Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

هنا ، نصف التخليق الإشعاعي ل 1-(2-[18F] Fluoroethyl)-L-tryptophan ، وهو عامل تصوير مقطعي بالإصدار البوزيتروني لدراسة استقلاب التربتوفان ، باستخدام استراتيجية من وعاء واحد ، من خطوتين في نظام تخليق الكيمياء الإشعاعية مع عوائد كيميائية إشعاعية جيدة ، وفائض enantiomeric عالية ، وموثوقية عالية.

Abstract

مسار كينورينين (KP) هو الطريق الرئيسي لاستقلاب التربتوفان. تشير الأدلة بقوة إلى أن مستقلبات KP تلعب دورا حيويا في انتشار الورم والصرع والأمراض العصبية التنكسية والأمراض النفسية بسبب آثارها المناعية المعدلة والعصبية والسمية العصبية. عامل التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني الأكثر استخداما على نطاق واسع (PET) لرسم خرائط استقلاب التربتوفان ، α-[11C] methyl-L-tryptophan ([11C]AMT) ، له عمر نصف قصير يبلغ 20 دقيقة مع إجراءات التخليق الإشعاعي الشاقة. مطلوب سيكلوترون في الموقع للتوليف الإشعاعي [11C] AMT. ينتج عدد محدود فقط من المراكز [11C] AMT للدراسات قبل السريرية والتحقيقات السريرية. وبالتالي ، هناك حاجة ماسة إلى تطوير عامل تصوير بديل له عمر نصف أطول ، ومناسب في الحركيات الحية ، ويسهل أتمتته. تم الإبلاغ عن فائدة وقيمة 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan ، وهو نظير تريبتوفان يحمل علامة الفلور 18 ، في التطبيقات قبل السريرية في xenografts المشتقة من خط الخلية ، و xenografts المشتقة من المريض ، ونماذج الأورام المعدلة وراثيا.

تقدم هذه الورقة بروتوكولا للتخليق الإشعاعي ل 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan باستخدام استراتيجية من وعاء واحد وخطوتين. باستخدام هذا البروتوكول ، يمكن إنتاج المقتفي الإشعاعي بنسبة 20 ± 5٪ (تم تصحيح الاضمحلال في نهاية التوليف ، n > 20) عائد كيميائي إشعاعي ، مع كل من النقاء الكيميائي الإشعاعي وفائض enantiomeric لأكثر من 95٪. يتميز البروتوكول بكمية سلائف صغيرة لا تزيد عن 0.5 مل من مذيب التفاعل في كل خطوة ، وتحميل منخفض من 4،7،13،16،21،24-hexaoxa-1،10-diazabicyclo [8.8.8] hexacosane (K222) ، ومرحلة متنقلة حميدة بيئيا وقابلة للحقن للتنقية. يمكن تكوين البروتوكول بسهولة لإنتاج 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan للتحقيق السريري في وحدة متاحة تجاريا.

Introduction

في البشر ، التربتوفان هو عنصر أساسي في النظام الغذائي اليومي. يتم استقلاب التربتوفان في المقام الأول عبر مسار كينورينين (KP). يتم تحفيز KP بواسطة إنزيمين محددين للمعدل ، إندوليامين 2 ، 3-ثنائي الأكسجين (IDO) وتريبتوفان 2 ، 3-ثنائي أكسجيناز (TDO). يتم تحويل أكثر من 95٪ من التربتوفان إلى كينورينين ومستقلباته النهائية ، مما يؤدي في النهاية إلى توليد نيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد ، وهو أمر ضروري لنقل الطاقة الخلوية. KP هو منظم رئيسي للجهاز المناعي ومنظم مهم للمرونة العصبية والآثار السمية العصبية 1,2. وينطوي استقلاب التربتوفان غير الطبيعي في مختلف الاضطرابات العصبية والأورام والنفسية والأيضية. لذلك ، تم استخدام نظائر التربتوفان ذات العلامات المشعة على نطاق واسع في التحقيق السريري. أكثر المقتفيات الإشعاعية التريبتوفان شيوعا التي تم التحقيق فيها سريريا هما 11C-α-methyl-L-tryptophan ([11C]AMT) و 11C-5-hydroxytryptophan (11C-5-HTP)3.

في 1990s ، تم استخدام 11C-5-HTP لتصور الأورام العصبية الصماوية التي تفرز السيروتونين 4 ولتشخيص ومراقبة العلاج من سرطان البروستاتا الغدي البروستاتا النقيلي المقاوم للهرمونات5. في وقت لاحق ، تم استخدامه كأداة تصوير لتحديد كمية نظام السيروتونين في البنكرياس الغدد الصماء6. ١١ كان C-5-HTP أيضا متتبعا واعدا للكشف غير الباضع عن الجزر القابلة للحياة في زرع الجزر داخل البوابة ومرض السكري من النوع 27,8. على مدى العقدين الماضيين ، تقدمت العديد من الأحماض الأمينية ذات العلامات المشعة إلى التحقيق السريري9,10. على وجه الخصوص ، تلقى التريبتوفان التناظري المسمى بالكربون 11 [11C] AMT اهتماما واسعا لرسم خرائط تخليق السيروتونين في الدماغ11،12،13،14 ولتوطين بؤر الصرع ، والأورام الصرعية ، ومجمع التصلب الدرني ، والأورام الدبقية ، وسرطان الثدي15،16،17،18،19،20 ,21,22,23,24,25,26. [11 ج] لدى AMT أيضا إقبال كبير على مختلف الأورام منخفضة وعالية الجودة لدى الأطفال27. علاوة على ذلك، تم استخدام تحليل التتبع الحركي ل [11C] AMT في الأشخاص البشريين للتمييز بين الأورام المختلفة وتصنيفها والتمييز بين الورم الدبقي وإصابة الأنسجة الناجمة عن الإشعاع15. [11 ج] يظهر التصوير الموجه بواسطة AMT فوائد سريرية كبيرة في اضطرابات الدماغ3,25. ومع ذلك ، نظرا لقصر عمر النصف للكربون-11 (20 دقيقة) وإجراءات التخليق الإشعاعي الشاقة ، يقتصر استخدام AMT [11C] على عدد قليل من مراكز PET مع السيكلوترون في الموقع ومرفق الكيمياء الإشعاعية.

يتمتع الفلور-18 بعمر نصف موات يبلغ 109.8 دقيقة ، مقارنة بعمر النصف 20 دقيقة للكربون-11. وتركزت الجهود بشكل متزايد على تطوير أجهزة تتبع إشعاعي تحمل علامة الفلور 18 لاستقلاب التربتوفان3,28. تم الإبلاغ عن ما مجموعه 15 من أجهزة التتبع الإشعاعي الفريدة من نوعها للفلور 18 المراد بها الإشعاعي التربتوفان من حيث وضع العلامات الإشعاعية ، وآليات النقل ، في المختبر وفي الجسم الحي ، والتوزيع البيولوجي ، وامتصاص الورم في xenografts. ومع ذلك، لوحظ إزالة الفلورة السريعة في الجسم الحي للعديد من المقتفيات، بما في ذلك 4-و 5-و 6-[18F]fluorotryptophan، مما حال دون مزيد من الترجمة السريرية29. 5-[18F] فلورو-α-ميثيل تريبتوفان (5-[18F]FAMT) و 1-(2-[18F]فلورو إيثيل)-L-تريبتوفان (L-[18F]FETrp، المعروف أيضا باسم (S)-2-amino-3-(1-(2-[18F]فلورو إيثيل)-1H-indol-3-yl) حمض البروبانويك، الوزن الجزيئي 249.28 جم/مول)، هما أكثر المقتفيات الإشعاعية الواعدة مع الحركيات المواتية في الجسم الحي في النماذج الحيوانية وإمكانات كبيرة لتجاوز [11 C]AMT لتقييم الحالات السريرية مع استقلاب التربتوفان غير المنظم28. 5-[18F] أظهر FAMT امتلاء عاليا في xenografts الورم الإيجابي IDO1 من الفئران التي تعاني من نقص المناعة وهو أكثر تحديدا لتصوير KP من [11C] AMT28,30. ومع ذلك ، فإن الاستقرار في الجسم الحي ل 5-[18F] FAMT لا يزال مصدر قلق محتمل حيث لم يتم الإبلاغ عن بيانات إزالة الفلورة في الجسم الحي بعد 30 دقيقة من حقن التتبع30.

أظهرت دراسة ما قبل السريرية في نموذج فأر الورم الأرومي النخاعي المعدل وراثيا أنه بالمقارنة مع 18F-fluorodeoxyglucose (18F-FDG) ، L-[18F] FETrp كان لديه تراكم عال في أورام الدماغ ، لا يكاد يذكر في إزالة الفلورة في الجسم الحي ، وامتصاص منخفض للخلفية ، مما يدل على نسبة مستهدفة إلى غير مستهدفة متفوقة 31,32. أشارت دراسات قياس الجرعات الإشعاعية في الفئران إلى أن L-[18F] FETrp كان لديه تعرض أقل بنسبة 20٪ تقريبا لقياس الجرعات المواتية من 18F-FDG PET tracer33 السريري. بالاتفاق مع نتائج الباحثين الآخرين ، توفر بيانات الدراسة قبل السريرية أدلة كبيرة لدعم الترجمة السريرية ل L-[18F] FETrp للتحقيق في استقلاب التربتوفان غير الطبيعي لدى البشر الذين يعانون من اضطرابات الدماغ مثل الصرع والأورام العصبية والتوحد والتصلب الدرني28،31،32،33،34،35،36 . ويبين الجدول 1 مقارنة عامة بين المقتفيات الثلاثة الأكثر تحقيقا على نطاق واسع لاستقلاب التربتوفان، وهي 11C-5-HTP و [11C] AMT و L-[18F] FETrp. كل من 11C-5-HTP و [11C] AMT لهما عمر نصف قصير وإجراءات وضع العلامات الإشعاعية الشاقة. يتم وصف بروتوكول للتخليق الإشعاعي ل L-[18F] FETrp باستخدام نهج وعاء واحد من خطوتين هنا. ويتميز البروتوكول باستخدام كمية صغيرة من سلائف وضع العلامات الإشعاعية، وكمية صغيرة من مذيبات التفاعل، وتحميل منخفض من K222 السامة، ومرحلة متنقلة حميدة بيئيا وقابلة للحقن للتنقية والتركيب السهل.

Protocol

تنبيه: يتضمن البروتوكول مواد مشعة. أي جرعة إضافية من المواد المشعة يمكن أن تؤدي إلى زيادة متناسبة في فرصة الآثار الصحية الضارة مثل السرطان. يجب على الباحثين اتباع ممارسات الجرعة "المنخفضة التي يمكن تحقيقها بشكل معقول" (ALARA) لتوجيه بروتوكول التخليق الإشعاعي مع الحماية الكافية في الخلية الساخنة أو غطاء الرصاص. من الضروري تقليل وقت الاتصال المباشر ، واستخدام درع الرصاص ، والحفاظ على أقصى مسافة لأي خطوة التعرض للإشعاع في عملية التخليق الإشعاعي. ارتد شارة قياس الجرعات الإشعاعية وحلقات مراقبة اليد طوال التجربة بأكملها، وكثيرا ما راقب الأسطح التي يحتمل أن تكون ملوثة مثل القفازات والأكمام والقدمين. يجب اتباع اللوائح التنظيمية المحلية والمؤسسية للجنة التنظيمية النووية لاستخدام أي مواد مشعة وشحنها والتخلص منها.

1. الاستعدادات الأولية

  1. تحضير 10٪ من الإيثانول في المرحلة المتنقلة من خلات الصوديوم / حمض الخليك 50 mM للكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء شبه التحضيرية (HPLC).
    1. ضع 3 مل من حمض الخليك الجليدي في قارورة حجمية نظيفة سعة 1000 مل. أضف 900 مل من الماء فائق النقاء (مقاومة 18 مليون أوم سم عند 25 درجة مئوية) إلى القارورة الحجمية ؛ أضف ما يقرب من 8 مل من محلول هيدروكسيد الصوديوم 6 M واضبط الرقم الهيدروجيني إلى 5.5 باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني المعاير وشريط الأس الهيدروجيني. بعد أن يبرد المحلول إلى درجة حرارة الغرفة ، قم بتكوين الحجم إلى 1000 مل بالماء فائق النقاء لإعداد محلول خلات الصوديوم / حمض الخليك (الرقم الهيدروجيني 5.5) الذي يبلغ 50 ملليمتر.
    2. قم بتصفية المحلول بالتفريغ من خلال مرشح غشاء 0.2 ميكرومتر ونقل المحلول إلى زجاجتين مذيبتين سعة 500 مل.
    3. ضع ما يقرب من 250 مل من المخزن المؤقت أعلاه في قارورة حجمية سعة 500 مل. استخدم أسطوانة متدرجة لقياس 50 مل من الإيثانول في دستور الأدوية الأمريكي (USP) وأضف الإيثانول إلى القارورة الحجمية. قم بتكوين الحجم إلى 500 مل مع 50 mM من خلات الصوديوم / حمض الخليك ، وقياس قيمة الرقم الهيدروجيني باستخدام شريط الأس الهيدروجيني.
  2. إعداد حلول مراقبة الجودة (QC) لاختبار ملاءمة النظام.
    1. أعد ملء زجاجات المذيبات HPLC بالماء النقي العذب (المذيب A) والإيثانول (المذيب B). قم بتعبئة مضخة HPLC وقم بتحميل برنامج HPLC بمعدل تدفق يبلغ 1 مل / دقيقة يتكون من 30٪ من المذيبات A و 70٪ من المذيبات B (v / v).
    2. قم بعمل حل تحكم (حل فارغ) لمراقبة الجودة. أضف 5 مل من كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪ في قارورة زجاجية سعة 20 مل. أضف 0.15 مل من 23.4٪ كلوريد الصوديوم إلى المحلول أعلاه. أضف 6 مل من المرحلة المتنقلة HPLC شبه التحضيرية المحضرة في الخطوة 1.1.3 (10٪ إيثانول في 50 mM من خلات الصوديوم / حمض الخليك ، الرقم الهيدروجيني 5.5) إلى القارورة الزجاجية.
    3. تحضير 1 ميكروغرام/مل من مخاليط L-FETrp غير المشعة و 5 ميكروغرام/مل من مخاليط L-FETrp و D-FETrp الراسيمية (الحلول القياسية).
    4. قم بإنشاء منحنى معايرة باستخدام حلول L-FETrp القياسية (0.1 ميكروغرام / مل ، 0.5 ميكروغرام / مل ، 1.0 ميكروغرام / مل ، 10 ميكروغرام / مل ، 100 ميكروغرام / مل).
    5. قم بإعداد تسلسل HPLC. تأكد من أن التسلسل يتضمن تشغيلا واحدا لمحلول العينة الفارغ ، وتشغيلين من L-FETrp القياسي (1 ميكروغرام / مل) ، وتشغيل واحد من مخاليط L-FETrp و D-FETrp الراسيمية (5 ميكروغرام / مل) ، وتشغيل واحد للمستحضرات الصيدلانية الإشعاعية النهائية.
    6. قم بتشغيل تسلسل HPLC الجزئي لاختبار مدى ملاءمة النظام قبل تحليل العينات المشعة باستخدام عمود HPLC تحليلي (250 × 4.6 مم).
      1. قم بتشغيل عينة فارغة واحدة وتأكد من أن كروماتوجرام العينة الفارغة لا يظهر أي قمم أو غير مهمة بين حجم الفراغ و 10 دقائق من الكروماتوجرام.
      2. قم بتشغيل نسختين متماثلتين من الحل القياسي (يحتوي على 1 ميكروغرام / مل من L-FETrp). تأكد من أن مساحات L-FETrp في النسختين المتماثلتين ضمن ±5٪ من القيمة المتوسطة.
      3. قم بتشغيل عينة واحدة من مخاليط L-FETrp و D-FETrp (5 ميكروغرام / مل من L-FETrp و D-EFTrp ، على التوالي). تأكد من إمكانية تحديد L-FETrp و D-FETrp على الكروماتوجرام وخط الأساس الذي تم حله.
  3. إعداد حلول وضع العلامات الإشعاعية وغيرها من المستلزمات.
    1. أضف الحلول التالية إلى خمسة قوارير على شكل حرف V سعة 1.5 مل على التوالي. قارورة 1: 1 مل من كربونات البوتاسيوم (K2CO3) / محلول K222 (5 ملغ / مل K222 و 1 ملغ / مل K2CO3 في محلول ماء / أسيتونيتريل ، 1/99 ، v / v) ل [18F] إزالة الفلورايد ؛ قارورة 2: 0.4 مل من الأسيتونيتريل اللامائي لتجفيف الفلورايد [18F] ؛ قارورة 3: سلائف وضع العلامات الإشعاعية في الأسيتونيتريل اللامائي (1-2 ملغ في 0.5 مل من الأسيتونيتريل اللامائي) لدمج الفلورايد [18F] ؛ قارورة 4: حمض الهيدروكلوريك (2 م ، 0.25 مل) في الأسيتونيتريل (0.25 مل) للتحلل الحمضي ؛ قارورة 5: 2 M هيدروكسيد الصوديوم (0.25 مل) لتحييد مخاليط التفاعل.
    2. قم بتنشيط خرطوشة ضوء ميثيل الأمونيوم الرباعية (QMA) عن طريق المرور أولا عبر 10 مل من محلول بيكربونات الصوديوم المشبع ، متبوعا ب 10 مل من الماء فائق النقاء ، ثم اغسل الخرطوشة بتدفق النيتروجين. قم بتهيئة خرطوشة C8 خفيفة وخرطوشة أكسيد الألومنيوم المحايدة عن طريق المرور عبر 10 مل من الإيثانول ، متبوعة ب 10 مل من الماء فائق النقاء.
    3. أضف 0.15 مل من 23.4٪ من كلوريد الصوديوم و 5 مل من كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪ إلى قارورة تركيبة معقمة 30 مل لضبط التوتر وتخفيف جزء HPLC.
    4. تحضير محلول (1 مل من خلات الصوديوم / حمض الخليك العازل ، 50 مللي متر ، الرقم الهيدروجيني = 5.5 محضر في الخطوة 1.1.1 ، 1 مل من الإيثانول ، و 0.5 مل من الماء [إجمالي 2.5 مل]) في حقنة لشطف وعاء التفاعل ؛ تحميل في قارورة معقمة 10 مل.

2. تجميع لوازم وضع العلامات الراديوية والتوليف الإشعاعي L-[18F] FETrp

  1. تجميع لوازم وضع العلامات الراديوية.
    1. قم بتشغيل طاقة الوحدة النمطية وثاني أكسيد الكربون والهواء المضغوط وخطوط الأرجون وطاقة وحدة التحكم المنطقية القابلة للبرمجة (PLC). انقر فوق الزر mod_pscf18 لتنشيط برنامج نظام توليف الكيمياء الإشعاعية. قم بتهيئة MVP للإدخال والإخراج والصياغة ، وتأكد من أن MVPs في المواضع 4 و 1 و 1 على التوالي.
    2. تأكد من أن حلقة HPLC في موضع الحقن وخرطوشة ضوء QMA في موضع احتجاز الفلورايد [18F].
    3. قم بتركيب زجاجة المرحلة المتنقلة HPLC شبه التحضيرية (التي تحتوي على الحل المعد في الخطوة 1.1.3). قم بموازنة نظام HPLC عن طريق تمرير المرحلة المتنقلة عبر عمود HPLC الدائري (250 × 10 مم) وعمود C18 (100 × 10 مم) بمعدل تدفق يبلغ 2 مل / دقيقة لمدة 30 دقيقة على الأقل ، ثم قم بتبديل صمام التحويل ، واسمح لهاتف HPLC المحمول بالمرور عبر عمود HPLC الدائري فقط ، وقم بزيادة معدل التدفق إلى 3 مل / دقيقة.
    4. قم بتركيب خرطوشة ضوء QMA في خط ملائمة/تحرير الفلورايد [18F]. قم بتركيب خراطيش الألومينا/C8 المكدسة بين موضع MVP 6 للإدخال والقارورة الوسيطة، وهي قارورة على شكل حرف V سعة 10 مل متصلة بحلقة عينة HPLC. قم بتثبيت قارورة فارغة سعة 10 مل (قارورة تنفيس) في موضع MVP الناتج 4 باستخدام إبرة أخرى متصلة بالقارورة كتنفيس. قم بتثبيت قوارير الكاشف 1-5 على مواضع MVP المدخلة 1-5 ، على التوالي.
    5. قم بتثبيت القارورة التي تحتوي على محلول الشطف المعد في الخطوة 1.3.4 إلى موضع MVP الناتج 6.
    6. قم بتركيب زجاجة نفايات سعة 500 مل (لجمع نفايات HPLC التي تمر عبر كل من العمودين الدائري وC18) في موضع MVP 1 للصياغة. قم بتركيب زجاجة نفايات أخرى سعة 500 مل (لجمع نفايات HPLC التي تمر عبر العمود الدائري) في نهاية جمع النفايات في الصمام ذي الوضعين ذي الأربعة منافذ.
    7. قم بتوصيل قارورة جمع الكسور (محلول معبأ مسبقا تم إعداده في الخطوة 1.3.3) بموضع MVP 2 للصياغة. قم بتوصيل موضع MVP الناتج 3 (خط الغاز) وخط تسليم المنتج النهائي بقوارير MVP موضع MVP 2 لاستعادة المنتج النهائي المركب. قم بتثبيت قارورة معقمة فارغة سعة 10 مل في موضع MVP 3 ، والذي سيتم استخدامه كقارورة احتياطية لجمع الكسر المستهدف.
    8. قم بتثبيت العمود القصير C18 بين صمام التحويل رباعي المنافذ وثنائي الموضع والتركيبة MVP.
      ملاحظة: أثناء تركيب قوارير الكاشف والصياغة، تأكد من إيقاف تشغيل إمدادات الأرجون في لوحة التحكم، وأن ضغط الأرجون صفر لتجنب أي نقل غير متوقع للسائل أثناء تجميع القارورة. تحقق مرة أخرى من جميع وصلات الإبرة ومواضع القارورة ومواضع MVP بحثا عن التخليق الإشعاعي القابل للتكرار.
  2. التخليق الإشعاعي ل L-[18F]FETrp
    1. تلقي ومسح [18F] الفلورايد.
      1. عند تلقي محلول الفلورايد [18F] (15 ± 3 جيجا بيكوريال (GBq) في بداية التوليف ، انظر جدول المواد) ، قم بمسح صندوق الرصاص على السطح وعلى ارتفاع 1 متر لتسجيل الحد الأقصى لمعدلات التعرض للإشعاع. قم بإجراء اختبار مسح للتأكد من أن صندوق الشحن غير ملوث. سجل جرعة [18F] من الفلورايد والوقت.
    2. نقل [18F] الفلورايد.
      1. نقل النشاط الإشعاعي إلى نظام تخليق الكيمياء الإشعاعية.
      2. قم بتوصيل خط الأرجون بإبرة قصيرة وخط نقل الفلورايد [18F] بإبرة طويلة بقارورة الفلورايد [18F]. أغلق الباب الزجاجي ذو الخلايا الساخنة وباب الرصاص.
        تحذير: استخدم مشبك طويل لدفع كلا الإبرتين لأسفل. تأكد من أن طرف الإبرة الطويل يجلس في الجزء السفلي من قارورة الفلورايد [18F] بحيث يمكن نقل كل الفلورايد [18F] إلى الخارج. عادة ، يتم طلب قارورة على شكل حرف V لتوصيل الفلورايد [18F].
    3. فخ ، أعود ، وجافة بشكل أزيوتروبي [18F] الفلورايد.
      1. انقر فوق Ar Supply لتشغيل خط إمداد الأرجون، وزيادة ضغط الأرجون، وتشغيل خط دفع الفلورايد [18F]، ودفع الفلورايد المائي [18F] من خلال خرطوشة ضوء QMA. بعد أن يتم حبس كل النشاط الإشعاعي في خرطوشة ضوء QMA ، وتكون قراءة كاشف النشاط الإشعاعي ثابتة ، قم بزيادة ضغط الأرجون ونفخ الأرجون من خلال الخرطوشة لمدة 5 دقائق أخرى لإزالة الماء الزائد.
      2. قم بإيقاف تشغيل خط دفع الفلورايد [18F]، وخفض ضغط الأرجون إلى الصفر، وقم بتبديل الصمام ثنائي المنافذ المكون من ستة منافذ من موضع احتجاز الفلورايد [18F] إلى موضع الاستخراج. افتح قارورة التفاعل ، وقم بتشغيل موضع الإدخال MVP 1 خط الأرجون ، وادفع محلول K222 / K2CO3 إلى قارورة الإدخال MVP موضع 1 من خلال خرطوشة ضوء QMA لإخراج النشاط الإشعاعي إلى قارورة التفاعل. قم بتبديل موضع إزالة الفلورايد [18F] إلى موضع الملائمة.
      3. انقر فوق الزر " تسخين" لتسخين المفاعل عند 110 درجة مئوية، وقم بتشغيل موضع الإخراج MVP 4 خط الأرجون (خط الكنس) الذي يتصل بالمفاعل، وتبخر المذيب في موضع MVP الناتج 4 قارورة.
      4. انقر فوق الزر تبريد لتبريد المفاعل إلى درجة حرارة الغرفة باستخدام ثاني أكسيد الكربون المضغوط ، وقم بإيقاف تشغيل الخط الكاسح ، وقم بتبديل موضع MVP للإدخال 1 إلى الموضع 2 ، وأضف الأسيتونيتريل اللامائي في القارورة 2. قم بتشغيل خط الكنس والسخان ليجف الفلورايد [18F] بشكل أزيوتروبي عند 110 درجة مئوية.
    4. أضف سلائف وضع العلامات الإشعاعية وادمج الفلورايد [18F].
      1. قم بتبريد المفاعل إلى درجة حرارة الغرفة ، وأوقف تشغيل خط الكنس ، وقم بتبديل موضع MVP للإدخال 2 إلى الموضع 3 ، وأضف سلائف وضع العلامات الراديوية tosylate في القارورة 3. أغلق المفاعل ، وقم بتسخين مخاليط التفاعل عند 100 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
    5. تبخر مذيب التفاعل و acidolyse.
      1. قم بتبريد المفاعل وفتحه ، وقم بتشغيل خط الكنس ، وتبخر مذيب التفاعل عند 100 درجة مئوية.
      2. قم بتبريد المفاعل ، وأطفئ خط الكنس ، وقم بتبديل موضع MVP للإدخال 3 إلى الموضع 4 ، وأضف خليط حمض الهيدروكلوريك / الأسيتونيتريل (0.5 مل ، 1/1 ، v / v). سخن التفاعل عند 100 درجة مئوية لمدة 10 دقائق لإزالة الحماية من مجموعات حماية tert-butyl و tert-butyloxycarbonyl في سلائف وضع العلامات الإشعاعية.
    6. تحييد رد الفعل.
      1. قم بتبريد المفاعل إلى درجة حرارة الغرفة ، وقم بتبديل موضع MVP للإدخال 4 إلى الموضع 5 لإضافة هيدروكسيد الصوديوم 2 M لتحييد خليط التفاعل. قم بإيقاف تشغيل خط الأرجون MVP للإدخال.
    7. انقل خليط التفاعل إلى القارورة الوسيطة.
      1. انقر فوق الزر F في MVP الناتج لتبديل MVP الناتج من موضع التهوية 4 إلى الموضع 5 ، ثم انقر فوق الزر F في MVP الإدخال لتبديل MVP الإدخال من الموضع 5 إلى الموضع 6. قم بتشغيل خط الأرجون MVP للإخراج. ادفع خليط التفاعل عبر خرطوشة أكسيد الألومنيوم المحايد المكدس وخراطيش C8 إلى القارورة الوسيطة المثبتة قبل حلقة عينة HPLC.
    8. شطف المفاعل ونقل الحل.
      1. قم بتبديل موضع MVP الناتج 5 إلى الموضع 6 ، وادفع محلول الشطف في قارورة موضع MVP الناتج 6 من خلال قارورة التفاعل ، والخراطيش إلى القارورة الوسيطة ، على التوالي. لاحظ أن حجم الخليط المشترك حوالي 3.5 مل. أغلق وعاء التفاعل.
    9. قم بتحميل الخليط المشترك إلى حلقة HPLC وتنقية الخليط.
      1. قم بتبديل حلقة HPLC من موضع الحقن إلى موضع التحميل ، وقم بتشغيل خط الأرجون MVP للإدخال ، وقم بتحميل المخاليط إلى حلقة HPLC سعة 5 مل. عند اكتمال الحمل، قم بتبديل زر التحميل للحقن، وانقر فوق حقن HPLC لبدء كروماتوجرام HPLC بمعدل تدفق 3 مل/دقيقة. انقر فوق زر شاشة HPLC للوصول إلى كروماتوجرام HPLC في الوقت الفعلي.
    10. قم بتحويل الكسر المستهدف إلى العمود C18.
      1. انقر فوق الزر MVP لتحويل جزء HPLC المستهدف إلى عمود C18 القصير في حوالي 12 دقيقة.
    11. اغسل عمود HPLC الدائري وقم بتنقية الكسر في عمود C18.
      1. بعد جمع النشاط الإشعاعي المستهدف في العمود C18 (وتدفق المرحلة المتنقلة HPLC إلى زجاجة النفايات MVP موضع MVP 1 للصياغة) ، قم بتبديل صمام التحويل ثنائي المنافذ المكون من أربعة منافذ إلى موضع جمع النفايات. اغسل العمود الدائري عند 4 مل / دقيقة لمدة 6 دقائق لإزالة الشوائب البسيطة D-[18F] FETrp وغيرها من الشوائب فوق البنفسجية (UV).
      2. انقر فوق الزر MVP لتحويل المرحلة المتنقلة HPLC مرة أخرى إلى موضع MVP 1 للتركيبة بمعدل تدفق 3 مل / دقيقة. لاحظ أن المرحلة المتنقلة تمر عبر العمود الدائري والعمود C18 لتنقية L-[18F] FETrp المحتفظ به في العمود C18.
    12. جمع الكسر المستهدف.
      1. جمع العطر في حوالي 32-34 دقيقة في صياغة MVP الموقف 2 قارورة.
        ملاحظة: عادة ، يتم جمع جزء HPLC لمدة 2 دقيقة ، والحجم الإجمالي بالإضافة إلى محلول كلوريد الصوديوم المعبأ مسبقا هو 8-15 مل.
    13. قم بتوصيل الجرعة إلى قارورة المنتج النهائي المعقمة.
      1. ادفع المحلول في التركيبة MVP موضع 2 قارورة من خلال خط التسليم والمرشح المعقم إلى قارورة الجرعة النهائية (عبر إبرة مرشح التهوية المعقمة المثبتة مسبقا).
        ملاحظة: خطوات البروتوكول 2.2.9-2.2.13 هي خطوات تستخدم لتنقية HPLC ل L-[18F] FETrp.
    14. فحص النشاط الإشعاعي وحجم الجرعة.
      1. قم بإزالة المرشح المعقم وفحص نشاط الجرعة النهائية وحجمها.
      2. اغسل النظام بالماء فائق النقاء متبوعا بالإيثانول بمعدل 4 مل / دقيقة لمدة 15 دقيقة على الأقل لكل منهما. قم بإيقاف تشغيل مضخة HPLC وصندوق PLC ؛ إغلاق البرنامج ؛ إغلاق خط الهواء المضغوط وخط الأرجون وخط ثاني أكسيد الكربون ؛ وإيقاف تشغيل الطاقة الرئيسية للوحدة.
    15. سحب جرعة مراقبة الجودة وتشغيل عينات مراقبة الجودة.
      1. اسحب ما يقرب من 0.1 مل من الجرعة النهائية إلى 0.2 مل من قارورة مراقبة الجودة. قم بتشغيل العينة الساخنة كبرنامج "تسلسل جزئي" بعد اختبار ملاءمة النظام الموضح في الخطوة 1.2.6 .
    16. تحليل بيانات مراقبة الجودة والإفراج عن الجرعة.
      1. حساب النقاء الكيميائي والكيميائي الإشعاعي ، والقيمة الزائدة للأنانتيومريك ، والنشاط المولي ؛ تحديد قيمة الرقم الهيدروجيني.
      2. حرر الجرعة إذا اجتازت جميع نتائج الاختبار النطاق المقبول.

3. نظام ما بعد التشغيل نظيف

  1. قم بمسح وحدة وضع العلامات الراديوية باستخدام مقياس مسح Geiger-Mueller (GM) للتأكد من أن النشاط الإشعاعي قد تحلل بشكل كاف (24 ساعة على الأقل) قبل تنظيف النظام.
  2. قم بتشغيل طاقة وحدة وضع العلامات الراديوية وطاقة صندوق PLC ؛ تنشيط برنامج نظام تخليق الكيمياء الإشعاعية ؛ وتهيئة MVP الإدخال وMVP الإخراج وصياغة MVP. قم بتبديل محدد العمود إلى موضع الالتفافية.
  3. افصل خراطيش ضوء QMA والألومينا وC8.
  4. اغسل جميع القوارير والخطوط بالماء فائق النقاء أولا ، يليه الإيثانول. جفف القوارير والخطوط باستخدام الأرجون عالي النقاء.
  5. ختم كل خط تنفيس باستخدام إبرة معقمة مع غطاء. استبدل قوارير الكاشف ووعاء التفاعل بقوارير محترقة في الفرن ووعاء تفاعل ، على التوالي.
  6. قم بإيقاف تشغيل مضخة HPLC وصندوق PLC ؛ إغلاق البرنامج ؛ إغلاق خط الهواء المضغوط وخط الأرجون وخط ثاني أكسيد الكربون ؛ وإيقاف تشغيل الطاقة الرئيسية للوحدة.

النتائج

يظهر مخطط التفاعل في الشكل 1. يتضمن وضع العلامات الإشعاعية الخطوتين التاليتين: 1) تفاعل سلائف وضع العلامات الإشعاعية مع [18F] يوفر الفلورايد الوسيط المسمى 18F ، و 2) إزالة الحماية من مجموعات حماية tert-butyloxycarbonyl و tert-butyl-protection في الوسيط يوفر المنتج النهائي L-[18F] FETrp....

Discussion

التربتوفان هو حمض أميني أساسي للبشر. يلعب دورا مهما في تنظيم المزاج والوظيفة الإدراكية والسلوك. تمت دراسة مشتقات التربتوفان المصنفة إشعاعيا ، وخاصة الكربون 11 المسمى [11C] AMT ، على نطاق واسع بسبب دورها الفريد في رسم خرائط تخليق السيروتونين38،39 ، والكشف عن الأورام وتصنيفها

Disclosures

ويعلن صاحبا البلاغ أنه لا توجد مصالح مالية متنافسة.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل مركز التشخيص والبحث PET / MRI ، ومن قبل أقسام البحوث الطبية الحيوية والأشعة في مستشفى Nemours / Alfred I. DuPont للأطفال.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
[18F]Fluoride in [18O]H2OPETNET Solutions Inc.N/A
4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosaneACROS291950010Kryptofix 222 or K222, 98%
Acetic acidACROS22214250099.8%
AcetonitrileSigma-Aldrich271004anhydrous, 99.8%
Agilent 1260 HPLC systemAgilent TechnologiesAgilent 1260Agilent 1260 series
Analytcial chiral HPLC columnSigma-Aldrich12024ASTAstec CHIROBIOTIC T, 25 cm × 4.6 mm
Carbon dioxide, 60 LBSAirgasREFR744R200S99.99%
D-FETrp standard referenceAffinity Research Chemicals IncN/ACustom synthesis
Empty sterile vialJubilant HollisterStier751520 mm closure, 10 mL
EthanolDecon Labs2716200 proof, USP grade. ≥99.9%
Fisherbrand 13 mm Syringe Filter, 0.22 µm, PVDF, sterileFisher Scientific09-720-3
Hydrochloric acidSigma-Aldrich30721≥37%
IsopropanolDecon Labs831670%, sterile
L-[18F]FETrp radiolabeling precursorAffinity Research Chemicals IncN/ACustom synthesis
L-FETrp standard referenceAffinity Research Chemicals IncN/ACustom synthesis
Light C8 cartridgeWatersWAT036770Sep-Pak  C8 plus light cartridge
Needle, 20 G x 1Becton-Dickinson & Co.305175
Needle, 20 G x 1 ½Becton-Dickinson & Co.305176
Needle, 21 G x 2Becton-Dickinson & Co.305129
Neutral aluminum oxideWatersWAT023561Sep-Pak alumina N plus light
Nylon membrane (0.20 µm )MilliPoreGNWP0470047 mm
Pall Acrodisc 25 mm syringe sterile filterPall Corporation4907
PETCHEM radiochemistry synthesis systemPETCHEM Solutions Inc. Pinckney, MIN/ARadiosynthesizer
pH strips 2.0 - 9.0EMD Millipore1.09584.0001
Potassium carbonateSigma-Aldrich36787799.995%
Quaternary methylammonium light cartridgeWaters186004051Sep-Pak QMA light
Semi-preparative C18 HPLC columnPhenomenex00D-4253-N0100 × 10 mm
Semi-preparative chiral HPLC columnSigma-Aldrich12034ASTAstec CHIROBIOTIC T, 25 cm × 10 mm
Sodium chloride injection 23.4%APP Pharmaceutical, LLC18730USP grade
Sodium chloridei injection 0.9%HospiraNDC 0409-4888-10USP grade
Sodium hydroxideHoneywell30657699.99%
Spinal needle, 20 G x 3 ½Becton-Dickinson & Co.405182
Sterile alcohol prep padsBioMed Resource Inc.PC661
Sterile empty vials, 2 mLHollister Stier7505ZA13 mm closure
Sterile empty vials, 30 mLJubilant HollisterStier7520ZA20 mm closure
Syringe PP/PE, 3 mL, Luer LockAir-Tite4020-X00V0
Syringe PP/PE, 5 mL, Luer LockBecton-Dickinson & Co.309646
Syringe,  PP/PE, 10 mL, NORM-JECTAir-Tite4100-000V0
Syringe, 1 mL, Luer SlipBecton-Dickinson & Co.309659
Syringe, 3 mL, Luer-LockBecton-Dickinson & Co.309657
Ultra high purity argonAirgasAR UHP30099.999%
Ultrapure waterMilliporeSigmaZRQSVP300Direct-Q 3 tap to pure and ultrapure water purification system

References

  1. Cetina Biefer, H. R., Vasudevan, A., Elkhal, A. Aspects of tryptophan and nicotinamide adenine dinucleotide in immunity: A new twist in an old tale. International Journal of Tryptophan Research. 10, 1178646917713491 (2017).
  2. Savitz, J. The kynurenine pathway: a finger in every pie. Molecular Psychiatry. 25 (1), 131-147 (2020).
  3. Zlatopolskiy, B. D., et al. 11C- and 18F-labelled tryptophans as PET-tracers for imaging of altered tryptophan metabolism in age-associated disorders. Russian Chemical Reviews. 89 (9), 879-896 (2020).
  4. Eriksson, B., et al. Positron emission tomography (PET) in neuroendocrine gastrointestinal tumors. Acta Oncologica. 32 (2), 189-196 (1993).
  5. Kälkner, K. M., et al. Positron emission tomography (PET) with 11C-5-Hydroxytryptophan (5-HTP) in patients with metastatic hormone-refractory prostatic adenocarcinoma. Nuclear Medicine and Biology. 24 (4), 319-325 (1997).
  6. Eriksson, O., et al. Quantitative imaging of serotonergic biosynthesis and degradation in the endocrine pancreas. Journal of Nuclear Medicine. 55 (3), 460-465 (2014).
  7. Carlbom, L., et al. 11C]5-hydroxy-tryptophan pet for assessment of islet mass during progression of type 2 diabetes. Diabetes. 66 (5), 1286-1292 (2017).
  8. Eriksson, O., et al. Positron emission tomography to assess the outcome of intraportal islet transplantation. Diabetes. 65 (9), 2482-2489 (2016).
  9. Jager, P. L., et al. Radiolabeled amino acids: Basic aspects and clinical applications in oncology. Journal of Nuclear Medicine. 42 (3), 432-445 (2001).
  10. Langen, K. J., Galldiks, N. Update on amino acid pet of brain tumours. Current Opinion in Neurology. 31 (4), 354-361 (2018).
  11. Chugani, D. C., Muzik, O., Chakraborty, P., Mangner, T., Chugani, H. T. Human brain serotonin synthesis capacity measured in vivo with α-[C-11]methyl-L-tryptophan. Synapse. 28 (1), 33-43 (1998).
  12. Chugani, D. C., Muzik, O. Alpha[C-11]methyl-L-tryptophan PET maps brain serotonin synthesis and Kynurenine pathway metabolism. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 20, 2-9 (2000).
  13. Diksic, M., Nagahiro, S., Sourkes, T. L., Yamamoto, Y. L. A new method to measure brain serotonin synthesis in vivo. I. Theory and basic data for a biological model. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 10 (1), 1-12 (1990).
  14. Diksic, M., Young, S. N. Study of the brain serotonergic system with labeled α-methyl-L-tryptophan. Journal of Neurochemistry. 78 (6), 1185-1200 (2001).
  15. Alkonyi, B., et al. Accurate differentiation of recurrent gliomas from radiation injury by kinetic analysis of α-11C-methyl-L-tryptophan PET. Journal of Nuclear Medicine. 53, 1058-1064 (2012).
  16. Bagla, S., et al. A distinct microRNA expression profile is associated with α[11C]-methyl-L-tryptophan (AMT) PET uptake in epileptogenic cortical tubers resected from patients with tuberous sclerosis complex. Neurobiology of Disease. 109, 76-87 (2018).
  17. Alkonyi, B., et al. Increased tryptophan transport in epileptogenic dysembryoplastic neuroepithelial tumors. Journal of Neuro-oncology. 107 (2), 365-372 (2012).
  18. Chugani, D. C. α-methyl-L-tryptophan: Mechanisms for tracer localization of epileptogenic brain regions. Biomarkers in Medicine. 5 (5), 567-575 (2011).
  19. Chugani, D. C., et al. Imaging epileptogenic tubers in children with tuberous sclerosis complex using α-[11C]methyl-L-tryptophan positron emission tomography. Annals of Neurology. 44 (6), 858-866 (1998).
  20. Chugani, H. T., et al. α-[11C]-Methyl-L-tryptophan-PET in 191 patients with tuberous sclerosis complex. Neurology. 81 (7), 674-680 (2013).
  21. Jeong, J. W., et al. Multi-modal imaging of tumor cellularity and tryptophan metabolism in human Gliomas. Cancer Imaging. 15 (1), 10 (2015).
  22. Juhász, C., et al. Quantitative PET imaging of tryptophan accumulation in gliomas and remote cortex. Clinical Nuclear Medicine. 37 (9), 838-842 (2012).
  23. Juhász, C., et al. Tryptophan metabolism in breast cancers: Molecular imaging and immunohistochemistry studies. Nuclear Medicine and Biology. 39 (7), 926-932 (2012).
  24. Juhász, C., et al. Successful surgical treatment of an inflammatory lesion associated with new-onset refractory status epilepticus. Neurosurgical Focus. 34, 5 (2013).
  25. Kumar, A., Asano, E., Chugani, H. T. α-[11C]-methyl-L-tryptophan PET for tracer localization of epileptogenic brain regions: Clinical studies. Biomarkers in Medicine. 5 (5), 577-584 (2011).
  26. Tiwari, V. N., Kumar, A., Chakraborty, P. K., Chugani, H. T. Can diffusion tensor imaging (DTI) identify epileptogenic tubers in tuberous sclerosis complex? Correlation with α-[11C]methyl-L-tryptophan ([11C]AMT) positron emission tomography (PET). Journal of Child Neurology. 27 (5), 598-603 (2012).
  27. Juhász, C., et al. In vivo uptake and metabolism of α-[11C]methyl-L-tryptophan in human brain tumors. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 26 (3), 345-357 (2006).
  28. John, F., Muzik, O., Mittal, S., Juhász, C. Fluorine-18-labeled PET radiotracers for imaging tryptophan uptake and metabolism: a systematic review. Molecular Imaging and Biology. 22 (4), 805-819 (2020).
  29. Zlatopolskiy, B. D., et al. Discovery of 7-[ 18 F]fluorotryptophan as a novel positron emission tomography (PET) probe for the visualization of tryptophan metabolism in vivo. Journal of Medicinal Chemistry. 61 (1), 189-206 (2018).
  30. Giglio, B. C., et al. Synthesis of 5-[18F]fluoro-α-methyl tryptophan: New trp based PET agents. Theranostics. 7 (6), 1524-1530 (2017).
  31. Yue, X., et al. Comparison of 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan and FDG for the detection of medulloblastoma in a transgenic mouse model. Journal of Nuclear Medicine. 60, 545 (2019).
  32. Xin, Y., et al. PET imaging of medulloblastoma with an 18F-labeled tryptophan analogue in a transgenic mouse model. Scientific Reports. 10 (1), 3800 (2020).
  33. Michelhaugh, S. K., et al. Assessment of tryptophan uptake and kinetics using 1-(2-18F-fluoroethyl)-L-tryptophan and α-11C-methyl-L-tryptophan PET imaging in mice implanted with patient-derived brain tumor xenografts. Journal of Nuclear Medicine. 58 (2), 208-213 (2017).
  34. Xin, Y., Cai, H. Improved radiosynthesis and biological evaluations of L- and D-1-[18F]fluoroethyl-tryptophan for PET imaging of IDO-mediated kynurenine pathway of tryptophan metabolism. Molecular Imaging and Biology. 19 (4), 589-598 (2017).
  35. Henrottin, J., et al. Fully automated radiosynthesis of N1-[18F]fluoroethyl-tryptophan and study of its biological activity as a new potential substrate for indoleamine 2,3-dioxygenase PET imaging. Nuclear Medicine and Biology. 43 (6), 379-389 (2016).
  36. Xin, Y., et al. Evaluation of l-1-[18F]Fluoroethyl-tryptophan for PET imaging of cancer. Molecular Imaging and Biology. 21 (6), 1138-1146 (2019).
  37. Yue, X., et al. Automated production of 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-tryptophan for imaging of tryptophan metabolism. Applied Radiation and Isotopes. 156, 109022 (2020).
  38. Booij, L., et al. Brain serotonin synthesis in adult males characterized by physical aggression during childhood: A 21-year longitudinal study. PLoS ONE. 5 (6), 11255 (2010).
  39. Chandana, S. R., et al. Significance of abnormalities in developmental trajectory and asymmetry of cortical serotonin synthesis in autism. International Journal of Developmental Neuroscience. 23 (2-3), 171-182 (2005).
  40. Juhász, C., Dwivedi, S., Kamson, D. O., Michelhaugh, S. K., Mittal, S. Comparison of amino acid positron emission tomographic radiotracers for molecular imaging of primary and metastatic brain tumors. Molecular Imaging. 13 (6), 1-10 (2014).
  41. Rubí, S., et al. Positron emission tomography with α-[11C]methyl-L-tryptophan in tuberous sclerosis complex-related epilepsy. Epilepsia. 54 (12), 2143-2150 (2013).
  42. Chugani, H. T., et al. Clinical and histopathologic correlates of 11C-alpha-methyl-L-tryptophan (AMT) PET abnormalities in children with intractable epilepsy. Epilepsia. 52 (9), 1692-1698 (2011).
  43. Muzik, O., Burghardt, P., Yi, Z., Kumar, A., Seyoum, B. Successful metformin treatment of insulin resistance is associated with down-regulation of the kynurenine pathway. Biochemical and Biophysical Research Communications. 488 (1), 29-32 (2017).
  44. Sun, T., et al. Radiosynthesis of 1-[18F]fluoroethyl-L-tryptophan as a novel potential amino acid PET tracer. Applied Radiation and Isotopes. 70 (4), 676-680 (2012).
  45. Mock, B. H., Winkle, W., Vavrek, M. T. A color spot test for the detection of Kryptofix 2.2.2 in [18F]FDG preparations. Nuclear Medicine and Biology. 24 (2), 193-195 (1997).
  46. Kim, D. W., Jeong, H. J., Lim, S. T., Sohn, M. H. Recent trends in the nucleophilic [18F]-radiolabeling method with no-carrier-added [18F]fluoride. Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 44 (1), 25-32 (2010).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

175 1 2 18F L tryptophan

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved