تطوير نموذج فأر معلق الرباط الرحمي العجزي

Beverly J. Miller; Brian K. Jones; Jonathan S. Turner; Steven R. Caliari; Monique H. Vaughan

doi:10.3791/64311

Summary

يؤثر هبوط أعضاء الحوض على ملايين النساء في جميع أنحاء العالم ، ومع ذلك فإن بعض التدخلات الجراحية الشائعة لها معدلات فشل تصل إلى 40٪. عدم وجود نماذج حيوانية قياسية للتحقيق في هذه الحالة يعيق التقدم. نقترح البروتوكول التالي كنموذج لتعليق الرباط الرحمي العجزي واختبار الشد في الجسم الحي .

Abstract

هبوط أعضاء الحوض (POP) هو اضطراب شائع في قاع الحوض (PFD) مع إمكانية التأثير بشكل كبير على نوعية حياة المرأة. ما يقرب من 10 ٪ -20 ٪ من النساء يخضعن لجراحة إصلاح قاع الحوض لعلاج هبوط في الولايات المتحدة. تؤدي حالات PFD إلى تكلفة سنوية إجمالية تبلغ 26.3 مليار دولار في الولايات المتحدة وحدها. هذه الحالة متعددة العوامل لها تأثير سلبي على نوعية الحياة ، ومع ذلك فقد تضاءلت خيارات العلاج فقط في الماضي القريب. أحد الخيارات الجراحية الشائعة هو تعليق الرباط الرحمي العجزي (USLS)، والذي يتم إجراؤه عادة عن طريق تثبيت القبو المهبلي على الرباط الرحمي العجزي في الحوض. يحتوي هذا الإصلاح على نسبة أقل من المضاعفات مقارنة بتلك التي تعاني من زيادة الشبكة ، ولكنه ملحوظ لمعدل فشل مرتفع نسبيا يصل إلى 40٪. بالنظر إلى عدم وجود نماذج حيوانية قياسية لدراسة ضعف قاع الحوض ، هناك حاجة سريرية ملحة للابتكار في هذا المجال مع التركيز على تطوير نماذج حيوانية فعالة من حيث التكلفة ويمكن الوصول إليها. في هذه المخطوطة، نصف نموذجا للفئران من منتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS) يتضمن استئصال الرحم الكامل يليه تثبيت القبو المهبلي المتبقي في الرباط الرحمي العجزي. الهدف من هذا النموذج هو محاكاة الإجراء الذي يتم إجراؤه على النساء ليتمكن من استخدام النموذج ثم التحقيق في الاستراتيجيات التعويضية التي تعمل على تحسين السلامة الميكانيكية لربط الرباط. الأهم من ذلك ، أننا نصف أيضا تطوير إجراء اختبار الشد في الموقع لتوصيف سلامة الواجهة في نقاط زمنية مختارة بعد التدخل الجراحي. بشكل عام، سيكون هذا النموذج أداة مفيدة للدراسات المستقبلية التي تبحث في خيارات العلاج لإصلاح الملوثات العضوية الثابتة عبر منتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS).

Introduction

هبوط أعضاء الحوض (POP) هو اضطراب شائع في قاع الحوض يؤثر على ملايين النساء في جميع أنحاء العالم مع إمكانية التأثير بشكل كبير على العديد من جوانب حياة المرأة ، خاصة مع سن¹. والجدير بالذكر أن ما يقرب من 13٪ من النساء في الولايات المتحدة سيخضعن لعملية جراحية بسبب هبوط البول أو سلس البول². حالة أكثر شيوعا بعد الحمل والولادة ، يتميز التدلي بنزول أعضاء الحوض ، في الغالب الأجزاء المختلفة من المهبل و / أو الرحم ، بما يتجاوز وضعها الطبيعي في التجويف البريتوني. هذا يؤدي إلى أعراض مزعجة من انتفاخ المهبل أو الضغط ، والأمعاء ، والمثانة ، والعجز الجنسي ، وانخفاض نوعية الحياة بشكل عام. وتشمل عوامل الخطر الأخرى للملوثات العضوية الثابتة السمنة، وتعاطي التبغ، والسعال المزمن، والإمساك³.

في النساء الأصحاء ، يتم دعم أعضاء قاع الحوض بواسطة عضلات الرافعة ، والأربطة الرحمية العجزية (USLs) ، والأربطة الأساسية ، ومرفقات النسيج الضام بالجدار الجانبي للحوض والهياكل البعيدة للجسم العجان ^4,5. تعد USLs من بين أهم الهياكل الداعمة القمية لكل من الرحم والمهبل القمي ، وبالتالي ، غالبا ما تستخدم في التصحيح الجراحي للملوثات العضوية الثابتة (الشكل 1). ينبع الدعم الهيكلي من USL من النسيج الضام الكولاجيني الكثيف في المنطقة المقدسة التي تنتقل إلى عضلات ملساء مكتظة بشكل وثيق. بسبب هذا التدرج التركيبي، يصبح USL متشابكا مع عضلات الرحم والمهبل لتوفير دعم قوي لأعضاء الحوض ^6,7. في معلق الرباط الرحمي العجزي (USLS)، يتم تثبيت USLs في قبو المهبل بعد استئصال الرحم، واستعادة المهبل والهياكل المحيطة إلى وضعها التشريحي في مقصورة البطن. ومع ذلك، وبغض النظر عن المسار عبر المهبل أو بالمنظار، فإن إجراء منتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS) يعاني من معدل فشل مرتفع نسبيا يصل إلى 40٪ في بعض الدراسات ^8,9. كان معدل تكرار أعراض الانتفاخ المهبلي المزعجة بعد 5 سنوات من الإصلاح لهبوط الحيز القمي ، مثل USLs ، حوالي 40٪ في تجربة معشاة ذات شواهد كبيرة متعددة المراكز⁹. في نفس التجربة ، كانت إعادة العلاج للهبوط المتكرر في 5 سنوات حوالي 10 ٪. لم تتم دراسة آلية معدل الفشل المرتفع هذا، ولكن استعادة المهبل والهياكل المحيطة به إلى وضعها التشريحي يتطلب وضع خياطة في منطقة الكولاجين الكثيفة في USL^10,11 بدلا من منطقة العضلات الملساء. لذلك، يمكن أن يكون معدل الفشل المرتفع ناتجا عن عدم التطابق الميكانيكي والتركيبي لواجهة USL المهبلية المشكلة جراحيا مقارنة بالتكامل الكامل الذي شوهد في ملحق عنق الرحم و USL الأصلي.

