلة المظلمة واستخدام نفس مربع لكل الحيوانات عبر الأيام.
7. جلب الحيوانات كل يوم إلى غرفة الاختبار في اقفاصها المنزل وتركهم دون عائق لمدة 15 دقيقة كفترة تعود على جميع الأصوات المتعلقة بالاختبار.

2-اختبار

1. اكتساب
   ملاحظة: الإجراء "تكييف مكان"، غير متحيزة من حيث الأفضلية الأولى عفوية، يتكون من ثلاث مراحل: ما قبل تكييف وتكييف وتكييف ما بعد (الشكل 1).
   1. تكييف السابقة (قبل-ج) (3 أيام) (الشكل 2و الشكل 3، 4 الرقم)
      ملاحظة: هنا، قيمة محايدة من المقصورات في المربع CPP يتم تقييمه. قياس الوقت الذي يقضيه في كل حجرة وبعد مقارنتها مع أن تنفق في مقصورة واحدة في تكييف بعد انتهاء الاختبار.
      1. جلب الحيوانات إلى غرفة الاختبار وتترك لهم اعتادوا لمدة 15 دقيقة.
      2. تحقق من أن تتم إزالة المقصلة من القفص.
      3. قم بإعداد الكمبيوتر والبرنامج. أدخل الحيوان معرفات واضغط على الأمر "المحاكمة" و "بدء" (الشكل 2).
      4. ضع الماوس برفق في الدائرة الوسطى (رمادي حجرة) ومغادرة غرفة الاختبار مع الحد الأدنى من الضوضاء.
      5. يعود جميع الحيوانات في اقفاصها المنزل وحفظ البيانات عند الانتهاء من المحاكمة.
      6. السماح للفئران الوصول إلى كل الأجزاء الأخرى من الجهاز لمدة 15 دقيقة (900 ق) في اليوم الواحد على 3 أيام متتالية.
      7. في يوم 3، قم بتدوين الوقت الذي يقضيه في كل حجرة على مدى فترة s 900، وحفظه للتعيين من الأجزاء الأخرى في المرحلة القادمة (الشكل 3).
      8. قم بتعيين نصف الحيوانات في كل مجموعة الحصول على العقاقير أو المركبات في حجرة واحدة (مثلاً، أسود)، والنصف الآخر في حجرة أخرى (مثلاً، بيضاء) (الشكل 4).
         ملاحظة: يجب ضمان التوزيع النهائي للحيوانات أن نصف الحيوانات قد تم تعيينها إلى حجرة المفضل في البداية، والنصف الآخر إلى حجرة غير المفضلة. وبالإضافة إلى ذلك، تلقي نصف الحيوانات المخدرات في حجرة واحدة (على سبيل المثال، واحدة سوداء) والنصف الآخر في الآخر (في هذه الحالة، واحدة بيضاء).
      9. عشرات التوازن في الفريق داخل مقصورات على حد سواء وكذلك عبر المجموعات (اختبار مجموعة الاختلافات مع تحليل تباين (ANOVA)). كإرشادات تقريبية، يجب أن تكون القيم حول s 360-370 في اختبار ما قبل-C (الشكل 4). ملاحظة: ينبغي الكشف عنها لا توجد اختلافات كبيرة بين الوقت الذي يقضيه في المقصورات المخدرات إقران وإقران المركبة أثناء اختبار ما قبل-ج.
      10. استبعاد الحيوانات التي يحمل على النفور الشديد أو تفضيل لأي حجرة. النظر في النفور كإنفاق وقت أقل من 33% في حجرة، والنظر تفضيل عند الحيوانات تنفق أكثر من 67 في المائة من إجمالي الوقت في تلك المقصورة.
   2. التكييف (4 أيام) (الرقم 5)
      1. وزن الحيوانات واستخدام هذه الأوزان لجرعات الكوكايين أثناء تكييف.
      2. يعد الحقن بالكوكايين أو المالحة استناداً إلى وزن الجسم.
      3. حقن ماوس واحدة في وقت إينترابيريتونيلي (ip) والفور وضعه بلطف في حجرة سوداء أو بيضاء المعينة على مربع.
      4. بعد انقطاع دام ح 4، حقن جرعة المخدرات فورا قبل أن يقتصر الماوس إلى حجرة إقران المخدرات لمدة 30 دقيقة (الشكل 5).
      5. البديل من هذا الإجراء كل يوم، بدءاً بالكوكايين في أيام 1 و 3، والمالحة في أيام 2 و 4.
      6. تحقق من أن الولادة تتم في كلتا الحالتين قبل إغلاق الباب المقصلة التي تفصل بين المقصورات اثنين، مما يجعل المنطقة الوسطى لا يمكن الوصول إليها.
         ملاحظة: في هذه المرحلة، ليست هناك حاجة لإعداد برنامج كمبيوتر.
   3. بعد تكييف (وظيفة-ج) (يوم واحد)
      1. جلب الحيوانات إلى غرفة الاختبار وتترك لهم اعتادوا لمدة 15 دقيقة.
      2. إزالة الباب مقصلة فصل المقصورات اثنين.
      3. قم بإعداد الكمبيوتر والبرنامج. أدخل الحيوان معرفات واضغط على الأمر "تشغيل".
      4. سجل الوقت الذي يقضيه الفئران غير المعالجة في كل حجرة أثناء فترة مراقبة s 900.
      5. عند الانتهاء من المحاكمة، يعود جميع الحيوانات في اقفاصها المنزل وحفظ البيانات.
      6. نعتبر أن المخدرات حدت بتفضيل المكان إذا كان الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات أثناء الوظيفة-C أكبر بكثير مما في اختبار ما قبل-ج. في حالة حدوث العكس، تنظر نفور لحجرة إقران المخدرات.
2. انقراض
   1. إجراء جلسة انقراض التنزيلات في جميع الفئات/الحيوانات التي وضعت تفضيلهم لحجرة إقران المخدرات.
   2. ضع الحيوان في الجهاز (بدون المقصلة) لمدة 15 دقيقة (نفس الاختبارات قبل وبعد-ج) (الشكل 1).
      ملاحظة: إذا كانت الجرعة المستخدمة في حزب الشعب الكمبودي ارتفاع (25 ملغ/كغ)، أداء دورة انقراض واحدة كل أسبوع. إذا كانت جرعة سوبثريشولد المستخدمة (1 مغ/كغ)، ثم تنفيذ دورتان الانقراض في الأسبوع (مثلاً الاثنين والخميس).
   3. النظر في تفضيل تسقط عند عدم إظهار البيانات من الاختبار انقراض الاختلافات فيما يتعلق باختبار ما قبل-ج، ولكنها تبين الاختلافات فيما يتعلق باختبار وظيفة-ج.
   4. كرر الاختبار 24 ساعة في وقت لاحق من أجل تأكيد الانقراض.
3. إعادة حزب الشعب الكمبودي
   1. إعادة المستحثة فتيلة
      1. تقييم آثار فتيلة جرعة من الكوكايين 24 ساعة بعد أن تأكدت الانقراض.
         ملاحظة: هي جرعات فتيلة نصف الجرعة السابقة التي تلقت الحيوان أثناء تكييف. إعادة الاختبار يخضع البروتوكول نفسه كما هو الحال في ما قبل-ج واختبارات وظيفة-ج، إلا أن الحيوانات تلقي جرعة الكوكايين في وحدة غير 15 دقيقة قبل الاختبار. يمكن أن تعزز فعالية فتيلة المخدرات تدفع بإعادته إلى وظيفته بعد تجارب متكررة الانقراض/إعادة²³، على الرغم من أن النظام جرعات لا يبدو أن تلعب دوراً في النتائج التي تم الحصول عليها³⁶.
      2. جلب الحيوانات إلى غرفة مختلفة من غرفة الاختبار (مكان غير الوحدات) (الشكل 6).
      3. حقن لهم بنصف الجرعة السابقة من الكوكايين (مثلاً، إذا كانت مكيفة الحيوانات مع الكوكايين 25 مغ/كغ، جرعة فتيلة ستكون 12.5 مغ/كغ).
      4. تجلب لهم العودة إلى فيفاريوم بهم لمدة 15 دقيقة.
      5. أخذها إلى غرفة الاختبار ووضع الحيوانات في الجهاز فورا (بدون أبواب مقصلة فصل المقصورات) لمدة 15 دقيقة (نفس ما قبل واختبارات وظيفة-ج).
      6. تنظر الفرق بين الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات خلال الدورة الأخيرة من الانقراض وإعادة الاختبار كمقياس لدرجة إعادة تفضيل الناجم عن المخدرات في ثوان.
      7. كرر الإجراء الانقراض-إعادة كل مرة مع تقليل الجرعات حتى يتأكد أن تكون غير فعالة.
         ملاحظة: يمكن استخدام عنصر تحكم حقن مالحة للتحكم في قدرة فتيلة الكوكايين (وليس لحقن نفسه) للحث على إعادة.
   2. إعادة الناجمة عن الإجهاد
      1. تقييم آثار إعادة الإجهاد الناجم عن 24 ساعة بعد أن تأكدت الانقراض
         ملاحظة: إعادة الاختبارات هي نفسها كتلك التي نفذت في وظيفة-ج (أمبوليشن مجاناً لمدة 15 دقيقة)، فيما عدا أنه يتم اختبار الحيوانات 15 دقيقة بعد هزيمة الاجتماعي في ناهضة تواجه (الشكل 6)
      2. أخذ الحيوانات إلى غرفة مختلفة من الغرفة حزب الشعب الكمبودي.
      3. ضع الماوس تجريبية مع جنس الخصم عدوانية مطابقة لسن متساوية ووزن الجسم في القفص البلاستيك (الشكل 6).
         ملاحظة: يتكون اللقاء ناهضة لاختبار 10 دقيقة في قفص بلاستيكية شفافة محايدة (23x13.5x13cm) مع نتيجة هزيمة للماوس التجريبية. إعداد الخصم العدوانية، أولاً عزل الحيوانات المختلفة التي تطابق في العمر ووزن الجسم كالفئران التجريبية لمدة 3 أسابيع. تدريبها على اكتساب الخبرة القتالية واختبارها لمستويات عالية من السلوك العدواني في الإقليم. للحصول على كونسبيسيفيكس العدوانية، الفئران يجب أن تكون معزولة لمدة 3 أسابيع على الأقل، وثم تدريب في العدوانية والهجوم على السلوكيات. ويتم تدريب الحيوانات في بيئة محايدة، تواجههم في أزواج. نسمح لهم لدغة الخصم 2 أو 3 المرات وإخراجهم من القفص، تنتهي التدريب دائماً قبل واحد من اثنين من الفئران ويبين الطلب، حيث أن الخبرة المكتسبة من هذا اللقاء يعزز السلوك العدواني. بعد تعرضه لاعتداء (التهديد والهجوم من كونسبيسيفيك العدوانية)، ينبغي أن يقدم الفئران التجريبية الأبطال/الفرار والسلوك الدفاعي/مستسلمة. المعيار هو تبني موقف محدد من الهزيمة، وتتميز بوضع رأسي مستسلمة ويعرّج فوريباوس، رئيس الزاوية تعدلها بالزيادة، وتراجع عن آذان (الشكل 6). حسب بيرك et al.، 2016، ونعتبر أن إنهاء المواجهة الاجتماعية في وقت سابق إذا كان الدخيل يعرض موقف ضعيف مستسلمة > 8 s أو إذا وقع 13 الهجوم لدغ. وثمة خيار آخر للحيوانات الشاشة دون التعرض لخطر الإصابة كبيرة يمكن أن وتيرة هذا الحيوان في حاوية شبكة مع وجود ثقب، ليس كبيرا بما يكفي للحيوان أما لتمرير.  يمكن أن يتم الكشف عن العدوان دون إخضاع الحيوانات لتوجيه السلوك العدواني.  إذا حيوان يديم إصابة بجرح 1 سم في القطر و/أو التعرض المباشر للعضلات، فإنه يتم استبعادها من الدراسة وينبغي أن euthanized.
      4. بعد 10 دقائق من لقاء ناهضة، تأخذ الفئران في غرفة الاختبار ووضع الحيوانات في الجهاز حزب الشعب الكمبودي فورا (بدون أبواب مقصلة فصل المقصورات) لمدة 15 دقيقة (نفس ما قبل واختبارات وظيفة-ج).

3. التحليل الإحصائي

ملاحظة: يجب أن يكون حجم عينة مثالية كحد أدنى حيوانات 15 كل مجموعة.

1. تحليل يعني الوقت المستغرق في حجرة إقران المخدرات للفريق عن طريق ANOVA مختلطة مع واحد بين متغير، العلاج، مع مستويين (مجموعة السيطرة على المجموعة التجريبية، مثال للفريقين في الشكل 7 ج)، وواحدة داخل المتغير – الأيام، مع مستويات 2 (قبل-ج ووظيفة-ج).
   ملاحظة: في مجموعة مراقبة، الحيوانات تلقي المخدرات لكن قد لا التلاعب البيئي. من ناحية أخرى، تتعرض الحيوانات في المجموعة التجريبية لظروف بيئية مختلفة. قارن بين الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات في يوم آخر-ج مع الاحترام قبل-ج بإجراء اختبار لمعرفة ما إذا كان هناك أي اختلافات كبيرة في حساسية للدواء.
2. وبالإضافة إلى ذلك، إجراء تحليلات وظيفة مخصصة بونفيروني للتحقق من أي من النقاط الهامة.
3. تحليل البيانات المتعلقة بقيم الانقراض وإعادته إلى وظيفته في مجموعات أن تفضيل المتقدمة عن طريق Student´s تي-الاختبارات على مواصلة إجراء إعادة الأهلية الانقراض خلال فترة التجربة، ولكن في اللحظة الأخيرة، تحليل لهم مع ANOVA مع داخل المتغير (الأيام) مع العدد من المستويات تبعاً لكل مجموعة.
   ملاحظة: عندما يتم زيادة عدد المقارنات، تلك التي سوف تكون كبيرة بالصدفة أيضا زيادة. على هذا النحو، لتجنب الحصول على إيجابيات كاذبة (النوع 1 أخطاء) ونحن 'تصحيح' فالقيمه مما يجعل الاختبار أكثر تحفظا مع تصحيح بونفيروني لاختبارات t متعددة. ومع ذلك، ينبغي للاختبار، وإعادة المقارنة بين انقراض آخر اختبار وإعادة اختبار. ولذلك، ليس هناك حاجة لتصحيح.

النتائج

أولاً، تظهر نتائج الممثل من إعادة الناجمين عن فتيلة والإجهاد في الشكل 7 استخدام الفئران الذكور OF1 الكبار.

البيانات في الشكل 7أ-ب تمثل الوقت ينفق في compartment(s) إقران المخدرات في ما قبل وحللت اختبار وظي...

Discussion

النقطة الرئيسية لبحوث الإدمان على المخدرات هو تطوير العلاجات التي تقلل من حنين، وبالتالي الحد من تعرض لانتكاسة. وبفضل إعادة نموذج نموذج حزب الشعب الكمبودي، فمن الممكن لدراسة تأثير العوامل الإجرائية والبيئية المختلفة التي تعدل الانتكاس، الذي يشكل أولوية للبحوث في المستقبل. وهناك بعض الن...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
MONPRE 2Z software	CIBERTEC S.A., Spain	N/A
Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area.	CIBERTEC S.A., Spain	N/A	The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.
Cocaine hydrochloride	Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain	N/A
Animals: mice of the OF1 outbred strain	Charles River, Barcelona Spain	N/A	Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.
Standard Diet- Teklad Global Diet 2014	Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain)		13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g
High fat diet TD.06415			45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g