بعد تصوير C.elegane المعالج بالمخدرات ، افتح ملف ND في خادم الصورة J باستخدام المكون الإضافي colocalization وحدد خيار تقسيم الصور في مربع الحوار. يحتوي كل ملف ND على طائرات صور تم التقاطها بثلاثة أطوال موجية وضوء مرئي. العمل مع الصور برايتفيلد والأخضر والأحمر.
قم بإنشاء نسخ مكررة من هذه الصور للحفاظ على الصورة الأصلية دون تغيير من خلال النقر على الصورة وتحديد تكرار أو استخدام اختصار لوحة المفاتيح بالإضافة إلى D.ثم قم بتقليل الخلفية عن طريق إنشاء صورة مكررة أخرى كما هو موضح سابقا. اطرح الخلفية بنصف قطر متداول يبلغ 100 وحدد خيار إنشاء خلفية لإنشاء صورة بخلفية الصورة المحددة. انتقل الآن إلى المعالجة ، وانقر فوق حاسبة الصور واطرح الصورة المكررة الأولى من الصورة المكررة الثانية.
استخدم الصور الناتجة لتحليل colocalization. لاستخدام المكون الإضافي colocalization ، قم بتحويل صور القناة الخضراء والحمراء إلى ثمانية بت بالنقر فوق الصورة ، وتحديد النوع ، متبوعا بثمانية بت. بعد ذلك ، انقر فوق المكونات الإضافية وحدد colocalization.
لقياس التمركز المشترك لإشارات الميتوكوندريا والليزوزوم ، اضبط النسبة على 75٪ القناة الحمراء للعتبة إلى 80.0 ، والقناة الخضراء العتبة إلى 50.0. يتم إنشاء صورة ثنائية ثمانية بت تحتوي على puncta colocalized وتجمع بين الصور الثلاث ذات الثمانية بت في صورة RGB كإخراج. بعد ذلك ، ركز على النقاط الموجودة في عضلة جدار جسم الرأس للديدان عن طريق تحديد المنطقة يدويا وإنشاء قناع بالنقر فوق تحرير وتحديد وإنشاء قناع لتحديد منطقة الاهتمام.
لتحديد الجسيمات في منطقة الاهتمام ، استخدم حاسبة الصور لتحديد الصور ذات الثمانية بتات والصور المقنعة. الاستفادة من العملية واختيار puncta في منطقة الاهتمام توليد صورة مع puncta في منطقة الاهتمام. أخيرا ، لتحليل مساحة الميتوكوندريا والليزوزومات الموضعية ، حدد تحليل ، متبوعا بتحليل الجسيمات وقياس مجموع النقاط بين 0.1625 ميكرومتر مربع وأربعة ميكرومتر مربع.
أظهرت الصور متحدة البؤر لعضلات جدار جسم الرأس للديدان تمركز مشترك للميتوكوندريا والليزوزومات. تسبب VL-850 في انقسام قوي في عضلات جدار جسم رأس الدودة ، مما يشير إلى محفز قوي للميفاجي. كانت قوة الميتوفاجي ل VL-850 مماثلة لقوة FCCP.