التأثير الاقتصادي لعلاج هذه الاضطرابات ملحوظ أيضا ، حيث يتم إنفاق ما يقرب من 300 مليون دولار سنويا في الولايات المتحدة على الرعاية الإسعافية¹² ، وأكثر من مليار دولار يتم إنفاقها سنويا في التكاليف المباشرة للعمليات الجراحية¹³. على الرغم من الموارد الاقتصادية الهائلة المخصصة لعلاج هذه الحالات ، إلا أن المضاعفات الناشئة عن العديد من جراحات الهبوط لا تزال محبطة. على سبيل المثال ، تقدم إصلاحات التدلي القمي القائمة على شبكة البولي بروبلين ، مثل sacrocolpopexy ، معدلات نجاح أعلى مقارنة بإصلاحات الأنسجة الأصلية¹⁴ ، ولكن على حساب المضاعفات المحتملة مثل التعرض للشبكة أو التآكل. تلقت إدارة الغذاء والدواء ما يقرب من 3000 شكوى تتعلق بمضاعفات الشبكة بين عامي 2008 و 2010 وحدها. وبلغ هذا ذروته في أمر من إدارة الغذاء والدواء لوقف تصنيع وبيع جميع المنتجات الشبكية الموضوعة عبر المهبل للملوثات العضوية الثابتة في أبريل 2019¹⁵. لذلك ، هناك حاجة سريرية قوية لمواد أخرى غير البولي بروبلين ، ونماذج لاختبارها ، والتي قد تزيد من إصلاحات هبوط الأنسجة الأصلية وتزيد من معدلات النجاح مقارنة بالتقنيات التقليدية مع الخياطة وحدها.

منذ إعلان إدارة الغذاء والدواء الأمريكية في عام 2019 ، توقف معظم جراحي الحوض عن استخدام الشبكة الموضوعة عبر المهبل لإصلاح التدلي ، مما دفع الباحثين إلى البحث عن مناهج جديدة لهندسة الأنسجة لزيادة إصلاحات الأنسجة الأصلية 16،¹⁷^،¹⁸ مثل خلايا انسجة اللحمة المتوسطة (MSCs)^9,20 . مع هذا التحول في التركيز ، هناك حاجة ملحة لتحسين النماذج الحيوانية التي يمكن أن تساعد في تطوير مواد جديدة. التحدي في هذه العملية هو تحقيق التوازن بين الأهمية السريرية والتكلفة. تحقيقا لهذه الغاية ، استفاد الباحثون الأساسيون والسريريون الذين يدرسون هبوط أعضاء الحوض من العديد من النماذج الحيوانية حتى الآن ، بما في ذلك الجرذان والفئران والأرانب والأغنام والخنازير والرئيسيات غير البشرية¹⁹. تعد عملية تحديد نموذج حيواني مثالي أمرا صعبا ، حيث أن البشر على قدمين ، وليس لديهم ذيل ، ولديهم عملية ولادة مؤلمة مقارنة بأنواع الثدييات الأخرى²⁰. تم استخدام الخنازير²¹ لمحاكاة تثبيت العجزي الروبوتي ، بينما تم استخدام الأغنام لمحاكاة إصلاحات هبوط المهبل²². هذه النماذج الحيوانية ، على الرغم من أهميتها سريريا ، محدودة الجدوى من حيث التكلفة والصيانة. وقد استخدمت الرئيسيات غير البشرية لدراسة التسبب في هبوط. السنجاب على وجه الخصوص هي واحدة من الأنواع الوحيدة بخلاف البشر التي يمكن أن تتطور هبوطا تلقائيا ، مما يجعلها واحدة من أكثر النماذج الحيوانية ذات الصلة²⁰. كما تم استخدام الرئيسيات غير البشرية لدراسة العمليات الجراحية النسائية مثل sacrocolpopexy²³ وزرع الرحم²⁴. على غرار نظرائهم من الأغنام والخنازير ، فإن القيد الأساسي للرئيسيات غير البشرية كنموذج حيواني للهبوط هو تكلفة الصيانة والرعاية والصعود¹⁹.

على الرغم من أن حوض القوارض موجه أفقيا مع نسبة أصغر بكثير من حجم قناة الرأس إلى الولادة مقارنة بالبشر¹⁹، إلا أن الفئران مناسبة للدراسات على الحيوانات الصغيرة لجراحة USLS نظرا لأن لها نفس تشريح USL والخلوية والبنية النسيجية وتكوين المصفوفة مقارنة ب USL²⁵ البشري. علاوة على ذلك ، فهي مفيدة من حيث الصيانة والصعود. على الرغم من هذه السمات المفيدة، لا توجد تقارير منشورة عن نموذج فئران لإصلاح منتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS). لذلك ، فإن الهدف هو وصف بروتوكول لاستئصال الرحم و USLS في فأر لويس متعدد الأزواج. سيكون هذا البروتوكول مفيدا للباحثين الذين يهدفون إلى دراسة الفيزيولوجيا المرضية والمكونات الجراحية للملوثات العضوية الثابتة باستخدام هذا النموذج الحيواني الذي يمكن الوصول إليه.

figure-introduction-6397
الشكل 1: هبوط أعضاء الحوض. أ: الاتجاه الطبيعي للأعضاء في التجويف البريتوني، ب: النزول الدراماتيكي للعضو عند حدوث التدلي. بعد استئصال الرحم، يعيد معلق الرباط الرحمي العجزي المهبل والتراكيب المحيطة به إلى موضعها التشريحي الصحيح. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Protocol

اتبع جميع إرشادات اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوان (IACUC) ، والحصول على الموافقة على جميع إجراءات الحيوانات قبل البدء. يمكن العثور على متطلبات تقنية الجراحة المعقمة من الدليل²⁶ ولوائح رعاية الحيوان²⁷. تمت الموافقة على الدراسة من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسية بجامعة فيرجينيا رقم البروتوكول 4332-11-20. الحصول على مربي الإناث متعددة الأفرع (اثنين من القمامة). يجب وضع الفئران في حظيرة معتمدة من قبل الجمعية الأمريكية لاعتماد رعاية المختبر وتزويدها بالطعام والماء حسب الحاجة. كانت الحيوانات في هذه الدراسة هي فئران لويس التي تم الحصول عليها من نهر تشارلز وكانت تتراوح أعمارها بين 4 و 6 أشهر لاستيعاب متطلبات القمامتين. تم الحفاظ على الحيوانات في دورة 12 ساعة من الضوء والظلام.

1. إصلاح هبوط أعضاء الحوض باستخدام تعليق الرباط الرحمي العجزي

تجهيز المعدات والمنطقة الجراحية لجراحة الحيوانات الحية
1. قم بإعداد المنطقة الجراحية بحيث يتم تسخين اللوحة الجراحية إلى 37 درجة مئوية باستخدام وسادات تسخين الماء الساخن المعاد تدويرها جنبا إلى جنب مع وسادة معقمة مقاومة للماء. تأكد من تعقيم اللوحة الجراحية والمنطقة الجراحية باستخدام مطهر سطح خال من المبيضات متبوعا بمسح الإيثانول بنسبة 70٪.
2. استخدم التعقيم الحراري للأوتوكلاف لتعقيم جميع مستلزمات الأوتوكلاف الآمنة ، بما في ذلك الأدوات الجراحية والإسفنج الجراحي (الشاش) ومسحات القطن والستارة التي تستخدم لمرة واحدة. الحصول على قفازات جراحية معقمة معبأة.
3. احصل على كليبرز كهربائي ، ومرهم للعيون ، ومناديل الإيثانول ، ومسحات قطنية ، ومحلول اليود ، جنبا إلى جنب مع شفرة مشرط معقمة وخيوط ، وضعها على طاولة العمل.
إعداد الحيوانات لجراحة الحيوانات الحية
1. ضع الحيوان بعناية في غرفة التخدير المزودة ب 2٪ إيزوفلوران وقم بوزن الحيوان بعد الوصول إلى مستوى التخدير المناسب. يتم تأكيد التخدير المناسب عندما لا يستجيب الحيوان لقرصة إصبع القدم.
2. ضع الحيوان على لوحة الجراحة في وضعية الانبطاح مع الأنف بشكل آمن في مخروط التخدير المزود ب 2٪ إيزوفلوران. ضع مرهما عينيا على عيون كل من الحيوانات.
3. تطبيق المسكنات الأفيونية ومضادات الالتهاب غير الستيروئيدية تحت الجلد (جدول المواد).
4. ضع الحيوان في وضع الاستلقاء ، كما هو موضح في الشكل 2 ، واحلق فرو البطن من عملية الخنجري وصولا إلى فتحة مجرى البول (8 سم × 4 سم). تعقيم البطن بثلاث شحنات من اليود والكحول لإعداد موقع الشق.
  ملاحظة: إذا أدت الحلاقة إلى نزيف ، فقم بإجراء الإرقاء مع الضغط قبل تحضير الجلد باستخدام وسادة تحضير اليود والكحول. الحفاظ على اليود على الجلد لمدة 30 ثانية.
5. إذا لم يكن هناك مساعد جراحي متاح ، فقم بإيداع الإمدادات والأدوات المعقمة في صينية أدوات معقمة ، بما في ذلك مسحات القطن المعقمة ، والستائر (الستارة) ، والإسفنج (الشاش) ، والشفرة الجراحية ، والخيوط الجراحية ، والعلامة الجراحية (اختياري). في حالة توفر مساعد جراحي ، يمكن حذف هذه الخطوة ، ويمكن للمساعد توفير الأدوات المعقمة باتباع الخطوة 1.3.1.
استئصال الرحم وتعليق الرباط الرحمي العجزي (USLS)
1. ارتد ثوبا جراحيا وغطاء للرأس وقناعا وقفازات معقمة. ثنى الحيوان بحقل معقم ، تاركا البطن مكشوفا فقط.
2. قم بعمل شق 7 سم أسفل خط ألبا من أسفل عملية الخنجري مباشرة إلى خط الحلمة السفلي باستخدام شفرة مشرط. يجب أن ينتهي الشق ~ 0.5-1.0 سم منضدة من فتحة مجرى البول. ثم قم بعمل شق عبر طبقة العضلات تحتها. تجنب الأوعية الدموية لجدار البطن لمنع النزيف.
3. قم بتجميع مبعدة البطن وفحص تجويف البطن (الشكل 3 أ). باستخدام ملقط القزحية ، حدد موقع قرن الرحم الأيسر برفق. الرحم عميق داخل الأمعاء، والتي غالبا ما تكون البنية التي واجهتها لأول مرة عند دخول التجويف البريتوني. من المفيد تحديد المبيض أولا (الشكل 3 ب) ووسادة الدهون المبيضية المرتبطة به.
4. ارفع قرن الرحم الأيسر برفق باستخدام مشبك أو مشبك بعوضة وابدأ استئصال الرحم عن طريق ربط القرن أسفل المبيض وقناة البيض باستخدام مشبك البعوض. المبايض هي هياكل حساسة ويمكن إتلافها بسهولة أو تدميرها مع التلاعب. توخي الحذر عند رفع قرون الرحم. أمسك القرن على مسافة آمنة من المبيض لتحقيق ذلك.
5. استمر في استئصال الرحم عن طريق تثبيت وتقليم الأوعية الدموية المجاورة والنسيج الضام والدهون من قرن الرحم باستخدام مقص صغير. قم بتثبيت النسيج الضام قبل الإزالة لتقليل النزيف. ضع المشابك بالقرب من واجهة الرحم قدر الإمكان ، وصولا إلى تقاطع الرحم العنقي (ويسمى أيضا تشعب القرن).
6. المشبك عبر قرن الرحم بالقرب من نقطة التشعب باستخدام ملقط البعوض (الشكل 4A-C). استئصال القرن المماثل فقط cephalad إلى المشبك لتجنب النزيف. يقع هذا بين تقاطع الرحم وعنق الرحم (فقط منبر إلى عنق الرحم) ونقطة ربط الرحم والبوق. سيبقى القبو المهبلي بعد استئصال الرحم (الشكل 4 د).
  ملاحظة: نظرا لصغر حجم أوعية الفئران ، كان ربط جذوع الرحم بمشبك مؤقت كافيا لهذه الجراحة. ومع ذلك ، يمكن تعديل هذه التقنية حسب الحاجة إما عن طريق ختم عنيق مع الكي الكهربائي أو ربط خياطة.
7. كرري الخطوات 1.3.3-1.3.6 على قرن الرحم الأيمن لإجراء استئصال الرحم الكلي.
8. اضبط مبعثر البطن لكشف الحوض السفلي. افحصي القبو المهبلي المكشوف والأنسجة الرباطية الضامة الداعمة لقاع الحوض ، والتي يمكن رؤيتها متصلة بالمهبل وعنق الرحم. إذا أمكن ، حدد الحالب بشكل ثنائي ، وهو مجرد وسطي للمبيضين.
9. حدد الأربطة الرحمية^{العجزية 28,29} ، الموضحة في الشكل 5 أ ، والتي يمكن العثور عليها متصلة بعنق الرحم أسفل جذوع قرون الرحم المتبقية (قبو المهبل). يتم تتبع الرباط في اتجاه رأسي وسطي نحو العجز.
10. باستخدام خياطة بوليدياكسانون 3-0 على إبرة صغيرة مدببة ، ضع غرزة عبر الرباط الرحمي العجزي الأيسر. ضع الغرزة عالية على الرباط ، بالقرب من العجز.
11. قم بشد الغرزة للتأكد من أنها استحوذت على الرباط الرحمي العجزي - يتم إدخال هيكل USL في عنق الرحم مع غوص الأصل خلف المستقيم حيث يلتصق بالعجز. مرة أخرى ، حدد الحالب للتأكد من أنه لم يتم دمجه أو التواءه مع غرزة الرحم العجزية.
12. بعد ذلك ، مرر غرزة polydiaxanone اليسرى عبر الجانب الأيسر من قبو المهبل (الشكل 5B) ، مع الحرص على دمج كل من الجانبين الأمامي والخلفي للصفعة المهبلية. كرر الخطوات لإكمال إجراء USLS على الجانب الأيمن. يمكن وضع غرز متعددة بشكل ثنائي ، إذا رغبت في ذلك.
13. بمجرد وضع غرز الرحم العجزية بشكل ثنائي ، اربط الخيط بإحكام باستخدام عقدة مربعة ، كما هو موضح في الشكل 5C ، بحيث يكون القبو المهبلي مرتفعا نحو العجز. هذا يكمل تعليق الرباط الرحمي العجزي.
إغلاق الجرح الجراحي
1. استبدل محتويات البطن مرة أخرى إلى وضعها التشريحي داخل التجويف البريتوني. أغلق الطبقات العميقة من جدار البطن (الصفاق ، اللفافة ، العضلات) بنمط خياطة مستمر من 4-0 إلى 6-0 polyglactin 910 أو خياطة polydiaxanon.
2. أغلق الجلد بغرزة تحت الجلد (أو متقطعة) من 4-0 إلى 6-0 بوليدياكسانون أو بوليجلاكتين 910. تطبيق المضادات الحيوية تحت الجلد حسب الحاجة للوقاية من عدوى الموقع الجراحي.
3. إجراء مراقبة ما بعد الجراحة حتى يستعيد الحيوان وعيه الكافي للحفاظ على راقد القص. لا تعيد الحيوان إلى السكن الاجتماعي حتى يتعافى تماما.

figure-protocol-6970
الشكل 2: تحضير الحيوانات للجراحة الحية. إزالة الفراء من المنطقة المحيطة بموقع الشق ضروري لتقنية التعقيم المناسبة. المنطقة الموضحة في اللوحتين (أ) و (ب) هي مبادئ توجيهية. يجب على الباحثين إزالة ما يكفي من الشعر بحيث لا تتلامس الأدوات المعقمة مع الشعر أثناء الجراحة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-protocol-7610
الشكل 3: الحفاظ على المبيضين. عادة ما تكون قرون الرحم غير مرئية عند فتح البطن لأول مرة، كما هو موضح في (أ). بمجرد تحديد موقع القرن وتتبعه للعثور على (ب) المبيض وقناة البيض حيث يتصلان بالقرن، يمكن تثبيت الجزء العلوي من القرن، وفصل القرن لبدء استئصال الرحم. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-protocol-8241
الشكل 4: إزالة قرون الرحم. يتضمن استئصال الرحم في الجرذ (أ) كلا قرني الرحم (ب) مثبتين عند تقاطع الرحم العنقي و (ج) استئصالهما. يبقى القبو المهبلي من كل قرن مع (D) جذع عنق الرحم / الرحم (السهم) الذي يربطهما. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-protocol-8857
الشكل 5: تعليق الرباط الرحمي العجزي. (أ) توجيه الأربطة الرحمية العجزية فيما يتعلق بهياكل القبو المهبلي التي تم إنشاؤها. عند وضع الغرز لإصلاح معلق الرباط الرحمي العجزي (USLS)، تلتقط الغرز (B) الرباط الرحمي العجزي ثم تمر عبر الجانبين الأمامي والخلفي للسوار المهبلي. (ج) مثبت في الرباط الرحمي العجزي، أصبح القبو المهبلي الآن مرتفعا في اتجاه العجز. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

2. اختبار الشد أحادي المحور

ملاحظة: تم تشغيل نظام الاختبار والبرنامج المستخدم وفقا لإرشادات الشركة المصنعة للمعايرة والاختبار. حدثت جميع الاختبارات عند 22 درجة مئوية.

إعداد العينة
1. القتل الرحيم للفأر باستخدام إجراء دوائي معتمد من IACUC. ضمان الوفاة عن طريق الطريقة المادية الثانوية. هنا ، تم استخدام استنشاق CO₂ متبوعا بثقب القلب. كشف قبو المهبل استعدادا لاختبار ميكانيكي الشد. في الدراسة الحالية ، قم بإجراء اختبار الشد على الأربطة الرحمية العجزية الأصلية (التحكم) ، وكذلك على الحيوانات التي خضعت لتعليق الرباط الرحمي العجزي كما هو موضح أعلاه (POP).
2. اختبار الأربطة في الموقع بعد 24 أسبوعا من الجراحة. يقترح تحديد نقطة زمنية نهائية لا تقل عن 8 أسابيع للسماح بإعادة الامتصاص الكامل للغرز.
  1. بعد القتل الرحيم الإنساني ، قم بعمل شق أسفل خط ألبا لكشف البطن.
  2. ابدأ في تشريح الأنسجة الدهنية حتى يصبح القبو المهبلي مرئيا. استمر في تشريح ضمادات الدهون في البطن حتى تصبح USLs السليمة مرئية بوضوح (التحكم ، الشكل 6A) أو يكون التقاطع بين الرباط الرحمي العجزي والقبو المهبلي مرئيا (الملوثات العضوية الثابتة ، الشكل 6C). توخ الحذر لعدم سحب الوصلة لإزالة الأنسجة الدهنية ، ولكن بدلا من ذلك باستخدام جروح دقيقة بمقص دقيق للحفاظ على الاتساق بين العينات.
  3. باستخدام مسطرة مرنة ، قم بقياس المسافة بين إدخال الرحم العجزي (الخلفي للمستقيم) والقبو المهبلي. هذه القيمة هي الطول الأصلي للنسيج.
    ملاحظة: يبلغ الطول الأصلي للنسيج، وهو طول المقياس، ل USLs للتحكم 13.4 ± 0.5 مم بينما يبلغ طول المقياس لإصلاح USLs 12.8 ± 0.4 مم.
  4. خيط الشريط السري خلف USL السليم (التحكم، الشكل 6B) أو تقاطع USLS (POP، الشكل 6D) بحيث يتمركز النسيج على الشريط السري. قم بقياس ارتفاع وعرض الأنسجة حيث تتقاطع مع الشريط السري باستخدام الفرجار الرقمي. سيتم استخدام هذه القيم لحساب مساحة المقطع العرضي.
  5. قم بتوصيل لوحة ضغط كبيرة (جدول المواد) عبر محول القاعدة وضع الحيوان فوقها بحيث يتم توسيط العينة أسفل حامل القبضة.
اختبار الشد
1. قم ببرمجة نظام اختبار الشد في البرنامج: التحميل المسبق ، الشرط المسبق ، السحب إلى الفشل. يتبع هذا بروتوكولات الاختبار الميكانيكية السابقة لقاع الحوض²⁹ والأنسجة التناسلية³⁰ .
2. قم بإعداد الأداة استعدادا لاختبار الشد. بالنسبة للدراسة الحالية ، استخدم خلية تحميل 10 N ، وقبضة مطبوعة ثلاثية الأبعاد ، ومحول قاعدة لتوصيل لوح ضغط كما هو موضح في الشكل 7.
  ملاحظة: أي إعداد أساسي يمكن أن يدعم الحجم الكامل للحيوان مقبول. استخدم أي قبضة يمكنها حمل الشريط السري بإحكام. تم استخدام حامل مطبوع ثلاثي الأبعاد مخصص وقبضة من الدراسات السابقة^31,32 في هذا الاختبار. وأدرجت ملفات المحكمة الخاصة بلبنان كملفات تكميلية.
  1. ضع الحيوان بحيث تتمركز العينة أسفل القبضة (الشكل 8 أ). شل حركة منطقة الحوض المحيطة بالعينة عن طريق تثبيت الحيوان على السطح الزجاجي (الشكل 8 ب).
  2. قم بخفض خلية التحميل بحيث تصل ذيول الشريط السري بسهولة إلى المقبض. قم بتأمين الشريط السري في القبضة ، وترك الشريط متراخيا لتجنب التلاعب بالعينة.
3. افتح اختبار التكييف المسبق في واجهة البرنامج وقم بتسمية الاختبار باسم العينة. تأكد من أن طريقة التكييف المسبق تتضمن خطوة التحميل المسبق.
4. انقر لبدء اختبار التكييف المسبق ، والذي سيقوم بتحميل العينة مسبقا عند 0.015 N. بمجرد استقرار قوة التحميل المسبق ، سيقوم الاختبار بتهيئة العينة مسبقا بمعدل استطالة يبلغ 0.1 مم / ثانية لمدة 30 ثانية. اترك المنديل يرتاح لمدة 1 دقيقة. أثناء الانتظار ، قم بتحميل نظام اختبار السحب إلى الفشل.
  ملاحظة: قد تختلف قوة التحميل المسبق وفقا لقيود الجهاز وظروف الاختبار. ارجع إلى الدراسات السابقة حيث يتراوح الحمل المسبق المبلغ عنه من 0.015 N إلى 0.1 N 29,33,34,35,36.
5. افتح نظام الاختبار المبرمج للسحب إلى الفشل. قم بتسمية الاختبار باسم العينة وانقر فوق حسنا للوصول إلى النافذة التالية. أدخل طول مقياس العينة ثم انقر فوق التالي للانتقال إلى صفحة الاختبار.
6. وازن الكل وانقر على ابدأ. اسمح للاختبار بالعمل بمعدل استطالة 0.1 مم / ثانية حتى يتم سحب الأنسجة إلى الفشل. سينتج الاختبار بيانات إزاحة الحمل.
حساب الإجهاد والانفعال والمعامل لاختبار الشد
1. باستخدام بيانات إزاحة الحمل ، ومنطقة المقطع العرضي ، وطول المقياس من العينة ، احسب الإجهاد (MPa) والإجهاد (٪) كما تم الإبلاغ عنه سابقا³⁷،³⁸،³⁹،⁴⁰^،⁴¹. استخدم المعادلة 1 والمعادلة 2 الموضحة أدناه. لاحظ أنه يجب أيضا مراعاة تمدد الشريط أثناء الاختبار في هذه الحسابات.
  المعادلة 1
  المعادلة 2
  1. من منحنى إزاحة الحمل (الشكل 9 أ ، د) ، احسب الصلابة (المنحدر الخطي ، N / mm) والحمل النهائي. من منحنى إجهاد الإجهاد ، احسب معامل الظل (المنحدر الخطي ، MPa) والضغط النهائي. تمت الإشارة إلى المنطقة الخطية لمنحنى إجهاد الإجهاد في الشكل 9B ، E مع معامل الظل المحسوب من هذه المنطقة الموضح في الشكل 9C ، F لكلا المجموعتين التجريبيتين.
    ملاحظة: لكل من معامل الصلابة والظل ، حدد الجزء الخطي عن طريق اختيار نافذة من النقاط تزيد من قيمة R² للانحدار الخطي^37,41.

figure-protocol-15522
الشكل 6: تحضير العينة لاختبار الشد أحادي المحور. (أ) USLs الضابطة المكشوفة قبل (ب) الشريط السري ملولب خلف النسيج. (ج) تقاطع القبو المهبلي USL بعد الذوبان الكامل للخيوط مع (ب) الشريط السري الملولب خلف الأنسجة استعدادا لاختبار الشد. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-protocol-16146
الشكل 7: نظام الاختبار الميكانيكي. (أ) نظام الاختبار في وضع اختبار الشد المستخدم مع (B) حامل مطبوع ثلاثي الأبعاد و (C) قبضة عينة مطبوعة ثلاثية الأبعاد كاملة بشريط محكم لتحسين القبضة. تكوين القطع الموضحة في اللوحة (D). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-protocol-16773
الشكل 8: إعداد اختبار الشد . (أ) تتمركز العينة أسفل القبضة والحامل. (ب) يظل الحيوان والأنسجة المحيطة بالعينة ثابتين قبل بدء اختبار الشد. كما هو موضح في الصورة الداخلية ، يعد تأمين الأنسجة المحيطة أمرا ضروريا لعزل الأنسجة محل الاهتمام. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-protocol-17383
الشكل 9: مثال على إخراج وتحليل بيانات اختبار الشد. (أ) منحنى إزاحة الحمل لعينة تحكم متبوعا ب (ب) تحليل إجهاد الإجهاد و (ج) ميل معادلة ملاءمة منحنى الخط الذي يوضح معامل المماس في MPa. (D-F) العملية نفسها لعينة منتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

النتائج

الجدوى الجراحية ووضع خياطة الرحم العجزي
لم تكن هناك مضاعفات أثناء العملية تتعلق باستئصال الرحم أو تعليق الرباط الرحمي العجزي في أي من الحيوانات. كان هناك نزيف ضئيل أثناء إزالة قرون الرحم ، بشرط أن يتم تثبيت الأوعية الدموية المجاورة قبل الإزالة. سمح النزيف المحدود بالتصور الجيد للأربطة الرحمية العجزية لوضع الخياطة ومنع إصابة الأمعاء أو المستقيم أو الحالب أو المثانة أثناء العملية. بعد وضع الغرز ، منع تقاطع القبو المهبلي USL المتشكل حديثا حركة جذع عنق الرحم / الرحم كما هو موضح في الشكل 5C. خلال الأيام الثلاثة الأولى بعد الجراحة ، تم فحص الحيوانات يوميا ، ثم كل أسبوعين حتى نهاية التجربة. مع إعطاء المسكنات الأفيونية طويلة المفعول ومضادات الالتهاب غير الستيروئيدية في وقت الجراحة ، وجد أن المسكنات الإضافية غير ضرورية. استنادا إلى تجربتنا مع 16 عملية جراحية على الحيوانات (ن = 8 لكل من مجموعتي التحكم ومنتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS)، يجب توقع انخفاض في الوزن في الأسبوع الأول بعد الجراحة بمتوسط خسارة 5.7 ± 1.4٪ من وزن يوم الجراحة. كما هو متوقع ، اكتسبت الفئران وزنا ببطء خلال الأسابيع ال 23 اللاحقة ، بمتوسط زيادة في الوزن يبلغ 15.1 ± 4.5٪ على مدار التجربة.

الاختبار الميكانيكي لإصلاح منتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS)
لتوضيح وظائف إصلاح منتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS)، تم إجراء اختبار الشد أحادي المحور. بعد القتل الرحيم للحيوان في النقطة الزمنية المختارة بعد الجراحة ، 24 أسبوعا في هذه الدراسة ، يجب تشريح المنطقة الجراحية بعناية لتصور تقاطع قبو USL المهبلي كما هو موضح في الشكل 6 أ. بالمقارنة مع المنهجيات الأخرى لاختبار USLs للفئران جنبا إلى جنب مع الهياكل الداعمة الأخرى وأعضاء الحوض^29,42 ، فإن الطريقة الموضحة هنا هي الأولى التي تختبر USL للفئران بطريقة معزولة. تم اختيار الشريط السري المستخدم في هذه الدراسة بشكل استراتيجي لمرونته حيث سمح امتثال الشريط بالحد الأدنى من تعطيل الأنسجة أثناء تحضير اختبار الشد. لذلك ، يجب تعديل بيانات إزاحة الحمل لمراعاة الكمية الصغيرة من التمدد التي يساهم بها الشريط السري. يقدم الشكل 9 مثالا على البيانات التي تم الحصول عليها عن طريق اختبار الشد مع الشكل 9 أ الذي يقدم مثالا على مخطط إجهاد إجهاد نموذجي. يوصى بالإبلاغ عن بيانات الإجهاد والإجهاد لأن هذه المعلومات طبيعية ومستقلة عن حجم العينات³⁴ ويمكن مقارنتها بشكل أفضل عبر الدراسات. بالنسبة للرباط الرحمي العجزي السليم ، نبلغ عن الخصائص الهيكلية مثل الحمل النهائي (2.9 ± 0.5 نيوتن) والصلابة (0.4 ± 0.1 نيوتن / مم) بالإضافة إلى خصائص المواد الطبيعية مثل الإجهاد النهائي (2.1 ± 0.4 ميجا باسكال) ، الإجهاد النهائي (1.6 ± 0.5) ومعامل الظل (4.0 ± 1.1 ميجا باسكال). في الاختبارات أحادية المحور التي أجريت على الأعضاء التناسلية للفئران وجميع وصلات الأنسجة الداعمة لها من قبل Moalli et al. ، أبلغوا عن حمل نهائي عند الفشل (13.2 ± 1.1 نيوتن) وتصلب (2.9 ± 0.9 نيوتن / مم) أعلى من USL²⁹ المعزول. يذكر العمل الذي قام به Moalli et al. والأدبيات الأخرى^34,35 التباين العالي بين العينات المختبرة كما هو موضح في البيانات المقدمة هنا. بالنسبة لإصلاح تعليق الرباط الرحمي العجزي ، وجدنا أن جميع خصائص المواد الهيكلية (الصلابة ، 0.33 ± 0.13 نيوتن / مم ؛ الحمل النهائي ، 2.6 ± 1.3 نيوتن) وخصائص المواد الطبيعية (الإجهاد النهائي ، 1.8 ± 0.7 ميجا باسكال ؛ الإجهاد النهائي 1.3 ± 0.3 ؛ معامل الظل ، 3.0 ± 0.9 ميجا باسكال) أقل من خصائص USL الأصلي.

Discussion

يتميز البروتوكول بالعديد من المزايا. على حد علمنا، هذا هو أول وصف منشور لمنتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS) في نموذج الفئران، وسوف يزود الباحثين المستقبليين بخطوات قابلة للتكرار لتنفيذ هذا الإجراء في بيئة البحث. ثانيا، قمنا بتضمين بروتوكول جديد لاختبار الشد للواجهة الأصلية والجراحية ل USL. يمكن استخدام بروتوكول اختبار الشد في دراسات مماثلة تبحث في مناهج هندسة الأنسجة الجديدة لزيادة إصلاحات الأنسجة الأصلية مثل USLS. علاوة على ذلك ، فإن نموذج الفئران نفسه مفيد لدراسة اضطرابات قاع الحوض بسبب سهولة التعامل / الصعود ، والعمر القصير ، وفعالية التكلفة مقارنة بالنماذج الحيوانية الأكبر. تشمل قيود البروتوكول عدم القدرة على تقييم أحد المضاعفات الرئيسية للمثقفين الجامعيين الجامعيين، وهو التواء الحالب. على الرغم من ذلك ، لم يكن لدينا أي حالات إصابة حالب مفترضة في هذه الدراسة. هناك اعتبار آخر هو أن الاتجاه الأفقي للحوض ، ونسبة قناة رأس الجنين إلى الولادة الصغيرة ، وعدم وجود هبوط تلقائي في نموذج الفئران يحد من بعض قابلية تطبيق النتائج على البشر. ومع ذلك، فإن استخدام الفئران متعددة الشقوق هو أحد نقاط قوة هذه الدراسة لأن هذا يمثل عامل الخطر الرئيسي في تطور الملوثات العضوية الثابتة³.

سيكون إنشاء بروتوكول ناجح لاستئصال الرحم ومنتدى القيادة للمثقفين الجامعيين (USLS) في فأر لويس أداة مفيدة للباحثين المستقبليين الذين يبحثون في المكونات الجراحية للملوثات العضوية الثابتة، مع تقليل التباين في اختبار السلوك الميكانيكي ل USL. النماذج الحيوانية الجراحية مفيدة من حيث أنها تسمح للباحثين بتصميم تجارب ذات صلة سريريا تتحكم في التكافؤ وكتلة الجسم والمرض والتغذية³⁴ مع التخفيف من المخاطر الأخلاقية للدراسة الأولية على البشر. علاوة على ذلك ، تسمح النماذج الموحدة للملوثات العضوية الثابتة للباحثين بتجاوز قيود جمع الأنسجة البشرية. على وجه الخصوص ، ستمكن طرق اختبار الشد الموضحة في هذا البروتوكول من الاتساق بين الدراسات. اختبرت نماذج القوارض السابقة الخواص الميكانيكية لمنطقة الحوض بأكملها ، والتي تشمل عنق الرحم والمهبل وأربطة دعم الحوض^{المتعددة 29,42}. تسمح الطرق الموضحة هنا بقياس USL بطريقة تحافظ على مرفقات العمود الفقري وعنق الرحم الأصلية. وتجدر الإشارة إلى أن طرق اختبار الشد لا تقيم USL وحدها، بل تقيم USL بالاقتران مع إدخاله في العجز وعنق الرحم. هذه هي قوة الدراسة لأنها تعكس القوى المعتادة في الموقع التي يتعرض لها الرباط. نحن نقر بأن السلوك الميكانيكي للرباط المعزول سيكون مختلفا إذا تم اختباره خارج الجسم الحي بدون ملحقاته الأصلية. هذا صحيح بشكل خاص لأن هياكل الفئران صغيرة وتحد من جدوى جمع عينة مناسبة للاختبار خارج الجسم الحي. تواجه USLs التحميل في اتجاهات متعددة في الموقع، لذا فإن الطبيعة أحادية المحور للاختبار هي قيد، ولكن استخدام هذه الطريقة يسمح بإجراء مقارنات ذات مغزى بين الدراسات السابقة لميكانيكا USL للفئران^29,42. على الرغم من عدم وجود بروتوكول اختبار ميكانيكي قياسي مقبول على نطاق واسع ، إلا أن هذا النموذج سيكون أداة مفيدة لدراسات هندسة الأنسجة المستقبلية في هذا المجال.

تعتبر العديد من الخطوات الموضحة في هذا البروتوكول ضرورية لصحة الحيوانات ورفاهيتها بالإضافة إلى إمكانية استنساخ جراحة USLS واختبارات الشد اللاحقة. أولا ، من الضروري الحصول على كل من الأدوية المسكنة والمضادة للالتهابات الموصوفة بأنها مسكن وحده وجد أنه غير كاف لإدارة الألم. يقلل المضاد الحيوي الوقائي من خطر الإصابة بعدوى موقع الجراحة وهو معيار الرعاية في الجراحة البشرية. فيما يتعلق بالإجراء الجراحي للمثقفين الجامعيين الجامعيين (USLS)، فإن تجنب تلف المبيضين وتقليل فقدان الدم أمران ضروريان لإجراء عملية جراحية ناجحة. تصف الخطوتان 1.3.3 و 1.3.4 فصل الجزء العلوي من قرن الرحم عن المبيض المجاور ؛ يجب توخي الحذر للحفاظ على هذا التشريح على جانب قرن الرحم لمنع تعطيل الأوعية الحساسة حول المبيض ، مما قد يؤدي إلى نزيف مفرط. وتجدر الإشارة إلى أن محققين آخرين أظهروا أن وظيفة المبيض يتم الحفاظ عليها بعد إزالة قرون الرحم⁴³. علاوة على ذلك ، إذا تعطلت المبايض أو أزيلت ، فسوف تنزعج بنية ألياف الكولاجين الكلية ، مما يؤدي إلى تغيير الخواص الميكانيكية لأنسجتها^44,45. بمجرد فصل قرن الرحم بأمان عن المبيض ، هناك مستوى واضح من التشريح يسمح بعزل قرن الرحم عن منصات الدهون والأوعية الدموية المحيطة. على الرغم من مستوى التشريح الواضح ، يجب تأمين عنيق على طول قرن الرحم بمشبك قبل الاستئصال بمقص صغير. على عكس الممارسة الجراحية في البشر ، وجدنا أن ربط خياطة عنيق استئصال الرحم غير ضروري ، لأن تثبيت عنيق قبل النقل يضمن الإرقاء المناسب. تصف الخطوة 1.3.6 من البروتوكول هذه العملية الدقيقة لتقليل فقدان الدم. أثناء إجراء استئصال الرحم ، يجب توخي الحذر الشديد لتحديد الحالب كما هو مذكور في الخطوتين 1.3.6 و 1.3.8. يعد فهم القرب التشريحي للحالب أمرا بالغ الأهمية، حيث أن إحدى المضاعفات الأكثر شيوعا المرتبطة ب USLs في البشر هي إصابة الحالب⁴⁶.

في الختام ، نقدم بروتوكولا جديدا لإجراء استئصال الرحم ، وتعليق الرباط الرحمي العجزي ، واختبار الشد ل USL في نموذج الفئران. نتوقع أن تساعد النتائج التي توصلنا إليها الباحثين في العلوم الأساسية في المستقبل من خلال تقديم وصف واضح وقابل للتكرار لهذه الإجراءات وبالتالي السماح بتقدم أبحاث هبوط أعضاء الحوض.

Disclosures

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

نشكر البروفيسور سيلفيا بليمكر على استخدام Instron الخاص بها والبروفيسور جورج المسيح لاستخدام مساحته الجراحية بالإضافة إلى حامل وقبضة مطبوعة 3D. تم دعم هذا العمل من قبل شراكة الأبحاث الانتقالية UVA-Coulter ووزارة الدفاع (W81XWH-19-1-0157).

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alcohol prep pad	BD	326895
Artificial Tear Ointment	American Health Service Sales Corp	PH-PARALUBE-O
Bluehill software	Instron	Bluehill 3
Cavicide 1 disinfectant	Fisher Scientific	22 998 800
Compression platean	Instron	2501-163
Cotton swabs	Puritan Medical	806-WC
Gauze Sponge, 8-Ply	VWR	95038-728
Mosquito Forceps	Medline Industries	MMDS1222115
Needle Holder	Medline Industries	DYND04045
Operating Scissors, 5½", Sharp	American Health Service Sales Corp	4-222
Opioid Analgesic (Buprenorphine XR)	Fidelis Animal Health	Ethiqa XR	0.65 mg/kg SC Q72
NSAID Analgesic (Meloxicam SR)	Wildlife Pharmaceuticals, LLC	Meloxicam SR	1 mg/kg SC q72
PDS II, 3-0 Polydioxanone Suture, SH-1	Ethicon	Z316H
PDS II, 5-0 P olydioxanone Suture, RB-1	Ethicon	Z303H
Retractor	Medline Industries	MDS1862107
Scalpel Blade Stainless Surgical #10	Miltex	4-310
Scalpel Handle	Medline Industries	MDS15210
Scissor, Micro, Curved, 4.5"	Westcott	MDS0910311
Single Column Universal Testing System	Instron	5943 S3873	1 kN force capacity, 10 N load cell
Sterile Natural Rubber Latex Gloves	Accutech	91225075
Suture,Vicryl,6-0,P-3	Ethicon	J492G
Tape,Umbilical,Cotton,1/8X18"	Ethicon	U10T
Tension and Compression Load Cell	Instron	2530-10N	10N load cell (1 kgf, 2 lbf)
Veterinary surgical adhesive (skin glue)	Covetrus	31477

References

Olsen, A. L., et al. Epidemiology of surgically managed pelvic organ prolapse and urinary incontinence. Obstetrics and Gynecology. 89 (4), 501-506 (1997).
Wu, J. M., et al. Lifetime risk of stress urinary incontinence or pelvic organ prolapse surgery. Obstetrics and Gynecology. 123 (6), 1201-1206 (2014).
Kenton, K., Mueller, E. R. The global burden of female pelvic floor disorders. BJU International. 98, 1-7 (2006).
Herschorn, S. Female pelvic floor anatomy The pelvic floor, supporting structures, and pelvic organs. Reviews in Urology. 6, 2-10 (2004).
Jelovsek, J. E., Maher, C., Barber, M. D. Pelvic organ prolapse. The Lancet. 369 (9566), 1027-1038 (2007).
Campbell, R. M. The anatomy and histology of the sacrouterine ligaments. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 59 (1), 1-12 (1950).
Reisenauer, C., et al. The role of smooth muscle in the pathogenesis of pelvic organ prolapse - An immunohistochemical and morphometric analysis of the cervical third of the uterosacral ligament. International Urogynecology Journal and Pelvic Floor Dysfunction. 19 (3), 383-389 (2008).
Lavelle, R. S., Christie, A. L., Alhalabi, F., Zimmern, P. E. Risk of prolapse recurrence after native tissue anterior vaginal suspension procedure with intermediate to long-term followup. Journal of Urology. 195 (4), 1014-1020 (2016).
Jelovsek, J. E., et al. Effect of uterosacral ligament suspension vs sacrospinous ligament fixation with or without perioperative behavioral therapy for pelvic organ vaginal prolapse on surgical outcomes and prolapse symptoms at 5 years in the OPTIMAL randomized clinical trial. JAMA - Journal of the American Medical Association. 319 (15), 1554-1565 (2018).
Bradley, M. S., et al. Vaginal uterosacral ligament suspension: A retrospective cohort of absorbable and permanent suture groups. Female Pelvic Medicine & Reconstructive Surgery. 24 (3), 207-212 (2018).
Cola, A., et al. Native-tissue prolapse repair: Efficacy and adverse effects of uterosacral ligaments suspension at 10-year follow up. International Journal of Gynecology and Obstetrics. , (2022).
Sung, V. W., Washington, B., Raker, C. A. Costs of ambulatory care related to female pelvic floor disorders in the United States. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 202 (5), 1-4 (2010).
Subak, L. L., et al. Cost of pelvic organ prolapse surgery in the United States. Obstetrics and Gynecology. 98 (4), 646-651 (2001).
Siddiqui, N. Y., et al. Mesh sacrocolpopexy compared with native tissue vaginal repair: A systematic review and meta-analysis. Obstetrics & Gynecology. 125 (1), 44-55 (2015).
FDA takes action to protect women's health, orders manufacturers of surgical mesh intended for transvaginal repair of pelvic organ prolapse to stop selling all devices. FDA News Release Available from: https://www.fda.gov/news-events/press-announcements/fda-takes-action-protect-womens-health-orders-manufacturers-surgical-mesh-intended-transvaginal (2019)
Brincat, C. A. Pelvic organ prolapse reconsidering treatment, innovation, and failure. JAMA - Journal of the American Medical Association. 322 (11), 1047-1048 (2019).
Cundiff, G. W. Surgical innovation and the US Food and Drug Administration. Female Pelvic Medicine & Reconstructive Surgery. 25 (4), 263-264 (2019).
Luchristt, D., Weidner, A. C., Siddiqui, N. Y. Urinary basement membrane graft-augmented sacrospinous ligament suspension: a description of technique and short-term outcomes. International Urogynecology Journal. 33 (5), 1347-1350 (2022).
Couri, B. M., et al. Animal models of female pelvic organ prolapse: Lessons learned. Expert Review of Obstetrics and Gynecology. 7 (3), 249-260 (2012).
Mori da Cunha, M. G. M. C., et al. Animal models for pelvic organ prolapse: systematic review. International Urogynecology Journal. 32 (6), 1331-1344 (2021).
Kasabwala, K., Goueli, R., Culligan, P. J. A live porcine model for robotic sacrocolpopexy training. International Urogynecology Journal. 30 (8), 1371-1375 (2019).
Mansoor, A., et al. Development of an ovine model for training in vaginal surgery for pelvic organ prolapse. International Urogynecology Journal. 28 (10), 1595-1597 (2017).
Liang, R., et al. Impact of prolapse meshes on the metabolism of vaginal extracellular matrix in rhesus macaque. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 212 (2), 1-7 (2015).
Johannesson, L., et al. Preclinical report on allogeneic uterus transplantation in non-human primates. Human Reproduction. 28 (1), 189-198 (2013).
Iwanaga, R., et al. Comparative histology of mouse, rat, and human pelvic ligaments. International Urogynecology Journal. 27 (11), 1697-1704 (2016).
National Research Council. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition. , (2011).
Federal Animal Welfare Regulations. National Archives Available from: https://www.ecfr.gov/current/title-9/chapter-l/subchapter-A/part-2/subpart-C/section-2.31 (2022)
Ma, Y., et al. Knockdown of Hoxa11 in vivo in the uterosacral ligament and uterus of mice results in altered collagen and matrix metalloproteinase activity. Biology of Reproduction. 86 (4), 100 (2012).
Moalli, P. A., et al. A rat model to study the structural properties of the vagina and its supportive tissues. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 192 (1), 80-88 (2005).
Yoshida, K., et al. Mechanics of cervical remodelling: Insights from rodent models of pregnancy. Interface Focus. 9 (5), 20190026 (2019).
Christ, G. J., Sharma, P., Hess, W., Bour, R. . Modular biofabrication platform for diverse tissue engineering applications and related method thereof. , (2020).
Smith, K., Christ, G. J. . Incorporation of in vitro double seeding for enhanced development of tissue engineered skeletal muscle implants. , (2019).
Becker, W. R., De Vita, R. Biaxial mechanical properties of swine uterosacral and cardinal ligaments. Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 14 (3), 549-560 (2015).
Donaldson, K., Huntington, A., De Vita, R. Mechanics of uterosacral ligaments: Current knowledge, existing gaps, and future directions. Annals of Biomedical Engineering. 49 (8), 1788-1804 (2021).
Baah-Dwomoh, A., McGuire, J., Tan, T., De Vita, R. Mechanical properties of female reproductive organs and supporting connective tissues: A review of the current state of knowledge. Applied Mechanics Reviews. 68 (6), 1-12 (2016).
Tan, T., Cholewa, N. M., Case, S. W., De Vita, R. Micro-structural and biaxial creep properties of the swine uterosacral-cardinal ligament complex. Annals of Biomedical Engineering. 44 (11), 3225-3237 (2016).
Kurtaliaj, I., Golman, M., Abraham, A. C., Thomopoulos, S. Biomechanical testing of murine tendons. Journal of Visualized Experiments. (152), e60280 (2019).
Griffin, M., et al. Biomechanical characterization of human soft tissues using indentation and tensile testing. Journal of Visualized Experiments. (118), e54872 (2016).
Feola, A., et al. Parity negatively impacts vaginal mechanical properties and collagen structure in rhesus macaques. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 203 (6), 1-8 (2010).
Tan, T., et al. Histo-mechanical properties of the swine cardinal and uterosacral ligaments. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 42, 129-137 (2015).
Abramowitch, S. D., Feola, A., Jallah, Z., Moalli, P. A. Tissue mechanics, animal models, and pelvic organ prolapse: A review. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology. 144, 146-158 (2009).
Lowder, J. L., et al. Adaptations of the rat vagina in pregnancy to accommodate delivery. Obstetrics and Gynecology. 109 (1), 128-135 (2007).
Koebele, S. V., et al. Hysterectomy uniquely impacts spatial memory in a rat model: A role for the nonpregnant uterus in cognitive processes. Endocrinology. 160 (1), 1-19 (2019).
Kafantari, H., et al. Structural alterations in rat skin and bone collagen fibrils induced by ovariectomy. Bone. 26 (4), 349-353 (2000).
Daghma, D. E. S., et al. Computational segmentation of collagen fibers in bone matrix indicates bone quality in ovariectomized rat spine. Journal of Bone and Mineral Metabolism. 36 (3), 297-306 (2018).
Manodoro, S., Frigerio, M., Milani, R., Spelzini, F. Tips and tricks for uterosacral ligament suspension: how to avoid ureteral injury. International Urogynecology Journal. 29 (1), 161-163 (2018).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

186

This article has been published

Video Coming Soon

Keep me updated: