بروتوكول شاشة إشارة متحولة لتوفير العمالة وتكرارها لدراسة الثيغمومورفولوجينيس لمصنع نموذجي أرابيدوبسيس ثاليانا

Summary

تم بناء آلة تحميل لطيفة تعمل باللمس من فرش الشعر البشري والأسلحة الروبوتية ووحدة تحكم. يتم دفع فرش الشعر بواسطة الأسلحة الروبوتية المثبتة على الجهاز وتتحرك بشكل دوري لتطبيق قوة اللمس على النباتات. قوة اللمسات الشعر يحركها آلة مماثلة لتلك التي من اللمسات المطبقة يدويا.

Abstract

النباتات التي تستجيب لكل من التحفيز اتّصال آليّ داخل أو خارج خلويّة (أو قوة إشارات) ويطوّر تغيرات خاصّة مورفولوجيّة, يدعى [ثيوغممورفولوجنسس]. في العقود الماضية، تم تحديد العديد من مكونات الإشارة والإبلاغ عن مشاركتها في الميكانوترانسدوكأيشن (على سبيل المثال، البروتينات الملزمة بأيون اتون الكالسيوم وإنزيمات التركيب الحيوي لحمض الجاسمونيك). ومع ذلك، فإن بطء نسبيا وتيرة البحوث في دراسة إشارات القوة أو التكومورفولوجيا تعزى إلى حد كبير إلى سببين: شرط الحث البشري التملّق باليد من الحث على الثيغمومورفوجينية وأخطاء قوة القوة المرتبطة بلمسة يد الناس. لتعزيز كفاءة تحميل القوة الخارجية على كائن نباتي، تم بناء آلة تحميل تلقائية تعمل باللمس. توفر هذه اللمسات الروبوتية لفرشاة الشعر التي تعمل بالذراع محاكاة تعمل باللمس قابلة للتكرار بسهولة، وجولات غير محدودة من التكرار باللمس وقوة اللمس القابلة للتعديل. ويمكن استخدام هذا الشعر قوة اللمس آلة التحميل لكل من فحص على نطاق واسع من المسوخ إشارة قوة اللمس ودراسة الفينوميكس من النباتات thigmomorphogenesis. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن استبدال المواد التي تعمل باللمس مثل شعر الإنسان، مع مواد طبيعية أخرى مثل الشعر الحيواني، وخيوط الحرير وألياف القطن. ويمكن تجهيز الأسلحة المتحركة الآلي على الجهاز مع فوهات رش المياه والمنافيخ الهواء لتقليد القوى الطبيعية لقطرات المطر والرياح، على التوالي. باستخدام هذا الشعر التلقائي تعمل باللمس قوة آلة التحميل في تركيبة مع لمس مسحة القطن التي يتم تنفيذها يدويا، قمنا بالتحقيق في استجابة اللمس من اثنين من المسوخ إشارة القوة، MAP KINASE KINASE 1 (MKK1) وMKK2 النباتات . قيّمت ال [فينومس] من ال [تووش-فورس] يحمّل وحشيّة نوع معامل واثنان مسوخ كان إحصائيّا. وقد أظهرت اختلافات كبيرة في الاستجابة اللمسية.

Introduction

مصنع thigmomorphogenes is هو المصطلح الذي صاغه جاف، MJ في عام 1973¹. بل هو التروبيسم النبات ولكن مختلفة عن فوتوتروبيسم المعروفة أو الجاذبية الناجمة عن محفزات أشعة الشمس أو الجاذبية^2،3. وهو يصف التعديلات phenotypic المرتبطة التحفيز الميكانيكي الدوري، والتي لوحظت في كثير من الأحيان من قبل علماء النبات في أوقات سابقة^4،5. قطرات المطر، والرياح، والنباتات، واللمسات الحيوانية والبشرية، وحتى لدغات الحيوانات، وتعتبر جميعها أنواع مختلفة من المحفزات المشانو التي تؤدي إلى قوة الإشارات في النباتات^4،5. خصائص النباتات thigmomorphogenesis تشمل تأخير الاغلاق، والجذعية أقصر، أصغر وردية / ورقة حجم فيالنباتات العشبية، والجذعية سمكا في النباتات الخشبية 6،^7،8. هذا هو على عكس استجابة thigmonastic أو thigmotropic غالبا ما توجد في نبات الميموزا أو غيرها من الكروم الحساسة الميكانو، حيث هذه الاستجابات التي تعمل باللمس السريع من الأسهل أن يلاحظ^1،9،10. من ناحية أخرى، من الصعب نسبياً ملاحظة التكوّن من الثيوغموبومورفو بسبب استجابته البطيئة للنمو. عادة ما يلاحظ تكوين الثيوغمومورفو بعد أسابيع أو حتى سنوات من التحفيز المستمر لتحميل القوة. هذه الطبيعة الفريدة من استجابة لمسة النبات يجعل من الصعب إجراء شاشة وراثية إلى الأمام باستخدام تحفيز اللمس اليدوي البشري لعزل المتحولين المقاومين للقوة التي تعمل باللمس بطريقة قوية.

لتوضيح مسارات نقل إشارة القوة والآليات الجزيئية الكامنة وراء التكومورمورجينيسيس^6،11، وقد أجريت التجارب البيولوجية الجزيئية والخلوية في^{الماضي 6، 12،13،14.} وقد اقترحت هذه الدراسات أن مستقبلات إشارة قوة النبات تتكون أساسا من قنوات أيون mechanosensitive (MSC) ومجمعات MSC المربوطة تتألف من مجمعات متعددة من البروتينات التي تمتد الغشاء^{11،14 , 15.}السيتوبلازمية كا²⁺ ارتفاع عابر ولدت في غضون ثوان من لمسة أولية. الرياح، المطر، أو تحفيز الجاذبية قد تتفاعل مع أجهزة استشعار الكالسيوم المصب لنقل إشارات القوة إلى الأحداث النووية^{14،16،17،18}. بالإضافة إلى الدراسات الجزيئية والخلوية، وجدت الشاشة الوراثية إلى الأمام مع لمس إصبع يدوي للنباتات أن الهرمونات النباتية والأيض الثانوي تشارك في التعبير الجيني الذي يترتب على ذلك اللمس (TCH) بعد لمس قوة التحميل^13،19. على سبيل المثال، تم تحديد aos وopr3²⁰ متحولين حتى الآن من الدراسات الوراثية. ومع ذلك، فإن المشكلة الرئيسية المرتبطة بتطبيق علم الوراثة إلى الأمام في دراسة علم الجينات الثيغمومورفوجينية لا تزال العمل المكثف المطلوب لتكميم مستوى الاستجابة باللمس ولمس عدد كبير من السكان من المتحولين وراثيا النباتات الفردية. المسألة التي تستغرق وقتا طويلا لا تزال قائمة أيضا في اليد لمس القائم على شاشة متحولة^14،20. على سبيل المثال، لإكمال جولة واحدة من التحفيز قوة اللمس، يحتاج الشخص إلى لمس 30-60 مرة (لمسة واحدة في الثانية) على مصنع فردي. من أجل الحصول على عدد كاف من النباتات لتحليل النمط الظاهري الإحصائي، هناك حاجة عادة إلى 20-50 من النباتات الفردية من نفس النمط الجيني لعملية تحميل قوة اللمس. يعني نظام تحميل قوة اللمس هذا أن الشخص يحتاج إلى إجراء 600-3000 لمسة على النمط الجيني واحد من الخيارات. هذا النوع من اللمس عادة ما يحتاج إلى تكرار 3 إلى 5 جولات في اليوم، وهو ما يعادل ما يقرب من 1800-15،000 الاصبع أو القطن مسحة اللمسات في اليوم الواحد لكل النمط الجيني من النباتات. وعادة ما يطلب من شخص مدرب تدريبا جيدا للحفاظ على قوة وقوة اللمسات المتعددة ضمن نطاق مرغوب فيه طوال العديد من جولات التكرار في يوم واحد لتجنب التباين الكبير في القوة والقوة. كما هو معروف جيدا أن التكومورفو التكوين هو عملية saturable والجرعة تعتمد^{على 6،21}، قوة اللمس / قوة يصبح حاسما للنجاح في إثارة استجابة اللمس من النبات.

لإزالة تحميل قوة اللمس التي تعتمد على الشخص والحفاظ على التطبيق الميكانيكي ضمن نطاق خطأ مقبول^14،لذلك قمنا بتصميم آلة تحميل التلقائي قوة اللمس لتحل محل اللمسات التي يتم التلاعب بها باليد. الجهاز لديه 4 الأسلحة المتحركة بنيت، وقد تم تجهيز كل منها مع فرشاة شعر الإنسان واحد. ويسمى هذا الإصدار نموذج K1 لتحديد ميزة من الشعر البشري تعمل باللمس قوة التحميل. إذا تم قياس 4 أنماط جينية كمياً لنشأة الثيغمومورفو أو الاستجابة باللمس تحت آلة واحدة، يمكن قياس 40-48 فردًا لكل نمط جيني. تستمر كل جولة من التكرار باللمس (أقل من 60 مرة من اللمس لكل مصنع) أقل من 5 دقائق باستخدام ذراع روبوتية قابلة للتعديل بسرعة متحركة. وهكذا، يمكن تحفيز النباتات على آلة اللمس K1 النموذجية ميكانيكيا لجولات متعددة في اليوم إما مع تحميل قوة اللمس المستمر أو مستويات مختلفة من نقاط القوة كما هو مبرمج في البداية.

لذلك تم اختيار أرابيدوبسي ثاليانا،وهو كائن نباتي نموذجي، كنوع من النباتات المستهدفة لاختبار تطبيق آلة تحميل اللمس التلقائي بالكامل للشعر. لأن هناك العديد من البنوك البذور الكبيرة المتاحة لاسترداد الجراثيم المختلفة من المسوخ وحجم المزهرة، Arabidopsis يناسب بشكل جيد إلى المساحة المتاحة في الجرف النمو شنت مع نموذج K1 آلة اللمس.

يتكون الجهاز الآلي للمس طراز K1 من ثلاثة مكونات رئيسية: (1) رف معدني على شكل حرف H يتكون من اثنين من المحركات الخطية التي يقودها الحزام، (2) الأسلحة المعدنية الروبوتية المجهزة بفرش الشعر، و (3) وحدة تحكم. لآلة لمس نموذج K1 مخصصة، كل وحدة محور X / Y يتكون من واحد حزام يحركها دليل السكك الحديدية، وكتل الشرائح اثنين (الأحمر) ومحرك واحد 57 السائر (مثبتة مسبقا وقابلة للفك) (الشكل1A،B). يسمح المحرك الأفقي العلوي للذراع المعدنية الروبوتية بالتحرك أفقياً ويساراً، ويسمح المحرك الخطي ذو الحزام العمودي السفلي بتحريك الذراع المعدنية الروبوتية صعوداً وهبوطاً رأسياً (الشكل1B، الشكل 2A) ). تم تركيب أربعة أذرع روبوتية قابلة للفك على الموضع العمودي (الشكل1C، الشكل 2B). وكانت أربع فرش شعر الإنسان ملزمة إلى أربعة الأسلحة الروبوتية، على التوالي (الشكل1C، الشكل 2باء). يتم وضع علامة على جميع الأجزاء الميكانيكية لبناء آلة اللمس K1 النموذجية بخط غامق أدناه في الشكل 1C (انظر أيضًا جدول المواد).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

1. إعداد البذور

ملاحظة: تم شراء بذور أرابيدوبسي من كل من النوع البري(Col-0)وكذلك mkk1 و mkk2 فقدان وظيفة المسوخ المستخدمة من مركز الموارد البيولوجية Arabidopsis (ABRC، https://www.arabidopsis.org، كولومبوس، OH).

1. حساب عدد الأفراد النباتية من كل النمط الجيني سيتم استخدامها لتحليل إحصائي موثوق بها. إعداد عدد كاف من البذور على أساس معدل الإنبات من كل خط، وعادة 4-5 مرات أكثر مما هو مطلوب لتجربة. ضمان عدد كاف من النباتات الصحية وموحدة الحجم يمكن استخدامها لفحص استجابة اللمس. ووفقا لهذا البروتوكول، عادة ما تستخدم 300-500 بذور لكل نمط جيني لإنتاج 80-90 النباتات من حجم مماثل.
2. تزج البذور في الماء البارد وتخزينها في 4 درجة مئوية (مغطاة رقائق الألومنيوم للحفاظ على في الظلام) لimbibition البذور. زرع البذور 5-7 أيام بعد imbibition.

2- نمو النبات

1. حدد التربة المناسبة لنمو النبات (انظر جدولالمواد). تجنب كتل كبيرة ومزجها بشكل متجانس.
2. إعداد 24 أكواب بلاستيكية: قدرة الاحتفاظ هي 207 مل وقطر الحافة العليا هو 7.4 سم.
3. ملء هذه الأكواب البلاستيكية مع التربة المختلطة. السماح للتربة تتراكم ما يصل إلى 1-2 سم أعلى من حافة الكأس وتسطيح سطح التربة مكدسة بهدوء.
4. نقل 24 أكواب في علبة بلاستيكية (21 بوصة × 10.8 بوصة × 2.5 بوصة) ووضع الدرج تحت حالة ضوء ثابت (انظر أدناه).
5. أضف 2.5 لتر من الماء إلى كل صينية قبل ساعتين من بذر البذور. السماح للتربة لامتصاص المياه من الثقوب الموجودة في قيعان الكؤوس والانتظار لسطح التربة لإسقاط إلى مستوى حافة الكأس.
6. زرع 3-4 بذور في بقعة واحدة، و 4 بقع موزعة بالتساوي داخل كوب.
7. ضع غطاء بلاستيكي شفاف فوق كل صينية، ودع البذور تنبت لمدة أسبوع. ثم إزالة الغطاء والسماح للشتلات أن تنمو لمدة أسبوع آخر.
8. إزالة النباتات اضافية عن طريق ترقق والحفاظ على 4 الأفراد النبات من حجم مماثل في كل كوب 9-10 أيام بعد بذر البذور.
9. سقي النباتات مع 1.5 لتر من الماء كل يوم بعد أنت بمرحلة البذور.

3- حالة النمو

1. تعيين درجة حرارة غرفة النمو في 23.5 ± 1.5 درجة مئوية، والرطوبة بين 35 و 45٪.
2. تعيين شدة الضوء بين 180 و 240 μ=m^-2∙s^-1 (يقاس بمقياس الإشعاع للبحوث IL 1700, International Light)¹⁴. الإشعاع النشط التركيبي الضوئي هو من 90 إلى 120 درجة مئوية^-2∙s-1.
3. تعيين حالة الضوء لتكون ثابتة 24 ساعة.

4. بناء آلة تحميل قوة تعمل باللمس

ملاحظة: تم تصميم هذا الشعر الروبوتية تعمل باللمس قوة آلة التحميل (نموذج K1) لخدمة أغراض كل منقوة اللمس إشارة تحويلة الفرز وجيل الثيغمومورفوجينيسيس النبات (الشكل 1، الشكل2).

1. وحدات ما قبل التثبيت (قابلة للفك، الشكل 1C)
   1. تثبيت اثنين من كتل الشريحة (I) ومحرك واحد 57 السائر (II) على محور X / Y دليل السكك الحديدية وحدة (III / V).
   2. قم بتثبيت كتلتين من الشرائح (I) على العارضة المساعدة لمحور X/Y (IV/VI).
2. تركيب أجزاء ميكانيكية أخرى (الشكل 1C)
   1. إصلاح محور X دليل السكك الحديدية وحدة (III) وX محور العارضة المساعدة (IV) معا عن طريق تجميع اثنين من لوحات تقاطع (السابع) في كل نهاية من دليل السكك الحديدية.
   2. قم بإصلاح وحدة دليل السكك الحديدية (V) على الجزء الظهري لكتلتين من الشرائح (محور X) في موضع عبور عن طريق تجميع لوحتي تقاطع (VIII) بينهما.
   3. قم بإصلاح العارضة المساعدة لمحور Y (VI) على الظهرية لكتل الشرائح الأخرى (المحور X) في موضع العبور عن طريق تجميع لوحتي تقاطع (VIII) بينهما.
   4. تجميع حامل الأسلحة الروبوت (التاسع) على الجزء الأمامي من اثنين من كتل الشريحة (محور Y) في موقف عبور مع لوحة تقاطع (الشكل2A).
   5. تجميع 4 فرش الشعر (X) على الأسلحة الروبوت (التاسع) مع المشابك (الشكل2B).

5. تعمل باللمس قوة إعداد آلة التحميل

ملاحظة: يتم عرض كافة المعلمات التحكم لتعيين آلة اللمس K1 النموذجي ة بخط غامق أدناه في لوحة التحكم (الشكل2F).

1. تثبيت فرش الشعر تعمل باللمس على الأسلحة الروبوتية. استخدم مسطرة فولاذية بطول 330 مم كحامل لإصلاح طبقة واحدة من شعر الإنسان (3600-4600 شعر/فرشاة) بالتساوي. طول الشعر هو 126 مم (الشكل1C).
2. إصلاح تلك الحكام الصلب على الأسلحة الروبوتية مع اثنين من المشابك المعدنية.
3. تعيين ارتفاع الأسلحة الآلية على طول البعد الرأسي (محور Y) أولاً. اضغط على Jog F+ لرفع وهرول R- لخفض الأسلحة الروبوتية وفرش. دع طرف فرش الشعر أقل بـ 0.5 سم من حافة الكوب. اضغط على مجموعة صفر. قبل تشغيل دورات الجهاز 1-2 للتأكد من أن يتم لمس جميع الأفراد النبات. ضبط ومعايرة فرش ونصائح الشعر إلى نفس الارتفاع كل يوم خلال فترة اللمس بأكملها.
4. استخدم مقياسًا إلكترونيًا لقياس قوة اللمس (التحميل الرأسي) والحفاظ على مستوى قوة اللمس عند 1-2 mN^14.
5. تعيين موقف البداية من الأسلحة الآلة على طول البعد الأفقي (محور س) يدويا. السماح لفرش الشعر لشنق على حافة كل علبة وتأكد من أنه لا يتم لمس أي نبات قبل بدء تجربة لمس. اضغط على Jog F+/Jog R- لتحريك ذراع الجهاز أفقيا ً شيئاً فشيئاً لتعيين موضع البداية.
6. اضبط مسافة السفر بفرشاة الشعر في البعد الأفقي (محور X) إلى 365 مم عن طريق الضغط على زر السفر. اضغط على شركة F +/ شركةR- لنقل الأسلحة الرشاشة للحصول على مسافة سفر كاملة وضمان أن يتم لمس جميع النباتات المعالجة خلال تجربة لمس كامل.
7. تعيين سرعة الحركة على طول محور X من الأسلحة آلة في 5000 مم / دقيقة عن طريق الضغط على زر سرعة السيارات. الحفاظ على نفس سرعة الحركة خلال تجربة لمس كامل.
8. قم بتعيين وقت اللمس في 20 تجربة عن طريق الضغط على زر الدورة الثانوية. احتفظ بنفس العدد من اللمسات لكل جولة خلال تجربة اللمس بأكملها.
   ملاحظة: دورة ثانوية واحدة تساوي مسافة سفر اثنين، مما يعني أن الأسلحة الآلية ستنتقل من موضع البداية إلى موضع النهاية ثم تعود إلى موضع البداية. دورة ثانوية واحدة يولد اثنين من اللمسات. فرش الشعر لمس النباتات 40 مرة في غضون 20 التجارب (2 اللمسات × 20 التجارب = 40 اللمسات). يتم تعريف 40-اللمس لتكون جولة واحدة من تحميل قوة اللمس.
9. تعيين الفاصل الزمني التكرار من جولة اللمس في 480 دقيقة في اليوم الواحد عن طريق الضغط على زر الفترة الرئيسية. احتفظ بنفس تردد الجولات التي تعمل باللمس أثناء تجربة لمس كاملة.
   ملاحظة: هذا يسمح فرش الشعر للمس النباتات لمدة 3 جولات في اليوم، والفاصل الزمني بين كل جولة هو 480 دقيقة (8 ح). الرقم الأزرق المعروض لتقف على الوقت الفاصل الزمني لكل جولة لمسة. سيبدأ الجهاز جولة جديدة من اللمس تلقائيًا عندما يتحول العد التنازلي أدناه (الرقم الأحمر) إلى 0000.
10. تعيين دورة رئيسية في 12 التجارب، مما يعني أن الجهاز سوف تلمس النباتات لمدة 12 جولات في غضون فترة 4 أيام تلقائيا. يتم استخدام هذا الإعداد من 12 التجارب لتجنب الخطأ البشري في تخطي يوم من لمس.
11. اضغط على زر البدء لبدء البرنامج المحدد مسبقًا. سيقوم الجهاز الذي تعمل باللمس طراز K1 تلقائيًا بإجراء تحميل قوة اللمس وفقًا للإعدادات.

6- جمع البيانات الفسيولوجية وتحليلها

1. أيام إلىالاغلاق: تسجيل يوم الاغلاق من كل مصنع على حدة ضمن تجربة لمس. الاغلاق هو رمز أن النبات يغير مرحلة نموه من المرحلة النباتية إلى مرحلة الإنجاب. في أرابيدوبسي، يتم تعريف يوم الاغلاق على أنه عدد الأيام التي يستخدمها النبات ليكون أول جذع الإزهار يصل إلى 1 سم في الطول.
   ملاحظة: في ظل حالة النمو المذكورة أعلاه، يبدأ عادة الاغلاق من النباتات من النوع البري من 19 إلى 23 يوما بعد بذر البذور وينتهي في 28-32 يوما.
2. دائرة نصف قطرها روزيت:قياس المسافة من مركز روزيت إلى غيض من أطول ورقة.
   1. التقاط صور من علبة كاملة من أعلى. التقط صورًا لمجموعة التحكم والمجموعة المعالجة باللمس بشكل منفصل.
   2. قم بتنزيل البرنامج المناسب. استخدام البرنامج تحميل مجاني ImageJ (https://imagej.nih.gov/ij/download.html) على سبيل المثال.
   3. افتح ملف صورة، واستخدم وظيفة التكبير/التصغير لتكبير الصورة في حجم مناسب.
   4. اختر أداة مستقيمة لرسم خط مستقيم بين مركز روزيت وطرف أطول ورقة لقياس دائرة نصف قطرها روزيت.
   5. حدد مصنع واحد واضغط على الزر الأيسر لرسم خط مستقيم من مركز روزيت إلى أطول طرف ورقة.
   6. اختر وظيفة تحليل القياس أو اضغط على Ctrl + M لتحليل مسافة الخط.
   7. حدد كوب واحد وكرر الخطوتين السابقتين لتحليل قطر كل كوب من البلاستيك في نفس الوقت. استخدم هذه البيانات لإجراء الحساب للقضاء على التحيز الناتج عن التقاط الصور.
      ملاحظة: المعادلة هي:
      R_a/D_a = R_m/D_m
      (R_a، دائرة نصف قطرها روزيت الفعلية من النبات؛ د_أ، القطر الفعلي للكوب البلاستيك؛ R_m، نصف قطرروزيت قياس نفس النبات التي يحددها برنامج؛ Dم، قطر قياس كوب من البلاستيك الذي يستخدم لزراعة نفس النبات)
3. منطقة روزيت:قياس الأفقي 2-الأبعاد مساحة السطح من أوراق روزيت.
   1. إزالة الإزهار دون التأثير على بقية أعضاء روزيت.
   2. التقاط الصور من الجزء العلوي من كل مصنع جنبا إلى جنب مع مسطرة مقياس وضعت في مكان قريب.
   3. استخدام واحد البرنامج المساعد مجانا من ImageJ، روزيت المقتفي واتبع البروتوكول نشرت سابقا²².

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

التلقائي الشعر تعمل باللمس قوة آلة التحميل
ولمراقبة التغيرات المورفولوجية على النباتات، فإن ظروف النمو القابلة للاستنساخ وأساليب العلاج هي مفتاح الحصول على نتائج قابلة للتكرار. ويتحقق هذا عالية الإنتاجية والتلقائي ة تعمل باللمس قوة إشارة متحولة الفرز من قبلآ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Thigmomorphogenesis هو استجابة نمو النبات معقدة نحو الاضطرابات الميكانيكية، والذي ينطوي على شبكة من الإشارات الخلوية وعمل الهرمونات النباتية. هو نتيجة للتطور التكيفي للنباتات للبقاء على قيد الحياة في ظل الظروف البيئية غير المرغوب فيها^25،26. وقد تم اختيار لمسة ميكان?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
4 hair brushes		customized
4 robot arms with one holder		customized	1000 mm length holder and 560 mm length robot arm
57 stepper motor		57HS22-A
All purpose potting soil	Plantmate, Hong Kong
Arabidopsis plant seeds	Arabidopsis Biological Resource Centers, Columbus, OH		For arabidopsis seed purchase
BIO-MIX potting substratum	Jiffy Products International BV, the Netherlands	1000682050	Two soils were mixed together to grow Arabidopsis. The ratio of All purpos potting soil and  BIO-MIX is 1:2
IL 1700 research radiometer	International Light, Newburyport, MA		The light intensity of both full-wavelength and photosynthetic active radiation can be measured.
ImageJ	https://imagej.nih.gov/ij/download.html		Free downloaded software
Ju Feng Precision and Automation Technology Limited	Shenzhen, China		For belt-driven linear actuators and other mechanical modules purchase
Junction plate of the slide block			To fix the Y guide-rail module or Y auxiliary girder onto backs of slide blocks
Junction plate of the X axis module		customized	To connect the X guide-rail module and X auxiliary girder
Slide block
WDT4045 X axis guide-rail module		843 mm, customized	Pre-installed with two slide blocks and one 57 stepper motor
WDT4045 Y axis guide-rail module		1038 mm, customized	Pre-installed with two slide blocks and one 57 stepper motor
X axis auxiliary girder		843 mm, customized	Pre-installed with two slide blocks
Y axis auxiliary girder		1038 mm, customized	Pre-installed with two slide blocks