دغدغة، تقنية لإحداث تأثير إيجابي عند التعامل مع الفئران

Summary

يوضح هذا المقال تطبيق موحد المناولة مرحة ودغدغة تقنية مصممة لتقليد لعب الفئران متقلب. هذه التقنية بشكل فعال في الحد من الخوف من ردود الفعل للبشر وتوليد إيجابية تؤثر عندما تتم معالجة الفئران لأنشطة تربية المشتركة والطبية والبحوث إجراءات مثل حقن.

Abstract

التعامل مع الحيوانات الصغيرة مثل الفئران يمكن أن يؤدي إلى العديد من الآثار السلبية. وهذه تشمل خوف البشر، مقاومة للمناولة، خطر الإصابة المتزايدة للحيوانات وإيدي مدربيها، تناقص الرفق بالحيوان، وأقل بيانات صالحة للبحث. للتقليل إلى أدنى حد من آثار سلبية على النتائج التجريبية وعلاقات الإنسان والحيوان، اعتادوا أبحاث الحيوانات هي غالباً ما يجري التعامل معها. ومع ذلك، أساليب التعود اختلافاً كبيرا، وكثيراً ما ذات فعالية محدودة. أكثر حقاً، فمن الممكن للبشر لتحاكي جوانب سلوك الحيوانات متقلب مرحة أثناء المناولة. عند تطبيقها على فئران المختبرات بطريقة منهجية، هذا التعامل مع مرحة، يشار إلى دغدغة، دأبت تثير الاستجابات السلوكية الإيجابية. توفر هذه المقالة وصفاً مفصلاً للفئران موحدة دغدغة تقنية. هذا الأسلوب يمكن أن تسهم في إجراء تحقيقات في المستقبل إلى الدول العاطفية الإيجابية في الحيوانات، وجعله أسهل للتعامل مع الفئران لأنشطة تربية مشتركة مثل تغيير القفص أو الإجراءات الطبية/البحوث مثل الحقن، وأن تنفذ كمصدر الإثراء الاجتماعي. خلص إلى أنه يمكن استخدام هذا الأسلوب تقليل كفاءة وعملياً خوف الفئران من البشر وتحسين رفاههم، فضلا عن نموذج موثوق بها الدول العاطفية الإيجابية.

Introduction

التعامل مع الحيوانات الصغيرة، مثل الفئران المحلية (الجرذ النرويجي) أبقى في المختبرات والحيوانات الأليفة، ويمكن أن يسبب زيادات كبيرة في المؤشرات السلوكية والفسيولوجية للإجهاد¹، فضلا عن البرود الردود توحي ²من الاضطراب العاطفي. يمكن أن تؤدي معالجة الفئران الاستجابات القائمة على الخوف تجاه البشر^3،4، الذي قد يزيد من صعوبة التعامل مع زيادة، وزيادة خطر الإصابة بالحيوانات ومعالج وتحد من صلاحية البيانات التجريبية⁵.

لتجنب الآثار السلبية للتعامل مع النتائج التجريبية وعلاقات الإنسان والحيوان، أنها ممارسة شائعة لإتاحة بعض الوقت للحيوانات الشباب المكتسبة حديثا روض للتفاعل البشري قبل تعيينهم إلى علاجات تجريبية. خلال هذه الفترة التأقلم، قد يعرض أولياء الأمر الفئران إلى سلسلة من الأحداث التي يمكن أن تكون شديدة المتغير في كل من الشكل والمدة. وهذه قد تشمل التعرض السلبي للناس، لمس، رفع، يداعب، وعقد، والحديث، ويعامل تقديم الطعام. ورغم تركيبات من هذه الإجراءات تقليل الخوف من البشر⁶، يتضح فيها ممارسات معينة هي الأكثر فعالية للاستخدام من قبل أولياء الأمر الحيوان مشغول. هناك تقارير تفيد بأن الفئران يمكن أن يكون أما الردود السلبية، أو على الأقل أي رد إيجابي، إلى بعض هذه التقنيات الفردية^2،7،،من⁸⁹.

وفي المقابل، تدعم أدلة وافرة على الاستنتاج بأن دغدغة، أسلوب التعامل مع الذي يحاكي جوانب سلوك متقلب مرحة للفئران، أحد أشكال الاتصال الاجتماعي، خاصة بالنسبة للفئران الأحداث^{10، قوة مفيدة 11،،}من¹²¹³. الفئران هي الثدييات الاجتماعية العالية، وهو واضح من التقيد بالوقت الذي يقضونه في اللعب معا كالأحداث¹⁴ ودوافعها القوية لإعادة إنشاء والحفاظ على الاتصال الاجتماعي مع^{، كونسبيسيفيكس،من1516 17}. دغدغة الجرذ يعتمد على طبيعة اجتماعية مرحة الفئران لتحويل المناولة إلى تجربة إيجابية. هذا المفهوم وضعت أصلاً كنموذج للتحقيق أساسا العصبية الحيوية للدول العاطفية الإيجابية أثارت قبل اللعب الاجتماعي السلوك⁷. ومنذ ذلك الحين، استخدمت الفئران دغدغة في التجارب المختلفة ما يزيد على 56، 22 منها مقابل دغدغة البعض التعامل مع تقنيات¹³.

اللعب متقلب في الفئران تتميز بالسلوكيات الرئيسية هما: "الظهرية الاتصال" و "رقم التعريف الشخصي" (الشكل 1)^18،19. أثناء اللعب متقلب، الفئران يبدأ اللعب بجعل الاتصال الظهرية مع مؤخر العنق الشريك. المستلم يستجيب المتداول تارة ويتم تمركزها بالوقوف البادئ¹⁹أعلاه. يستمر اللعب مع الفئران يتناوبون يجري في كل موقف، في أعلى وأسفل¹⁸. معالجات البشر قادرون على تقليد المكونات الرئيسية اثنين من اللعب متقلب بالتناوب بين الاتصال مع مؤخر في الفئران (الاتصال الظهرية) والسطح البطني (pin) باستخدام حركات الأصابع مشابهة لتلك المستخدمة عند دغدغة طفل قوية وسريعة. وبطبيعة الحال، دغدغة أنه ليس نسخة طبق الأصل من اللعب متقلب الفئران الفئران لا يعلقون يد الإنسان خلال دغدغة. وفي الواقع، يمكن أن تختلف مستوى مشاركة الأفراد في اللعب متقلب ودغدغة^20،21. وعلى الرغم من ذلك، يبدو أن دغدغة استدعاء نفس آليات مكافأة متقلب واللعب بين كونسبيسيفيكس. دغدغة هو مطلوب بنشاط عن طريق الحيوانات ويمكن أن تكون بمثابة مكافأة لتكييف هواء فعال التعلم، والمساهمة بالأدلة التي يجري مدغدغ هو مكافأة كبيرة للفئران الصغار^7،،من^{1112، 13 , 22}-على الرغم من أن الفئران أبلغ أيضا معرفة مهمة استثابي مقابل التمسيد اللطيف كالمكافأة، كانوا أسرع الاقتراب من يد شخص يقدم دغدغة بالمقارنة مع حدود الشكل⁷.

الدبابيس المستخدمة في دغدغة قد تبدو مشابهة لإجراءات مشتركة لضبط النفس ولكن هناك أدلة على أن الفئران تصور هذه الأنواع من التعامل بشكل مختلف. عندما يتم تقييد الفئران مرارا وتكرارا، مثل إجراء حقن، أنها تفرز البورفيرنيات المفرط أدى إلى تشروموداكريورهيا ("دموع حمراء")⁸. يحدث استجابة للضغوطات الحادة تشروموداكريورهيا ويتسبب في الجلد والفراء حول العيون والأنف تصبح الملون لون محمر²³. عندما مرارا وتكرارا باستمرار وضبط النفس على ظهره كما هو الحال في pin، الفئران أظهرت أقل جاذبية للبشر عليه عندما مدغدغ¹². هذه النتائج تعني أن القيود قصيرة متكررة والنشرات خلال دغدغة مرشحتان بطريقة مختلفة عن النفس غير مرحة. وهكذا، التقنية الدقيقة المستخدمة في دغدغة آثار هامة لتوليد حالة عاطفية إيجابية بدلاً من المساهمة في التعامل مع الإجهاد.

رصد أثر دغدغة في الفئران العاطفية الدولة يمكن بسهولة إنجاز بالاهتمام بالألفاظ للفئران. عادة إنتاج الفئران فئتين من الألفاظ بالموجات فوق الصوتية (أوسفس)، في حوالي 22 كيلوهرتز و 50 كيلو هرتز، بالإضافة إلى الألفاظ مسموعة. أوسفس 22-كيلوهرتز تحدث عادة عند توقع أحداث البرود وهي مصحوبة بالدماغ مرتفعة النشاط اتروبين²⁴. ولذلك، تعتبر أوسفس 22 كيلوهرتز للإشارة إلى حالة عاطفية سلبية من القلق. أوسفس 50 كيلوهرتز، خاصة من نوع التضمين التردد "زغردة" (الشكل 2)، ترتبط عادة بحالات وحوافز مجزية ومصحوبة بزيادة الدماغ تتميز النشاط^24،25. وبناء على ذلك، يعتبر التعبير عن وفرة 50 كيلوهرتز أوسفس تعكس حالة عاطفية إيجابية^24،26،،من²⁷²⁸. وأخيراً، المرتبطة عادة بالألفاظ مسموعة، وثم تستخدم كعلامات والألم الجسدي وعدم الراحة. وهكذا يوفر إنتاج التفاضلية لهذه الأشكال الثلاثة من الألفاظ سجل موثوق بها من تغييرات في الحالة العاطفية للفئران²⁶. إنتاج الفئران أوسفس في حوالي 22 كيلوهرتز أثناء التعرض للحيوانات المفترسة، والتعرض للمحفزات مؤلمة مثل صدمة سيرا على الأقدام، و القتال بين الذكور²⁸. الجرة قد أبلغ أيضا للحصول على أوسفس 22 كيلوهرتز متعددة في الفئران ساذجة، يستدل على أنها تشير إلى سلبية تؤثر على². وفي المقابل، عند مدغدغ بالبشر، كعندما تقوم باللعب متقلب مع الفئران الأخرى، إنتاج الفئران عديدة 50 كيلوهرتز أوسفس. ويتضح أن معدل 50 كيلوهرتز أوسفس يوفر مقياس متدرج للاستجابة العاطفية الإيجابية التي تم إنشاؤها بواسطة دغدغة^29،30.

الأوصاف القائمة "كيف لدغدغة الفئران" موجز بدلاً من ذلك ويمكن أن يؤدي إلى نتائج متغير. علاوة على ذلك، قد يكون المبتدئ "ticklers الفئران" مؤقت مفرط في محاولاتهم لتقليد اللعب متقلب. العبارة "دغدغة بشدة" هي أسهل للفهم عندما تظاهر بصريا. ولذلك، هو أن الهدف من هذه المادة تقديم وصف مفصل وإثبات كيفية تقليد التفاعلات مرحة الإيجابية لدى الفئران بطريقة فعالة ومتسقة موثوق يثير ردود إيجابية من معظم الفئران عند التعامل معها. هذا البروتوكول وصف دغدغة تقنية موحدة، ويشرح كيف يمكن ضم دغدغة مع إجراءات مثل ضبط النفس وحقن للتخفيف من الخبرات العاطفية يحتمل أن تكون غير سارة.

Protocol

أجريت جميع التجارب وفقا "الدليل معاهد الصحة الوطنية" للرعاية و "استخدام الحيوانات المختبرية"^31،32 في مرافق معتمدة من قبل "آآلاك الدولية"، ووافقت عليها الدولة واشنطن جامعة مؤسسات الرعاية الحيوانية واستخدام اللجنة. يمكن أن يعرض البروتوكول التالي أفراد حساسية الحيوانات المختبرية. ينبغي ارتداء معدات الوقاية الشخصية كما أوصت بمقدمي الرعاية الصحية وبرنامج السلامة والصحة المهنية المؤسسية. البروتوكول يصور الإجراءات المنصوص عليها في مختبر نموذجي ظروف السكن ولكن يمكن تكييفها لاستخدامها في مرافق أعلى السلامة البيولوجية (مثلاً عن طريق استخدام مجلس الوزراء السلامة البيولوجية، إلخ.).

1-إعداد المعدات والإعداد

1. معالجة مربع
   1. إعداد قفص الحيوان المنزلية أو غيرها الضميمة لدغدغة، يشار إلى مربع المناولة.
   2. تأكد من أن مربع التعامل مع كبيرة بما يكفي توفير مساحة لليد tickler والفئران التحرك بينما منعهم من القفز.
   3. تأكد من أن المربع معالجة خالية من العقبات. وهكذا، إذا كان إجراء دغدغة في قفص المنزل، إزالة أية كائنات مثل أكواخ، تلتهم العصي، والورق المموج.
   4. خط مربع المناولة الأرضية مع الفراش،³³. يمكن استخدام أنواع أخرى من تغطية الكلمة الناعمة لكن ليست فعالة في التماس الألفاظ 50 كيلوهرتز¹³.
   5. ضع مربع التعامل مع جدول أو كونترتوب على ارتفاع يسمح اليد المعالج في بسهولة الوصول إلى منطقة الطابق بأكمله من مربع التعامل.
   6. تقليل تأثير الجدة بالتعود على الفئران إلى مربع مناولة قبل دغدغة، إذا لزم الأمر.
2. جهاز ضبط الوقت: للإشارة إلى بداية ونهاية 15 s نوبات، ضع جهاز توقيت قرب مربع المناولة حيث يمكن بسهولة قراءتها. بدلاً من ذلك، قد أحال إشارة الوقت السمع إلى tickler من خلال سماعات.
3. تسجيل حناجرهم
   1. إذا يجري تسجيل الألفاظ تحديد أنواع مختلفة من حناجرهم لأغراض البحث، واستخدم ميكروفون قادر على التقاط الصوت النطاق العريض 10-120-كيلوهرتز، متصلاً بجهاز قادر على تسجيل الأصوات عالية التردد.
   2. تعليق أو إرفاق الميكروفون في الجزء العلوي أو الجانب من المربع، منخفضة بما يكفي الكشف عن المكالمات بوضوح وتجنب الخلط مع مكالمات من الفئران في أقفاص القريبة، ولكن بعيداً عن متناول المادية من الفئران.
   3. إذا كانت الألفاظ تحتاج فقط إلى مراقبة للتأكد من الأسلوب دغدغة السليم، ثم استخدام كاشف الخفافيش وإعداده على جانب المربع. في حالة استخدام جهاز كشف للمطياف، بسيطة، تعيين الجهاز في 50 كيلوهرتز.
4. قفازات المختبر: استخدام يد العارية أو رقيقة القفاز عند دغدغة. تم تطوير تقنية دغدغة باستخدام يد عارية.  ومع ذلك، يد رقيقة القفاز أيضا فعالة في حفز السلوك مرحة وإنتاج USV 50 كيلوهرتز بينما يسمح معالج إلى الشعور بمقدار الضغط المطبق على الجسم في الفئران ويشعرون بالردود في الفئران عن طريق القفازات.

2-دغدغة الداخلي

1. وضع قفازات المختبر، إذا لزم الأمر. إحضار القفص المنزل إلى الجدول أو منضدة. بلطف نقل الفئران في خانة معالجة إذا دغدغة لا تجري في قفص المنزل. بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت، والصوت تسجيل إذا لزم الأمر.
2. للتطبيق المتسق، بالتناوب بين 15 ثانية لجهة الاتصال والإصدار s 15 من الاتصال لمدة 2 دقيقة. تم العثور على هذه المدة للتفاعل كافية لزيادة جاذبية فئران إلى البشر¹¹.
   1. لبدء الدورة دغدغة مع إطلاق سراح 15 s، وضع اليد بلا حراك داخل أحد جانبي مربع التعامل. وجود الجهة يسمح الفئران التماس التفاعل بتوجيه ولغ ويقرص الضوء (يقضم) نحو اليد، مما يشير إلى اهتمام للفئران للتفاعل²². عندما يحدث هذا، حرك يده بعيداً عن الفئران، التي يمكن أن يلتمس مطاردة مرحة من الجهة بالفئران. بدلاً من ذلك، ترك يده من خارج منطقة الجزاء أثناء الإفراج عن 15 ثانية.
   2. متابعة الإفراج عن 15 ثانية لدغدغة، الشروع في التفاعل مع جهة اتصال الظهرية (2-4 ق). باستخدام يد واحدة، قوة اللمس مؤخر في الفئران (سطح الظهرية من الرقبة) مع أطراف الأصابع باستخدام حركات الأصابع السريع كما يشيع أداؤها في دغدغة البشرية. تجنب الاتصال مع الردف كما يستهدف هذا المجال للهيئة خلال اللقاءات العدوانية³⁴.
   3. اتبع الجهة الظهرية بدبوس. ضع الإبهام والإصبع الأوسط تحت اليدين للفئران؛ رفع الفئران، مجرد عالية بما يكفي للسماح بسرعة الحصول على لا متلوي تحول الفئران على ظهرها بينما تكفل الذيل.
      ملاحظة: أنه قد يساعد على دفع طفيفة على الجزء الخلفي الفئران بالإصبع الصغير عندما تحول الفئران على ظهرها.
   4. عقد الفئران فضفاضة، ولكن بحزم؛ أن تكون حازمة ولكن ليس قويا. بمجرد الفئران على ظهرها على الأرض، ابق الجسم فضفاضة أثناء تحريك الأصابع بسرعة وقوة ولكن بلطف على البطن، كما يستخدم عادة في دغدغة البشرية.
   5. على الرغم من أن يتم التنشيط سريعة وحازمة، الحفاظ التدبيس انتعش (2-4 s/رقم التعريف الشخصي) للتقليل من ردود فعل سلبية. السماح للفئران للحق نفسه واتبع سريعاً مع جهة اتصال الظهرية.
   6. تواصل بديلة بين جهات الاتصال الظهرية ودبابيس. وفي المتوسط، ينبغي أن يكون هناك 4 إلى 5 دبابيس/15 ق³⁵.
   7. لا تلتقط الفئران بكلتا يديه. وخلال 15 s دغدغة، دائماً الحفاظ على الأصابع تتحرك واتصال مع الجسم في الفئران، وحتى في الانتقالات بين دبابيس والاتصالات الظهرية.
   8. أداء ثلاثة يدغدغ 15-s إضافية والنشرات 15-s لمدة 2 دقيقة.
3. في حالة استخدام مربع مناولة، العودة الفئران إلى قفصة المنزل. في حالة استخدام قفص المنزل، وضع أجسام تخصيب مرة أخرى في القفص. تنظيف مربع التعامل مع مناشف ورقية لإزالة البراز والبول لا تستوعبها الفراش.
4. كرر مع القفص القادم من الفئران، حسب الحاجة.

3-دغدغة الفئران متعددة في وقت واحد

1. يمكن مدغدغ الفئران ك مجموعة³⁶. إذا لم تكن مدة المعالجة ذات الصلة، والبديل دغدغة كل الفئران لمدة 15 ثانية. يمكن أن يتجاوز مدة الدورة دغدغة 2 دقيقة حسب الحاجة حتى أن يتلقى كل الفئران أربع نوبات من دغدغة جهة الاتصال تتخللها الإفراج.
2. إذا كانت مدة المعالجة ذات الصلة لنتائج البحث، ثم استخدم الإجراءات التالية:
   1. لأزواج، دغدغة فأر واحد ل 15 s متبوعة مباشرة بدغدغة الفئران الثانية 15 القادمة s (أي.، أثناء الإفراج عن الفئران أول)، وهلم جرا. لم يقم tickler فترة راحة.
   2. لثلاثة توائم، استخدم الإجراء الموضح في 3.2.1 لدغدغة اثنين من الفئران ودغدغة الثلث في الوقت نفسه كواحد من الآخرين باستخدام اليد الأخرى.
   3. لمجموعات من الفئران 4 أو أكثر، دغدغة كل الفئران أو زوج من الفئران لمدة 15 ثانية. ويمكن تمديد فترة الدورة دغدغة يتجاوز 2 دقيقة حسب الحاجة.

النتائج

العوامل التي تؤثر في، أو يحتمل أن تؤثر على، ردود على دغدغة ملخصة في الجدول 1. وقد أشارت إلى نتائج إيجابية من الفئران دغدغة بتدابير متعددة لرعاية الفئران وتؤثر إيجابيا. وتشمل النتائج المشتركة زيادة إنتاج أوسفس 50 كيلوهرتز، وسلوك نهج زيادة، وزيادة سهولة التعامل. ذكرت آثار جرذ دغدغة على المستوى الخلوي والوراثية تشمل التعبير الجيني غيرت في تحت المهاد³⁷، وزيادة الخلايا في المغزلي المسنن من^38،الحصين³⁹. نتائج إرشادية لخفض القلق المعمم والخوف من البشر وأفيد أيضا مثل تقليل زمن الوصول إلى نهج في 9 مختلف التجارب،¹³أقل التجميد بعد الخوف تكييف⁴¹من^40،، وزيادة إدخالات في وسط ساحة الميدان مفتوحاً بالفئران مساكن منفردة³⁶. لمزيد من المعلومات، انظر لافوليتي et al.، الذي يقدم استعراضاً منهجياً للأدب دغدغة أن يحدد 22 تقارير التحقيق نتائج فأر دغدغة بالمقارنة مع التقنيات الأخرى¹³.

وترد أمثلة القادم، محددة من النتائج التي يمكن الحصول عليها عند إقران أسلوب دغدغة مع ضبط النفس وداخل البريتوني إجراءات الحقن (IP).

الفئران سبراغ داولي (الذكور؛ أيام 85-94 من العمر؛ n = 48) مدغدغ لمدة 2 دقيقة مباشرة قبل وبعد حقن IP المالحة يوميا لمدة 10 أيام، خاصة عندما تقترن بدغدغة الأحداث تجربة (2 دقيقة/يوم من أيام 25-45 من العمر)، أنتجت أكثر 50 كيلوهرتز USV فقط قبل (GLM ANOVA، و_{3, 44} = 9.59، ف < 0.0001؛ الشكل 3 ألف) وفقط بعد (و_{3, 44} = 8.74، p = 0.0001؛ الشكل 3) حقن (توكي-كرامر، ف < 0.05) مقارنة بالفئران المعرضة إلى ناحية سلبية¹⁰. أثناء التسليم الفعلي موجزاً للحقن، كبح إنتاج أوسفس 50 كيلوهرتز (يعني ± سراج الدين، 15 ± 1.4 أوسفس/دقيقة) والتعامل مع معاملة لا أثر على معدل¹⁰. واستنتج أن دغدغة، عند تطبيقها على حد سواء قبل وبعد إجراء حقن، التي يسببها دولة عاطفية إيجابية التي أدار أفيرسيفينيس الداخلي، خاصة بالنسبة لأولئك الذين تعرضوا لدغدغة كالأحداث.

لمعرفة ما إذا كان دغدغة ستكون فعالة إذا خفضت إلى قبل أو بعد حقنه بدلاً من كليهما، وإذا كان ذلك، الوقت الذي سيكون أفضل، قورنت ردود الفئران إلى دغدغة من قبل، بعد، وقبل بعد الحقن. تم قياس معدلات أوسفس 50 كيلوهرتز ومكالمات مسموعة كما تؤثر المؤشرات الإيجابية والسلبية، على التوالي¹². الفئران سبراغ داولي (الذكور؛ 32-41 يوما من العمر؛ n = 96) كانت أما ضبط النفس وإعطاء حقنه مالحة الملكية الفكرية يومية (اينج) أو تقييدها دون تلقي حقنه (التحكم، يخدع)، ويتعرض لواحد من العلاجات التالية: لا دغدغة، الفئران لم تكن وتطرق قبل وبعد الإجراء ضبط النفس (TN)؛ مدغدغ لمدة 2 دقيقة الحق قبل (السل)، وبعد (تا)، أو قبل وبعد ضبط النفس (TBA)¹². في 2 دقيقة قبل ضبط النفس، أنتجت الفئران من العلاجات التي تلقي دغدغة قبل ضبط النفس (السل، والقابلات التقليديات) أوسفس الأكثر 50 كيلوهرتز (ANOVA جلمم، و_3,88 = 49.19، ف < 0.0001؛ الشكل 3). لم تختلف الفئران تا و TN في معدل أوسفس المنتجة قبل إجراء ضبط النفس. أثناء الإجراء، أي الفئران التي تلقت دغدغة (تا، السل، TBA) أنتجت USV 50 كيلوهرتز أكثر من تلك التي كانت لا مدغدغ (تينيسي؛ و_3,88 = 50.67، ف < 0.0001؛ 3D الشكل). بين الفئران مدغدغ، أولئك الذين يتلقون دغدغة قبل الإجراء (السل، والقابلات التقليديات) أنتجت أكثر 50 كيلوهرتز أوسفس أثناء ضبط النفس مقارنة بتلك التي مدغدغ بعد ذلك (تا؛ ف < 0.05). في الفترة 2-مين بعد الإجراء، أنتجت الفئران في جميع الفئات مدغدغ (تا، والسل، والقابلات التقليديات) أوسفس 50 كيلوهرتز أكثر من تلك التي كانت لا مدغدغ (تينيسي؛ و_3,88 = 53.64، ف < 0.0001؛ 3E الشكل). وعلاوة على ذلك، أثناء الإجراء، مدغدغ الفئران قبل ضبط النفس (السل، والقابلات التقليديات) أنتجت مكالمات مسموعة أقل مقارنة بالفئران التي لم تتلق دغدغة (تينيسي)، بينما الفئران مدغدغ بعد ذلك (تا) لم تختلف عن تلك الموجودة في المجموعات الأخرى (و_3,88 = 3.67, p= 0.02؛ 3F الشكل). وتبين النتائج أن دغدغة الفئران قبل تقييد لهم لحقنه الملكية الفكرية أنتجت علامات تؤثر إيجابيا أكبر عبر الفترات قبل وأثناء وبعد الإجراء من دغدغة إلا بعد ضبط النفس¹².

أولياء الأمر تطبيق واحد من العلاجات المعالجة التالية للفئران (سبراغ داولي الذكور؛ n = 32) من 57 إلى 74 يوما عمر: معالجة الحد الأدنى (1) مرة واحدة أسبوع في قفص تغيير؛ (2) التعرض ليد سلبي لمدة 2 دقيقة يوميا؛ (3) 2 دقيقة من دغدغة كل يوم، لتقليد الاجتماعية تلعب؛ (4) 2 دقيقة يوميا لضبط النفس على العودة للفئران، محاكاة تعلق تراجعنا مهيمنة¹¹. في الدقيقة بعد عنوان IP حقن الفئران من تيكليد والعلاجات السلبي، وأمضى الوقت أكثر تربية في النصف الأمامي من القفص، قريبة من حيث كان يقف الباحث، مقارنة بالفئران من الحد الأدنى وضبط النفس العلاجات (GLM ANOVA، و_{3، 27} = 5.70، p = 0.004؛ الشكل 3). بالإضافة إلى ذلك، تلفظ الفئران تيكليد أوسفس 50 كيلوهرتز أكثر من الفئران في معاملة سلبية عندما تتعرض إلى يد مألوفة أو غير مألوفة لمدة 3 دقائق في اختبار نهج الإنساني (± يعني تحويل سجل المكالمات سراج الدين بالدقيقة، الحد الأدنى: ± 0.7 0.26، السلبي: 0.6 ± 0.18، مدغدغ: ± 1.8 0.30، ضبط النفس: ± 1.4 0.28؛ و_3,28 = 4.04، p = 0.02). وهكذا، ساعد وجود بسيط ناحية سلبية تعود فئران إلى البشر بالنسبة للتعامل مع الحد الأدنى، ولكن دغدغة هو الأسلوب الأكثر فعالية لإنتاج استجابة إيجابية نحو¹¹من البشر.

رقم 1: تلعب الفئران متقلب السلوك. (أ) الاتصال الظهرية؛ (ب) الرقم¹⁸. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

رقم 2: 50 كيلوهرتز الألفاظ بالموجات فوق الصوتية التواتر التضمين نوع "زغردة"- وأنتجت خمسة زغردة الألفاظ في 1 s من الفئران خلال دغدغة. خطوط أفقية في 17-25-وكيلو هرتز 70 تم إنتاجها بواسطة المعدات الإلكترونية في الغرفة (على سبيل المثال-، الكمبيوتر وميكروفون وكاميرا).

الشكل 3: الاستجابات للفئران المعرضة إلى إجراءات تجريبية، ودغدغة من قبل، أو في تركيبة مع مثل حقن (الملكية الفكرية) داخل البريتوني. معدل أوسفس 50 كيلوهرتز (يعني ± SE المكالمات بالدقيقة) أنتجت (A) قبل والمناولة (M) دغدغة (T) كالأحداث ومن ناحية سلبية (ف) (ب) بعد إجراء حقن بالفئران الذكور البالغين يتعرضون إلى الحد الأدنى أو دغدغة (T) مباشرة قبل وبعد حقن (تسفر عن أربعة من الجمع بين العلاج: M-P، T-P، M-T، ترينيداد وتوباغو)؛ من كلوتير et al. ¹⁰-معدل أوسفس 50 كيلوهرتز (يعني ± SE المكالمات بالدقيقة) أنتجت (ج) من قبل، (د) خلال و (ه) بعد ضبط النفس (مع أو بدون حقن IP) مرة واحدة يوميا لعشرة أيام متتالية من الأحداث ذكور الفئران التي تلقت لا دغدغة (تينيسي) أو دغدغة قبل (السل)، وبعد (تا)، أو على حد سواء قبل وبعد (TBA) الإجراء؛ وأنتجت معدل المكالمات مسموعة (F) أثناء ضبط النفس؛ من كلوتير et al. ¹²-(ز) مدة (يعني ± SE s) تربية القريبة الباحث خلال 1 دقيقة بعد حقن IP من ذكور الفئران المعرضة إلى الحد الأدنى، السلبي، دغدغة، أو ضبط النفس في التعامل مع أولياء الأمر؛ من كلوتير et al. ¹¹-أشرطة مع رسائل مختلفة (أ، ب، ج) تشير إلى اختلافات في مقارنات عشوائية (توكي-كرامر، ف < 0.05). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

عامل	تأثير				مراجع
الجوهرية
العمر	لا يوجد فرق في الألفاظ 50 كيلوهرتز الموجات فوق الصوتية (أوسفس) بين الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين 24-44 و 89-92 يوما القديمة				18، 29، 42
	نقصان في أوسفس 50 كيلوهرتز للفئران من عمرها 71 يوما إلى 148 يوما القديمة				29
	17 يوم القديمة الذكور بالعديد من أوسفس 50 كيلوهرتز أكثر من 7-9 أشهر الذكور القديمة				43
	وأظهرت الفئران مدغدغ ككل من الأحداث والبالغين النتائج الأكثر إيجابية مقارنة بالفئران فقط مدغدغ كالأحداث أو الكبار.				10
الجنس	ذكور الفئران أنتجت أكثر من أوسفس 50 كيلوهرتز في 44 و 71 يوما القديمة، ولكن الإناث تنتج أكثر أوسفس 50 كيلوهرتز في 148 الأيام القديمة				29
	ذكور الفئران أنتجت أوسفس 50 كيلوهرتز أكثر من الإناث في 44 و 58 يوما.				43
	لم توجد فروق الجنس في أوسفس 50 كيلوهرتز في 96 الفئران منذ فترة طويلة-إيفانز الأحداث أو 52 ويستار الأحداث				42، 44
	ويستار الأحداث الإناث تنتج أكثر من أوسفس 22 كيلوهرتز من الذكور				44
الفروق الفردية بين	الفئران التي تفوه بها أكثر أوسفس 50 كيلوهرتز أظهر نهج تناقص الوقت لإدارته الذاتية دغدغة، وزادت تحيز الحكم الإيجابي بعد دغدغة، وازداد انتشار الخلايا هيبوكامبال بعد دغدغة				27، 37، 45
	تنتجها الفئران أكثر مرحة أكثر 50 كيلوهرتز أوسفس				43
إجهاد	وتوحي الأدلة لم يبلغ عنها، ولكن القصصية الفئران من سلالات مختلفة ومربي تختلف في استجابتها لدغدغة. وتباينت خطوط الفئران عند تحديده بناء على ارتفاع مقابل انخفاض معدل أوسفس 50 كيلوهرتز ردا على دغدغة.				22، 26، 42، 46
الخبرة السابقة لدغدغة	زيادة الإنتاج من 50 كيلوهرتز الموجات فوق الصوتية أوسفس				12
الخارجية
الأسرة	أنتجت الفئران أكثر 50 كيلوهرتز أوسفس عند مدغدغ في مقابل الفراش مألوفة لا الفراش				33
الإجهاد	دغدغة الجرذان 1 ساعة، ولكن لا 23 ساعة، بعد ضبط النفس الإجهاد خفض الإنتاج أوسفس 50 كيلوهرتز				47، 48
توقيت	دغدغة الفئران قبل الحقن كان أكثر فعالية في زيادة 50 كيلوهرتز أوسفس من دغدغة بعد الحقن				12
جنس معالج	أي أثر العثور على				Panksepp، ج. 2014، بيانات غير منشورة
الألفة للفئران باستخدام معالج	أنتجت أكثر من 50 كيلوهرتز أوسفس الفئران وإنفاق المزيد من الوقت قرب مألوفة بالمقارنة مع tickler غير مألوف				11
معالج دغدغة الخبرة/حيوية لدغدغة بواسطة معالج	الإنتاج المتضررة من أوسفس 50 كيلوهرتز ولكن عدم التفضيل ونهج السلوك				2011 كلوتير، س.، بيانات غير منشورة
مدة دبابيس بواسطة معالج/تواتر التناوب بين جهات الاتصال الظهرية ودبابيس	انخفاض وتيرة يقضم (تفسير كما تلعب استدراج العروض) كان موجها إلى يد فرض أسنان 15-s (ضبط النفس) من يد إعطاء يدغدغ مع عدة جهات الظهرية ودبابيس كل 15 ثانية				11
أودورانتس (مثلاً، عطور، شامبو، كريم الحلاقة) المستخدمة من قبل معالج	لم يبلغ عنها
حجم المجموعة الاجتماعية	الإسكان الفردية زيادة استجابات إيجابية إلى دغدغة مقارنة بمجموعة الإسكان في معظم التجارب. دغدغة يضم مجموعة الفئران مع زملائه في قفص في قفص المنزل خفض هذا الفرق				7، 22، 27، 36
كثافة الضوء	دغدغة في 1000 لوكس تخفيض 50 كيلوهرتز أوسفس بالمقارنة مع 25 لوكس.				43
الضوضاء	لم يبلغ عنها
قفص التنظيف قبل دغدغة	الإنتاج المتعمد من أوسفس 22 كيلوهرتز في بعض الفئران				12
الوقت من اليوم	أي تأثير على إنتاج أوسفس 50 كيلوهرتز عندما يقوم في بداية أو نهاية فترة الخفيفة. دغدغة الفئران في البداية/نهاية مقابل الفترة الخفيفة لا بعد مقارنة منتصف الفترة فاتح أو داكن				2011 كلوتير، س.، بيانات غير منشورة

الجدول 1: قائمة بالعوامل التي تؤثر في، أو يحتمل أن تؤثر، ردود الفئران على دغدغة، أسلوب التعامل مع مرحة ينوي تقليد لعب الفئران متقلب.

Discussion

ويصف هذا البروتوكول تقنية للفئران دغدغة، أسلوب التعامل مع مرحة محاكاة سلوك اللعب متقلب الفئران التي فعالة في توليد الألفاظ يدل على التأثير الإيجابي وزيادة نهج السلوك عندما تتم معالجة الفئران لتربية أو الطبية المشتركة وبحث إجراءات مثل حقن الملكية الفكرية.

اللعب الاجتماعي، ونموذج إيجابي عادة من الاتصال الاجتماعي، اقترح للمساعدة في معايرة ردود الفعل العاطفية لحالات مخيفة^42،43، وتوليد المرونة ل القلق والاكتئاب⁴⁴. تقوم بمحاكاة الفئران الاجتماعية، دغدغة ويبدو أن المثل الآثار المفيدة⁷. وبالتالي، لتطبيق دغدغة لتكون ناجحة في حمل الدول العاطفية الإيجابية، من المهم أن نضع في اعتبارنا أن اليد المقصود بمثابة "شريك اللعب" خلال دغدغة. اليد جذابة لأنها تحاكي السلوكيات التي تتوقع الفئران والتمتع من الفئران آخر أثناء اللعب متقلب. ومن ثم رفع وعقد الفئران بكلتا يديه هو محاكاة لا تلعب الفئران، وقد لا يكون نفس التأثير. وفي الواقع، سوف تتعلم الفئران المختبرية لتجنب القيود غير مرحة فيها معالج يحمل لهم يد واحدة والسكتات الدماغية لهم مع اليد الأخرى⁴⁵. خلال دغدغة الفئران، من المهم أيضا لنقل الجهة ثقة وحزما، بينما يجري حية ومرحة. الاحتفاظ تعلق انتعش (2-4 s/رقم التعريف الشخصي) ينبغي التقليل من ردود فعل سلبية لأنه متقلب اللعب بين الفئران، كررت يؤدي التثبيت إلى النطق من أوسفس 22 كيلوهرتز¹⁸.

على الرغم من أن الفئران الأحداث أكثر مرحة وتظهر استجابات أقوى لدغدغة من الفئران البالغين¹⁸، دغدغة في مرحلة البلوغ له أيضا فوائد¹⁰. دغدغة الفئران عند الشباب كما تبين أن لها فوائد في وقت لاحق في الحياة³⁶، مما يوحي بأن الفئران تجربة طويلة أثر إيجابي على فعلهم العاطفية للوجود البشري. الاختلافات بين الجنسين في الاستجابة إلى دغدغة غير متناسقة، مع ورود تقارير عن أية اختلافات الجنس في الفئران الأحداث^46،47، الأحداث الذكور تنتج أكثر 50 كيلوهرتز الألفاظ والألفاظ كيلوهرتز 22 عدد أقل من الأحداث الإناث^{29 ،،}من⁴⁸³⁹، والإناث الأكبر سنا إنتاج الألفاظ 50 كيلوهرتز أكثر من الذكور في نفس العمر²⁹، مماثلة للنتائج التي توصل إليها للعب الاجتماعي⁴⁹.

ويمكن تقييم فعالية هذه التقنية دغدغة استخدام أنماط حركة الفئران وحناجرهم. سوف عاب الفئران ولعق الأصابع المعالج في أثناء فترات الإفراج بعد دغدغة¹¹15-s. يقضم هي لدغ الخفيفة غير الضارة، والتي وصفت بأنها سلوك اللعب-استدراج العروض في الفئران الصغار²². عندما ينتقل المعالج من ناحية حول التعامل مع المربع، سوف اتبع الفئران ومطاردة. الفئران، لا سيما الشباب منهم، سيتم أيضا تشغيل وعدو حول المربع بين نوبات دغدغة وتظهر زيادة متميزة في النشاط بعد نوبة دغدغة، مماثلة لتشغيل النشاط الذي يميز اللعب متقلب. إذا لا تزال غير متحرك خلال النشرات، وتعديل أسلوب دغدغة، مثل تخفيض مدة دبوس الفئران أو إعطاء دبابيس أقل، ربما يلزم. فمن الأفضل إعطاء دبابيس قصيرة المدة للدورة الأولى لدغدغة. ويمكن زيادة مدة وعدد من المسامير كما تعتاد على الفئران إلى دغدغة. الجرذان ينطق أوسفس 50 كيلوهرتز، بما في ذلك التغريد، خلال دغدغة وبين نوبات دغدغة. ويمكن رؤية زيادة تدريجية في عدد التغريد أنتجت خلال النشرات 15-s خلال الأسبوعين الأولين من دغدغة اليومية قبل أن يستقر⁴⁷. تسمح الاختلافات الفردية الفئران مدغدغ أن تكون مقسمة إلى ارتفاع وانخفاض المتصلين تستجيب خلطات للتأكيد والقلق أنهيدونيا^46،،من⁴⁷⁵⁰.

جرذ دغدغة استخدمت بنجاح لحمل تؤثر إيجابيا المقررة على أساس إنتاج أوسفس 50 كيلوهرتز خلال دغدغة¹³. قد نفذت مؤخرا كأسلوب لتقليل خوف البشر في الفئران والتخفيف من أفيرسيفينيس الطبية وإجراءات البحث مثل حقن. الأدلة تشير إلى أن، عندما قدمت لمدة 2 دقيقة فقط للحيوان الواحد يوميا، دغدغة وسيلة فعالة وعملية للحد من تجنب البشر¹¹. وإذ ترى أن الفئران الأحداث سوف تلعب معا لحوالي 60 دقيقة يوميا^51،،من⁵²⁵³، دغدغة لمدة 2 دقيقة يوميا العملية ولكن يفترض قصيرة جداً لتكرار الآثار الكاملة للعب الاجتماعي بين الفئران. أصحاب الحيوانات الأليفة الفئران، الذين لديهم المزيد من الوقت لمعالجة هذه الفئران من أولياء الأمر مختبر عموما، قد توفر الفئران مع دغدغة إضافية طالما تواصل الفئران تستجيب على نحو إيجابي. استناداً إلى Burgdorf et al. ^{44 , 45}، 15 دقيقة الأولى من اللعب متقلب ويبدو أن الأكثر إيجابية للفئران. وفي المقابل، قد يكون أكثر فعالية لدغدغة الفئران لفترات تصل إلى 15 دقيقة، لا سيما إذا كان مبرر وجيه لأنهم لا يمكن أن يوضع في مجموعة اجتماعية. ومع ذلك، استناداً إلى اللعب كتدريب لغير متوقع "³⁸، أسلوباً أكثر تنوعاً مما قد يكون الأسلوب الموصوفة هنا اللازمة للحفاظ على هرج أطول دغدغة الدورات. قد تكون دورات دغدغة إضافية كل يوم أيضا مفيداً طالما أنشطة أخرى هامة بيولوجيا مثل النوم والتغذية لا البصر. فضلا عن المساهمة في تحسين رفاه المختبر والفئران الأليفة، وصف أسلوب دغدغة موحدة يمكن استخدامها في البحوث المستمرة التي تهدف إلى فهم آثار اللعب الاجتماعي ومكوناته الاجتماعية السلوكية، على، والدماغ التنمية.

عند دغدغة أنجز المحيطة بالحقن، خاصة عندما جنبا إلى جنب مع الخبرات السابقة دغدغة (إنهاء 40-50 يوما في وقت سابق)، زادت معدلات USV 50 كيلوهرتز قبل وبعد الحقن، وخفضت أسعار المكالمات مسموعة خلال حقن¹⁰ . ومن ثم دغدغة يبدو للتخفيف من الآثار السلبية لحقن الملكية الفكرية، لا سيما في الفئران التي اعتادوا على دغدغة كالأحداث¹⁰. على الرغم من أن دغدغة لا يمنع عدم الراحة المرتبطة بالحقن كالإنتاج المقررة استناداً إلى مكالمات مسموعة، فزادت 50 كيلوهرتز أوسفس مقارنة بحالة التحكم، من قبل، أثناء وبعد الإجراء ضبط النفس¹². ووفقا لبيانات USV 50 كيلوهرتز، كان النقطة الزمنية الأكثر فعالية لتطبيق دغدغة قبل وليس بعد إجراء ضبط النفس¹². تؤثر على الفئران دغدغة قبل الحقن قد مرحل تأثير ذلك إيجابية مرتفعة خلال الإجراء¹². دغدغة لذلك يمكن التقليل من الآثار السلبية المحتملة للإجراءات الطبية الروتينية في رعاية الفئران والسلوك. إجراء المزيد من البحوث أمر ضروري لتحديد كيف يمكن إقران الأسلوب فعال مع غيرها من تقنيات الحقن وغيرها من الإجراءات الطبية/التجريبية.

وعموما، لقد أظهرنا أن الفئران نتائج دغدغة في نتائج إيجابية مثل زيادة إنتاج USV 50 كيلوهرتز وسلوك نهج، فضلا عن انخفض تجنب البشر والمقاومة للتعامل. ونحن نوصي دغدغة الفئران كوسيلة فعالة لتحسين رفاهية الفئران والنمذجة الولايات العاطفية الإيجابية.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Table or workbench			No specific brand is recommended.
Handling box (rat home cage or another enclosure)			No specific brand is recommended.
Bedding or or other type of soft cover			No specific brand is recommended.
Gloves (thin laboratory gloves)			Optional.
Timing device	Deltaworks	Interval Timer:Timing for HIIT Training, Workouts https://itunes.apple.com/us/app/interval-timer-timing-for-hiit-training-workouts/id406473568?mt=8	Optional. Any timer will do, although it is convenient to use an interval timer if you are tickling multiple rats.
Ultrasonic microphone such as a bat detector or USB microphone	Magenta Electronics LTD	Bat4 Bat Detector https://www.magenta2000.co.uk/acatalog/Bat_Detector_Bat4.html	Optional. The Magenta bat detector is relatively inexpensive and easy to use, but can only detect vocalizations at one range at a time.
	Dodotronic	Ultramic 200K http://www.dodotronic.com/ultramics/?v=7516fd43adaa	Optional. This microphone has worked well in our experiments. There are many other options for ultrasonic microphones.
Bioacoustic software	CIBRA	SeaWave http://www-3.unipv.it/cibra/seawave.html	Optional. Free software with limited recording capabilities.
	CIBRA	SeaPro http://www-3.unipv.it/cibra/seapro.html	Optional. This software has extensive recording capabilities, and has worked well in our studies. There are many other software packages that work with bioacoustic microphones.