نود أن نشكر مارك ليونارد من وسائل الإعلام ستوديو كارلتون غامرة للحصول على المساعدة من الخبراء التقنيين في إنتاج وتحرير الفيديو والدكتور مارتن برتراند غامرة من وسائل الإعلام كارلتون مختبر التجديد استوديو / العصبية للمساعدة نموذج البصرية. الكتاب الامتنان على مشورة الخبراء من الدكتور مارلين Keaney وجميع العاملين معها مخصص في جامعة أوتاوا رعاية الحيوان والخدمات البيطرية. وقد تم تمويل هذا العمل من قبل المعهد الكندي للبحوث الصحية (CIHR، MOP 62826) لSALB، ومعهد CIHR من الشيخوخة ومبادرة استراتيجية التدريب في البحوث الصحية / برنامج تدريبي في CIHR Lipidomics الاعصاب (96121 TGF) لSALB وSF، المؤسسة الكندية للإبداع لSF، أونتاريو الابتكار الاستئماني لSF، و Autodesk البحوث إلى SF. ACM يتلقى بانتينغ CIHR وجائزة أفضل الدكتوراه. NV يتلقى زمالة ما بعد المهنية من معهد الشيخوخة وCIHR برنامج التدريب في Lipidomics الاعصاب.

1. إعداد الكواشف <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لغسل المهبل معقم، الأوتوكلاف الماء المقطر مزدوجة ([ده 2 O) ومخزن في حاوية مغلقة بإحكام في درجة حرارة الغرفة لحين الحاجة إليها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتقييم الخلوي، إضافة 0.1 غرام من مسحوق الكريستال البنفسجي إلى 100 ​​مل من DDH 2 O. تخلط جيدا. ويمكن تخزين الكريستال البنفسجي وصمة عار (0.1٪) في حاوية مغلقة بإحكام في درجة حرارة الغرفة لحين الحاجة إليها. </li></ol> 2. خلايا المهبل جمع (الغسل المهبلي) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع لمبة اللاتكس على نهاية تلميح 200 ميكرولتر معقمة ووضع ما يقرب من 100 ميكرولتر من معقمة [ده 2 O باستخدام التدرج على الطرف كمبدأ توجيهي الحجم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رفع الماوس للخروج من قفص لها ومكانها على النطاط قفص (غطاء) مع نهاية لها هند / الخلف نحو لكم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نتشبث الذيل ورفع النهاية الخلفية. سوف الماوس الآن فقط لها الكفوف أمام استيعاب النطاط. في هذه المرحلة قد الماوس التبول. إذا كان الأمر كذلك، انتظر حتى يتوقف التبول. ينبغي أن يكون هناك ترك البول عند مدخل قناة المهبل، قد تحتاج إلى شطف مع افتتاح الزائدة O 2 DDH باستخدام تلميح منفصلة (أي ليس تلميح الخاص بك جمع العينات). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع نهاية الطرف DDH O مليئة 2 في افتتاح قناة المهبل مع الحرص على عدم اختراق فتحة المهبل و(وعنق الرحم) التحفيز يمكن أن تحدث في الفئران 1،2 حمل كاذب. التقارير الأخيرة تشير الفئران هي أقل عرضة لهذا الغرض مع ذلك ينبغي الحرص على تقليل درجة الغزو في التحليلات المتكررة 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خفض بلطف لمبة لطرد ما بين ربع إلى نصف حجم الماء (~ 25-50 ميكرولتر) في افتتاح قناة المهبل. وهذه السوائل نضح تلقائيا في القناة دون الإدراج الإكراميات. الافراج ببطء الضغوط التي تمارس على لمبة. فإن السائل الانسحاب الى داخل الحافة. تجنب الضغط الإفراج بسرعة كبيرة جدا لمنع تطلع السوائلفي لمبة. وهناك معلومات قد تكون مفيدة تمت تصفيتها لهذا الغرض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة السابقة مرة 4-5 باستخدام نفس الطرف، لمبة، والسائل للحصول على عدد كاف من الخلايا في عينة واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع السائل على شريحة زجاجية، والسماح للتشويه حتى يجف تماما في درجة حرارة الغرفة. مرة واحدة جافة، يمكن ملطخة هذه المسحات ودقي على الفور أو تخزينها وملطخة في وقت لاحق. </li></ol> 3. تلوين الخلوي باستخدام كريستال بنفسجي * 4 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الشريحة الجافة في وعاء coplin (أو غيرها من السفن تلطيخ مقارنة) التي تحتوي على الكريستال البنفسجي وصمة عار لمدة 1 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة لجرة coplin ثانية تحتوي على DDH 2 O. غسل الشريحة مع DDH 2 O لمدة 1 دقيقة. تكرار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الزائدة DDH 2 O من حواف الشريحة مع الأنسجة منديل الخفيف واجب، وتجنب الاتصال مع مسحة الملون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة ما يقرب من 15 ميكرولتر من الجلسرين على رأس تشويه والغطاءزلة. وبدلا من ذلك، يمكن استخدام الكواشف الأخرى النسيجية تصاعد للحصول على أكثر ديمومة، وعدم نشرها وصمة عار. </li></ol> * والتلوين بطريقة وصفها هنا هو أبسط الإجراءات التي يمكن القيام بها في أي مختبر. أساليب أخرى يمكن تقديم تفاصيل إضافية. على سبيل المثال، وذلك باستخدام تلطيخ بابانيكولاو، يمكن التمييز بين نضج الخلايا الظهارية خلايا الأنوية مع أقل نضجا الملون خلايا ناضجة الفيروز وأكثر الوردي أو البرتقالي الملون. ويمكن استخدام هذه الاختلافات لتنظيم مقدمات الوداق وقت مبكر أو متأخر .. 4 4. علم الخلايا المهبلية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دراسة مسحة تحت المجهر ضوء لتحديد أنواع الخلايا الحالية. وينبغي أن يتم الفحص المجهري مباشرة بعد تلطيخ كما البنفسجي الكريستال ونشر من الخلايا مع مرور الوقت عند استخدام الجلسرين لcoverslipping. وينبغي اتخاذ Photomicrographs في وقت لتوثيق تحليل الخلايا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبدأ من خلال النظر في entirتشويه الإلكتروني على أقل التكبير. تحديد منطقة ممثل والانتقال إلى أعلى التكبير. سترى الخلايا الظهارية الحرشفية متقرن، الكريات البيض، و / أو الخلايا الظهارية الأنوية (النتائج ممثل، الشكل 1A-C). ونسبة الخلايا الحالية تسمح لك لتحديد المرحلة دقي من الماوس في وقت جمع العينات (النتائج ممثل، الشكل 1D-G) وضعها على الفور الهرمونية (المناقشة، الشكل 2). </li></ol> 5. ممثل النتائج علم الخلايا: يمكن الكشف عن ثلاثة أنواع الخلايا الأولية في عينات مسحة مهبلية: (1) الخلايا الظهارية الأنوية (الشكل 1A)، (2) الخلايا الظهارية الحرشفية متقرن (1B الشكل)، و (3) الكريات البيض (الشكل 1C). الخلايا الظهارية الأنوية لها السيتوبلازم الملون طفيفة، قتامة غشاء البلازما الملون، ونواة بيضاوية ( <strاونج&gt; الشكل 1A). الخلايا الظهارية الحرشفية متقرن ملطخة بشكل موحد، وأكثر مضلعة الشكل من الذين سبقوهم الظهارية الأنوية، وتفتقر إلى النواة (1B الشكل). ويمكن تمييز الكريات البيض النوى من الخلايا الظهارية من شكلها غير منتظم، نوى متعددة الأشكال الملون نحو مظلم، وصغر حجم (الشكل 1C، السهام السوداء). يجب أن تلوث البول تكون موجودة في التشويه، تم الكشف عن بلورات حمض اليوريك بسهولة بواسطة هياكلها البلورية تختلف عن أي نوع من أنواع الخلايا المتوقع (الشكل 3). وهذا ينبغي أن يحدث، وكشف الغامض من نوع من الخلايا السائدة، ينبغي تجاهل تشويه وعدم استخدامها لتنظيم الأغراض. التدريج: يمكن استخدام نسبة النسبية للأنواع الخلايا التي لوحظت في مسحات لتحديد مرحلة من مراحل دورة دقي على الفأرة في يوم جمع العينات (الشكل 1D-G). خلال مقدمات الوداق، الخلايا بشكل حصري تقريبامجموعات من الجولة، جيد الإنشاء الأنوية الخلايا الظهارية (1D الشكل، ممثل الخلية المشار إليها بواسطة السهم الأبيض). خلال الدورة النزوية، ومتقرن الغالب الخلايا الحرشفية الخلايا الظهارية والحاضر في مجموعات المزدحمة بالسكان (الشكل 1E، ممثل الخلية المشار إليها بواسطة السهم). خلال تلية الوداق، الكريات البيض الملون الصغيرة على نحو مظلم تسود (الشكل 1F، ممثل الخلية المشار إليها بواسطة السهم الأسود). ويمكن ملاحظة الخلايا الظهارية الحرشفية متقرن، وغالبا في شظايا، (الشكل 1F، ممثل الخلية المشار إليها بواسطة السهم الأسود). خلال هجوع الودق، متقرن الحرشفية الخلايا الظهارية نادرة قد تكون لا تزال موجودة (الشكل 1G، ممثل الخلية المشار إليها بواسطة السهم الأسود)، ومع ذلك لا تزال تسود الكريات البيض (الشكل 1G، ممثل الخلية المشار إليها بواسطة السهم الأسود). ويمكن تمييز تلية الوداق من هجوع الودق بظهور الخلايا الظهارية الأنوية في هجوع الودق ( <stron<html> ز&gt; الشكل 1G، أشار ممثل الخلية بواسطة السهم الأبيض). <img src="/files/ftp_upload/4389/4389fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> الشكل 1. ويمكن استخدام الخلوي من تقييم مسحات مهبلية لتحديد المرحلة دقي ثلاثة أنواع الخلايا الرئيسية في عينات تم الكشف عن تشويه المهبلية: (A) الخلايا الظهارية الأنوية، (B) الخلايا الظهارية الحرشفية متقرن، والكريات البيضاء (C). ويمكن استخدام نسبة من هذه أنواع الخلايا الموجودة في تشويه لتحديد الفئران في (D) مقدمات الوداق، (E) شبق، (F) تلية الوداق، أو هجوع الودق (G) كما هو موضح في نتائج ممثلة. الأسود في رؤوس سهام E، F ونقطة G لالخلايا الحرشفية الظهارية ممثل متقرن. أسود الأسهم في C، F G نقطة وممثل لleykocytes. الأنوية السهام البيضاء في D وممثل G تسليط الضوء على الخلايا الظهارية. . JPG &quot;بديل =&quot; الشكل 2 &quot;/&gt; الشكل 2. علم الخلايا المهبلية تشويه يعكس الأحداث الغدد الصماء الكامنة. كما يتم توفير التفاصيل في المناقشة. <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4389/4389fig2large.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية</a> . <img src="/files/ftp_upload/4389/4389fig3.jpg" alt="الشكل 3" /> الشكل 3. قد تكون بلورات حمض اليوريك الحالي البنفسجي الكريستال التالية تلطيخ البول العينات الملوثة. (A) بلورات شفافة ويمكن أن تكون مختلفة الأحجام (الأسهم والمنطقة محاصر في تضخيم (B)). لا خلايا موجودة في هذا المجال. يجب اليوريك التلوث داخل الكريستال حمض الحقول المستخدمة لتلوين الخلوي تكون موجودة، فإنه قد يكون من الصعب تحديد بدقة أنواع الخلايا الحالية ويجب التخلص من التشويه. على نطاق والحانات = 50 ميكرومتر.

<ol>
	<li>Adler, N. T., Zoloth, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Copulatory+behavior+can+inhibit+pregnancy+in+female+rats.">Copulatory behavior can inhibit pregnancy in female rats.</a> Science. 168, 1480-1482 (1970).</li><li>Adler, N. T., Resko, J. A., Goy, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+copulatory+behavior+on+hormonal+change+in+the+female+rat+prior+to+implantation.">The effect of copulatory behavior on hormonal change in the female rat prior to implantation.</a> Physiology. 5, 1003-1007 (1970).</li><li>Yang, J. J., Larsen, C. M., Grattan, D. R., Erskine, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mating-induced+neuroendocrine+responses+during+pseudopregnancy+in+the+female+mouse.">Mating-induced neuroendocrine responses during pseudopregnancy in the female mouse.</a> Journal of. 21, 30-39 (2009).</li><li>Hong, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+the+mouse+estrus+cycle+in+response+to+BRCA1+inactivation+suggest+a+potential+link+between+risk+factors+for+familial+and+sporadic+ovarian+cancer.">Changes in the mouse estrus cycle in response to BRCA1 inactivation suggest a potential link between risk factors for familial and sporadic ovarian cancer.</a> Cancer research. 70, 221-228 (2010).</li><li>Hawkins, S. M., Matzuk, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+menstrual+cycle:+basic+biology.">The menstrual cycle: basic biology.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1135, 10-18 (2008).</li><li>Walmer, D. K., Wrona, M. A., Hughes, C. L., Nelson, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lactoferrin+expression+in+the+mouse+reproductive+tract+during+the+natural+estrous+cycle:+correlation+with+circulating+estradiol+and+progesterone.">Lactoferrin expression in the mouse reproductive tract during the natural estrous cycle: correlation with circulating estradiol and progesterone.</a> Endocrinology. 131, 1458-1466 (1992).</li><li>Parkening, T. A., Collins, T. J., Smith, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+and+pituitary+concentrations+of+LH,+FSH,+and+prolactin+in+aging+C57BL/6+mice+at+various+times+of+the+estrous+cycle.">Plasma and pituitary concentrations of LH, FSH, and prolactin in aging C57BL/6 mice at various times of the estrous cycle.</a> Neurobiology of aging. 3, 31-35 (1982).</li><li>Sarkar, D. K., Chiappa, S. A., Fink, G., Sherwood, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gonadotropin-releasing+hormone+surge+in+pro-oestrous+rats.">Gonadotropin-releasing hormone surge in pro-oestrous rats.</a> Nature. 264, 461-463 (1976).</li><li>Rajendren, G., Gibson, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+confocal+microscopic+study+of+synaptic+inputs+to+gonadotropin-releasing+hormone+cells+in+mouse+brain:+regional+differences+and+enhancement+by+estrogen.">A confocal microscopic study of synaptic inputs to gonadotropin-releasing hormone cells in mouse brain: regional differences and enhancement by estrogen.</a> Neuroendocrinology. 73, 84-90 (2001).</li><li>Kumar, T. R., Wang, Y., Lu, N., Matzuk, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicle+stimulating+hormone+is+required+for+ovarian+follicle+maturation+but+not+male+fertility.">Follicle stimulating hormone is required for ovarian follicle maturation but not male fertility.</a> Nature. 15, 201-204 (1997).</li><li>Montgomery, V., Loutradis, D., Tulchinsky, D., Kiessling, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FSH-induced+ovulation+in+intact+and+hypophysectomized+mice.">FSH-induced ovulation in intact and hypophysectomized mice.</a> Journal of reproduction and fertility. 84, 1-6 (1988).</li><li>Mihm, M., Gangooly, S., Muttukrishna, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+normal+menstrual+cycle+in+women.">The normal menstrual cycle in women.</a> Animal reproduction science. , 124-229 (2011).</li><li>Appelgren, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histochemical+demonstration+of+drug+interference+with+progesterone+synthesis.">Histochemical demonstration of drug interference with progesterone synthesis.</a> Journal of reproduction and. 19, 185-186 (1969).</li><li>Sander, V. A., Facorro, G. B., Piehl, L., de Celis Rubin, E., Motta, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+DHEA+and+metformin+on+corpus+luteum+in+mice.">Effect of DHEA and metformin on corpus luteum in mice.</a> Reproduction. 138, 571-579 (2009).</li><li>Stocco, C., Telleria, C., Gibori, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+control+of+corpus+luteum+formation,+function,+and+regression.">The molecular control of corpus luteum formation, function, and regression.</a> Endocrine reviews. 28, 117-149 (2007).</li><li>Rudolph, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+overt+menstruation+in+intact+mice.">Induction of overt menstruation in intact mice.</a> PLoS One. 7, e32922 (2012).</li><li>Yano, J., Lilly, E., Barousse, M., Fidel, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+cell-derived+S100+calcium-binding+proteins+as+key+mediators+in+the+hallmark+acute+neutrophil+response+during+Candida+vaginitis.">Epithelial cell-derived S100 calcium-binding proteins as key mediators in the hallmark acute neutrophil response during Candida vaginitis.</a> Infection and immunity. 78, 5126-5137 (2010).</li><li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Occurrence+of+anoestrus+in+mice+caged+in+groups.">Occurrence of anoestrus in mice caged in groups.</a> The Journal of endocrinology. 18, 102-107 (1959).</li><li>Lamond, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+stimulation+derived+from+other+animals+of+the+same+species+on+oestrous+cycles+in+mice.">Effect of stimulation derived from other animals of the same species on oestrous cycles in mice.</a> The Journal of endocrinology. 18, 343-349 (1959).</li><li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL/6J+mice:+I.+Cycle+frequency,+length+and+vaginal+cytology.">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biology of reproduction. 27, 327-339 (1982).</li><li>Felicio, L. S., Nelson, J. F., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+studies+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL/6J+mice:+II.+Cessation+of+cyclicity+and+the+duration+of+persistent+vaginal+cornification.">Longitudinal studies of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: II. Cessation of cyclicity and the duration of persistent vaginal cornification.</a> Biology of reproduction. 31, 446-453 (1984).</li><li>Van Der Lee, S., Boot, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+pseudopregnancy+in+mice.+II.">Spontaneous pseudopregnancy in mice. II.</a> Acta physiologica et pharmacologica Neerlandica. 5, 213-215 (1956).</li><li>Van Der Lee, S., Boot, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+pseudopregnancy+in+mice.">Spontaneous pseudopregnancy in mice.</a> Acta physiologica et pharmacologica Neerlandica. 4, 442-444 (1955).</li><li>Armaiz-Pena, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrous+cycle+modulates+ovarian+carcinoma+growth.">Estrous cycle modulates ovarian carcinoma growth.</a> Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research. 15, 2971-2978 (2009).</li><li>Jemiolo, B., Harvey, S., Novotny, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promotion+of+the+Whitten+effect+in+female+mice+by+synthetic+analogs+of+male+urinary+constituents.">Promotion of the Whitten effect in female mice by synthetic analogs of male urinary constituents.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 83, 4576-4579 (1986).</li></ol>

الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح. أجريت جميع التجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية الصارمة واللوائح المنصوص عليها من قبل جامعة أوتاوا رعاية الحيوان اللجنة والمجلس الكندي للرعاية الحيوان.

هذه التغييرات في التصنيف خلية تدل على الأحداث الغدد الصماء الكامنة. مقدمات الوداق المرحلة من دورة دقي يتوافق مع المرحلة الجرابية الإنسان من الدورة الشهرية (5) ويعرف بزيادة ما قبل التبويض في تعميم β-17-استراديول مستويات 6، فضلا عن زيادة صغيرة في البرولاكتين 7 (الشكل 2، مقدمات الوداق، اللوحة اليمنى). الزيادة في استراديول-17-β يحفز بشكل غير مباشر بين الافراج عن الخلايا العصبية موجهة الغدد التناسلية الهرمون في منطقة ما تحت المهاد والحاجز الذي، بدوره، في تنشيط خلايا تستجيب الغدة النخامية الأمامية لاطلاق سراح الهرمون وهرمون المنبه للجريب إلى الدورة الدموية 8،9 (الشكل 2 ، مقدمات الوداق، اللوحة اليمنى). في مسحات مهبلية مأخوذة من الحيوانات في مقدمات الوداق، تكاد تكون الخلايا بيضاوية حصرا الخلايا الظهارية الأنوية (1D الشكل، الشكل 2، مقدمات الوداق، اللوحة اليمنى). في ذروة المنبه للجريب horm1 الإباضة مستويات الإشارات ودخولها حيز شبق 10،11. خلال الدورة النزوية، β-17-استراديول مستويات البرولاكتين وانخفاض مستويات الذروة 6،7 (الشكل 2، شبق، اللوحة اليمنى). مسحات مهبلية وتتميز من خلال الكشف الحصري تقريبا من الخلايا غير طبيعية الشكل متقرن الظهارية الحرشفية في كثير من الأحيان في كتل (الشكل 1E، الشكل 2، شبق، اللوحة اليمنى). دخول تلية الوداق يتزامن مع الارتفاع المستمر في مستويات هرمون البروجسترون 6 و يتوافق مع بداية مرحلة الجسم الأصفر الإنسان 12 (الشكل 2، تلية الوداق، اللوحة اليمنى). مستويات البروجسترون ويبدأ في الارتفاع، وهناك زيادة صغيرة في β-17-استراديول مستويات استجابة لتفعيل الجسم الأصفر 6،13،14 (الشكل 2، تلية الوداق، اللوحة اليمنى). أنواع الخلايا الموجودة في المهبل مسحات خلال هذه المرحلة هي، مجزأة متقرن الخلايا الظهارية والكريات البيض الملون أصغر قتامة (الارقام ..ه 1F، الشكل 2، تلية الوداق، اللوحة اليمنى). وأخيرا، الدخول إلى هجوع الودق يحدث في الفئران وتعميم مستويات البروجسترون الذروة 6، المقابلة لمرحلة الجسم الأصفر أواخر الإنسان 12. الانحدار من الجسم الأصفر يؤدي إلى انخفاض حاد في مستويات البروجسترون اللاحقة 15،16 (الشكل 2، هجوع الودق، اللوحة اليمنى). الكريات البيض تسود في مسحات خلال هجوع الودق. يتم تقليل وتيرة الخلايا الظهارية والخلايا الظهارية متقرن الأنوية تبدأ يتم الكشف عن فقط قبل الانتقال إلى مقدمات الوداق (الشكل 1G، الشكل 2، هجوع الودق، اللوحة اليمنى). وباختصار، يمكن استخدام هذه بسيطة، والبروتوكول الروتينية لتقدير التقلبات الهرمونية اليومية وإنشاء المرحلة التجريبية في الفئران ودقي دون تغيير الوضع الإنجابية إذا اتخذت الاحتياطات التالية. يجب أن يتم تنفيذ أخذ العينات لا يزيد عن مرة واحدة يوميا باستخدام بروتوكول غير الغازية تنازلياribed هنا مقارنة الاختراق المتكرر لقناة المهبل، والطموح، والانفعالات. هذا يمكن أن يسبب تهيج المهبل مما أدى إلى استجابة التهابية 17 مما أدى إلى الكريات البيض وغيرها من أنواع الخلايا أن يكون حاضرا في مسحات التي قد نخلط تقييم الخلوي. وعلاوة على ذلك، حتى في مستعمرة الإناث، يضم، فمن الطبيعي أن نرى هجوع الودق الممتدة ومراحل مختلفة في الفئران شبق والحث جيدا من 18 اودقية وهذا التحديد يكون مفيدا في تفسير تأثير الهرمونات الإنجابية في والجنس والمرض والدراسات. وقدم أيضا التباين في الطول مع تقدم العمر ودورة من خلال أوجه الاختلاف السكن داخل المستعمرات (فرد أو مجموعة السكن) من الإناث 7،19-21. يمكن الإناث الموجودة في المستعمرات الإناث فقط وقف ركوب الدراجات وأدخل حالة من هجوع الودق لفترات طويلة بالرغم من أنه يمكن 18،22،23 الدراجات إعادة نصبها من قبل أقفاص سابقة التجهيز التعرض لمع البول الذكور للحصول الدراجات 24،25. وهكذا، لإنشاء individuaأطوال دورة لتر بالنسبة للماوس معين، فمن المستحسن أن يتم تنفيذ عمليات تقييم غير الغازية وصفها هنا يوميا، مع الرعاية، حتى لوحظ دورتين كاملتين.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> كتالوج # </td></tr><tr><td> العقيمة 200 ميكرولتر ماصة نصائح </td><td> Diamed </td><td> E340901 </td></tr><tr><td> اللاتكس لمبة (1 مل) </td><td> الصياد </td><td> 03-488-21 </td></tr><tr><td> الشرائح الزجاجية المجهر </td><td> الصياد </td><td> 12-550-15 </td></tr><tr><td> الكريستال البنفسجي وصمة عار (25 ز) </td><td> الصياد </td><td> C581-25 </td></tr><tr><td> ماسحات الأنسجة الخفيف واجب </td><td> VWR </td><td> 82003-820 </td></tr><tr><td> الغليسيرول </td><td> الصياد </td><td> BP229-1 </td></tr><tr><td> المجهر زجاج غطاء (22x30) </td><td> الصياد </td><td> 12-544A </td></tr></tbody></table>

performing vaginal lavage, crystal violet staining, and vaginal cytological evaluation for mouse estrous cycle staging identification

وسيلة سريعة لتقييم الوضع الإنجابية في القوارض مفيد ليس فقط في دراسة الخلل الإنجابي ولكن مطلوب أيضا لإنتاج نماذج جديدة من الماوس المرض والتحقيقات في التنظيم الهرموني للتنكس النسيج (أو التجديد) بعد التحدي المرضية. يتم تقسيم الفئران الإنجابية (أو دقي) دورة في 4 مراحل: مقدمات الوداق، شبق، تلية الوداق، وهجوع الودق. تقلبات في تعميم المعرفة مستويات المنشطات المبيض β-17-استراديول والبروجسترون، وهرمون الجونادوتروبين وتينيزينغ وتحفيز الهرمونات جريب، وموجهة الجسم الأصفر هرمون البرولاكتين الانتقال عبر هذه المراحل إشارة الإنجابية. التغييرات في التصنيف خلية داخل القناة المهبلية على الفئران تعكس هذه الأحداث الغدد الصماء الكامنة. ويمكن استخدام مراجعة يومية لنسبة النسبية للالأنوية الخلايا الظهارية، الخلايا الظهارية الحرشفية متقرن، والكريات البيض موجودة في المهبل مسحات لتحديد دقي الفئرانمراحل. درجة الغزو، ومع ذلك، يعملون في جمع هذه العينات يمكن أن يغير الوضع الإنجابية وتثير استجابة التهابية يمكن أن نخلط تقييم الخلوي من مسحات. هنا، نحن تصف بسيطة، غير الغازية بروتوكول التي يمكن استخدامها لتحديد مرحلة من مراحل دورة دقي على فأرة الحاسوب الإناث دون تغيير دورة حياتها الإنجابية. نحن بالتفصيل كيفية التمييز بين أربع مراحل من دورة دقي من جمع وتحليل الخلية التصنيف السائد في مسحات مهبلية ونحن نبين كيف يمكن تفسير هذه التغييرات فيما يتعلق بمركز الغدد الصماء.

Watch this Scientific Journal Video about Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification at JoVE.com

Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification

هنا، نحن تصف كيفية تحديد المرحلة من الفئران الإنجابية (مقدمات الوداق، شبق، تلية الوداق، أو هجوع الودق) من خلال جمع بسيطة غير الغازية، وتقييم الخلوي لعينات مسحة المهبل. وصفنا علم الخلايا المهبلية كذلك كيف يعكس تعميم مستويات الهرمونات التي تقوم عليها من خلال الانتقال التناسلي للدورة الفئران.

أداء الغسل المهبلي، كريستال تلوين بنفسجي، والتقييم النسيجية المهبلية لتحديد دورة دقي الماوس التدريج

A rapid means of assessing reproductive status in rodents is useful not only in the study of reproductive dysfunction but is also required for the ...

performing-vaginal-lavage-crystal-violet-staining-vaginal-cytological

Research

JoVE Journal

Biology

110.3K Views.  Neural Regeneration Laboratory and Ottawa Institute of Systems Biology. هنا، نحن تصف كيفية تحديد المرحلة من الفئران الإنجابية (مقدمات الوداق، شبق، تلية الوداق، أو هجوع الودق) من خلال جمع بسيطة غير الغازية، وتقييم الخلوي لعينات مسحة المهبل. وصفنا علم الخلايا المهبلية كذلك كيف يعكس تعميم مستويات الهرمونات التي تقوم عليها من خلال الان...

Video: Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated procedures to obtain such measurements in the same animal are generally not feasible.  Here, we demonstrate protocols for obtaining from mice repeated measurements of AHR and bronchoalveolar lavage fluid samples.  Mice were challenged intranasally seven times over 14 days with a potent allergen or sham treated.  Prior to the initial challenge, and within 24 hours following each intranasal challenge, the same animals were anesthetized, orally intubated and mechanically ventilated.  AHR, assessed by comparing dose response curves of respiratory system resistance (RRS) induced by increasing intravenous doses of acetylcholine (Ach) chloride between sham and allergen-challenged animals, were determined.  Afterwards, and via the same intubation, the left lung was lavaged so that differential enumeration of airway cells could be performed.  These studies reveal that repeated measurements of AHR and BAL fluid collection are possible from the same animals and that maximal airway hyperresponsiveness and airway eosinophilia are achieved within 7-10 days of initiating allergen challenge.  This novel technique significantly reduces the number of mice required for longitudinal experimentation and is applicable to diverse rodent species, disease models and airway physiology instruments.  

Repeated measurements of rodent respiratory physiology and sampling of airway inflammatory cells are desirable, but generally not feasible. Here we describe a repeatable method for orally intubating mice that permits repeated measurements of airway hyperreactivity and sampling of airway inflammatory cells.

A عكسية ، غير الغازية طريقة لقياس مقاومة مجرى الهواء وأخذ عينات السوائل غسل القصبات في الفئران

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models. This paper describes the development of an orthotopic mouse model of ovarian cancer, treatment of cancer via oral delivery of drugs, and monitoring of tumor cell behavior in response to drug treatment in real time using in vivo imaging system. In this orthotopic model, ovarian tumor cells expressing luciferase are applied topically by injecting them directly into the mouse bursa where each ovary is enclosed. Upon injection of D-luciferin, a substrate of firefly luciferase, luciferase-expressing cells generate bioluminescence signals. This signal is detected by the in vivo imaging system and allows for a non-invasive means of monitoring tumor growth, distribution, and regression in individual animals. Drug administration via oral gavage allows for a maximum dosing volume of 10 mL/kg body weight to be delivered directly to the stomach and closely resembles delivery of drugs in clinical treatments. Therefore, techniques described here, development of an orthotopic mouse model of ovarian cancer, oral delivery of drugs, and in vivo imaging, are useful for better understanding of human ovarian cancer and treatment and will improve targeting this disease.

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

Orthotopic animal models of ovarian cancer replicate better human disease and therefore enhance our understanding of cancer progression and tumor response to therapy. A mouse model receives an intrabursal injection of luciferase-expressing ovarian tumor cells. Treatment is administered via oral gavage. Tumor growth is monitored by in vivo imaging system.

في الجسم الحي التصوير والعلاجات العلاجية في الفأر نموذج مثلي من سرطان المبيض

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Evaluation of Mammary Gland Development and Function in Mouse Models

The human mammary gland is composed of 15-20 lobes that secrete milk into a branching duct system opening at the nipple. Those lobes are themselves composed of a number of terminal duct lobular units made of secretory alveoli and converging ducts1. In mice, a similar architecture is observed at pregnancy in which ducts and alveoli are interspersed within the connective tissue stroma. The mouse mammary gland epithelium is a tree like system of ducts composed of two layers of cells, an inner layer of luminal cells surrounded by an outer layer of myoepithelial cells denoted by the confines of a basement membrane2. At birth, only a rudimental ductal tree is present, composed of a primary duct and 15-20 branches. Branch elongation and amplification start at the beginning of puberty, around 4 weeks old, under the influence of hormones3,4,5. At 10 weeks, most of the stroma is invaded by a complex system of ducts that will undergo cycles of branching and regression in each estrous cycle until pregnancy2. At the onset of pregnancy, a second phase of development begins, with the proliferation and differentiation of the epithelium to form grape-shaped milk secretory structures called alveoli6,7. Following parturition and throughout lactation, milk is produced by luminal secretory cells and stored within the lumen of alveoli. Oxytocin release, stimulated by a neural reflex induced by suckling of pups, induces synchronized contractions of the myoepithelial cells around the alveoli and along the ducts, allowing milk to be transported through the ducts to the nipple where it becomes available to the pups 8. Mammary gland development, differentiation and function are tightly orchestrated and require, not only interactions between the stroma and the epithelium, but also between myoepithelial and luminal cells within the epithelium9,10,11. Thereby, mutations in many genes implicated in these interactions may impair either ductal elongation during puberty or alveoli formation during early pregnancy, differentiation during late pregnancy and secretory activation leading to lactation12,13. In this article, we describe how to dissect mouse mammary glands and assess their development using whole mounts. We also demonstrate how to evaluate myoepithelial contractions and milk ejection using an ex-vivo oxytocin-based functional assay. The effect of a gene mutation on mammary gland development and function can thus be determined in situ by performing these two techniques in mutant and wild-type control mice.

This method describes how to dissect and assess mammary gland development and function from mice. Excised mammary glands are assessed for the degree of development using whole mount while milk ejection is evaluated using an oxytocin-based myoepithelial cell contraction assay.

تقييم التنمية وظيفة الغدة الثديية في نماذج الماوس

The human mammary gland is composed of 15-20 lobes that secrete milk into a branching duct system opening at the nipple. Those lobes are themselves ...

Live Cell Cycle Analysis of Drosophila Tissues using the Attune Acoustic Focusing Cytometer and Vybrant DyeCycle Violet DNA Stain

Flow cytometry has been widely used to obtain information about DNA content in a population of cells, to infer relative percentages in different cell cycle phases. This technique has been successfully extended to the mitotic tissues of the model organism Drosophila melanogaster for genetic studies of cell cycle regulation in vivo. When coupled with cell-type specific fluorescent protein expression and genetic manipulations, one can obtain detailed information about effects on cell number, cell size and cell cycle phasing in vivo. However this live-cell method has relied on the use of the cell permeable Hoechst 33342 DNA-intercalating dye, limiting users to flow cytometers equipped with a UV laser. We have modified this protocol to use a newer live-cell DNA dye, Vybrant DyeCycle Violet, compatible with the more common violet 405nm laser. The protocol presented here allows for efficient cell cycle analysis coupled with cell type, relative cell size and cell number information, in a variety of Drosophila tissues. This protocol extends the useful cell cycle analysis technique for live Drosophila tissues to a small benchtop analyzer, the Attune Acoustic Focusing Cytometer, which can be run and maintained on a single-lab scale.

Live Cell Cycle Analysis of Drosophila Tissues using the Attune Acoustic Focusing Cytometer and Vybrant DyeCycle Violet DNA Stain

A protocol for cell cycle analysis of live Drosophila tissues using the Attune Acoustic Focusing Cytometer is described. This protocol simultaneously provides information about relative cell size, cell number, DNA content and cell type via lineage tracing or tissue specific expression of fluorescent proteins in vivo.

تحليل دورة الخلية الحية من<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الأنسجة باستخدام الصوتية أقلم التركيز عداد الكريات وVybrant DyeCycle البنفسج الحمض النووي وصمة عار

Flow cytometry has  been widely used to obtain information about DNA content in a population of  cells, to infer relative percentages in different cell ...

Pyrosequencing for Microbial Identification and Characterization

Pyrosequencing is a versatile technique that facilitates microbial genome sequencing that can be used to identify bacterial species, discriminate bacterial strains and detect genetic mutations that confer resistance to anti-microbial agents. The advantages of pyrosequencing for microbiology applications include rapid and reliable high-throughput screening and accurate identification of microbes and microbial genome mutations. Pyrosequencing involves sequencing of DNA by synthesizing the complementary strand a single base at a time, while determining the specific nucleotide being incorporated during the synthesis reaction. The reaction occurs on immobilized single stranded template DNA where the four deoxyribonucleotides (dNTP) are added sequentially and the unincorporated dNTPs are enzymatically degraded before addition of the next dNTP to the synthesis reaction. Detection of the specific base incorporated into the template is monitored by generation of chemiluminescent signals. The order of dNTPs that produce the chemiluminescent signals determines the DNA sequence of the template. The real-time sequencing capability of pyrosequencing technology enables rapid microbial identification in a single assay. In addition, the pyrosequencing instrument, can analyze the full genetic diversity of anti-microbial drug resistance, including typing of SNPs, point mutations, insertions, and deletions, as well as quantification of multiple gene copies that may occur in some anti-microbial resistance patterns.

Pyrosequencing is a versatile technique that facilitates microbial genome sequencing that can be used to identify bacterial species, discriminate bacterial strains, and detect genetic mutations that confer resistance to anti-microbial agents. In this video, the procedure for microbial amplicon generation, amplicon pyrosequencing, and DNA sequence analysis will be demonstrated.

Pyrosequencing لتحديد وتوصيف الميكروبية

Pyrosequencing is a versatile technique that facilitates microbial genome sequencing that can be used to identify bacterial species, discriminate ...

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Drosophila melanogaster is a powerful model system that has been widely used to elucidate a variety of biological processes. For example, studies of both the female and male germ lines of Drosophila have contributed greatly to the current understanding of meiosis as well as stem cell biology. Excellent protocols are available in the literature for the isolation and imaging of Drosophila ovaries&#160;and testes3-12. Herein, methods for the dissection and preparation of Drosophila testes for microscopic analysis are described with an accompanying video demonstration. A protocol for isolating testes from the abdomen of adult males and preparing slides of live tissue for analysis by phase-contrast microscopy as well as a protocol for fixing and immunostaining testes for analysis by fluorescence microscopy are presented. These techniques can be applied in the characterization of Drosophila mutants that exhibit defects in spermatogenesis as well as in the visualization of subcellular localizations of proteins.

Cytological Analysis of Spermatogenesis: Live and Fixed Preparations of Drosophila Testes

Methods for isolating and preparing Drosophila testes samples (live and fixed) for imaging by phase-contrast and fluorescence microscopy are described herein.&#160;

تحليل الخلوي الحيوانات المنوية: الأعمال التحضيرية لايف والثابتة من<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الخصية

Drosophila melanogaster is a powerful model system that has been widely used to elucidate a variety of biological processes. For example, studies of both ...

Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera

Diversified species of Drosophila (fruit fly) provide opportunities to study mechanisms of development and genetic changes responsible for evolutionary changes. In particular, the adult stage is a rich source of morphological traits for interspecific comparison, including wing pigmentation comparison. To study developmental differences among species, detailed observation and appropriate staging are required for precise comparison. Here we describe protocols for staging of pupal periods and quantification of wing pigmentation in a polka-dotted fruit fly, Drosophila guttifera. First, we describe the method for detailed morphological observation and definition of pupal stages based on morphologies. This method includes a technique for removing the puparium, which is the outer chitinous case of the pupa, to enable detailed observation of pupal morphologies. Second, we describe the method for measuring the duration of defined pupal stages. Finally, we describe the method for quantification of wing pigmentation based on image analysis using digital images and ImageJ software. With these methods, we can establish a solid basis for comparing developmental processes of adult traits during pupal stages.

Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera

Protocols for staging pupal periods and measurement of wing pigmentation of Drosophila guttifera are described. Staging and quantification of pigmentation provide a solid basis for studying developmental mechanisms of adult traits and enable interspecific comparison of trait development.

أساليب لفترات الخوادر التدريج والقياس للجناح تصبغ المورفولوجية جوتيفيرا

Diversified species of Drosophila (fruit fly) provide opportunities to study mechanisms of development and genetic changes responsible for evolutionary ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current blastocyst injection protocol. Here we report that a simple rotation of the embryo, and injection through Trans-Inner cell mass (TICM) increased the percentage of chimeric mice from 31% to 50%, with no additional equipment or further specialized training. 26 different inbred clones, and 35 total clones were injected over a period of 9 months. There was no significant difference in either pregnancy rate or recovery rate of embryos between traditional injection techniques and TICM. Therefore, without any major alteration in the injection process and a simple positioning of the blastocyst and injecting through the ICM, releasing the ES cells into the blastocoel cavity can potentially improve the quantity of chimeric production and subsequent germline transmission.

Here we present a protocol to increase chimera production without the use of new equipment. A simple orientation change of the embryo for injection can increase the number of embryos produced, and potentially reduce the timeline to germline transmission.

حقن الخلية الداخلية عبر كتلة من الخلايا الجذعية الجنينية يؤدي إلى ارتفاع في أسعار تشيميريسم

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

Quantification of Lipid Abundance and Evaluation of Lipid Distribution in Caenorhabditis elegans by Nile Red and Oil Red O Staining

Caenorhabditis elegans is an exceptional model organism in which to study lipid metabolism and energy homeostasis. Many of its lipid genes are conserved in humans and are associated with metabolic syndrome or other diseases. Examination of lipid accumulation in this organism can be carried out by fixative dyes or label-free methods. Fixative stains like Nile red and oil red O are inexpensive, reliable ways to quantitatively measure lipid levels and to qualitatively observe lipid distribution across tissues, respectively. Moreover, these stains allow for high-throughput screening of various lipid metabolism genes and pathways. Additionally, their hydrophobic nature facilitates lipid solubility, reduces interaction with surrounding tissues, and prevents dissociation into the solvent. Though these methods are effective at examining general lipid content, they do not provide detailed information about the chemical composition and diversity of lipid deposits. For these purposes, label-free methods such as GC-MS and CARS microscopy are better suited, their costs notwithstanding.

Quantification of Lipid Abundance and Evaluation of Lipid Distribution in Caenorhabditis elegans by Nile Red and Oil Red O Staining

Nile red staining of fixed Caenorhabditis elegans is a method for quantitative measurement of neutral lipid deposits, while oil red O staining facilitates qualitative assessment of lipid distribution among tissues.

التحديد الكمي لوفرة الدهن وتقييم توزيع الدهن في ايليجانس كاينورهابديتيس "الأحمر النيل" و "النفط تلطيخ س الأحمر"

Caenorhabditis elegans is an exceptional model organism in which to study lipid metabolism and energy homeostasis. Many of its lipid genes are conserved ...

Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, uncoupling of metabolism to generate heat, and secretion of adipokines to regulate whole-body homeostasis and immune responses. Emerging research is identifying important regional differences in the developmental, molecular, and functional profiles of adipocytes located in discrete depots throughout the body. Different properties of the depots are medically relevant since metabolic diseases often demonstrate depot-specific effects. This protocol will provide investigators with a detailed anatomic atlas and dissection guide for the reproducible and accurate identification and excision of diverse mouse adipose tissues. Standardized dissection of discrete adipose depots will allow detailed comparisons of their molecular and metabolic characteristics and contributions to local and systemic pathologic states under various nutritional and environmental conditions.

Adipocytes exist in discrete depots and have diverse roles within their unique microenvironments. As regional differences in adipocyte character and function are uncovered, standardized identification and isolation of depots is crucial for advancement of the field. Herein, we present a detailed protocol for the excision of various mouse adipose depots.

تحديد وتشريح مستودعات الماوس المتنوعة

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, ...