وقدمت التمويل لهذا المشروع من أموال منحة من NINDS الأذربيجانية NS045647.

1. المواد المطلوبة للتدريب واختبار <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختبار الغرفة. أي حاوية كبيرة بما يكفي لاستيعاب حيوانا واحدا والكؤوس رائحة اثنين. استخدام المختبر لدينا غرف فعال تعديل (ميد شركاه المحدودة) مع أشرطة الطابق إزالة لافساح المجال لرائحة أكواب (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رائحة أكواب وحامل الكأس. أكواب واسعة بما فيه الكفاية وعميقة للسماح للحفر وبعض حامل آلية / لتحقيق الاستقرار لهم (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المعطرة الرمال. يستخدم بروتوكول لدينا اختبار الروائح المحددة سابقا للا تظهر استجابة التحيز في الفئران (الكاكاو والريحان والكمون والقهوة) 4. كانت مختلطة كل الرمال المعطرة في نسبة الرائحة ز 1 حتي 110 غرام، نظيفة نسكينتيد الرمال ملعب &quot;رمال مربع&quot; ويمكن تخزينها في حاويات محكمة الإغلاق لمدة تصل إلى 6 أشهر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معزز. نحن استخدام قطع الفواكه الحبوب باعتبارها حلقة معزز. نوصي تعريض الحيوانات إلى معزز (عن طريق الإيداع في أقفاص وطنهم) 3 إلى 5 أيام قبل هيئة تنظيم الاتصالاتining للتغلب على الاستجابات رهوب الجديد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة وقف أو الموقت. </li></ol> 2. التعامل مع الحيوان قبل التدريب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعامل مع. كما سيتم وضع الحيوانات في وإزالتها من غرف مرارا وتكرارا طوال التدريب / اختبار، نوصي التعامل مع الحيوانات ثلاثة إلى خمسة أيام قبل التدريب من أجل تعريفهم الاتصال البشري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحفيز. من أجل تحفيز الحيوانات لأداء هذه المهمة على، مستوى معين من الحرمان من الطعام أمر ضروري. ينبغي الشروع في تقييد الغذاء ثلاثة أيام على الأقل قبل كل من التدريب والاختبار ويمكن الاحتفاظ الحيوانات بنسبة 90٪ من الوزن التغذية الحرة. عادة كميات من 15-20 جم يوميا من طعام كافية، ولكن يجب أن يتم التحقق الأوزان الحيوان كل يوم بينما تقييد الغذاء. </li></ol> 3. حفر التدريب ويمكن تحقيق تدريب حيوان لحفر في الرمال في المتوسط ​​من ثماني جلسات على مدى فترة أربعة أيام من الوقت. خلال حفر هيئة تنظيم الاتصالاتining، يجب تعيين الدائرة حتى من خلال وضع كوب رائحة اثنين الى آلية / حامل ووضع الإعداد كأس رائحة في الغرفة. وترد تفاصيل إجراءات عامة أدناه بهدف تشكيل الحيوان من استهلاك معزز لحفر في الرمال تماما لاسترداد عليه. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدورة 1 - التعود والتدريب مجلة الغرفة. ملء كوب رائحة تماما مع معزز (لا الرمال). وضع الحيوانات في الجهاز لمدة 30 دقيقة مما يسمح للحيوان أن تستهلك بحرية معزز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدورة 2 - التعود الرمال. ملء كوب رائحة تماما مع معزز وصب كمية صغيرة من الرمال نسكينتيد في كل كوب، وملء ما لا يزيد عن نصف الكأس. وضع الحيوانات في الجهاز لمدة 30 دقيقة مما يسمح للحيوان أن تستهلك بحرية معزز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدورة 3 - حفر السطح. ملء كوب رائحة خليط مع معزز حتى من الرمل ونسكينتيد، وترك المعززات متعددة عرضة للخطر. وضع الحيوانات في الجهاز ل30 دقيقة مما يسمح للحيوان أن تستهلك بحرية معزز. في عملية استهلاك المعززات المكشوفة، ويجب أن الحيوان كشف المعززات إضافية تحت سطح الرمال. ينبغي الحيوان التحول من استخدام فمه لاستخدام الأرجل الأمامية لإزالة كل معزز من الرمال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدورة 4 - الحفر. ملء كوب رائحة بمزيج من معزز جزء 1 إلى 3 أجزاء الرمال نسكينتيد، وترك 1-2 المعززات عرضة للخطر. وضع الحيوانات في غرفة لمدة 30 دقيقة مما يسمح للحيوان أن تستهلك بحرية معزز. يجب أن يبدأ الحيوان لحفر مع الأرجل الأمامية لكشف المعززات إضافية وإزالتها من الرمال. وينبغي مساعدة الحيوانات التي لا تبدأ لكشف معزز بعد فترة من الوقت 10 دقيقة (الباحث يجب أن كشف معزز 1 في كل مرة إلى أن يتعلم الحيوان). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدورة 5 - حفر الكامل. ملء كوب رائحة بمزيج من معزز جزء 1 إلى 3 أجزاء الرمال نسكينتيد، دون ترك أي المعززات عرضة للخطر. جيش التحرير الشعبى الصينىم الحيوان في الجهاز لمدة 30 دقيقة مما يسمح للحيوان أن تستهلك بحرية معزز. وينبغي مساعدة الحيوانات حسب الحاجة. قد تحتاج بعض الحيوانات مثيلات متعددة من هذه الدورة من أجل إثبات حفر السلوك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدورة 6 - هيكل محاكمة التعود. بعد ثلاثة المعززات في المواقف، عميق الأوسط، وسطحية في الرمال في كل كوب رائحة. وضع الحيوانات في غرفة حتى يتم استرداد كل ثلاثة من كل كوب، والمساعدة حسب الحاجة. مرة واحدة وقد تم استرجاع جميع، ضع الحيوان في جهاز عن 15-30 ثانية عقد وإعادة أكواب رائحة كما هو موضح في هذه الخطوة. ثم، ضع الحيوان مرة أخرى إلى الغرفة وتكرار هذه العملية حتى الحيوان أكملت أربع محاكمات الإجمالي. ينبغي أن يصبح الحيوان تعود على وضعه في جهاز القابضة وبدء الحفر على الفور عند وضعه في الغرفة. يجب أن تثبت أيضا للحيوان كامل السلوك حفر واسترداد معزز في الجزء السفلي من الكأس رائحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl">الدورة 7 - المعززات واحد. وضع معزز واحد في نصف عمق الرمال في كل كوب. وضع الحيوانات في غرفة والسماح لها لاسترداد كل المعززات، ووضع بعد ذلك في جهاز عقد لمدة 30 ثانية. كرر هذه العملية لمدة أربع محاكمات الإجمالي. يجب أن يبدأ الحيوان لحفر أسرع وتتطلب الحد الأدنى من المساعدة من الباحث. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدورة 8 - اختبار التمييز وهمية. ملء كوب كما هو موضح في جلسة 7. إعطاء الحيوان 30 ثانية لاسترداد كل المعززات. وضع الحيوانات في الجهاز عندما تم عقد استرجاع كل 30 ثانية أو انقضت و. كرر هذا لعدد من التجارب التي سيتم استخدامها في مرحلة الاختبار. يجب حيوانات تعلم لحفر بسرعة عند وضعها مرة أخرى في الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دورات إضافية. اعتمادا على التجارب الأولية التمييز، قد ترغب في إجراء مجرب دورات إضافية لتعريف الحيوان مع الروائح معين. سوف تظهر الفئران تميل إلى رهاب الجديد في البداية ويفضلالروائح المألوفة المرتبطة سابقا مع تعزيز 10. </li></ol> 4. اختبار التمييز <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ينبغي للباحث اختيار الاقتران رائحة، بما في ذلك رائحة التي سيتم اصطاد مع معزز (التمييز الصحيح) والذي لن يحدث. وسيتم اتخاذ قرارات إضافية، مثل عدد من الانتكاسات والتمييز، الحد الأقصى لعدد الأيام والتجارب، وما إذا كان ينبغي الاختبار القبلي قبل الإصابة يعتمد بشكل كبير على مسألة تجريبية (انظر الملاحظات الإضافية أدناه). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويمكن اختبار الفئران والبيانات المسجلة باليد من قبل الباحث. يجب تسجيل الباحث عن كل محاكمة: الاختيار الصحيح أو غير صحيحة، الكمون لبدء الحفر والمحاكمات التي فأر مرات على. <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن يكون عدد المحاكمات تجري إدارتها وفقا لتقدير الباحث (انظر الملاحظات الإضافية أدناه). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينبغي أن طول المحاكمة يكون وفقا لتقدير الباحث (انظر الملاحظات الإضافية أدناه). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> والباحثين ويجب شير بطريقة عشوائية هيكل محاكمة (اليسار واليمين موقع أكواب رائحة)، مع التحذير من أن ما لا يزيد عن ثلاث تجارب هي على التوالي على الجانب معين. وهذا يساعد على تقليل التحيز الجانب. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل الشروع في محاكمة كل، ضع الحيوان في غرفة التي تواجه الجزء الخلفي، مسافة واحدة من كل كوب. قد وضع حيوان أقرب إلى كوب واحد تزيد من فرصة تطوير التحيز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان الحيوان يميز بشكل صحيح، تسمح لاسترداد وتستهلك معزز، ومن ثم إزالته لجهاز عقد لمدة 30 ثانية. إذا انقضاء المهلة أو يختار بشكل غير صحيح، إزالته فورا، قبل أن &quot;يصحح&quot; نفسه، ووضعه في جهاز عقد لمدة 30 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر هذه العملية لاختيار عدد من المحاكمات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة حيوان يحقق معيارا محدد مسبقا (أي دقة&gt; 80٪ في اليوم الواحد لمدة ثلاثة أيام متتالية)، قد الحيوانية الانتقال الى المرحلة التالية التمييز / الانعكاس وكرر العملية المذكورة أعلاه. </li></ol&gt; 5. ملاحظات إضافية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختبار في مختبرنا وجدت أن التدريب والاختبار العمل باستخدام أفضل واحد نصف من الحبوب قطعة الفاكهة لتجنب حلقة شبع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أثناء التدريب، قد يكون بعض الحيوانات إلى مزيد من المساعدة من الآخرين. نوصي القيام بما هو ضروري لتحقيق حفر السلوك. ومع ذلك، مرة واحدة يبدأ الاختبار، ونحن أبدا محاولة للتدخل وتحسين السلوك للجرذ الحفر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قد متفاوتة العدد الإجمالي للمحاكمات تكون كافية للمختبرات مختلفة. وقد استخدمت التجارب المخبرية لدينا في 6 و 8 و 12 محاكمات في كل دورة، 1 دورة في اليوم الواحد، ولقد وجد تفضيل الإعداد محاكمة 8. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قد تتفاوت مدة المحاكمة يكون من الضروري في بعض الاجهزة التجريبية (على سبيل المثال، نموذجا الحيوانات تحت الضغط قد تحتاج مرات المحاكمة زيادة أو قلة التجارب المجموع). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينبغي استخدام المعيار مسبقا من أجل تحديد متى حيوان وقد تفننت على التمييز. اختبار في مختبر لدينا حاجة إلى الدقهY أكبر من 80٪ (5/6 المحاكمات، والمحاكمات 7/8، أو المحاكمات 10/12) في اليوم لمدة 3 أيام متتالية. ومع ذلك، يمكن أيضا أعلى معيار (85٪) يمكن استخدامها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينبغي أن تستخدم عتبات مسبقا / القصوى لأكبر عدد ممكن من الأيام التي تنفق على رائحة معينة. وسيتم هذا تمليها إلى حد كبير مسألة البحث. على سبيل المثال، يتم نقل الدراسات المختبرية لدينا TBI، واعتبارا من جراء الطبيعة التقدمية من الفئران، TBI التي لم تصل إلى معيار التمييز على رواية / الانعكاس بعد 12 يوما من الاختبار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> البت في الاختبار القبلي أو البعدي فقط هو السؤال الذي يتحدد بشكل كبير من قبل الاتجاه التجريبي. الاختبار التمهيدي يسمح احد لإجراء تقييم الذاكرة على الحيوان بعد الاصابه، والتي قد تكون ذات صلة وفقا لنوع الإصابة. ومع ذلك، اختبار آخر يسمح احد لفحص الفروق في معدل الاستحواذ على التمييز بين المجموعات. مختبر لديها وسوف تستمر في استخدام كل. </li></ol>

<ol>
	<li>Birrell, J. M., Brown, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medial+frontal+cortex+mediates+perceptual+attentional+set+shifting+in+the+rat.">Medial frontal cortex mediates perceptual attentional set shifting in the rat.</a> J. Neurosci. 20, 4320-4324 (2000).</li><li>Bunsey, M., Eichenbaum, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conservation+of+hippocampal+memory+function+in+rats+and+humans.">Conservation of hippocampal memory function in rats and humans.</a> Nature. 379, 255-257 (1996).</li><li>Eichenbaum, H., Fagan, A., Cohen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+olfactory+discrimination+learning+set+and+facilitation+of+reversal+learning+after+medial-temporal+damage+in+rats:+Implications+for+an+account+of+preserved+learning+abilities+in+amnesia.">Normal olfactory discrimination learning set and facilitation of reversal learning after medial-temporal damage in rats: Implications for an account of preserved learning abilities in amnesia.</a> J. Neurosci. 6, 1876-1884 (1986).</li><li>Kaiser, D. H., Means, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+transfer+across+odor+stimuli+using+probability+of+reinforcement+in+the+rat.">Value transfer across odor stimuli using probability of reinforcement in the rat.</a> Behav. Processes. 73, 164-169 (2006).</li><li>Martens, K. M., Vonder Haar, C., Hutsell, B. A., Hoane, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Additional+options+for+behavioral+testing+in+rodent+models+of+traumatic+brain+injury:+A+simple+discrimination+task+used+as+a+novel+method+of+testing+decision-making+behavior.">Additional options for behavioral testing in rodent models of traumatic brain injury: A simple discrimination task used as a novel method of testing decision-making behavior.</a> J. Neurotrauma. , (2012).</li><li>Writing Group Members. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Executive+summary:+Heart+disease+and+stroke+statistics+-+2012+update.">Executive summary: Heart disease and stroke statistics - 2012 update.</a> Circulation. 125, 188-197 (2012).</li><li>Narayan, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+trials+in+head+injury.">Clinical trials in head injury.</a> J. Neurotrauma. 19, 503-557 (2002).</li><li>Fujimoto, S. T., Longhi, L., Saatman, K. E., McIntosh, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+and+cognitive+function+evaluation+following+experimental+traumatic+brain+injury.">Motor and cognitive function evaluation following experimental traumatic brain injury.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 28, 365-378 (2004).</li><li>Mitchell, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experiments+on+neophobia+in+wild+and+laboratory+rats:+A+reevaluation.">Experiments on neophobia in wild and laboratory rats: A reevaluation.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 90, 190-197 (1976).</li><li>Baum, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+two+types+of+deviation+from+the+matching+law:+Bias+and+undermatching.">On two types of deviation from the matching law: Bias and undermatching.</a> J. Exp. Anal. Behav. 22, 231-242 (1974).</li><li>Swets, J. A., Dawes, R. M., Monahan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychological+science+can+improve+diagnostic+decisions.">Psychological science can improve diagnostic decisions.</a> Psychological Science in the Public Interest. 1, 1-26 (2000).</li><li>Stuss, D. T., Murphy, K. J., Binns, M. A., Alexander, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Staying+on+the+job:+The+frontal+lobes+control+individual+performance+variability.">Staying on the job: The frontal lobes control individual performance variability.</a> Brain. 126, 2363-2380 (2003).</li><li>Burkett, E. E., Bunnell, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Septal+lesions+and+the+retention+of+DRL+performance+in+the+rat.">Septal lesions and the retention of DRL performance in the rat.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 62, 468-471 (1966).</li><li>Porter, M. C., Burk, J. A., Mair, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+effects+of+hippocampal+or+prefrontal+cortical+lesions+on+three+versions+of+delayed+non-matching-to-sample+based+on+positional+or+spatial+cues.">A comparison of the effects of hippocampal or prefrontal cortical lesions on three versions of delayed non-matching-to-sample based on positional or spatial cues.</a> Behav. Brain Res. 109, 69-81 (2000).</li><li>Walton, M. E., Bannerman, D. M., Alterescu, K., Rushworth, M. F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+specialization+within+medial+frontal+cortex+of+the+anterior+cingulate+for+evaluating+effort-related+decisions.">Functional specialization within medial frontal cortex of the anterior cingulate for evaluating effort-related decisions.</a> J. Neurosci. 23, 6475-6479 (2003).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

في هذا الفيديو، ونحن قد أظهرت كيف يمكن أن تجرى مهمة حفر باستخدام منخفضة التكلفة نسبيا والمواد، مع بعض الخبرة، يمكن أن تتم بسرعة إلى حد ما اختبار (~ 10 دقيقة / الحيوان). وهذا يسمح ليتم إدراج المهمة بسهولة في اختبار البطاريات الموجودة لTBI وإصابات الدماغ السكتة الدماغية، وغيرها. مهمة حفر أيضا قوية من حيث أنه يمكن تقييم جوانب مختلفة من الإدراك، بما في ذلك تقييم التعلم السابق، الانتكاسات، والاستحواذ رواية (على سبيل المثال، مجموعة نقل). الأهم من ذلك، وقد تبين مهمة حفر لتكون فعالة في تقييم وظيفة بعد تلف في الدماغ الأمامية. وبالإضافة إلى ذلك، تم استخدام نموذج حفر مماثلة لدراسة نقل قيمة الأضرار في الفئران بعد قرن آمون 4، وبالتالي يمكن بسهولة أن تدرس بعد TBI. الفوائد الرئيسية من المهام مثل هذه واحدة هي القدرة على تقييم أشكال أخرى من الإدراك مما هو اختبار عادة في معظم الدماغ إصابة مسمارالمنشأ. هناك حاليا نقص في المهام، حصلت بسرعة بسيطة لتقييم الإدراك أماميا بوساطة تلف في الدماغ بعد. في مجال TBI التجريبية، هناك اعتمادا قويا على متاهات وتقييم وحيد هو الإدراك 9. التمييز والسلوك الاختيار هي جوانب هامة من أماميا بوساطة الإدراك التي تحتاج إلى تقييم التالية تلف في الدماغ. وقد تم دراسة هذه النماذج المختلفة تحت (تأخر مطابقة إلى العينة تعزيز التفاضلي، من انخفاض معدل الاستجابة والجهد القائم على صنع القرار، الخ) في مجال التحليل التجريبي للسلوك، ولكن تعاني من نقص في الدراسات من إصابات الدماغ 14-16. تطوير علاجات جديدة لعلاج تلف خلايا الدماغ يتطلب التحقق من صحة عبر طرائق متعددة من السيارات، والحسية، والوظيفة الإدراكية. يمكن أن المهام مثل هذا تصبح حيوية لتقييم الوظائف المعرفية بشكل كامل تحت العلاج العلاجية. في حين أن إعادة حفر المهمةيقدم خطوة في الاتجاه الصحيح لتقييم وظائف المخ بعد الإصابة، لا تزال هناك قيود على ذلك. والمقصود أن يكون بسيطا لبناء وإدارة، وتحليل، ولكن هذا يعني أن هناك حدودا العليا إلى ما يمكن قياسه. حاليا، خيارين هي كل ما يمكن تقسيمه بموجب نموذج معين. بالإضافة إلى ذلك، فإن مهمة حفر ليست حساسة بما فيه الكفاية للتعامل مع جوانب أخرى من ضعف أمامي، مثل الاندفاع، التي قد تتداخل مع قدرة صنع القرار الحيوان. في حين لم تظهر مهمة حفر لتكون ناجحة بالنسبة لنا في تقييم تلف في الدماغ في الحيوانات الصغيرة، لا تزال هناك العديد من الأشياء التي يمكن القيام به مع المهمة لصقل وتحسينه. وتشمل هذه الفئات الخاصة من السكان تقييم (العمر، الجنس، السلالة)، ومقارنتها مباشرة إلى نماذج فعال أنها مقتبسة من، إجراء مقارنة مباشرة لهذه المهمة مع المهام الأخرى التي تقيم ضعف الأمامية بعد الإصابة، واستكشاف additiاونال طرق لتحليل ومقارنة البيانات الناتجة عن هذه المهمة. تم تصميم هذه المهمة لمعالجة بعض القضايا في مجال عملنا من خلال اختبار وظيفة أمامي بطرق متعددة بعد تلف في الدماغ. ومع ذلك، يمكن للمرء أن المهمة لن قياس جميع العمليات المعرفية التي تأثرت بسبب اصابة في الدماغ. وبالتالي، فإننا ندعو إلى مواصلة الشعب لتطوير وتحسين المهام على مثل تلك المبينة في هذا البروتوكول على نحو أكمل تقييم اعاقات وظيفية بعد إصابات الدماغ. في القيام بذلك، يمكننا زيادة فعالية تطوير الأدوية والعلاج لإصابات الدماغ من خلال تقييم التدابير عبر متعددة.

تلف في الدماغ الناجم عن إصابات في الدماغ (المصرف التجاري العراقي) والسكتة الدماغية هي واحدة من الأسباب الرئيسية للوفاة والعجز في الولايات المتحدة. معا، وهذه نتيجة اضطرابات في ما مجموعه نحو 2.5 مليون حوادث، مع حوالي 500،000 مما أدى إلى وفاة أو إعاقة 6-7. على الرغم من هذا عبئا ثقيلا على المجتمع، وقد تم تطوير علاجات لعلاج عدد قليل جدا إما TBI أو السكتة الدماغية. إلى حد ما، يمكن أن يعزى عدم وجود خيارات العلاج المتاحة لتقييم السلوكية غير كافية من الأدوية والعلاجات رواية 8. على وجه الخصوص، هناك نقص من المهام بدقة وحساسية تقييم تأثيرات العلاج على العجز المعرفي في مختلف بعد إصابات الدماغ قبل السريرية في الأدب. حاليا معظم التقييمات المعرفية التي يتم تنفيذها باستخدام الذاكرة المكانية تقييم مهمة متاهة مثل متاهة موريس المائية 9. هناك أسباب متعددة لهذا النقص في الاختبار بما في ذلك الوقت الذي يستغرقهتميز بشكل كامل وتقييم العجز المعرفي، والاعتماد الكبير على معدات باهظة الثمن والخبرات للاستفادة من المهام فعال، والسرعة التي يمكن أن يؤديها هذه التقييمات. تحقيقا لهذه الغاية، وقد تكيفت لدينا التمييز رائحة الأساسية المهمة، مهمة حفر، لتقييم إصابة الدماغ الإدراك التالية. تم تصميم مهمة حفر لتكون رخيصة، وأداة سريعة وفعالة لتقييم الخلل المعرفي إصابة الدماغ التالي من TBI أو السكتة الدماغية. مهمة حفر يعتمد على المبادئ الأساسية للتعلم فعال وصنع القرار. كما أنها ليست سوى نموذج قرار اثنين من الاختيار، هذه المهمة تمثل واحدة من أبسط التمييز التي يمكن إجراؤها. في البروتوكول سوف يلي تفاصيل عن إنشاء المهمة فضلا عن أن توصف منهجية التدريب. لقد وجدنا أن هذه المهمة هي أقوى عند تقييم العجز المعرفي أماميا بوساطة مقارنة العجز الجداري من جانب واحد، إلا أنه لم يتم بعد اختبار تحت نموذجا للالحصين الضرر 5. وفي أحسن الأحوال، تكون مناسبة هذه المهمة لتقييم فعالية العلاج أو العلاج على الانتعاش من العجز أمامي اثر اصابة. ومع ذلك، فمن الممكن أن مع تعديلات ويمكن أيضا أن تستخدم هذه المهمة لاستكشاف أكثر تعقيدا صنع القرار السلوك مثل الاندفاع ومطابقة المعمم.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td> اسم المادة </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> EQUIPMENT </td></tr><tr><td> غرفة فعال </td><td> ميد شركاه </td><td> ENV-008CT </td><td> كمية: 1 غرفة فعال قياسي، أي أجهزة خارجية. </td></tr><tr><td> زجاجي </td><td> الأجهزة المحلية المتجر </td><td> N / A </td><td> المبلغ: 1 ورقة قص إلى الحجم المناسب لتناسب غرفة. </td></tr><tr><td> قبعات الأنابيب البلاستيكية النهاية </td><td> الأجهزة المحلية المتجر </td><td> N / A </td><td> المبلغ: 2 كوب الإعداد / رائحة. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> الكواشف</td></tr><tr><td> رمل </td><td> الأجهزة المحلية المتجر </td><td></td><td></td></tr><tr><td> مختلف التوابل </td><td> بقالة مخزن المحلية </td><td></td><td></td></tr><tr><td> معزز </td><td> بقالة مخزن المحلية </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> يتم سرد * معدات البناء في الغرفة. </td></tr></table>

the dig task: a simple scent discrimination reveals deficits following frontal brain damage

الادراكي هو السبب الأكثر شيوعا للإعاقة في البشر بعد تلف في الدماغ، إلا أن المهام السلوكية المستخدمة لتقييم الإدراك في نماذج القوارض من إصابات الدماغ غير متوفرة. الاقتراض من الأدب فعال تستخدم المختبر لدينا التمييز رائحة الأساسية نموذج 1-4 من أجل تقييم العجز في الفئران أماميا جرحى. قبل فترة وجيزة وصفناها مهمة حفر وأظهرت أن الفئران مع تلف في الدماغ الأمامية تظهر العجز الشديد في اختبارات متعددة داخل المهمة 5. هنا نقدم بروتوكول أكثر تفصيلا لهذه المهمة. يتم وضع الفئران في غرفة والسماح للتميز بين اثنين من الرمال المعطرة، واحدة منها تحتوي على معزز. بعد انتهاء التجربة الفئران إما يميز بشكل صحيح (كما هو محدد في حفر الرمال المعطرة الصحيح)، يميز بشكل غير صحيح، أو 30 ثانية انقضاء. ويسمح الفئران التي تميز بشكل صحيح لاسترداد وتستهلك معزز. دي الفئران التيتتم إزالة فورا scriminate بشكل غير صحيح من الغرفة. وهذا يمكن أن تستمر من خلال مجموعة متنوعة من الانتكاسات والروائح الرواية. التحليل الأساسي هو دقة لكل الاقتران رائحة (نسبة التراكمي الصحيح لكل رائحة). النتائج العامة من مهمة حفر تشير إلى أنه هو إعداد بسيطة التجريبية التي يمكن تقييم العجز في الفئران مع الأضرار الثنائية الأمامية القشرية مقارنة مع الفئران الضرر الجداري من جانب واحد. ويمكن أيضا مهمة حفر إدراجها بسهولة في بطارية اختبار المعرفية الموجودة. يمكن استخدام المزيد من المهام مثل هذا واحد يؤدي إلى اختبار أكثر دقة من أمامي وظيفة إصابة التالية، والتي قد تؤدي إلى الخيارات العلاجية لتلقي العلاج. وقد أجريت جميع استخدام الحيوانات وفقا للبروتوكولات المعتمدة من قبل رعاية الحيوان واللجنة المؤسسية الاستخدام.

هناك نوعان من المتغيرات الرئيسية التي يمكن تسجيلها في مهمة حفر: تصحيح / غير الصحيحة والكمون. ومع ذلك، يمكن أيضا أن الاستجابات غير المسجلة وتحليلها لأنها قد تكون مهمة عند النظر في الدافع. ويمكن استخدام هذه التدابير لتوليد لتحليل مثل دقة (المحاكمات الصحيح # / الكلية)، والتحيز استجابة 11، والكمون. ويمكن استخدام هذه الإجراءات لتقييم عدة أنواع مختلفة من التعلم، وهذا يتوقف على تصميم التجربة (انظر الملاحظات أعلاه إضافية). الاختبار التمهيدي للحيوانات يسمح الباحث لتقييم الذاكرة لتمييز المستفادة. من الانتكاسات التمييز المستفادة تسمح الباحث لمعرفة مدى حيوان يمكن التكيف مع الطوارئ المتغيرة. التعلم من التمييز رواية يسمح للباحثين لمقارنة التعلم عبر التزاوج رائحة مختلفة، فضلا عن تقييم القدرة على التعلم الرواية. وهذا يتوقف على تصميم الدراسة (انظر الملاحظات أعلاه إضافية)، ويمكن أن تكون هذه التدابيرتحليل في تصميم التدابير المتكرر أو يمكن طي إلى متغير واحد. سابقا، انهارت ونحن دقة في قياس نسبة التراكمي الصحيح من أجل تحليل كل على حدة التمييز رائحة 5. هذا حدث عن طريق جمع عدد من التمييز الصحيح وقسمة الناتج على عدد من تجارب كل تمييز. سلسلة من اتجاه واحد ثم استخدمت بين الموضوعات-تحليل الفروق (ANOVAs) لدراسة الاختلافات لكل فريق التمييز رائحة ما بعد الإصابة. ومع ذلك، يمكن الحصول على مزيد من السلطة للتحليل من خلال استخدام الأساليب الإحصائية المتقدمة مثل النمذجة آثار مختلطة. واحد بديل آخر هو استخدام إشارة الكشف عن نظرية لتحليل البيانات. هذا هو نهج شعبية في صنع القرار الأدب الإنسان، وتتيح للباحث لدراسة معظم البيانات من موضوع معين في الرسم البياني واحد وبسرعة تقييم درجة دقة، والتحيز، والعجز 12. واختيار المنهج التحليلي لا يكونمدفوعة من قبل rgely السؤال التجريبية، سواء كانت أحد يريد أن المقارنة بين مختلف أنواع التعلم، وتقييم نوع واحد واحد للتعلم، أو تطبيق نهج صنع القرار إلى البيانات. بعد إصابات الدماغ الأمامية الثنائية، وقد وجدت أن الفئران المختبرية لدينا عجز كبير تعاني تحت كل أنواع التعلم في هذه المهمة. أظهرت الحيوانات أماميا، أصيب بعجز في الذاكرة لتعلم التمييز سابقا وكذلك صعوبة في تعلم عكس ذلك الاقتران رائحة (الشكل 3). الحيوانات أمامي كان هناك صعوبة في التعلم التمييز رواية (الشكل 3). وفقا لبحث سابق 13، كان هناك أيضا زيادة كبيرة في التباين في الحيوانات المصابة أماميا (الشكل 3). في المقابل، أظهرت إصابة الجداري من جانب واحد في مختبرنا أي عجز في التمييز جميع في هذه المهمة. وأظهرت الفئران من جانب واحد أي عجز في ليموري لتعلم التمييز سابقا وحصلت أيضا على التمييز بسرعة كبيرة عكس (الشكل 4). تعلموا أزواج رائحة الرواية بسرعة كبيرة وكذلك (الشكل 4). وبالإضافة إلى ذلك، كان التباين داخل الجماعة من جانب واحد بجروح منخفضة جدا، ومعظم الفئران أداء أمثل على المهمة. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/50033/50033fig1.jpg" /> وقد أجريت الشكل 1. اختبار في مختبرنا في بنك الغرف فعال القياسية (ميد شركاه المحدودة) التي تم تكييفها للاستخدام في هذه المهمة عن طريق إزالة أربع مرات متتالية من الأرض القضبان لفتح مساحة للأكواب رائحة اثنين. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/50033/50033fig2.jpg" /> الشكل 2. اختبار في مختبرنا يستخدم الأنابيب البلاستيكية نهاية مباراة دولية (6 سم و 5.5 سم في القطر) كما ج رائحةيو بي إس وقطعة من زجاجي (10 × 22 سم) مع اثنين من الثقوب الدائرية حفر (5.5 سم في القطر) كما رائحة حامل الكأس. <img alt="الشكل 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50033/50033fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50033/50033fig3.jpg" /> 3 الشكل. يوضح هذا الرسم البياني الأداء النموذجي من الشام (الأزرق) مقابل أماميا جرحى (الحمراء) عبر مراحل مختلفة الفئران العديد من التجارب في شكلين مختلفين. في لوحة A، يتم تمثيل البيانات في رسم بياني شريطي مع بقع بيضاء تمثل نقاط البيانات الفردية للفئران في كل مجموعة. في لوحة B، ورسوم بيانية نفس البيانات في الرسم البياني الخطي. لم يكن هناك اختلاف على اكتساب التمييز ما قبل الاصابة. ومع ذلك، بعد الإصابة وعلى نفس التمييز والفئران تؤدي في المئة الشام التراكمي 93٪ بينما الصحيح الفئران المصابين في المئة أداء التراكمي 65٪ الصحيح. عندما كانت تدار على عكس التمييز، ينجالفئران محكم تنخفض إلى أقل من الأداء فرصة. وبالمثل، على التمييز رائحة الفئران الرواية كان أماميا جرحى صعوبة التعلم الاقتران الرواية وبقي في الأداء أدناه فرصة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50033/50033fig3large.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية</a> . <img alt="الشكل 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50033/50033fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50033/50033fig4.jpg" /> الشكل 4. يوضح هذا الرسم البياني الأداء النموذجي من الشام (الأزرق) مقابل من جانب واحد parietally-المصابين الفئران (الخضراء) عبر مراحل مختلفة من إجراء تجارب على شكلين مختلفين. في لوحة A، يتم تمثيل البيانات في رسم بياني شريطي مع بقع بيضاء تمثل نقاط البيانات الفردية للفئران في كل مجموعة. في لوحة B، ورسوم بيانية نفس البيانات في الرسم البياني الخطي. لا يوجد فرق بين المجموعتين في أي من التمييز. من جانب واحد فيالفئران أجريت في jured أو، في بعض الحالات، أعلى قليلا من المستويات الشام بعد الاصابة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50033/50033fig4large.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية</a> .

Watch this Scientific Journal Video about The Dig Task: A Simple Scent Discrimination Reveals Deficits Following Frontal Brain Damage at JoVE.com

The Dig Task: A Simple Scent Discrimination Reveals Deficits Following Frontal Brain Damage

في هذا البروتوكول، يوصف تطبيق رواية رائحة التمييز. المهمة هي مهمة حفر غير مكلفة بشكل معقول والتي يمكن استخدامها لتقييم الإدراك أماميا بوساطة تلف في الدماغ بعد.

المهام حفر: A التمييز رائحة بسيطة تكشف العجز بعد أمامي تلف في الدماغ

Cognitive impairment is the most frequent cause of disability in humans following brain damage, yet the behavioral tasks used to assess cognition in ...

the-dig-task-simple-scent-discrimination-reveals-deficits-following

Research

JoVE Journal

Neuroscience

13.5K Views.  Southern Illinois University at Carbondale. في هذا البروتوكول، يوصف تطبيق رواية رائحة التمييز. المهمة هي مهمة حفر غير مكلفة بشكل معقول والتي يمكن استخدامها لتقييم الإدراك أماميا بوساطة تلف في الدماغ بعد.

Video: The Dig Task: A Simple Scent Discrimination Reveals Deficits Following Frontal Brain Damage

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended upon this work to develop a simple quantitative measure of forepaw dexterity that is sensitive to lateralized impairments and age-dependent changes. Rodents learn skillful forepaw and digit movements to manage thin pasta pieces, which they eagerly consume. We have previously described methods for quantifying vermicelli handling in rats and showed that the measures are very sensitive to forelimb impairments resulting from unilateral ischemic lesions, middle cerebral artery occlusions and unilateral striatal dopamine depletion [Allred, R.P., Adkins, D.L., Woodlee, M.T., Husbands, L.C., Maldonado M.A., Kane, J.R., Schallert, T. &amp; Jones, T.A. The Vermicelli Handling Test: a simple quantitative measure of dexterous forepaw function in rats. J. Neurosci. Methods 170, 229-244 (2008)]. Here we present a more detailed protocol for this test in rats and compare it with a newly developed version for mice, the Capellini Handling Test. Rats and mice are videotaped while handling short lengths of uncooked vermicelli or capellini pasta, respectively, with a camera positioned to optimize the view of paw movements. Slow motion video playback allows for the identification of forepaw adjustments, defined as any distinct removal and replacement of the paw, or of any number of digits, on the pasta piece after eating commences. Forepaw adjustments per piece are averaged over trials per each testing session. Repeated testing permits sensitive quantitative analysis of changes in forepaw dexterity over time. Protocols for pre-testing habituation and handling practice, as well as procedures for characterizing atypical handling patterns, are described. Because rats and mice perform the pasta handling tests slightly differently, species-specific differences in administration and scoring of these tests are highlighted. All animal use was in accordance with protocols approved by the University of Texas at Austin Animal Care and Use Committee.

The Vermicelli and Capellini Handling Tests of forepaw dexterity take advantage of the natural inclination of rodents to manipulate food items using skillful forepaw and digit movements. Animals are videotaped while handling short strands of uncooked dry pasta. Slow motion video playback allows for the quantification of forepaw adjustments.

والشعيرية والتعامل مع الاختبارات Capellini : تدابير كمية بسيطة من وظيفة forepaw حاذق في الجرذان والفئران

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after injury (Teng et al., 2006). It is recognized that transcriptional programs essential for neurite and axonal outgrowth are 
reactivated upon injury in the PNS (Makwana et al., 2005). However the tools available to analyze neuronal gene regulation in vivo are limited and 
often challenging.
The dorsal root ganglia (DRG) offer an excellent injury model system because both the CNS and PNS are innervated by a 
bifurcated axon originating from the same soma. The ganglia represent a discrete collection of cell bodies where all transcriptional events occur, 
and thus provide a clearly defined region of transcriptional activity that can be easily and reproducibly removed from the animal. Injury of nerve 
fibers in the PNS (e.g. sciatic nerve), where axonal regeneration does occur, should reveal a set of transcriptional programs that are distinct from 
those responding to a similar injury in the CNS, where regeneration does not take place (e.g. spinal cord). Sites for transcription factor binding, 
histone and DNA modification resulting from injury to either PNS or CNS can be characterized using chromatin immunoprecipitation (ChIP). 
Here, we describe a ChIP protocol using fixed mouse DRG tissue following axonal injury. This powerful combination provides a means for characterizing the pro-regeneration chromatin environment necessary for promoting axonal regeneration.

We present a method for chromatin immunoprecipitation from dorsal root ganglia tissue following axonal injury. The approach can be used to identify specific transcription factor binding sites and epigenetic modification of histone and DNA important for the regeneration of injured axons in both the peripheral and central nervous system.

مناعي لونين من الظهرية جذر الأنسجة العقد التالي من الإصابات محواري

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

The Morris Water Maze (MWM) was first established by neuroscientist Richard G. Morris in 1981 in order to test hippocampal-dependent learning, including acquisition of spatial memoryand long-term spatial memory 1. The MWM is a relatively simple procedure typically consisting of six day trials, the main advantage being the differentiation between the spatial (hidden-platform) and non-spatial (visible platform) conditions 2-4. In addition, the MWM testing environment reduces odor trail interference 5. This has led the task to be used extensively in the study of the neurobiology and neuropharmacology of spatial learning and memory. The MWM plays an important role in the validation of rodent models for neurocognitive disorders such as Alzheimer&#x2019;s Disease 6, 7. In this protocol we discussed the typical procedure of MWM for testing learning and memory and data analysis commonly used in Alzheimer&#x2019;s disease transgenic model mice.

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#039;s Disease Model Mice

The Morris Water Maze is a behavioral task to test hippocampal-dependent learning and memory. It has been widely used in the study of neurobiology, neuropharmacology and neurocognitive disorders in rodent models.

اختبار متاهة موريس المائية للعجز التعلم والذاكرة في الفئران مرض الزهايمر النموذجي

The Morris Water Maze (MWM) was first established by neuroscientist Richard G. Morris in 1981 in order to test hippocampal-dependent learning, including ...

Investigations on Alterations of Hippocampal Circuit Function Following Mild Traumatic Brain Injury

Traumatic Brain Injury (TBI) afflicts more than 1.7 million people in the United States each year and even mild TBI can lead to persistent neurological impairments 1. Two pervasive and disabling symptoms experienced by TBI survivors, memory deficits and a reduction in seizure threshold, are thought to be mediated by TBI-induced hippocampal dysfunction 2,3. In order to demonstrate how altered hippocampal circuit function adversely affects behavior after TBI in mice, we employ lateral fluid percussion injury, a commonly used animal model of TBI that recreates many features of human TBI including neuronal cell loss, gliosis, and ionic perturbation 4-6.
	Here we demonstrate a combinatorial method for investigating TBI-induced hippocampal dysfunction. Our approach incorporates multiple ex vivo physiological techniques together with animal behavior and biochemical analysis, in order to analyze post-TBI changes in the hippocampus. We begin with the experimental injury paradigm along with behavioral analysis to assess cognitive disability following TBI. Next, we feature three distinct ex vivo recording techniques: extracellular field potential recording, visualized whole-cell patch-clamping, and voltage sensitive dye recording. Finally, we demonstrate a method for regionally dissecting subregions of the hippocampus that can be useful for detailed analysis of neurochemical and metabolic alterations post-TBI.
	These methods have been used to examine the alterations in hippocampal circuitry following TBI and to probe the opposing changes in network circuit function that occur in the dentate gyrus and CA1 subregions of the hippocampus (see Figure 1). The ability to analyze the post-TBI changes in each subregion is essential to understanding the underlying mechanisms contributing to TBI-induced behavioral and cognitive deficits. 
	The multi-faceted system outlined here allows investigators to push past characterization of phenomenology induced by a disease state (in this case TBI) and determine the mechanisms responsible for the observed pathology associated with TBI.

A multi-faceted approach to investigating functional changes to hippocampal circuitry is explained. Electrophysiological techniques are described along with the injury protocol, behavioral testing and regional dissection method. The combination of these techniques can be applied in similar fashion for other brain regions and scientific questions.

تحقيقات بشأن التعديلات من وظيفة الدائرة الحصين عقب معتدل إصابات في الدماغ

Traumatic Brain Injury (TBI) afflicts more than 1.7 million people in the United States each year and even mild TBI can lead to persistent neurological ...

A Simple Alternative to Stereotactic Injection for Brain Specific Knockdown of miRNA

MicroRNAs (miRNAs) are key regulators of gene expression. In the brain, vital processes like neurodevelopment and neuronal functions depend on the correct expression of microRNAs. Perturbation of microRNAs in the brain can be used to model neurodegenerative diseases by modulating neuronal cell death. Currently, stereotactic injection is used to deliver miRNA knockdown agents to specific location in the brain. Here, we discuss strategies to design antagomirs against miRNA with locked nucleotide modifications (LNA). Subsequently describe a method for brain specific delivery of antagomirs, uniformly across different regions of the brain. This method is simple and widely applicable since it overcomes the surgery, associated injury and limitation of local delivery in stereotactic injections. We prepared a complex of neurotropic, cell-penetrating peptide Rabies Virus Glycoprotein (RVG) with antagomir against miRNA-29 and injected through tail vein, to specifically deliver in the brain. The antagomir design incorporated features that allow specific targeting of the miRNA and formation of non-covalent complexes with the peptide. The knock-down of the miRNA in neuronal cells, resulted in apoptotic cell death and associated behavioural defects. Thus, the method can be used for acute models of neuro-degeneration through the perturbation of miRNAs.

MicroRNAs play crucial roles in the brain and are potential targets for modeling neuro-degeneration. However, perturbing miRNA levels is challenging due to the short length of miRNA and inaccessibility of the brain tissue. This video presents a method for antagomir design and brain specific delivery using a neuropeptide in mice.

بديل بسيط لحقن المجسم لالدماغ ضربة قاضية محددة من ميرنا

MicroRNAs (miRNAs) are key regulators of gene expression.  In the brain, vital processes like neurodevelopment and neuronal functions depend on the ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

طريقة بسيطة لقياس التغيرات في السلوك المكافأة التماس طريق<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

High Resolution Quantitative Synaptic Proteome Profiling of Mouse Brain Regions After Auditory Discrimination Learning

The molecular synaptic mechanisms underlying auditory learning and memory remain largely unknown. Here, the workflow of a proteomic study on auditory discrimination learning in mice is described. In this learning paradigm, mice are trained in a shuttle box Go/NoGo-task to discriminate between rising and falling frequency-modulated tones in order to avoid a mild electric foot-shock. The protocol involves the enrichment of synaptosomes from four brain areas, namely the auditory cortex, frontal cortex, hippocampus, and striatum, at different stages of training. Synaptic protein expression patterns obtained from trained mice are compared to na&#239;ve controls using a proteomic approach. To achieve sufficient analytical depth, samples are fractionated in three different ways prior to mass spectrometry, namely 1D SDS-PAGE/in-gel digestion, in-solution digestion and phospho-peptide enrichment. 
High-resolution proteomic analysis on a mass spectrometer and label-free quantification are used to examine synaptic protein profiles in phospho-peptide-depleted and phospho-peptide-enriched fractions of synaptosomal protein samples. A commercial software package is utilized to reveal proteins and phospho-peptides with significantly regulated relative synaptic abundance levels (trained/na&#239;ve controls). Common and differential regulation modes for the synaptic proteome in the investigated brain regions of mice after training were observed. Subsequently, meta-analyses utilizing several databases are employed to identify underlying cellular functions and biological pathways.

The identification of molecules and pathways controlling synaptic plasticity and memory is still a major challenge in neuroscience. Here, a workflow is described addressing the relative quantification of synaptic proteins supposedly involved in the molecular reorganization of synapses during learning and memory consolidation in an auditory learning paradigm.

عالية الدقة الكمية متشابك بروتيوم من التنميط ماوس مناطق الدماغ بعد السمعية التمييز التعلم

The molecular synaptic mechanisms underlying auditory learning and memory remain largely unknown. Here, the workflow of a proteomic study on auditory ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful analysis of synaptic transmission modulation when performing field potential or intracellular recordings. This manuscript describes methodological aspects that might be helpful in improving experimental conditions for the maintenance of acute brain slices and for recording field excitatory postsynaptic potentials in a commercially available submersion chamber with an outflow-carbogenation unit. The outflow-carbogenation helps to stabilize the oxygen level in experiments that rely on the recycling of a small buffer reservoir to enhance the cost-efficiency of drug experiments. In addition, the manuscript presents representative experiments that examine the effects of different carbogenation modes and stimulation paradigms on the activity-dependent synaptic plasticity of synaptic transmission.

This protocol describes the stabilization of the oxygen level in a small volume of recycled buffer and methodological aspects of recording activity-dependent synaptic plasticity in submerged acute hippocampal slices.

تسجيل اللدونة متشابك في شرائح هيبوكامبال الحاد تحتفظ في صغيرة الحجم-إعادة التدوير، ونضح-، وغمر من نوع نظام الدائرة

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Measurement &amp; Analysis of the Temporal Discrimination Threshold Applied to Cervical Dystonia

The temporal discrimination threshold (TDT) is the shortest time interval at which an observer can discriminate two sequential stimuli as being asynchronous (typically 30-50 ms). It has been shown to be abnormal (prolonged) in neurological disorders, including cervical dystonia, a phenotype of adult onset idiopathic isolated focal dystonia. The TDT is a quantitative measure of the ability to perceive rapid changes in the environment and is considered indicative of the behavior of the visual neurons in the superior colliculus, a key node in covert attentional orienting. This article sets out methods for measuring the TDT (including two hardware options and two modes of stimuli presentation). We also explore two approaches of data analysis and TDT calculation. The application of the assessment of temporal discrimination to the understanding of the pathogenesis of cervical dystonia and adult onset idiopathic isolated focal dystonia is also discussed.

Methods for the measurement and analysis of the temporal discrimination threshold are presented, and its application to the study of the pathogenesis of cervical dystonia are discussed.

قياس وتحليل لعتبة التمييز الزمنية المطبقة على خلل عنق الرحم

The temporal discrimination threshold (TDT) is the shortest time interval at which an observer can discriminate two sequential stimuli as being ...

A Simple and Reproducible Method to Prepare Membrane Samples from Freshly Isolated Rat Brain Microvessels

The blood-brain barrier (BBB) is a dynamic barrier tissue that responds to various pathophysiological and pharmacological stimuli. Such changes resulting from these stimuli can greatly modulate drug delivery to the brain and, by extension, cause considerable challenges in the treatment of central nervous system (CNS) diseases. Many BBB changes that affect pharmacotherapy, involve proteins that are localized and expressed at the level of endothelial cells. Indeed, such knowledge on BBB physiology in health and disease has sparked considerable interest in the study of these membrane proteins. From a basic science research standpoint, this implies a requirement for a simple but robust and reproducible method for isolation of microvessels from brain tissue harvested from experimental animals. In order to prepare membrane samples from freshly isolated microvessels, it is essential that sample preparations be enriched in endothelial cells but limited in the presence of other cell types of the neurovascular unit (i.e., astrocytes, microglia, neurons, pericytes). An added benefit is the ability to prepare samples from individual animals in order to capture the true variability of protein expression in an experimental population. In this manuscript, details regarding a method that is utilized for isolation of rat brain microvessels and preparation of membrane samples are provided. Microvessel enrichment, from samples derived, is achieved by using four centrifugation steps where dextran is included in the sample buffer. This protocol can easily be adapted by other laboratories for their own specific applications. Samples generated from this protocol have been shown to yield robust experimental data from protein analysis experiments that can greatly aid the understanding of BBB responses to physiological, pathophysiological, and pharmacological stimuli.

Here, a method for isolation of rat brain microvessels and for the preparation of membrane samples is described. This protocol has the clear advantage of producing enriched microvessel samples with acceptable protein yield from individual animals. Samples can then be used for robust protein analyses at the brain microvascular endothelium.

أسلوب بسيط واستنساخه تحضير عينات الغشاء من الفئران المعزولة حديثا ميكروفيسيلس الدماغ

The blood-brain barrier (BBB) is a dynamic barrier tissue that responds to various pathophysiological and pharmacological stimuli. Such changes resulting ...