1. إعداد نسيج القولون لGIMM <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإعداد جزء من القولون البعيدة عن مرصد على الحركة المعوية (GIMM) المركز الاول في القولون معزولة في الجليد الباردة حل كريبس (121 ملي مول كلوريد الصوديوم ، و 5.9 ملي بوكل ، 2.5 ملي CaCl 2 ، 1.2 ملم MgCl 2 ، 25 ملم NaHCO 3 ، 1.2 ملي ناه 2 ص 4 ، و 8 ملي الجلوكوز ؛ الهوائية مع 95 ٪ O 2 / 5 ٪ CO 2). واضح بعيدا مساريق المتبقية من الجدار الخارجي وإحداث شق صغير في نهاية المطاف عن طريق الفم حتى يمكن تمييزه عند وضعها في حمام الجهاز. ملاحظة : قد تبقى في الأنسجة حل كريبس المثلج لمدة تصل إلى 2 ساعة قبل التجريب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المقبل ، وضع قنوات تدفق وتدفق في الحمام الجهاز بحيث تكون خارج مجال الكاميرا لمنع التدخل في الحصول على الصور. يروي مستمر مع الجهاز حمام prewarmed (37 درجة مئوية) الاوكسيجين (95 ٪ ، 5 ٪ CO 2) حل كريب وبمعدل تدفق 10 مل / دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقب انتهاء الشفوية مقابل الشرج ، دبوس جزء من القولون البعيدة (ما لا يقل عن 5 سم) على حد سواء في الحمام الجهاز ، مما يتيح قدرا صغيرا من التسيب بحيث يمكن ان تتحرك بحرية الجزء يصل إلى 1 سم في المتوسط . وينبغي وضع نهاية الفم نحو الباحث لسهولة وضع بيليه البراز. وينبغي أن يعلق قولوني شرائح بنفس الطريقة من قبل الباحث نفسه عن كل تجربة ، ضمن مجموعة من التجارب نظرا لأن طول والتوتر في الجزء يؤثر على معدل الحركية الدافعة ، مع امتداد طولي خفض معدل العبور (ديكسون وآخرون. ، 2007). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للإعداد ليوازن ما لا يقل عن 30 دقيقة. </li></ol> 2. إعداد GIMM والحصول على البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في النظام GIMM ، مضاءة الجزء القولون في غرفة نضح من تحتها. يتم وضع كاميرا الفيديو الرقمية مع جهاز كمبيوتر موصول فوق الغرفة. ضمان أن يتم تشغيل كل من مصدر الإضاءة الخفيفة وبرامج GIMM جرا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد إعداد تجربة جديدة في مجال تطبيق برامج GIMM ، والشروع في المحاكمة الأولى من خلال إدخال بيليه الايبوكسي المغلفة البراز في نهاية الجزء الشفوي للشروع في القولون التمعج. انقر على التبديل تبديل الكاميرا على الكمبيوتر لتشغيل الكاميرا وانقر على زر التسجيل لبدء التسجيل. وتسجل حركة بيليه في الاتجاه الشرج بواسطة كاميرا الفيديو ويتم تخزين الأفلام الرقمية على جهاز كمبيوتر لتحليلها لاحقا. بيليه عندما وصلت الى نهاية الجزء القولون ، انقر فوق زر التسجيل لإيقاف التسجيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للحصول على قيمة لمراقبة معدل الدفع ، وتبدأ مع شريحة القولون من الحيوانات صحية وبدون تطبيق المخدرات. 3-5 إجراء التجارب في إعداد واحدة ، مع فترة الاسترداد من 5 دقائق بين كل تشغيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتحديد الآثار المترتبة على ظروف معينة أو المخدرات على حركية القولون ، تؤدي المحاكمات 3-5 / التحضير لكل حالة تجريبية. بالإضافة إلى ذلك ، تنفيذ كل تجربة على خمسة على الاقل من مختلف نقطتين لا يقل عن خمسة حيوانات مختلفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في تحليل الأفلام الرقمية ، ويتم احتساب معدل الدفع بيليه برازي والوقت الذي يستغرقه لبيليه لاجتياز الطول العاشر من الجزء القولون. </li></ol> 3. بناء خرائط Spatiotemporal <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويمكن تحويل ملفات الفيديو الرقمية المكتسبة من تشغيل GIMM الفردية على الخرائط باستخدام برنامج spatiotemporal GIMM المخصصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على المحور الأفقي ، ويتم رسم التغيرات في القطر القولون بمرور الوقت من خلال تحويل صورة من القولون في كل إطار الفيديو إلى صورة ظلية ، وحساب وتحويل القطر على طول النطاق في الرمادي. والنتيجة النهائية هي أن بيليه ومناطق الاسترخاء تظهر سوداء ، في حين تقلص مجالات تظهر بيضاء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويمثل المسافة التي يقطعها لبيليه خلال الجزء القولون على المحور الرأسي. </li></ol> 4. Spatiotemporal خرائط ممثل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المعروضة هنا هي خرائط تظهر spatiotemporal ممثل بيليه في قطاعات حركية القولون تحت ظروف تجريبية مختلفة. و(العمودي) ذ محور يمثل موقف بيليه على مر الزمن ، في حين أن (أفقيا) × محور يمثل المسافة التي تقدم من خلال بيليه الجزء القولون. <img src="/files/ftp_upload/2435/2435fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في خريطة spatiotemporal من القولون التحكم (غير المعالجة ، عادي) ، سوف تقدم خطيا بيليه بمعدل مم 2 ~ / ثانية. في المقابل ، يمكن لإدارة بعض الأدوية أو التهاب في القولون نتيجة اضطراب في أنماط حركية مثل القدرة على الحركة والحركة أوقفت المتعسرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويمكن أيضا أن تكون النتائج من GIMM كما هو مبين الرسوم البيانية ، والذي يمثل المحور الصادي المسافة في ملليمتر سافر من قبل بيليه برازي ومحور س يمثل الوقت بالثواني. على سبيل المثال ، وإدارة DAMGO (D - Ala2 ، N - ME - Phe4 ، الغليسين - ol5) ، وهوالأفيونية μ مستقبلات ناهض ، يؤدي إلى انخفاض في القدرة على الحركة الدافعة في القولون. </li></ol>

<ol>
	<li>Bayliss, W. M., Starling, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+movements+and+innervation+of+the+small+intestine.">The movements and innervation of the small intestine.</a> J of Physiol (Lond). 24, 99-143 .</li><li>Dickson, E. J., Spencer, N. J., Hennig, G. W., Bayguinov, P. O., Ren, J., Heredia, D. J., Smith, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+enteric+occult+reflex+underlies+accommodation+and+slow+transit+in+the+distal+large+bowel.">An enteric occult reflex underlies accommodation and slow transit in the distal large bowel.</a> Gastroenterology. 132, 1912-1924 (2007).</li><li>Foxx-Orenstein, A. E., Jin, J. G., Grider, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=5-HT4+receptor+agonists+and+delta-opioid+receptor+antagonists+act+synergistically+to+stimulate+colonic+propulsion.">5-HT4 receptor agonists and delta-opioid receptor antagonists act synergistically to stimulate colonic propulsion.</a> Am J Physiol. 275, 979-983 (1998).</li><li>Grider, J. R., Foxx-Orenstein, A. E., Jin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=5-Hydroxytryptamine4+receptor+agonists+initiate+the+peristaltic+reflex+in+human,+rat,+and+guinea+pig+intestine.">5-Hydroxytryptamine4 receptor agonists initiate the peristaltic reflex in human, rat, and guinea pig intestine.</a> Gastroenterology. 115, 370-380 (1998).</li><li>Kadowaki, M., Wade, P. R., Gershon, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Participation+of+5-HT3,+5-HT4,+and+nicotinic+receptors+in+the+peristaltic+reflex+of+guinea+pig+distal+colon.">Participation of 5-HT3, 5-HT4, and nicotinic receptors in the peristaltic reflex of guinea pig distal colon.</a> Am J Physiol. 271, 849-857 (1996).</li><li>Krauter, E. M., Strong, D. S., Brooks, E. M., Linden, D. R., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+colonic+motility+and+the+electrophysiological+properties+of+myenteric+neurons+persist+following+recovery+from+trinitrobenzene+sulfonic+acid+colitis+in+the+guinea+pig.">Changes in colonic motility and the electrophysiological properties of myenteric neurons persist following recovery from trinitrobenzene sulfonic acid colitis in the guinea pig.</a> Neurogastroenterol Motil. 19, 990-1000 (2007).</li><li>Langley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Autonomic Nervous System. , (1921).</li><li>Linden, D. R., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+excitability+of+myenteric+AH+neurones+in+the+inflamed+guinea-pig+distal+colon.">Enhanced excitability of myenteric AH neurones in the inflamed guinea-pig distal colon.</a> J Physiol. 547, 589-601 (2003).</li><li>Linden, D. R., Sharkey, K. A., Ho, W., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclooxygenase-2+contributes+to+dysmotility+and+enhanced+excitability+of+myenteric+AH+neurones+in+the+inflamed+guinea+pig+distal+colon.">Cyclooxygenase-2 contributes to dysmotility and enhanced excitability of myenteric AH neurones in the inflamed guinea pig distal colon.</a> J Physiol. 557, 191-205 (2004).</li><li>Linden, D. R., Chen, J. X., Gershon, M. D., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serotonin+availability+is+increased+in+mucosa+of+guinea+pigs+with+TNBS-induced+colitis.">Serotonin availability is increased in mucosa of guinea pigs with TNBS-induced colitis.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 285, 207-216 (2003).</li><li>Linden, D. R., Couvrette, J. M., Ciolino, A., McQuoid, C., Blaszyk, H., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indiscriminate+loss+of+myenteric+neurones+in+the+TNBS-inflamed+guinea-pig+distal+colon.">Indiscriminate loss of myenteric neurones in the TNBS-inflamed guinea-pig distal colon.</a> Neurogastroenterol Motil. 17, 751-760 (2005).</li><li>Lomax, A. E., Mawe, G. M., Sharkey, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+facilitation+and+enhanced+neuronal+excitability+in+the+submucosal+plexus+during+experimental+colitis+in+guinea-pig.">Synaptic facilitation and enhanced neuronal excitability in the submucosal plexus during experimental colitis in guinea-pig.</a> J Physiol. 564, 863-875 (2005).</li><li>Lomax, A. E., O'Hara, J. R., Hyland, N. P., Mawe, G. M., Sharkey, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+alterations+to+enteric+neural+signaling+in+the+guinea+pig+colon+following+the+resolution+of+colitis.">Persistent alterations to enteric neural signaling in the guinea pig colon following the resolution of colitis.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 292, 482-491 (2007).</li><li>Strong, D. S., Cornbrooks, C. F., Roberts, J. A., Hoffman, J. M., Sharkey, K. A., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purinergic+neuromuscular+transmission+is+selectively+attenuated+in+ulcerated+regions+of+inflamed+guinea+pig+distal+colon.">Purinergic neuromuscular transmission is selectively attenuated in ulcerated regions of inflamed guinea pig distal colon.</a> J Physiol. 588, 847-859 (2010).</li><li>Wade, P. R., Chen, J., Jaffe, B., Kassem, I. S., Blakely, R. D., Gershon, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+and+function+of+a+5-HT+transporter+in+crypt+epithelia+of+the+gastrointestinal+tract.">Localization and function of a 5-HT transporter in crypt epithelia of the gastrointestinal tract.</a> J Neurosci. 16, 2352-2364 (1996).</li><li>Wood, M. J., Hyman, N. H., Mawe, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effects+of+Daikenchuto+(DKT)+on+Propulsive+Motility+in+the+Colon.">The Effects of Daikenchuto (DKT) on Propulsive Motility in the Colon.</a> J Surg Res. , (2009).</li></ol>

وقد رعت إنتاج هذا الفيديو عن طريق البحث Catamount والتنمية ، والمؤتمر الوطني العراقي ، التي تنتج الأداة المستخدمة في هذه المقالة.

وكان أول وصف العصبية الحركية بوساطة الدافعة في القناة الهضمية أكثر من قرن من الزمان والتي بايليس ستارلينغ (بايليس والزرزور ، 1899). أدت هذه الملاحظة إلى تسمية أعصاب الأمعاء والجهاز العصبي المعوي (ENS) ، وتقسيم واضح للنظام العصبي المستقل (لانغلي ، 1921). التمعج المعوية العصبية ينطوي تمتد و / أو التحفيز المخاطية عند نقطة معينة ، وتقلصات بوساطة منعكس أعلاه ، أو عن طريق الفم ل، ومستوى التحفيز والاسترخاء في الاتجاه مجافي الفم. والنتيجة هي توليد ضغوط الانحدار الذي يدفع محتويات اللمعية في الاتجاه عن طريق الفم لمجافي الفم. في الامعاء الصغيرة من مجموعة متنوعة من الأنواع ، والفئران في الأمعاء كبيرة ، ويمكن تفعيلها من تقلصات موجات تمعجية بالتسريب من السوائل في التجويف قطاعات من الامعاء. في القولون خنزير غينيا البعيدة ، يمكن إدراج الكريات البرازية طبيعية أو اصطناعية في نهاية الفم من القولون ، ويمكن رصد التقدم المحرز على طول جزء من القولون بسهولة. وهكذا ، فإن القولون خنزير غينيا القاصي يوفر مقايسة بسيطة ومفيدة للتحقيق في حركية الدافعة في الأمعاء. التمعج هو منعكس العصبية المعقدة التي تنطوي على عدد من المركبات وneuroactive المستقبلات. ونتيجة لذلك ، والمركبات التي تؤثر على النقل العصبي في ENS تؤثر على معدل الحركية الدافعة. وتشارك السيروتونين ، الذي صدر في المقام الأول من خلايا معوية أليفة الكروم في الغشاء المخاطي في الأمعاء ، والشروع في منعكس تمعجية. باستخدام خنزير غينيا القاصي القولون ، Grider وزملاؤه أظهرت أن تتعزز القدرة على الحركة الدافعة من الادارة intralumenal 5 - HT مستقبلات 4 (فوكس - اورنشتاين وآخرون ، 1998 ؛. Grider وآخرون ، 1998) ، في حين حمام تطبيق 5 HT - 3 و 5 - HT مستقبلات 4 يقلل من نسبة الدفع (Kadowaki وآخرون ، 1996 ؛ ليندن وآخرون ، 2003b). وعلاوة على ذلك ، وتثبيط للنقل السيروتونين مع مثبطات امتصاص السيروتونين الانتقائية (اس اس اراي) يزيد التمعج في تركيزات منخفضة ، بعد الانخفاضات التمعج في تركيزات أعلى ، على الأرجح بسبب الحساسية من مستقبلات 5 - HT (Kadowaki وآخرون ، 1996 ؛. واد وآخرون ، 1996). الجزيئات الأخرى التي تساهم في إشارة حركية خنزير غينيا الدافعة تشمل أستيل يتصرف في المستقبلات النيكوتينية ، وهو الوسيط الرئيسي للإشارات interneuronal في الامعاء. منع انتقال متشابك مع مستقبلات النيكوتين هيكساميثونيوم النقصان بيليه الدفع بتركيزات عالية ، في حين أن تركيزات أقل لا تؤثر على معدل الدفع (Kadowaki وآخرون ، 1996). المواد الأفيونية ، ومستقبلات المواد الأفيونية ، والتي كانت معروفة منذ فترة طويلة أن يكون لها تأثيرات مثبطة على حركية الجهاز الهضمي ، وانخفاض كريات الدفع في النموذج خنزير غينيا الحركية الدافعة (فوكس - اورنشتاين وآخرون ، 1998 ؛. وود وآخرون ، 2009). ومن المثير للاهتمام ، daikenchuto ، والادوية العشبية التقليدية اليابانية المستخدمة سريريا لعلاج القيء وآلام المعدة ، والحركة المختلين ، يقلل من نسبة الدفع بيليه عندما تدار النالوكسون مع خصم الأفيونية ، وعندما تدار وحدها ، والنتائج العكسية في التمعج (وود وآخرون ، 2009). هذه النتائج توضح مدى فائدة من طراز خنزير غينيا الحركية الدافعة لتقييم المساهمات من المركبات المختلفة والمستقبلات على أنماط حركية القولون. وقد أظهر عدد من الدراسات أن التهاب يؤدي إلى تغييرات في الخصائص الكهربائية ومتشابك من الخلايا العصبية القولون (ليندن وآخرون ، 2003a ؛. وماكس وآخرون ، 2005) ، وأن هذه التغييرات يمكن أن تستمر لأسابيع بعد الشفاء من الالتهاب (Krauter . وآخرون ، 2007 ؛ وماكس وآخرون ، 2007). ويمكن تحقيق تأثير التهاب القولون الناجم عن التغييرات على المرونة العصبية الحركية الدافعة في القولون خنزير غينيا البعيدة باستخدام نظام GIMM. هذا النظام له العديد من المزايا أكثر من الطريقة التقليدية لرصد حركية القولون ، الذي يقيم الحركية الدافعة من خلال قياس الوقت ببساطة بيليه برازي يسافر مسافة معينة. وقد بينت الدراسات السابقة التي يسببها التهاب اللدونة العصبية في القولون هناك انخفاض في سرعة الدفع بيليه (ليندن وآخرون ، 2003a ؛. يندن وآخرون ، 2005) ، وبعد مزيد من التحقيقات الأخيرة التي تستخدم هذا النظام وكشفت أكثر GIMM تغييرات معقدة (قوي وآخرون ، 2010). على سبيل المثال ، انخفض معدل الدفع بيليه في المناطق المتقرحة من القولون القاصي ملتهبة ، ومع ذلك تتسارع الحركية في المناطق المجاورة ، وهي الظاهرة التي لم يكن معترف بها من قبل في وقت سابق ان الطريقة &quot;ساعة توقيت&quot;. وقد أظهرت الدراسات الأخرى التي يمكن استعادة dysmotility خلال المرحلة النشطة من التهاب مع تثبيط COX - 2 (ليندن وآخرون ، 2004) ، والقدرة على الحركة بعد أن استمرت إلى ما بعد تعديلهاالقرار هو الالتهاب COX - 2 الأحرف (Krauter وآخرون ، 2007). علاوة على ذلك ، في هذه الدراسات في وقت لاحق ، كشفت الخرائط spatiotemporal التي تم إنشاؤها بواسطة نظام GIMM نمط تدريجي في القدرة على الحركة القولون الذي لوحظ في مرحلة ما بعد التهاب الحيوانات التي تساهم في انخفاض معدلات الدفع. في الختام ، خنزير غينيا القاصي فحص القولون الحركية الدافعة يمثل إنتاجية عالية وسيلة لقياس آثار اختبار المركبات والحالات المرضية في حركية القولون ، وعلاوة على ذلك ، فإن النظام يوفر GIMM نهج بسيط ومباشر لتقييم القدرة على الحركة الدافعة القولون في المختبر. أنها تسمح لقياسات مستمرة لدفع بيليه ، فضلا عن توليد خرائط spatiotemporal لدراسة أنماط النشاط العفوي. بالمقارنة مع الطرق التقليدية ، ويمكن أن تسفر أيضا ظاهرة أكثر تعقيدا التي يمكن quantitated reanalyzed وسبل متعددة كما يتم حفظ الملفات الرقمية إلى النظام ويمكن الوصول إليها بسهولة.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Krebs&#x2019; Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isoflurane</td>
<td>Anesthesia</td>
<td>Webster Veterinary</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Epoxy-coated fecal pellet </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>native guinea pig pellet dried and epoxy (black nail polish) coated</td>
</tr>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micro Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stainless Steel Pins</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Beakers</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>500 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Gas Tank</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>95% O2/5% CO2</td>
</tr>
<tr>
<td>Timer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gastrointestinal Motility Monitor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Catamount Research and Development</td>
<td>&nbsp;</td>
<td><a href="http://www.catamountresearch.com/products/gimm.htm">http://www.catamountresearch.com/products/gimm.htm</a></td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

gastrointestinal motility monitor (gimm)

مراقب على الحركة المعوية (GIMM ؛ Catamount بحوث والتنمية ؛ سانت البانز ، VT) هو النظام في المختبر الذي يراقب حركية الدافعة في قطاعات معزولة من القولون خنزير غينيا القاصي. نظام كامل يتكون من جهاز كمبيوتر ، وكاميرا الفيديو ، وحمام مضيئة الجهاز ، وتحوي حمام ماء ساخن تعميم المضخات ، وبرامج مخصصة GIMM لتسجيل وتحليل البيانات. بالمقارنة مع الطرق التقليدية لرصد التمعج القولون ، ونظام يسمح للGIMM التقييم الكمي المستمر في القدرة على الحركة. واستحم القولون خنزير غينيا القاصي تحسنت في حل كريبس الاوكسيجين ، ويتم دفع البراز الكريات إدراجها في نهاية الفم على طول جزء من القولون بمعدل حوالي 2 ملم / ثانية. يتم التقاط الأفلام الدعوى بيليه البراز على طول هذا الجزء ، ويمكن استخدام البرنامج GIMM تتبع التقدم المحرز في بيليه البراز. ويمكن الحصول على معدلات الحركية الدافعة لقطاع بأكمله أو عن أي منطقة معينة من الفائدة. بالإضافة إلى تحليل أنماط حركية بلعة التي يسببها ، ويمكن بناؤها من الخرائط spatiotemporal شرائح الفيديو التي تم التقاطها لتقييم عفوية أنماط النشاط الحركي. تطبيقات هذا النظام تشمل تقييم التأثيرات الدوائية لمضادات مستقبلات وعلى حركية الدافعة ، فضلا عن تقييم التغيرات التي تنجم عن الظروف الفيزيولوجية المرضية ، مثل التهاب أو الاجهاد. وخنزير غينيا القاصي فحص القولون الحركية الدافعة ، وذلك باستخدام نظام GIMM ، واضحة وبسيطة للتعلم ، وأنه يوفر طريقة موثوق بها وقابلة للتكرار لتقييم القدرة على الحركة الدافعة.

Watch this Scientific Journal Video about Gastrointestinal Motility Monitor GIMM at JoVE.com

Gastrointestinal Motility Monitor GIMM

تقييم حركية القولون في القولون خنزير غينيا القاصي مع مراقب على الحركة المعوية (GIMM) هو نهج واضحة وبسيطة لمعرفة الكمية لتقييم القدرة على الحركة الدافعة في القناة الهضمية.

مراقب على الحركة المعوية (GIMM)

The Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM; Catamount Research and Development; St. Albans, VT) is an in vitro system that monitors propulsive motility ...

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Biology

Unit 1

Gastrointestinal Motility Monitor (GIMM)

Drugs Affecting Gastrointestinal Motility

SCIENTISTS IN ACTION

30.5K Views.  The University of Vermont. تقييم حركية القولون في القولون خنزير غينيا القاصي مع مراقب على الحركة المعوية (GIMM) هو نهج واضحة وبسيطة لمعرفة الكمية لتقييم القدرة على الحركة الدافعة في القناة الهضمية.

Video: Gastrointestinal Motility Monitor GIMM

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is largely due to the difficulty with which one can create a cell-compatible and steady microenvironment using conventional microfabrication techniques and materials. We address this problem via the introduction of a novel microfabrication material, agarose gel, as the base material for the microfluidic device. Agarose gel is highly malleable, and permeable to gas and nutrients necessary for cell survival, and thus an ideal material for cell-based assays. We have shown previously that agarose gel based devices have been successful in studying bacterial and neutrophil cell migration2. In this report, three parallel microfluidic channels are patterned in an agarose gel membrane of about 1mm thickness. Constant flows with media/buffer are maintained in the two side channels using a peristaltic pump. Cells are maintained in the center channel for observation. Since the nutrients and chemicals in the side channels are constantly diffusing from the side to center channel, the chemical environment of the center channel is easily controlled via the flow along the side channels. Using this device, we demonstrate that the movement of neural stem cells can be monitored optically with ease under various chemical conditions, and the experimental results show that the over expression of epidermal growth factor receptors (EGFR) enhances the motility of neural stem cells. Motility of neural stem cells is an important biomarker for assessing cells aggressiveness, thus tumorigenic factor3. Deciphering the mechanism underlying NSC motility will yield insight into both disorders of neural development and into brain cancer stem cell invasion.

We demonstrate that the over expression of epidermal growth factor receptors (EGFR) enhances the motility of neural stem cells(NSCs) using a novel agarose gel based microfluidic device. This technology can be readily adaptable to other mammalian cell systems where cell sources are scarce, such as human neural stem cells, and the turn around time is critical.

تقييم العصبية على الحركة باستخدام الخلايا الجذعية جل المستندة Agarose الأجهزة ميكروفلويديك

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is ...

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary clearance function has been established. Freshly harvested mouse trachea is cut longitudinally through the trachealis muscle and mounted in a shallow walled chamber on a glass-bottomed dish. The trachea sample is positioned along its long axis to take advantage of the trachealis muscle to curl longitudinally. This allows imaging of ciliary motion in the profile view along the entire tracheal length. Videos at 200 frames/sec are obtained using differential interference contrast microscopy and a high speed digital camera to allow quantitative analysis of cilia beat frequency and ciliary waveform. With the addition of fluorescent beads during imaging, cilia generated fluid flow also can be determined. The protocol time spans approximately 30 min, with 5 min for chamber preparation, 5-10 min for sample mounting, and 10-15 min for videomicroscopy.

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

An easy and reliable technique for visualizing and quantifying airway cilia motility and cilia generated flow using mouse trachea is described. This technique can be modified to determine how a wide range of factors influence cilia motility, including pharmacological agents, genetic factors, environmental exposures, and/or mechanical factors such as mucus load.

طريقة السابقين فيفو التصوير عالية الدقة في القدرة على الحركة الأهداب في القوارض مجرى الهواء الظهارة

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative  analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary  ...

Preparation, Imaging, and Quantification of Bacterial Surface Motility Assays

Bacterial surface motility, such as swarming, is commonly examined in the laboratory using plate assays that necessitate specific concentrations of agar and sometimes inclusion of specific nutrients in the growth medium. The preparation of such explicit media and surface growth conditions serves to provide the favorable conditions that allow not just bacterial growth but coordinated motility of bacteria over these surfaces within thin liquid films. Reproducibility of swarm plate and other surface motility plate assays can be a major challenge. Especially for more &#8220;temperate swarmers&#8221; that exhibit motility only within agar ranges of 0.4%-0.8% (wt/vol), minor changes in protocol or laboratory environment can greatly influence swarm assay results. &#8220;Wettability&#8221;, or water content at the liquid-solid-air interface of these plate assays, is often a key variable to be controlled. An additional challenge in assessing swarming is how to quantify observed differences between any two (or more) experiments. Here we detail a versatile two-phase protocol to prepare and image swarm assays. We include guidelines to circumvent the challenges commonly associated with swarm assay media preparation and quantification of data from these assays. We specifically demonstrate our method using bacteria that express fluorescent or bioluminescent genetic reporters like green fluorescent protein (GFP), luciferase (lux operon), or cellular stains to enable time-lapse optical imaging. We further demonstrate the ability of our method to track competing swarming species in the same experiment.

Swarming motility is influenced by physical and environmental factors. We describe a two-phase protocol and guidelines to circumvent the challenges commonly associated with swarm assay preparation and data collection. A macroscopic imaging technique is employed to obtain detailed information on swarm behavior that is not provided by current analysis techniques.

التحضير والتصوير، والكمي لالسطحية الجرثومي على الحركة فحوصات

Bacterial surface motility, such as swarming, is commonly examined in the laboratory using plate assays that necessitate specific concentrations of agar ...

Measurement of Larval Activity in the Drosophila Activity Monitor

Drosophila larvae are used in many behavioral studies, yet a simple device for measuring basic parameters of larval activity has not been available. This protocol repurposes an instrument often used to measure adult activity, the TriKinetics Drosophila activity monitor (MB5 Multi-Beam Activity Monitor) to study larval activity. The instrument can monitor the movements of animals in 16 individual 8 cm glass assay tubes, using 17 infrared detection beams per tube. Logging software automatically saves data to a computer, recording parameters such as number of moves, times sensors were triggered, and animals&#8217; positions within the tubes. The data can then be analyzed to represent overall locomotion and/or position preference as well as other measurements. All data are easily accessible and compatible with basic graphing and data manipulation software. This protocol will discuss how to use the apparatus, how to operate the software and how to run a larval activity assay from start to finish.

Measurement of Larval Activity in the Drosophila Activity Monitor

This report describes a method for measuring Drosophila larval activity using the TriKinetics Drosophila Activity Monitor. The device employs infrared beams to detect movements of up to 16 individual animals. Data can be analyzed to represent motion parameters including rates and the positions of the animals within the assay chambers.

قياس اليرقات آخر في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; مراقبة النشاط

Drosophila larvae are used in many behavioral studies, yet a simple device for measuring basic parameters of larval activity has not been available. This ...

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, and membrane potential. All of these approaches depend on measurement of activity at one or multiple locations along the gut simultaneously which are then interpreted to provide a sense of overall motility patterns. Recently, the development of video recording and spatiotemporal mapping (STmap) techniques have made it possible to observe and analyze complex patterns in ex vivo whole segments of colon and intestine. Once recorded and digitized, video records can be converted to STmaps in which the luminal diameter is converted to grayscale or color [called diameter maps (Dmaps)]. STmaps can provide data on motility direction (i.e., stationary, peristaltic, antiperistaltic), velocity, duration, frequency and strength of contractile motility patterns. Advantages of this approach include: analysis of interaction or simultaneous development of different motility patterns in different regions of the same segment, visualization of motility pattern changes over time, and analysis of how activity in one region influences activity in another region. Video recordings can be replayed with different timescales and analysis parameters so that separate STmaps and motility patterns can be analyzed in more detail. This protocol specifically details the effects of intraluminal fluid distension and intraluminal stimuli that affect motility generation. The use of luminal receptor agonists and antagonists provides mechanistic information on how specific patterns are initiated and how one pattern can be converted into another pattern. The technique is limited by the ability to only measure motility that causes changes in luminal diameter, without providing data on intraluminal pressure changes or muscle tension, and by the generation of artifacts based upon experimental setup; although, analysis methods can account for these issues. When compared to previous techniques the video recording and STmap approach provides a more comprehensive understanding of gastrointestinal motility.

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Recently available video recording and spatiotemporal mapping (STmap) techniques make it possible to visualize and quantify both propagating and mixing patterns of intestinal motility. The goal of this protocol is to explain the generation and analysis of STmaps using the GastroIntestinal Motility Monitoring (GIMM) system.

رسم الخرائط الزمانية المكانية في القدرة على الحركة في<em&gt; السابقين فيفو</em&gt; الاستعدادات للأمعاء

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, ...

A High Resolution Method to Monitor Phosphorylation-dependent Activation of IRF3

The IRF3 transcription factor is critical for the first line of defense against pathogens mainly through interferon &#946; and antiviral gene expression. A detailed analysis of IRF3 activation is essential to understand how pathogens induce or evade the innate antiviral response. Distinct activated forms of IRF3 can be distinguished based on their phosphorylation and monomer vs dimer status. In vivo discrimination between the different activated species of IRF3 can be achieved through the separation of IRF3 phosphorylated forms based on their mobility shifts on SDS-PAGE. Additionally, the levels of IRF3 monomer and dimer can be monitored using non-denaturing electrophoresis. Here, we detail a procedure to reach the highest resolution to gain the most information regarding IRF3 activation status. This is achieved through the combination of a high resolution SDS-PAGE and a native-PAGE coupled to immunoblots using multiple total and phosphospecific antibodies. This experimental strategy constitutes an affordable and sensitive approach to acquire all the necessary information for a complete analysis of the phosphorylation-mediated activation of IRF3.

Here we describe a procedure allowing a detailed analysis of the phosphorylation-dependent activation of the IRF3 transcription factor. This is achieved through the combination of a high resolution SDS-PAGE and a native-PAGE coupled to immunoblots using multiple phosphospecific antibodies.

A عالية الدقة الطريقة لرصد تفعيل الفسفرة التي تعتمد من IRF3

The IRF3 transcription factor is critical for the first line of defense against pathogens mainly through interferon &#946; and antiviral gene expression. ...

Utilizing pHluorin-tagged Receptors to Monitor Subcellular Localization and Trafficking

Understanding membrane protein trafficking, assembly, and expression requires an approach that differentiates between those residing in intracellular organelles and those localized on the plasma membrane. Traditional fluorescence-based measurements lack the capability to distinguish membrane proteins residing in different organelles. Cutting edge methodologies transcend traditional methods by coupling pH-sensitive fluorophores with total internal reflection fluorescence microscopy (TIRFM). TIRF illumination excites the sample up to approximately 150 nm from the glass-sample interface, thus decreasing background, increasing the signal to noise ratio, and enhancing resolution. The excitation volume in TIRFM encompasses the plasma membrane and nearby organelles such as the peripheral ER. Superecliptic pHluorin (SEP) is a pH sensitive version of GFP. Genetically encoding SEP into the extracellular domain of a membrane protein of interest positions the fluorophore on the luminal side of the ER and in the extracellular region of the cell. SEP is fluorescent when the pH is greater than 6, but remains in an off state at lower pH values. Therefore, receptors tagged with SEP fluoresce when residing in the endoplasmic reticulum (ER) or upon insertion in the plasma membrane (PM) but not when confined to a trafficking vesicle or other organelles such as the Golgi. The extracellular pH can be adjusted to dictate the fluorescence of receptors on the plasma membrane. The difference in fluorescence between TIRF images at neutral and acidic extracellular pH for the same cell corresponds to a relative number of receptors on the plasma membrane. This allows a simultaneous measurement of intracellular and plasma membrane resident receptors. Single vesicle insertion events can also be measured when the extracellular pH is neutral, corresponding to a low pH trafficking vesicle fusing with the plasma membrane and transitioning into a fluorescent state. This versatile technique can be exploited to study localization, expression, and trafficking of membrane proteins.

Labeling the extracellular domain of a membrane protein with a pH sensitive fluorophore, superecliptic pHluorin (SEP), allows subcellular localization, expression, and trafficking to be determined. Imaging SEP-labeled proteins with total internal reflection fluorescence microscopy (TIRFM) enables the quantification of protein levels in the peripheral ER and plasma membrane.

باستخدام مستقبلات الموسومة pHluorin لمراقبة التحت خلوية التعريب والاتجار

Understanding membrane protein trafficking, assembly, and expression requires an approach that differentiates between those residing in intracellular ...

Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy

Lymph nodes (LNs) are organs spread within the body, where the innate immune responses can connect with the adaptive immunity. In fact, LNs are strategically interposed in the path of the lymphatic vessels, allowing intimate contact of tissue antigens with all resident immune cells in the LN. Thus, understanding the cellular composition, distribution, location and interaction using ex vivo whole LN imaging will add to the knowledge on how the body coordinates local and systemic immune responses. This protocol shows an ex vivo imaging strategy following an in vivo administration of fluorescent-labeled antibodies that allows a very reproducible and easy-to-perform methodology by using conventional confocal microscopes and stock reagents. Through subcutaneous injection of antibodies, it is possible to label different cell populations in draining LNs without affecting tissue structures that can be potentially damaged by a conventional immunofluorescence microscopy technique.

This protocol describes a technique to image different cell populations in draining lymph nodes without alterations in the organ structure.

تصور بنية العقدة الليمفاوية وتوطين الخلايا باستخدام الفحص المجهري السابق فيفيفو

Lymph nodes (LNs) are organs spread within the body, where the innate immune responses can connect with the adaptive immunity. In fact, LNs are ...

Measuring Crop Motility and Food Passaging in Drosophila

Most animals use the gastrointestinal (GI) tract to digest food. The movement of the ingested food in the GI tract is essential for nutrient absorption. Disordered GI motility and gastric emptying cause multiple diseases and symptoms. As a powerful genetic model organism, Drosophila can be used in GI motility research. The Drosophila crop is an organ that contracts and moves food into the midgut for further digestion, functionally similar to a mammalian stomach. Presented is a protocol to study Drosophila crop motility using simple measurement tools. A method for counting crop contractions to evaluate crop motility and a method for detecting the distribution of food dyed blue between the crop and gut using a spectrophotometer to investigate the effect of the crop on food passaging is described. The method was used to detect the difference in crop motility between control and nprl2 mutant flies. This protocol is both cost-efficient and highly sensitive to crop motility.

Measuring Crop Motility and Food Passaging in Drosophila

The goal of this protocol is to measure crop contraction and quantify food distribution in the Drosophila gut.

قياس حركية المحاصيل والطعام في Drosophila

Most animals use the gastrointestinal (GI) tract to digest food. The movement of the ingested food in the GI tract is essential for nutrient absorption. ...

Using Real-Time Cell Metabolic Flux Analyzer to Monitor Osteoblast Bioenergetics

Bone formation by osteoblasts is an essential process for proper bone acquisition and bone turnover to maintain skeletal homeostasis, and ultimately, prevent fracture. In the interest to both optimize peak bone mass and combat various musculoskeletal diseases (i.e., post-menopausal osteoporosis, anorexia nervosa, type 1 and 2 diabetes mellitus), incredible efforts have been made in the field of bone biology to fully characterize osteoblasts throughout their differentiation process. Given the primary role of mature osteoblasts to secrete matrix proteins and mineralization vesicles, it has been noted that these processes take an incredible amount of cellular energy, or adenosine triphosphate (ATP). The overall cellular energy status is often referred to as cellular bioenergetics, and it includes a series of metabolic reactions that sense substrate availability to derive ATP to meet cellular needs. Therefore, the current method details the process of isolating primary, murine bone marrow stromal cells (BMSCs) and monitoring their bioenergetic status using the Real-time cell metabolic flux analyzer at various stages in osteoblast differentiation. Importantly, these data have demonstrated that the metabolic profile changes dramatically throughout osteoblast differentiation. Thus, using this physiologically relevant cell type is required to fully appreciate how a cell's bioenergetic status can regulate the overall function.

Real-time cell metabolic flux assay measures the oxygen consumption rate and extracellular acidification rate, which corresponds to mitochondrial and glycolytic adenosine triphosphate production, using pH and oxygen sensors. The manuscript explains a method to understand the energy status of osteoblasts and the characterization and interpretation of the cellular bioenergetic status.

استخدام محلل التدفق الأيضي للخلايا في الوقت الفعلي لمراقبة الطاقة الحيوية لمنطقة العظام

Bone formation by osteoblasts is an essential process for proper bone acquisition and bone turnover to maintain skeletal homeostasis, and ultimately, ...