JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يستخدم البروتوكول الحالي حزمة محاكاة جزيئية حيوية ويصف نهج الديناميات الجزيئية (MD) لنمذجة الكاسباز من النوع البري وأشكاله الطافرة. تسمح طريقة MD بتقييم التطور الديناميكي لهيكل الكاسباز والتأثير المحتمل للطفرات أو تعديلات ما بعد الترجمة.

Abstract

موت الخلايا المبرمج هو نوع من موت الخلايا المبرمج الذي يقضي على الخلايا التالفة ويتحكم في نمو الكائنات الحية متعددة الخلايا وتوازنها في الأنسجة. تلعب Caspases ، وهي عائلة من بروتياز السيستين ، دورا رئيسيا في بدء موت الخلايا المبرمج وتنفيذه. يتم ضبط نضوج الكاسباس ونشاطها من خلال تعديلات ما بعد الترجمة بطريقة ديناميكية للغاية. لتقييم تأثير التغييرات اللاحقة للترجمة ، يتم تحور المواقع المحتملة بشكل روتيني مع استمرار المخلفات لأي تعديلات. على سبيل المثال ، يتم استبدال بقايا سيرين بألانين أو حمض الأسبارتيك. ومع ذلك ، يمكن لمثل هذه البدائل أن تغير تشكيل موقع كاسباز النشط ، مما يؤدي إلى اضطرابات في النشاط التحفيزي والوظائف الخلوية. علاوة على ذلك ، يمكن أن تؤدي طفرات بقايا الأحماض الأمينية الأخرى الموجودة في المواضع الحرجة إلى كسر بنية ووظائف الكاسباز وتؤدي إلى اضطراب موت الخلايا المبرمج. لتجنب صعوبات استخدام المخلفات الطافرة ، يمكن تطبيق مناهج النمذجة الجزيئية بسهولة لتقدير التأثير المحتمل لبدائل الأحماض الأمينية على بنية الكاسباز. يسمح البروتوكول الحالي بنمذجة كل من الكاسباز من النوع البري وأشكاله الطافرة باستخدام حزمة المحاكاة الجزيئية الحيوية (العنبر) ومرافق الكمبيوتر العملاق لاختبار تأثير الطفرات على بنية البروتين ووظيفته.

Introduction

موت الخلايا المبرمج هو واحد من أكثر العمليات الخلوية التي تمت دراستها على نطاق واسع والتي تنظم التشكل وتوازن الأنسجة للكائنات متعددة الخلايا. يمكن أن يبدأ موت الخلايا المبرمج من خلال مجموعة واسعة من المحفزات الخارجية أو الداخلية ، مثل تنشيط مستقبلات الموت ، واضطراب في إشارات دورة الخلية ، وتلف الحمض النووي ، وإجهاد الشبكة الإندوبلازمية (ER) ، والالتهابات البكتيرية والفيروسية المختلفة1. يتم تصنيف الكاسباس - لاعبو موت الخلايا المبرمج الرئيسيين - تقليديا إلى مجموعتين: المبادرون (caspase-2 و caspase-8 و caspase-9 و caspase-10) والمستجيبات (caspase-3 و caspase-6 و caspase-7) ، اعتمادا على بنية مجالها والمكان في سلسلة caspase 2,3. عند إشارات موت الخلية ، تتفاعل كاسباس البادئ مع جزيئات المحول التي تسهل التثبيط الناجم عن القرب والمعالجة الذاتية لتشكيل إنزيم نشط. يتم تنشيط كاسباس المستجيب من خلال الانقسام بواسطة كاسباس البادئ وتنفيذ خطوات التنفيذ النهائية عن طريق شق ركائز خلوية متعددة4.

يتم تنظيم نضوج ووظيفة البادئ والمستجيب caspases من خلال عدد كبير من الآليات المختلفة داخل الخلايا ، من بينها التعديل بعد الترجمة يلعب دورا لا غنى عنه في تعديل موت الخلية5. تؤدي إضافة مجموعات معدلة (الفسفرة أو النيتروسيل أو المثيلة أو الأستيلة) أو البروتينات (الوجود في كل مكان أو SUMOylation) إلى تغيير النشاط الأنزيمي للكاسباز أو تكوين البروتين واستقراره الذي ينظم موت الخلايا المبرمج. يتم تطبيق الطفرات الموجهة للموقع على نطاق واسع للتحقيق في مواقع التعديل المحتملة بعد الترجمة وتمييز دورها. عادة ما يتم استبدال موقع التعديل المفترض بحمض أميني آخر ، والذي لا يمكن تعديله مرة أخرى. وبالتالي ، يتم تحور سيرين وثريونين المفسفرين إلى ألانين ، ويتم استبدال مواقع اللايسين في كل مكان بالأرجينين. تتضمن الإستراتيجية الأخرى استبدال حمض أميني يحاكي بشكل خاص التعديل اللاحق للترجمة (على سبيل المثال ، تم استخدام الغلوتامات والأسبارتات لتقليد سيرين أو ثريونين المفسفر)6. ومع ذلك ، فإن بعض هذه البدائل الموجودة في المنطقة المجاورة العالية لموقع نشط أو في مواقع حرجة يمكن أن تغير بنية الكاسباز ، وتزعج النشاط التحفيزي ، وتقمع موت الخلايا المبرمج7. يمكن ملاحظة تأثيرات مماثلة في حالات الطفرات الخاطئة المرتبطة بالورم في جينات الكاسباز. على سبيل المثال ، أدت الطفرة المرتبطة بالورم في caspase-6 - R259H - إلى تغييرات توافقية للحلقات في جيب ربط الركيزة ، مما قلل من الدوران الحفاز الفعال للركائز8. يمكن أن يؤدي استبدال الأحماض الأمينية G325A في caspase-8 المحدد في سرطان الخلايا الحرشفية في الرأس والرقبة إلى إعاقة نشاط caspase-8 ، مما أدى إلى تعديل إشارات العامل النووي kB (NF-kB) وتعزيز تكوين الورم9.

لتقييم التأثير المحتمل لبدائل الأحماض الأمينية على بنية الكاسباز ووظيفته ، يمكن تطبيق النمذجة الجزيئية. تم وصف نهج الديناميات الجزيئية (MD) في هذا العمل لنمذجة الكاسباز من النوع البري وأشكاله الطافرة باستخدام حزمة المحاكاة الجزيئية الحيوية (العنبر). تعطي طريقة MD نظرة على التطور الديناميكي لبنية البروتين بعد إدخال الطفرات. تم تطوير حزمة Amber في الأصل بواسطة مجموعة Peter Kollman ، وأصبحت واحدة من أكثر أدوات البرامج شيوعا للمحاكاة الجزيئية الحيوية10،11،12،13. ينقسم هذا البرنامج إلى جزأين: (1) AmberTools ، وهي مجموعة من البرامج المستخدمة بشكل روتيني لإعداد النظام (تعيين نوع الذرة ، وإضافة الهيدروجين وجزيئات الماء الصريح ، وما إلى ذلك) وتحليل المسار ؛ و (2) العنبر ، الذي يتمحور حول برنامج محاكاة PMEMD. AmberTools عبارة عن حزمة مجانية (وشرط أساسي لتثبيت Amber نفسه) ، بينما يتم توزيع Amber بترخيص منفصل وهيكل رسوم. يمكن أن تؤدي المحاكاة المتوازية على كمبيوتر عملاق و / أو استخدام وحدات معالجة الرسومات (GPUs) إلى تحسين أداء البحث العلمي لديناميكيات بنية البروتين14 بشكل كبير. أحدث إصدارات البرامج المتاحة هي AmberTools21 و Amber20 ، ولكن يمكن أيضا استخدام البروتوكولات الموضحة مع الإصدارات السابقة.

Protocol

1. إعداد النظام

ملاحظة: تم بناء النماذج الجزيئية لأشكال البروتين الأصلية والمتحولة بناء على بنية بلورية مناسبة تم الحصول عليها من بنك بيانات البروتين15,16.

  1. لاسترداد بنية PDB المحددة ، استخدم القائمة المنسدلة تنزيل الملفات وانقر فوق تنسيق PDB. قم بإزالة الملاحظات وبيانات الاتصال، وأدخل بطاقة TER بين سلاسل البروتين المنفصلة في ملف PDB. اختياريا ، قم بتعيين حالة البروتون لبقايا الهستيدين عن طريق استبدال اسم البقايا HIS ب HIE أو HID أو HIP (الملف التكميلي 1).
    ملاحظة: من المعقول عدم إزالة جزيئات الماء التي تم حلها بلوريا (إذا كانت موجودة في ملف PDB).
  2. لإعداد نموذج البداية ، قم بتشغيل برنامج tleap (حزمة AmberTools) ثم أدخل الأوامر التي تتعامل مع كائنات tleap .
    1. قم بتشغيل البرنامج: tleap. قم بتحميل حقل قوة ff14SB لوصف البروتين بالميكانيكا الجزيئية: > مصدر leaprc.protein.ff14SB.
    2. حقول قوة الحمل لجزيئات الماء والأيونات الذرية (Na + ، Cl-): مصدر > leaprc.water.tip3p.
    3. قم بتحميل ملف PDB وإنشاء إحداثيات للهيدروجين ، وإنشاء كائن باسم mol: > mol = loadpdb protein.pdb.
    4. تحقق من عدم الاتساق الداخلي الذي قد يسبب مشاكل: > تحقق من مول.
      ملاحظة: يجب تحديد جسور ثاني كبريتيد، إن وجدت، يدويا. استبدل أسماء cysteines CYS المرتبطة تساهميا ب CYX واكتب الأمر التالي في tleap لإنشاء رابطة بين ذرات SG: الرابطة mol.X.SG mol.Y.SG (X و Y هي أرقام بقايا السيستين).
    5. قم بإنشاء صندوق مذيب حول البروتين (ماء TIP3P ، مسافة 12 Å): > solvatebox mol TIP3PBOX 12.0.
    6. تحقق من إجمالي الشحنة: > شحن مول ، وأضف عدادات (Na + أو Cl-) لتحييد النظام:
      > إضافات مول Na + 0.
    7. قم بإنشاء ملف prmtop الطوبولوجيا وملف الإحداثيات inpcrd (مدخلات لتشغيل محاكاة): > saveamberparm mol protein.prmtop protein.inpcrd. قم بإنهاء برنامج tleap: > إنهاء.
      ملاحظة: يمكن تحويل ملفات الإحداثيات بتنسيق Amber بسهولة إلى تنسيق PDB باستخدام أداة ambpdb (راجع دليل المستخدمين، راجع جدول المواد).

2. تقليل الطاقة

ملاحظة: يعد تقليل الطاقة ضروريا لإزالة أي ملامسات وتداخلات سيئة بين الذرات في نظام البدء تؤدي إلى عدم الاستقرار عند تشغيل MD.

  1. نفذ المرحلة الأولى من تقليل الطاقة (2500 خطوة من خوارزمية الهبوط الأكثر حدة + 2500 خطوة من خوارزمية التدرج المرافق) لتحسين مواضع ذرات الهيدروجين المضافة وجزيئات الماء مع الحفاظ على إحداثيات البروتين ثابتة بواسطة قيود موضعية على الذرات الثقيلة.
    1. قم بتشغيل برنامج pmemd كما يلي:
      pmemd -O -i min1.in -p protein.prmtop -c protein.inpcrd -o protein_min1.out
      -r protein_min1.rst -ref protein.inpcrd.
    2. اتبع الوسيطات المطلوبة: -i بيانات التحكم في الملف ؛ -p FILE الطوبولوجيا الجزيئية ، معلمات مجال القوة ، أسماء الذرات ؛ -c الإحداثيات الأولية للملف ؛ -o إخراج سجل FILE قابل للقراءة من قبل المستخدم ؛ -r ملف الإحداثيات النهائية ؛ -ref إحداثيات مرجع FILE لقيود الموقف.
    3. حدد الخيارات في ملف الإدخال min1.in:
      &cntrl
      imin = 1 ، maxcyc = 5000 ، ncyc = 2500 ،
      قص = 10.0 ، NTB = 1 ،
      NTC = 1 ، NTF = 1 ،
      ntpr = 10 ،
      NTR = 1 ،
      قناع ضبط النفس = ': 1-517& !@H = '،
      restraint_wt = 2.0
      /
      ملاحظة: خيارات الإدخال: imin=1 إجراء التقليل; maxcyc = 5000 الحد الأقصى لعدد دورات التقليل ؛ يتم تحويل طريقة التقليل ncyc = 2500 من الهبوط الحاد إلى التدرج المترافق بعد دورات ncyc ؛ قطع = 10.0 قطع غير مستعبدين (Å) ؛ NTB = 1 يتم فرض حدود دورية ، حجم ثابت ؛ NTC = 1 لا يتم تطبيق أي قيود على أطوال الروابط (لتحسين تقارب الطاقة) ؛ ntf = 1 يتم حساب جميع التفاعلات ؛ NTPR = تتم طباعة معلومات الطاقة 10 إلى ملف الخروج كل خطوات NTPR ؛ NTR = 1 علامة لتقييد ذرات محددة باستخدام جهد توافقي ؛ قناع ضبط النفس = ' : 1-517 & !@H=' يحدد الذرات المقيدة ؛ restraint_wt = 2.0 الوزن (كيلو كالوري / مول ∙Å2) للقيود الموضعية.
  2. نفذ المرحلة الثانية من تقليل الطاقة (5000 خطوة هبوط شديدة الانحدار + 5000 خطوة تدرج مترافقة) دون قيود لتحسين النظام بأكمله.
    1. استخدم min2.in و protein_min1.rst كمدخلات: pmemd -O -i min2.in -p protein.prmtop
      -c protein_min1.rst -o protein_min2.out -r protein_min2.rst.
    2. حدد الخيارات في ملف الإدخال min2.in:
      &cntrl
      imin = 1 ، maxcyc = 10000 ، ncyc = 5000 ،
      قص = 10.0 ، NTB = 1 ،
      NTC = 1 ، NTF = 1 ،
      NTPR = 10
      /

3. التدفئة

ملاحظة: تهدف هذه المرحلة إلى تسخين النظام من 0 K إلى 300 K. يتم تعيين السرعات الأولية للذرات لأن نموذج البدء المستند إلى ملف PDB لا يحتوي على معلومات السرعة.

  1. نفذ عملية التسخين بقيود موضعية على ذرات البروتين (50 حصانا ، حجم ثابت).
    1. استخدم heat.in و protein_min2.rst كمدخلات: pmemd -O -i heat.in -p البروتين.prmtop
      -c protein_min2.rst -o protein_heat.out
      -r protein_heat.rst -x protein_heat.mdcrd -المرجع protein_min2.rst
    2. اتبع الوسيطات المطلوبة: -x مجموعات إحداثيات FILE المحفوظة على مسار MD.
    3. حدد الخيارات في ملف الإدخال heat.in:
      &cntrl
      imin = 0 ، irest = 0 ، ntx = 1 ،
      نستليم = 25000 ، DT = 0.002 ،
      NTC = 2 ، NTF = 2 ،
      قص = 10.0 ، NTB = 1 ،
      NTPR = 500 ، NTWX = 500 ،
      ntt = 3 ، gamma_ln = 2.0 ،
      tempi = 0.0 ، temp0 = 300.0 ،
      NTR = 1 ، قناع ضبط النفس = ': 1-517' ،
      restraint_wt = 1.0 ،
      نمروبت = 1
      /
      &wt TYPE = 'TEMP0' ،
      istep1 = 0 ، istep2 = 25000 ،
      القيمة 1 = 0.1 ، القيمة 2 = 300.0 /
      &بالوزن النوع = "إنهاء" /
      ملاحظة: خيارات الإدخال: imin=0 تشغيل MD; irest = 0 تشغيل محاكاة جديدة ؛ ntx = 1 لا تتم قراءة السرعات الأولية من ملف RST ؛ nstlim = 25000 عدد خطوات MD ؛ DT = 0.002 خطوة زمنية (ps) ؛ ntc = 2 الروابط التي تتضمن الهيدروجين مقيدة باستخدام خوارزمية SHAKE ؛ ntf = 2 لا يتم حساب القوى للروابط المقيدة ؛ تتم كتابة إحداثيات NTWX = 500 إلى ملف MDCRD كل خطوات NTWX ؛ NTT = 3 تنظيم درجة حرارة لانجفين. gamma_ln = تردد تصادم 2.0 لديناميات لانجفين (ps−1) ؛ tempi = 0.0 درجة الحرارة الأولية ؛ temp0 = 300.0 درجة الحرارة المرجعية ؛ تتم قراءة معلمات nmropt = 1 المحددة في قائمة أسماء &wt ؛ اكتب = 'TEMP0' تغيير درجة الحرارة المستهدفة.

4. التوازن

ملاحظة: هذه المرحلة ضرورية لضبط كثافة الماء والحصول على حالة توازن البروتين.

  1. قم بإجراء التوازن عند 300 كلفن دون أي قيود (500 حصان ، ضغط ثابت).
    1. استخدم equil.in و protein_heat.rst كمدخلات: pmemd -O -i equil.in -p البروتين.prmtop
      -c protein_heat.rst -o protein_equil.out -r protein_equil.rst -x protein_equil.mdcrd.
    2. حدد الخيارات في ملف الإدخال equil.in:
      &cntrl
      imin = 0 ، irest = 1 ، ntx = 5 ،
      نستليم = 250000 ،
      dt = 0.002 ،
      NTC = 2 ، NTF = 2 ،
      قص = 10.0 ، NTB = 2 ، NTP = 1 ، رمادي داكن = 2.0 ،
      ntpr = 1000 ، ntwx = 1000 ، ntwr = 50000 ،
      ntt = 3 ، gamma_ln = 2.0 ،
      درجة الحرارة 0 = 300.0
      /
      ملاحظة: خيارات الإدخال: irest=1 إعادة تشغيل المحاكاة; NTX = تتم قراءة الإحداثيات والسرعات 5 من ملف RST تم إنشاؤه مسبقا ؛ NTB = 2 يتم فرض الحدود الدورية ، ضغط ثابت ؛ NTP = 1 قياس الضغط الخواص ؛ Taup = 2.0 وقت استرخاء الضغط (PS) ؛ NTWR = 50000 كل خطوات NTWR ، تتم كتابة ملف RST ، مما يضمن التعافي من التعطل.

5. ديناميات الإنتاج

  1. بعد تحقيق التوازن بنجاح ، قم بإجراء محاكاة MD للإنتاج (10 نانوثانية أو أكثر) عند ضغط ثابت ، وقم بإنشاء ملف المسار للتحليل اللاحق لبنية البروتين.
    1. استخدم prod.in و protein_equil.rst كمدخلات: pmemd -O -i prod.in -p protein.prmtop
      -c protein_equil.rst -o protein_prod.out -r protein_prod.rst -x protein_prod.mdcrd.
    2. حدد الخيارات في ملف الإدخال prod.in:
      &cntrl
      imin = 0 ، irest = 1 ، ntx = 5 ،
      نستليم = 5000000 ،
      dt = 0.002 ،
      NTC = 2 ، NTF = 2 ،
      قص = 10.0 ، NTB = 2 ، NTP = 1 ، رمادي داكن = 2.0 ،
      ntpr = 1000 ، ntwx = 1000 ، ntwr = 50000 ،
      ntt = 3 ، gamma_ln = 2.0 ،
      temp0 = 300.0 ، ig = -1
      /
      ملاحظة: النسخة الموازية من pmemd (pmemd. MPI) أو الإصدار المسرع لوحدة معالجة الرسومات (pmemd.cuda) يمكن استخدامه على مجموعات الكمبيوتر وأجهزة الكمبيوتر العملاقة. يمكن تقسيم محاكاة MD الطويلة إلى عدة أجزاء ويتم إجراؤها بالتتابع. يوصى بشدة بتعيين ig = -1 (خيار البذور العشوائية) لكل إعادة تشغيل محاكاة. يمكن استخدام برامج ptraj أو cppptraj لتحليل ومعالجة مسارات الإحداثيات. لمزيد من المعلومات، راجع دليل مستخدمي البرنامج.

النتائج

يمكن تطبيق البروتوكول الحالي بسهولة في دراسات التعديل اللاحق للترجمة للكاسباز أو الطفرات المسببة للأمراض. في هذا القسم ، يتم توضيح سير عمل نمذجة MD (الشكل 1) ، والذي تم استخدامه بنجاح في دراسة caspase-27. باستخدام الطفرات الموجهة للموقع في المختبر لمواقع الفسفر...

Discussion

يسمح نهج MD الموصوف بنمذجة كل من الأشكال البرية والمتحولة من caspase باستخدام حزم المحاكاة الجزيئية الحيوية. تتم مناقشة العديد من القضايا المهمة للمنهجية هنا. أولا ، يجب اختيار بنية بلورية تمثيلية للكاسباز من بنك بيانات البروتين. الأهم من ذلك ، كل من الأشكال الأحادية والثنائية من caspase مقبولة. ?...

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل بمنحة من مؤسسة العلوم الروسية (17-75-20102 ، تطوير البروتوكول). تم دعم التجارب الموصوفة في قسم النتائج التمثيلية (تحليل الفسفرة) من قبل جمعيات السرطان في ستوكهولم (181301) والسويدية (190345).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Amber20University of California, San FranciscoSoftware for molecular dynamics simulation
http://ambermd.org
AmberTools21University of California, San FranciscoSoftware for molecular modeling and analysis
http://ambermd.org

References

  1. Olsson, M., Zhivotovsky, B. Caspases and cancer. Cell Death and Differentiation. 18 (9), 1441-1449 (2011).
  2. Lavrik, I. N., Golks, A., Krammer, P. H. Caspase: Pharmacological manipulation of cell death. Journal of Clinical Investigation. 115 (10), 2665-2672 (2005).
  3. Degterev, A., Boyce, M., Yuan, J. A decade of caspases. Oncogene. 22 (53), 8543-8567 (2003).
  4. Pop, C., Salvesen, G. S. Human caspases: Activation, specificity, and regulation. Journal of Biological Chemistry. 284 (33), 21777-21781 (2009).
  5. Zamaraev, A. V., Kopeina, G. S., Prokhorova, E. A., Zhivotovsky, B., Lavrik, I. N. Post-translational modification of caspases: The other side of apoptosis regulation. Trends in Cell Biology. 27 (5), 322-339 (2017).
  6. Pearlman, S. M., Serber, Z., Ferrell, J. E. A mechanism for the evolution of phosphorylation sites. Cell. 147 (4), 934-946 (2011).
  7. Zamaraev, A. V., et al. Requirement for Serine-384 in Caspase-2 processing and activity. Cell Death and Disease. 11 (10), 825 (2020).
  8. Dagbay, K. B., Hill, M. E., Barrett, E., Hardy, J. A. Tumor-associated mutations in caspase-6 negatively impact catalytic efficiency. Biochemistry. 56 (34), 4568-4577 (2017).
  9. Ando, M., et al. Cancer-associated missense mutations of caspase-8 activate nuclear factor-κB signaling. Cancer Science. 104 (8), 1002-1008 (2013).
  10. Case, D. A., et al. . AMBER 2020. , (2020).
  11. Salomon-Ferrer, R., Case, D. A., Walker, R. C. An overview of the Amber biomolecular simulation package. WIREs Computational Molecular Science. 3 (2), 198-210 (2013).
  12. Roe, D. R., Cheatham, T. E. PTRAJ and CPPTRAJ: Software for processing and analysis of molecular dynamics trajectory data. Journal of Chemical Theory and Computation. 9 (7), 3084-3095 (2013).
  13. Maier, J. A., et al. ff14SB: Improving the accuracy of protein side chain and backbone parameters from ff99SB. Journal of Chemical Theory and Computation. 11 (8), 3696-3713 (2015).
  14. Salomon-Ferrer, R., Götz, A. W., Poole, D., Le Grand, S., Walker, R. C. Routine microsecond molecular dynamics simulations with AMBER on GPUs. 2. Explicit solvent particle mesh ewald. Journal of Chemical Theory and Computation. 9 (9), 3878-3888 (2013).
  15. Berman, H. M., et al. The Protein Data Bank. Nucleic Acids Research. 28 (1), 235-242 (2000).
  16. Burley, S. K., et al. RCSB Protein Data Bank: Powerful new tools for exploring 3D structures of biological macromolecules for basic and applied research and education in fundamental biology, biomedicine, biotechnology, bioengineering and energy sciences. Nucleic Acids Research. 49, 437-451 (2021).
  17. Martinez, X., et al. Molecular graphics: Bridging structural biologists and computer scientists. Structure. 27 (11), 1617-1623 (2019).
  18. Lee, T. S., et al. GPU-accelerated molecular dynamics and free energy methods in Amber18: Performance enhancements and new features. Journal of Chemical Information and Modeling. 58 (10), 2043-2050 (2018).
  19. Jäger, R., Zwacka, R. M. The enigmatic roles of caspases in tumor development. Cancers. 2 (4), 1952-1979 (2010).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

188

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved