ونود أن نشكر كيرت ميزر من إيزيس الصيدلة لتقديم المشورة المتعلقة جراحة بلعة ICV، وكذلك إيزيس الصيدلة ككل لتوريد مختبرنا مع منظمات خدمات الإيدز. وعلاوة على ذلك، نود أن نشكر كاري Shaner لمراجعة هذه المادة. معتمدة TMM وSLD بواسطة المعاهد الوطنية للصحة منح P50AG005681، K08NS074194، وR01NS078398.

<ol>
	<li>Crooke, S. T., Bennett, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+antisense+oligonucleotide+therapeutics.">Progress in antisense oligonucleotide therapeutics.</a> Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 36, 107-129 (1996).</li><li>Sazani, P., Kole, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+antisense+oligonucleotides+as+modulators+of+alternative+splicing.">Therapeutic potential of antisense oligonucleotides as modulators of alternative splicing.</a> The Journal of Clinical Investigation. 112 (4), 481-486 (2003).</li><li>Taylor, J. P., Hardy, J., Fischbeck, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxic+Proteins+in+Neurodegenerative+Disease.">Toxic Proteins in Neurodegenerative Disease.</a> Science. 296 (5575), 1991-1995 (2002).</li><li>Ross, C. A., Poirier, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+aggregation+and+neurodegenerative+disease.">Protein aggregation and neurodegenerative disease.</a> Nature Medicine. 10, S10-S17 (2004).</li><li>Miller, T. M., Smith, R. A., Kordasiewicz, H., Kaspar, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-Targeted+Therapies+for+the+Central+Nervous+System.">Gene-Targeted Therapies for the Central Nervous System.</a> Archives of Neurology. 65 (4), 447-451 (2008).</li><li>Vickers, T. A., Koo, S., Bennett, C. F., Crooke, S. T., Dean, N. M., Baker, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+Reduction+of+Target+RNAs+by+Small+Interfering+RNA+and+RNase+H-dependent+Antisense+Agents.">Efficient Reduction of Target RNAs by Small Interfering RNA and RNase H-dependent Antisense Agents.</a> The Journal of Biological Chemistry. 278, 7108-7118 (1074).</li><li>Smith, R. A., Miller, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antisense+Oligonucleotide+therapy+for+neurodegenerative+disease.">Antisense Oligonucleotide therapy for neurodegenerative disease.</a> The Journal of Clinical Investigation. 116 (8), 2290-2296 (2006).</li><li>Rosen, D. R., Siddique, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+Cu/Zn+superoxide+disumutase+gene+are+associated+with+familial+amyotrophic+lateral+sclerosis.">Mutations in Cu/Zn superoxide disumutase gene are associated with familial amyotrophic lateral sclerosis.</a> Nature. 362, 6415-62 (1993).</li><li>Haidet-Phillips, A. M., Hester, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytes+from+familial+and+sporadic+ALS+patients+are+toxic+to+motor+neurons.">Astrocytes from familial and sporadic ALS patients are toxic to motor neurons.</a> Nature Biotechnology. 29, 824-828 (2011).</li><li>Furukawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathological+roles+of+wild-type+Cu,Zn-superoxide+dismutase+in+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis.">Pathological roles of wild-type Cu,Zn-superoxide dismutase in Amyotrophic Lateral Sclerosis.</a> Neurology Research International. 2012, 1-6 (2012).</li><li>Hua, Y., Sahashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antisense+correction+of+SMN2+splicing+in+the+CNS+rescues+necrosis+in+a+type+III+SMA+mouse+model.">Antisense correction of SMN2 splicing in the CNS rescues necrosis in a type III SMA mouse model.</a> Genes and Development. 24, 1634-1644 (2010).</li><li>Passini, M. A., Bu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antisense+Oligonucleotide+Delivered+to+the+Mouse+CNS+Ameliorate+Symptoms+of+Severe+Spinal+Muscular+Atrophy.">Antisense Oligonucleotide Delivered to the Mouse CNS Ameliorate Symptoms of Severe Spinal Muscular Atrophy.</a> Science Translational Medicine. 3 (72), (2011).</li><li>Kordasiewicz, H. B., Stanek, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+Therapeutic+Reversal+of+Huntington's+Disease+by+Transient+Repression+of+Huntingtin+Synthesis.">Sustained Therapeutic Reversal of Huntington's Disease by Transient Repression of Huntingtin Synthesis.</a> Neuron. 74 (6), 1031-1044 (2012).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon.">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586 (2011).</li><li>Planel, E., Richter, K. E. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+Leads+to+Tau+Hyperphosphorylation+through+Inhibition+of+Phosphatase+Activity+by+Hypothermia.">Anesthesia Leads to Tau Hyperphosphorylation through Inhibition of Phosphatase Activity by Hypothermia.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (12), 3090-3097 (2007).</li><li>Southwell, A. L., Skotte, N. H., Bennett, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antisense+oligonucleotide+therapeutics+for+inherited+neurodegenerative+diseases.">Antisense oligonucleotide therapeutics for inherited neurodegenerative diseases.</a> Trends in Molecular Medicine. , (2012).</li><li>Kole, R., Krainer, A. R., Altman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+therapeutics:+beyond+RNA+interference+and+antisense+oligonucleotides.">RNA therapeutics: beyond RNA interference and antisense oligonucleotides.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 11, 125-140 (2012).</li></ol>

تلقي الكتاب أليغنوكليوتيد] العقاقير الخاصة بهم من إيزيس الصيدلة.

القدرة على توصيل الأدوية عالميا في الجهاز العصبي المركزي كما هو موضح في الفيديو هي تقنية قوية للغاية التي هي سهلة التعلم والاستخدام على حد سواء. مع الممارسة، وزرع مضخة واحدة أو ICV بلعة يمكن أن تكتمل في 10 دقيقة، والسماح لأفواج كبيرة من الفئران لتلقي العلاج في نفس الوقت. هذا هو مفيدة بشكل خاص للدراسات مع قراءات السلوكية، كما بأعداد أكبر لسلوك الماوس حاسمة للمساعدة في رؤية اختلافات كبيرة. وبناء على تجاربنا تقديم خدمات الإيدز عن طريق المضخات وحقن بلعة، لاحظنا بعض الايجابيات والسلبيات لكل طريقة. وتجدر الإشارة إلى أن هذه هي آراء في مختبرنا، وربما لا يكون صحيحا لجميع الموديلات الماوس والفئران. نجد الاستفادة من استخدام مضخات هو قدرتها على تقديم كمية عالية من ASO منذ يتم توزيع ASO على مدى فترة أطول بكثير من الوقت. هذا عادة ما يعادل ضربة قاضية يعد المستمر أو الربط بعد نشطASO التسريب، على الرغم من أن هذا قد لا يكون الحال دائما. السماح للمضخات أيضا لوضع جدول زمني دقيق لتسليم ASO (14 يوما، 28 يوما، أو 42 يوما) ويمكن تغيير مضخات مرة واحدة للسماح للتسريب ASO حتى تعد نشطة. ومع ذلك، لاحظنا أن تغيير تضخ أكثر من مرة يزيد من تقلب بسبب تشكيل جيوب ليفية حول المضخة التي تمنع من امتصاص السوائل مضخة بشكل صحيح. والعيب من المضخات هو أن بعض الفئران لا يتسامح مع مضخة، فضلا عن غيرهم. إذا كان خط المعدلة وراثيا كنت تعمل مع أكثر هشاشة، قد يكون مضخة مرهق للغاية. تحتاج إلى مضخات أيضا إلى إزالتها بعد ضخ النهائي، إخضاع الفئران لعملية جراحية أخرى والتخدير المضافة. إذا تقوم بعمل السلوك، من المهم بصفة خاصة لإزالة مضخة والسماح لمدة 1-2 أسابيع على الأقل من الانتعاش منذ وجود المضخة سوف تؤثر على بعض السلوكيات في الفئران. مع ICV بلعة حقن، ميزة واحدة من حيث التكلفة. هناكالاستثمار مقدما لشراء المحاقن والإبر، ولكن مع مرور الوقت، والحقن البلعة هي فعالة من حيث التكلفة أكثر حيث لا توجد مضخات / أنابيب / أنابيب القسطرة لشراء. وعموما، هناك أقل تصل بين الحفاظ على مع حقن بلعة ICV نظرا لعدم وجود قنية والمضخات. نجد أيضا أن بلعة ICV يمكن استخدامها لتقديم خدمات الإيدز على الفئران الأصغر سنا الهشة و / أو أكثر. والعيب من ICV بلعة هو أنه في حقنة واحدة. لا قدر ASO العام يمكن تسليمها من خلال هذا الطريق، وإذا كانت مدة عمل ASO المستخدمة قصيرة، فإن الآثار ضربة قاضية / الربط أيضا أن تكون قصيرة الأجل. كل من مضخات التناضحي فضلا عن البلعة ICV لديها القدرة على تقديم خدمات الإيدز التي يمكن أن البروتينات ضربة قاضية أو تغيير الربط من الجينات في الجهاز العصبي المركزي بأكمله القوارض، وهي تقنية لها تطبيقات واسعة في مجالات متعددة ذات صلة علم الأعصاب. نقترح تجريب كل أساليب التسليم إذا كنت غير متأكد من طريقة التعاطي هو الانسب لبلدكمدراسة pecific.

بعض الأدوية غير قادر على عبور حاجز الدم في الدماغ (BBB)، والتي تتطلب الجهاز العصبي المركزي مباشرة (CNS) التسليم. للتحايل على BBB، والمخدرات، يمكن تسليمها مباشرة الى الدماغ باستخدام أساليب وصفها. بينما مختبرنا ورقة التركيز هنا مفصلة عن أليغنوكليوتيد] العقاقير (منظمات خدمات الإيدز)، والمخدرات الأخرى، مثل الجزيئات الصغيرة، والأجسام المضادة، وناقلات العلاج الجيني، وغيرها، ويمكن أيضا أن يتم تسليمها من خلال النهج نفسه بالضبط. بعض البروتينات تلعب دورا أساسيا في التسبب في أمراض الاعصاب. هذه البروتينات غالبا ما تشكل الأنواع السامة وتتراكم في المجاميع، مما يؤدي في نهاية المطاف إلى الموت العصبية والأمراض العصبية اللاحقة 3-4. في محاولة لإبطاء أو حتى وقف تطور هذه الأمراض، قد يكون الخيار العلاجي واحدة لاستهداف مباشرة وتقلل من البروتين المسبب للمرض. ومع ذلك، وغالبا ما توجد هذه البروتينات بتواجد مطلق من خلال الجهاز العصبي المركزي، مما يجعل من الصعب على البريد<html> استهداف ffectively لهم على نطاق عالمي. من أجل استهداف الجينات في جميع أنحاء الجهاز العصبي المركزي بأكمله، ونحن إدارة منظمات خدمات الإيدز في الماوس السائل النخاعي (CSF) عن طريق البطين الجانبي لتجاوز BBB. هذا أسلوب معين يستفيد من نظام البطين الماوس الذي يغمر المخ بأكمله والحبل الشوكي، مما يسمح للتوزيع على نطاق واسع من منظمات خدمات الإيدز. نحن نستخدم منظمات خدمات الإيدز التي هي 18-20 مير RNA مثل الجزيئات التي تربط مباشرة تسلسل مرنا الهدف، واعتمادا على التعديلات الكيميائية ASO، إما A) تجنيد ريبونوكلياز-H إلى تدهور مرنا تؤدي إلى ضربة قاضية أو B) تحول الربط البديل 1 ، 2،16،17. وتجدر الإشارة إلى أن وجود جزيئات متعددة لهدمت بروتين معين في الجسم الحي، بما في ذلك shRNA. منذ هذه الجزيئات ليست هي محور هذه المقالة، نوجه القارئ إلى مراجعة المقالات التي أفضل آليات ضربة قاضية التفاصيل من العمل والمزايا / عيوب كل منها 5-6. jove_content &quot;&gt; في العمل قبل، ونحن قد استخدمت منظمات خدمات الإيدز لاستهداف البروتين الفائق ديسموتاز 1 (SOD1) في نموذج الفئران المعدلة وراثيا من التصلب الجانبي الضموري (ALS) 7 (الشكل 4). الطفرات في SOD1 تحدث في حوالي 2٪ من جميع ALS 8 الحالات، على الرغم من أنه قد تم الافتراض مؤخرا أن SOD1 قد تلعب دورا هاما في ALS متفرقة فضلا 9-10. من خلال خفض مجمل مستويات SOD1 الفئران المعدلة وراثيا في ALS، البقاء على قيد الحياة بعد بداية حدثت زيادة كبيرة 7. وكانت هذه البيانات الهامة الأولى لإظهار أن العلاج ASO في الجهاز العصبي المركزي يمكن أن يكون له أثر إيجابي عميق على نموذج مرض عصبي. ومنذ ذلك الحين، دخلت منظمات خدمات الإيدز تستهدف SOD1 الإنسان وأنجزت بنجاح المرحلة الاولى من التجارب السريرية البشرية مع آثار جانبية أقل (Clnicaltrails.gov NCT01041222) ، كما قدمت في عام 2012 64 عشر الأكاديمية الأمريكية لعلم الأعصاب السنوي. خطط لتحريك منظمات خدمات الإيدز انتقل إلى المرحلة الثانية من التجارب تجري حاليا. <pالطبقة = &quot;jove_content&quot;&gt; بينما كان استهداف SOD1 المظاهرة الأولى من استخدام منظمات خدمات الإيدز لعلاج الأمراض العصبية، ومنذ ذلك الحين أجريت عدة دراسات أخرى تبحث في أمراض مختلفة، وأهداف كل منها البروتين. في عامي 2010 و 2011، واستخدمت التحول من الربط بقاء البروتين من الخلايا العصبية الحركية 2 (SMN2) منظمات خدمات الإيدز أن في نماذج الماوس المعدلة وراثيا من ضمور العضلات الشوكي (SMA)، وأسفرت عن تحسن كبير في الظواهر المرض 11،12. هذه منظمات خدمات الإيدز الربط هي الآن في المرحلة الأولى من التجارب السريرية في الأطفال الذين يعانون من SMA (Clinicaltrails.gov NCT01494701). بالإضافة إلى ذلك، وقد تبين مؤخرا أن إدارة عابر من منظمات خدمات الإيدز تستهدف الجين huntingtin تمكنوا من انقاذ بشكل كبير نموذج الفأر وهنتنغتون، حتى بعد أن عادت مستويات البروتين huntingtin إلى خط الأساس 13. في كل من هذه الدراسات، تم تسليم منظمات خدمات الإيدز إلى البطين الجانبي لخفض مجمل مستويات الجين أو الجينات من خلال تغيير الربطالجهاز العصبي المركزي بأكمله. كلا مضخات ناضح وحقن بلعة واحدة يمكن استخدامها لتقديم خدمات الإيدز إلى CSF. مضخات تسمح بطيئة، والتسليم مستمر، في حين أن intracerebroventricular (ICV) البلعة هو سريعة والحقن لمرة واحدة. وقد استخدمنا كل من هذه الأساليب مع النجاح، على الرغم من أننا لم تبلغ المقارنة المباشرة بين المضخة والبلعة في خط المعدلة وراثيا واحد. استخدام منظمات خدمات الإيدز في الجهاز العصبي المركزي هو وسيلة قوية لخفض مجمل مستويات البروتين و / أو تغيير الربط من عدة بروتينات. بينما نستخدم منظمات خدمات الإيدز حصرا كعلاج لاضطرابات عصبية، ونحن ندرك أن الحقول الأخرى قد تستفيد أيضا من هذه التقنية. طالما أن البروتين من الفائدة يتم التعبير في الجهاز العصبي المركزي والهدف النهائي هو تحقيق تغييرات على مستوى الجهاز العصبي المركزي في التعبير الجيني، وذلك باستخدام منظمات خدمات الإيدز في تقنيات أثبتت قد تكون مفيدة جدا.

<table><tbody><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;PREPARING ALZET OSMOTIC PUMPS&lt;/strong&gt; </td></tr><tr><td>Alzet Osmotic Pump 14 days</td><td>DURECT</td><td>Model 1002</td><td></td></tr><tr><td>Alzet Osmotic Pump 28 days</td><td>DURECT</td><td>Model 2004</td><td></td></tr><tr><td>Alzet Osmotic Pump 42 days</td><td>DURECT</td><td>Model 2006</td><td></td></tr><tr><td>2.5 mm Catheters</td><td>PlasticsOne</td><td>3280PM/SPC</td><td>Custom ordered to 2.5 mm Catheter Length</td></tr><tr><td>Vinyl Catheter Tubing</td><td>DURECT</td><td>7760</td><td>ID: 0.027&quot;, OD: 0.045&quot;</td></tr><tr><td>0.9% Sodium Chloride, Irrigation, USP</td><td>Baxter</td><td>2F7124</td><td>NOT to be used in pumps or tubing</td></tr><tr><td>0.9% Sodium Chloride, Injection, USP</td><td>Hospira</td><td>NDC 0409-4888-10</td><td></td></tr><tr><td>p60 Petri Dish (Sterilized)</td><td>TRP</td><td>93060</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Blades (Sterile)</td><td>Butler Schein</td><td>#007319</td><td></td></tr><tr><td>Latex Surgical Gloves (Sterile)</td><td>Micro-Touch</td><td></td><td>CatNo will depend on size of the gloves needed</td></tr><tr><td>Sterile Towel Drape</td><td>Dynarex</td><td>4410</td><td></td></tr><tr><td>.2um Syringe Filters</td><td>PALL</td><td>4192</td><td></td></tr><tr><td>1 ml Syringe (Sterile)</td><td>BD</td><td>309625</td><td></td></tr><tr><td>50 ml Conical Tubes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>100% Ethanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;PUMP &amp;amp; BOLUS SURGERY PROTOCOLS&lt;/strong&gt; </td></tr><tr><td>Curved Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11001-12</td><td></td></tr><tr><td>Curved Hemostat</td><td>Fine Science Tools</td><td>13009-12</td><td></td></tr><tr><td>Fine Sharp Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>Curved Blunt Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14029-10</td><td></td></tr><tr><td>Bone Cutter</td><td>Fine Science Tools</td><td>16104-14</td><td></td></tr><tr><td>Straight Hemostat</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-12</td><td></td></tr><tr><td>Syringe</td><td>Hamilton</td><td>7653-01</td><td>10 &amp;mu;l gas-tight with removable needles</td></tr><tr><td>Needles</td><td>Hamilton</td><td>7758-04</td><td>26 gauge, Point Style: 2</td></tr><tr><td>5-0 Nylon Suture Thread</td><td>Covidient</td><td>SN-871</td><td></td></tr><tr><td>Alcohol Pads</td><td>Select</td><td>#521</td><td></td></tr><tr><td>Cotton Swabs (sterile)</td><td>Puritan</td><td>REF 806-WC</td><td></td></tr><tr><td>Super Glue</td><td>Loctite</td><td></td><td>Longneck Bottles</td></tr><tr><td>CAUTION: FastGreen Dye</td><td>Sigma</td><td>F7252-5G</td><td>Wear Eyeshields and Gloves when handling this product</td></tr><tr><td>Antibiotic Cream</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eye Ointment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Electric Shaver</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% Ethanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>10% Provadone Iodine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3% Hydogen Peroxide</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Warming Pad</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bead Sterilizer</td><td>SouthPointe Surgical</td><td>GRM5-1450</td><td></td></tr><tr><td>Small Animal Stereotaxic</td><td>Kopf</td><td>Model 940</td><td></td></tr><tr><td>Nose Cone</td><td>Kopf</td><td>Model 923-B</td><td></td></tr><tr><td>Ear Bars</td><td>Kopf</td><td>Model 921</td><td>This model is optional</td></tr><tr><td>Cannula Driver</td><td>Kopf</td><td>Model 1966</td><td></td></tr><tr><td>Syringe Holder</td><td>Kopf</td><td>Model 1972</td><td></td></tr><tr><td>Temperature Control System</td><td>Kopf</td><td>Model TCAT-2LV</td><td>Optional</td></tr><tr><td>Oxygen/Isoflurane System</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

direct intraventricular delivery of drugs to the rodent central nervous system

ونظرا لعدم القدرة على عبور حاجز الدم في الدماغ، والحاجة ليتم تسليمها مباشرة إلى الجهاز العصبي المركزي (CNS) بعض الأدوية. ويركز تحديدا على مختبرنا أليغنوكليوتيد] العقاقير (منظمات خدمات الإيدز)، على الرغم من أن التقنيات يظهر في شريط الفيديو هنا يمكن أن تستخدم أيضا لتقديم مجموعة كبيرة من المخدرات الأخرى إلى الجهاز العصبي المركزي. أليغنوكليوتيد] العقاقير (منظمات خدمات الإيدز) لديها القدرة على أهداف ضربة قاضية تسلسل محدد 1 وكذلك نسب الإسوي التحول من جينات معينة 2. لتحقيق واسع النطاق ضربة قاضية الجينات أو الربط في الجهاز العصبي المركزي من الفئران، ويمكن أن يتم تسليم منظمات خدمات الإيدز في الدماغ باستخدام طريقين منفصلين الإدارة، وكلاهما علينا أن نظهر في شريط الفيديو. الاستخدامات الأولى Alzet مضخات ناضح، وصله بجهاز القسطرة التي يتم زرعها جراحيا في البطين الجانبي. وهذا يسمح للمنظمات خدمات الإيدز إلى أن غرست بشكل مستمر إلى الجهاز العصبي المركزي لفترة محددة من الزمن. والثاني ينطوي على حقن بلعة واحدة من مرحباتركيز هرمون النمو من ASO إلى البطين الجانبي الأيمن. كلا أساليب استخدام نظام البطين الدماغي الماوس لتسليم ASO إلى الدماغ والحبل الشوكي بأكمله، على الرغم اعتمادا على احتياجات الدراسة، قد يكون من المفضل أسلوب واحد على الآخر.

بعد ضخ المضخة أو وقت معين بعد البلعة حقن ICV (نستخدم بشكل روتيني أربعة أسابيع)، من المهم لاختبار فعالية منظمات خدمات الإيدز. ونحن نوصي بأخذ مناطق مختلفة من الدماغ والحبل الشوكي لقياس مستويات / الإسوية من الجين المستهدف، سواء على المستوى الكمي باستخدام مرنا في الوقت الحقيقي PCR وكذلك مستوى البروتين باستخدام إما لطخة غربية أو ELISA (الشكل 4 لسبيل المثال نشرت ). وهذا سوف يساعد تحديد ASO فعالية في جميع أنحاء المناطق CNS مختلفة. إذا كان نصف عمر البروتين المستهدف هو طويل، ونحن ننصح الانتظار لفترة أطول بعد ASO التسريب من أجل تقييم أقصى ضربة قاضية البروتين أو الربط. ومن المهم أيضا لاختبار التوزيع بنسبة ضئيلة. ضخ مضخة يؤدي في التوزيع من خلال نصفي الكرة الأرضية على حد سواء المماثل والمقابل، على الرغم من تركيز ASO أعلى وغالبا ما ينظر في مناطق أقرب إلى نظام البطين 16. ICV بلعة حقن تسفر عن مزيد من unifoتوزيع RM من خلال الجهاز العصبي المركزي بنسبة ضئيلة 16، على الرغم من أن الآثار قد لا تستمر طويلا. نوجه القارئ إلى ساوثويل وآخرون. لرؤية مقارنة مباشرة لمضخة مقابل بلعة التوزيع بنسبة ضئيلة 16. نوصي أيضا اختبار جرعات متعددة فضلا عن مدة العمل لمنظمات خدمات الإيدز لأن كل ASO سوف تتصرف بشكل مختلف قليلا في الجسم الحي. منظمات خدمات الإيدز وعادة ما يكون مدة طويلة نسبيا من العمل، مع ضربة قاضية الهدف أو الربط استمرت عدة أشهر بعد التسليم ASO. وبالإضافة إلى ذلك، فإن بعض منظمات خدمات الإيدز تعمل على نحو أفضل من غيرها، وسوف بعض الأهداف الجين يكون من الأسهل ضربة قاضية من غيرها. وبسبب هذا، عندما ASOS فحص لتحديد مرشح الرصاص، نوصي اختبار لا يقل عن 3-5 منظمات خدمات الإيدز في الجسم الحي مع ن = 4-6 الكبار الفئران في ASO كما تمريرة الأول. في حالة استخدام المخدرات الأخرى من منظمات خدمات الإيدز، فإنه سيكون من المهم أيضا أن الطيار تركيز المثالي المخدرات، ومدة المخدرات من العمل، والجهاز العصبي المركزي المخدراتتوزيع لهذا المركب محددة. <img alt="الجدول 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50326/50326table1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50326/50326table1.jpg" /> الجدول 1. جراحة الإحداثيات. الإحداثيات المستخدمة لتصل إلى البطين الجانبي الحق في كل من الفئران والجرذان عندما زرع مضخات ناضح وكذلك إجراء عملية intracerebroventricular (ICV) البلعة. كلا إحداثيات، لمضخات والبلعة ICV، استهداف البطين الجانبي الأيمن. نحن نستخدم مجموعتين مختلفتين لأن هذه هي ما لدينا الأكثر خبرة ومعرفة مع توفير توزيع ممتازة من ASO. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/50326/50326fig1.jpg" /> الشكل 1. إعداد التجسيمي. (A) المعدات اللازمة لمضخة التجسيمي Alzet والعمليات الجراحية حقن بولس الأول) حبة الزجاج تعقيمص. الثاني) رقمية عبر الاقمار الصناعية. الثالث) قاعدة التجسيمي بأذرع متحركة. الرابع) درجة الحرارة التي تسيطر عليها سادة التدفئة. V) isoflurane و/ نظام الأوكسجين. السادس) غرفة isoflurane و. (B) عن قرب من مخروط الأنف والأذن القضبان. (C) اثنين من إرفاق المستندات المطلوبة. اليسار: الحقنة / حامل إبرة لحقن ICV البلعة. الحق: سائق قنية لالأسموزي زرع المضخة. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/50326/50326fig2.jpg" /> الشكل 2. Alzet الأسموزي زرع مضخة. (A) Alzet خيارات مضخة الاسموزي للفئران. مضخات 14 يوم (0.25 ميكرولتر / ساعة)، ومضخات يوم 28 (0.25 ميكرولتر / ساعة)، و 42 مضخات اليوم (0.15 ميكرولتر / ساعة) (B) إحداثيات لزرع مضخة من bregma: -0.5 مم مؤخره، -1.1 مم الجانبي ( اليمين)، و-2.5 ملم بطني (طول القسطرة). (C) بعد القيادة القسطرة من خلالالجمجمة والإلتصاق قنية، يتم مسح الصبغة عن طريق القسطرة لتقييم التنسيب المناسب للقسطرة في البطين الجانبي. (D) الدماغ Perfused مباشرة بعد صبغ تدار كما في (C). إذا تم وضع القسطرة بنجاح في البطين، وسيتم توزيع الصبغة في جميع أنحاء منظومة البطين الماوس. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/50326/50326fig3.jpg" /> الشكل (3). Intracerebroventricular حقن بولس. (A) المتوافق مع حقن بلعة من bregma: +0.3 ملم الأمامي، -1.0 مم الجانبي (على اليمين)، و-3.0 ملم بطني (B) بعد القيادة الإبرة من خلال الجمجمة -3.0 ملم بطني، يتم الضغط صبغ من خلال حقنة. لتقييم التنسيب المناسب من الإبرة في البطين في وقت لاحق. (C) الدماغ Perfused بعد فترة وجيزة صبغ تدار كما في (B). إذا وضعت إبرة بنجاح في البطين، علىوسيتم توزيع الصبغة في جميع أنحاء منظومة البطين الماوس. <img alt="الشكل 4" fo:content-width="5.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50326/50326fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50326/50326fig4.jpg" /> الشكل 4. أليغنوكليوتيد] العقاقير تقلل SOD1 الفئران في الجسم الحي (الشكل مأخوذة مباشرة من سميث وآخرون. 7). (AD) بواسطة العقاقير SOD1 [أليغنوكليوتيد الهيئة العامة للسدود r146192 أو الهيئة العامة للسدود سارعت وغرست لمدة 28 يوما في البطين الجانبي الأيمن من الفئران العادية بمعدل 100 ميكروغرام / يوم (A) الذاتية مستويات مرنا SOD1 من الدماغ والحبل الشوكي مقاسا QRT-PCR. ( B) SOD1 وA-تويولين مستويات البروتين بعد ASO التسريب. (C و D) مستويات البروتين لتويولين وSOD1 كميا لمناطق مختلفة من الدماغ التالي التسريب. (E) منظمات خدمات الإيدز ضد presenilin 1 أو GSK-3 وبيتا؛ وقد غرست لمدة 2 أسابيع في البطين الجانبي الأيمن من الفئران nontransgenic ومستويات مرنا المقررة في حق أمامي / الزمانية اللحاء. مستنسخة بإذن من الجمعية الأمريكية للالتحقيقات السريرية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50326/50326fig4large.jpg" target="_blank">انقر هنا لعرض أكبر شخصية</a> . <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/50326/50326fig5.jpg" fo:content-width="3in" fo:src="/files/ftp_upload/50326/50326fig5highres.jpg"/> الشكل 5. تشغيل خياطة مفرش أفقي. وخيوطها 5-0 النايلون خيوط الجروح داخل وخارج الجلد، بدءا الأمامي والخلفي العمل، مع التركيز أكثر على قنية. مرة واحدة بعد أن وصلت إلى النقطة الأكثر الخلفي، ثم يتم جلب خيوط الجروح النسخ الاحتياطي ومترابطة على مدى قنية مرة أخرى. وهذا يضمن إغلاق الجرح السليم ويمنع قنية / أنابيب من العمل من خلال الجلد.

Watch this Scientific Journal Video about Direct Intraventricular Delivery of Drugs to the Rodent Central Nervous System at JoVE.com

Direct Intraventricular Delivery of Drugs to the Rodent Central Nervous System

نحن تصف طريقة لاستهداف المخدرات الى الجهاز العصبي المركزي عن طريق إما زرع القسطرة أو إجراء عملية حقن بلعة إلى البطين الجانبي الحق في الفئران. ونحن نركز بشكل خاص على إيصال أليغنوكليوتيد] العقاقير. هذه التقنية غير قابلة للتكيف بسهولة إلى الأدوية الأخرى والفئران.

مباشرة داخل البطين تسليم المخدرات الى القوارض الجهاز العصبي المركزي

Due to an inability to cross the blood brain barrier, certain drugs need to be directly delivered into the central nervous system (CNS). Our lab focuses ...

direct-intraventricular-delivery-drugs-to-rodent-central-nervous

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Neuroscience

Unit 1

Pharmacotherapy of Psychosis and Mania

SCIENTISTS IN ACTION

60.0K Views.  Washington University in St. Louis School of Medicine. نحن تصف طريقة لاستهداف المخدرات الى الجهاز العصبي المركزي عن طريق إما زرع القسطرة أو إجراء عملية حقن بلعة إلى البطين الجانبي الحق في الفئران. ونحن نركز بشكل خاص على إيصال أليغنوكليوتيد] العقاقير. هذه التقنية غير قابلة للتكيف بسهولة إلى الأدوية الأخرى والفئران.

Video: Direct Intraventricular Delivery of Drugs to the Rodent Central Nervous System

Systemic and Local Drug Delivery for Treating Diseases of the Central Nervous System in Rodent Models

Thorough preclinical testing of central nervous system (CNS) therapeutics includes a consideration of routes of administration and agent biodistribution in assessing therapeutic efficacy. Between the two major classifications of administration, local vs. systemic, systemic delivery approaches are often preferred due to ease of administration. However, systemic delivery may result in suboptimal drug concentration being achieved in the CNS, and lead to erroneous conclusions regarding agent efficacy. Local drug delivery methods are more invasive, but may be necessary to achieve therapeutic CNS drug levels. Here, we demonstrate proper technique for three routes of systemic drug delivery: intravenous injection, intraperitoneal injection, and oral gavage. In addition, we show a method for local delivery to the brain: convection-enhanced delivery (CED). The use of fluorescently-labeled compounds is included for in vivo imaging and verification of proper drug administration. The methods are presented using murine models, but can easily be adapted for use in rats.

Thorough preclinical testing of drugs that act in the central nervous system often involves assessing and comparing drug biodistribution in association with specific routes of administration. Here, three commonly used methods of systemic delivery (intravenous, intraperitoneal, and oral) as well as a method for local delivery (convection-enhanced delivery) are demonstrated in mice.

النظامية والمحلية تسليم المخدرات لعلاج أمراض الجهاز العصبي المركزي في المجموعات القوارض

Thorough preclinical testing of central nervous system (CNS) therapeutics includes a consideration of routes of administration and agent biodistribution ...

Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular (ICV) and Intravenous (IV) Injection in Mice

Despite the protective role that blood brain barrier plays in shielding the brain, it limits the access to the central nervous system (CNS) which most often results in failure of potential therapeutics designed for neurodegenerative disorders 1,2. Neurodegenerative diseases such as Spinal Muscular Atrophy (SMA), in which the lower motor neurons are affected, can benefit greatly from introducing the therapeutic agents into the CNS. The purpose of this video is to demonstrate two different injection paradigms to deliver therapeutic materials into neonatal mice soon after birth. One of these methods is injecting directly into cerebral lateral ventricles (Intracerebroventricular) which results in delivery of materials into the CNS through the cerebrospinal fluid 3,4. The second method is a temporal vein injection (intravenous) that can introduce different therapeutics into the circulatory system, leading to systemic delivery including the CNS 5. Widespread transduction of the CNS is achievable if an appropriate viral vector and viral serotype is utilized. Visualization and utilization of the temporal vein for injection is feasible up to postnatal day 6. However, if the delivered material is intended to reach the CNS, these injections should take place while the blood brain barrier is more permeable due to its immature status, preferably prior to postnatal day 2. The fully developed blood brain barrier greatly limits the effectiveness of intravenous delivery. Both delivery systems are simple and effective once the surgical aptitude is achieved. They do not require any extensive surgical devices and can be performed by a single person. However, these techniques are not without challenges. The small size of postnatal day 2 pups and the subsequent small target areas can make the injections difficult to perform and initially challenging to replicate.

Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular ICV and Intravenous IV Injection in Mice

This article demonstrates two very different methods of injection: 1) into the brain (intracerebroventricular) and 2) systemic (intravenous) to introduce the therapeutic agents into the central nervous system of neonatal mice.

تقديم وكلاء العلاجية من خلال Intracerebroventricular (ICV) ، وحقن في الوريد (رابعا) في الفئران

Despite the protective role that blood brain barrier plays in shielding the brain, it limits the access to the central nervous system (CNS) which most ...

Medicine

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. Injection directly into spinal cord tissue bypasses these barriers, providing access to cell bodies or synapses where molecules can be incorporated. Combining viral vector technology with this method allows for introduction of target genes into nervous tissue for the purpose of gene therapy or tract tracing. Here a virus engineered for highly efficient retrograde transport (HiRet) is introduced at the synapses of propriospinal interneurons (PNs) to encourage specific transport to neurons in the spinal cord and brainstem nuclei. Targeting PNs takes advantage of the numerous connections they receive from motor pathways such as the rubrospinal and reticulospinal tracts, as well as their interconnection with each other throughout spinal cord segments. Representative tracing using the HiRet vector with constitutively active green fluorescent protein (GFP) shows high fidelity details of cell bodies, axons and dendritic arbors in thoracic PNs and in reticulospinal neurons in the pontine reticular formation. HiRet incorporates well into brainstem pathways and PNs but shows age dependent integration into corticospinal tract neurons. In summary, spinal cord injection using viral vectors is a suitable method for introduction of proteins of interest into neurons of targeted tracts.

This protocol demonstrates injection of a retrogradely transportable viral vector into rat spinal cord tissue. The vector is taken up at the synapse and transported to the cell body of target neurons. This model is suitable for retrograde tracing of important spinal pathways or targeting cells for gene therapy applications.

الحقن المباشر لناقل لينتيفيرال يسلط الضوء على عدة مسارات الحركية في الحبل الشوكي الفئران

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...

Intrathecal Delivery of Antisense Oligonucleotides in the Rat Central Nervous System

The blood brain barrier (BBB) is an important defense against the entrance of potentially toxic or pathogenic agents from the blood into the central nervous system (CNS). However, its existence also dramatically lowers the accessibility of systemically administered therapeutic agents to the CNS. One method to overcome this, is to inject those agents directly into the cerebrospinal fluid (CSF), thus bypassing the BBB. This can be done via implantation of a catheter for either continuous infusion using an osmotic pump, or for single bolus delivery. In this article, we describe a surgical protocol for delivery of CNS-targeting antisense oligonucleotides (ASOs) via a catheter implanted directly into the cauda equina space of the adult rat spine. As representative results, we show the efficacy of a single bolus ASO intrathecal (IT) injection via this catheterization system in knocking down the target RNA in different regions of the rat CNS. The procedure is safe, effective and does not require expensive equipment or surgical tools. The technique described here can be adapted to deliver drugs in other modalities as well.

Here, we describe a method for delivering drugs to the rat central nervous system by implanting a catheter into the lumbar intrathecal space of the spine. We focus on the delivery of antisense oligonucleotides, though this method is suitable for delivery of other therapeutic modalities as well.

توصيل البراز المضاد للندرة في الجهاز العصبي المركزي للفئران

The blood brain barrier (BBB) is an important defense against the entrance of potentially toxic or pathogenic agents from the blood into the central ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to intracranial delivery, intra-arterial administration of NSCs is less invasive and produces a more diffuse distribution of NSCs within the brain parenchyma. Further, intra-arterial delivery allows the first-pass effect in the brain circulation, lessening the potential for trapping of cells in peripheral organs, such as liver and spleen, a complication associated with peripheral injections. Here, we detail the methodology, in both mice and rats, for delivery of NSCs through the common carotid artery (mouse) or external carotid artery (rat) to the ipsilateral hemisphere after an ischemic stroke. Using GFP-labeled NSCs, we illustrate the widespread distribution achieved throughout the rodent ipsilateral hemisphere at 1 d, 1 week and 4 weeks after postischemic delivery, with a higher density in or near the ischemic injury site. In addition to long-term survival, we show evidence of differentiation of GFP-labeled cells at 4 weeks. The intra-arterial delivery approach described here for NSCs can also be used for administration of therapeutic compounds, and thus has broad applicability to varied CNS injury and disease models across multiple species.

A method for delivering neural stem cells, adaptable for injecting solutions or suspensions, through the common carotid artery (mouse) or external carotid artery (rat) after ischemic stroke is reported. Injected cells are distributed broadly throughout the brain parenchyma and can be detected up to 30 d after delivery.

التسليم داخل الشرايين للخلايا الجذعية العصبية إلى الدماغ الفئران والفأر: تطبيق على الإقفاري الدماغي

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

Stereotaxic Intracranial Delivery of Chemicals, Proteins or Viral Vectors to Study Parkinson's Disease

Parkinson's disease (PD) is a progressive disorder traditionally defined by resting tremor and akinesia, primarily due to loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra. Affected brain areas display intraneuronal fibrillar inclusions consisting mainly of alpha-synuclein (asyn) proteins. No animal model thus far has recapitulated all characteristics of this disease. Here, we describe the use of stereotaxic injection to deliver chemicals, proteins, or viral vectors intracranially in order to mimic various aspects of PD. These methods are well-established and widely used throughout the PD field. Stereotaxic injections are incredibly flexible; they can be adjusted in concentration, age of animal used for injection, brain area targeted and in animal species used. Combinations of substances allow for rapid variations to assess treatments or alter severity of the pathology or behavioral deficits. By injecting toxins into the brain, we can mimic inflammation and/or a severe loss of dopaminergic neurons resulting in substantial motor phenotypes. Viral vectors can be used to transduce cells to mimic genetic or mechanistic aspects. Preformed fibrillar asyn injections best recapitulate the progressive phenotype over an extended period of time. Once these methods are established, it can be economical to generate a new model compared to creating a new transgenic line. However, this method is labor intensive as it requires 30 minutes to four hours per animal depending on the model used. Each animal will have a slightly different targeting and therefore create a diverse cohort which on one hand can be challenging to interpret results from; on the other hand, help mimic a more realistic diversity found in patients. Mistargeted animals can be identified using behavioral or imaging readouts, or only after being sacrificed leading to smallercohort size after the study has already been concluded. Overall, this method is a rudimentary but effective way to assess a diverse set of PD aspects.

We describe how to successfully inject solutions into specific brain areas of rodents using a stereotaxic frame. This survival surgery is a well-established method used to mimic various aspects of Parkinson's disease.

Parkinson's disease (PD) is a progressive disorder traditionally defined by resting tremor and akinesia, primarily due to loss of dopaminergic neurons in ...

Intravenous Injections in Neonatal Mice

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are technically feasible and routine. However, some mouse models can have early onset of disease with a rapid progression that makes administration of potential therapies difficult. The temporal (or facial) vein is just anterior to the ear bud in mice and is clearly visible for the first two days after birth on either side of the head using a dissecting microscope. During this window, the temporal vein can be injected with volumes up to 50 &#956;l. The injection is safe and well tolerated by both the pups and the dams. A typical injection procedure is completed within 1-2 min, after which the pup is returned to the home cage. By the third postnatal day the vein is difficult to visualize and the injection procedure becomes technically unreliable. This technique has been used for delivery of adeno-associated virus (AAV) vectors, which in turn can provide almost body-wide, stable transgene expression for the life of the animal depending on the viral serotype chosen.

Animal models of pediatric disease can experience early onset and aggressive disease progression. Clinically relevant therapy delivery to young mouse models can be technically difficult. This protocol describes a non-invasive intravenous injection method for newborn mice within the first two postnatal days of life.

الحقن في الوريد في الفئران حديثي الولادة

Intravenous injection is a clinically applicable manner to deliver therapeutics. For adult rodents and larger animals, intravenous injections are ...

Biology

Intraventricular Drug Delivery and Sampling for Pharmacokinetics and Pharmacodynamics Study

Although the blood-brain barrier (BBB) protects the brain from foreign entities, it also prevents some therapeutics from crossing into the central nervous system (CNS) to ameliorate diseases or infections. Drugs are administered directly into the CNS in animals and humans to circumvent the BBB. The present protocol describes a unique way of treating brain infections through intraventricular delivery of antibiotics, i.e., polymyxins, the last-line antibiotics to treat multi-drug resistant Gram-negative bacteria. A straightforward stereotaxic surgery protocol was developed to implant a guide cannula reaching into the lateral ventricle in rats. After a recovery period of 24 h, rats can be injected consciously and repeatedly through a cannula that is fitted to the guide. Injections can be delivered manually as a bolus or infusion using a microinjection pump to obtain a slow and controlled flow rate. The intraventricular injection was successfully confirmed with Evans Blue dye. Cerebrospinal fluid (CSF) can be drained, and the brain and other organs can be collected. This approach is highly amenable for studies involving drug delivery to the CNS and subsequent assessment of pharmacokinetic and pharmacodynamic activity.

Delivery of therapeutics directly into the central nervous system is one way of circumventing the blood-brain barrier. The present protocol demonstrates intracerebroventricular injection for subsequent collection of cerebrospinal fluid and bodily organs. This facilitates the investigation of drug pharmacokinetics and pharmacodynamics in animal models for developing new treatments.

Although the blood-brain barrier (BBB) protects the brain from foreign entities, it also prevents some therapeutics from crossing into the central nervous ...

إجراء الحقن داخل بطانة الرحم البطيني في الفئران باستخدام نهج اليد الحرة

Free-Hand Intracerebroventricular Injections in Mice

The investigation of neuroendocrine systems often requires the delivery of drugs, viruses, or other experimental agents directly into the brains of mice. An intracerebroventricular (ICV) injection allows the widespread delivery of the experimental agent throughout the brain (particularly in the structures near the ventricles). Here, methods for making free-hand ICV injections in adult mice are described. By using visual and tactile landmarks on the heads of mice, injections into the lateral ventricles can be made rapidly and reliably. The injections are made with a glass syringe held in the experimenter&#39;s hand and placed at approximate distances from the landmarks. Thus, this technique does not require a stereotaxic frame. Furthermore, this technique requires only brief isoflurane anesthesia, which permits the subsequent assessment of mouse behavior and/or physiology in awake, freely behaving mice. Free-hand ICV injection is a powerful tool for the efficient delivery of experimental agents into the brains of living mice and can be combined with other techniques such as frequent blood sampling, neural circuit manipulation, or in vivo recording to investigate neuroendocrine processes.

تسليط الضوء على المؤلف: رؤى وابتكارات وسبل مستقبلية في التحكم العصبي التناسلي 

Here, a simple and rapid approach for performing intracerebroventricular injections in mice using a free-hand approach (that is, without a stereotaxic device) is described.

حقن داخل المخ البطيني الحر في الفئران

The investigation of neuroendocrine systems often requires the delivery of drugs, viruses, or other experimental agents directly into the brains of mice. ...

مباشرة داخل البطين تسليم المخدرات الى القوارض الجهاز العصبي المركزي

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

النظامية والمحلية تسليم المخدرات لعلاج أمراض الجهاز العصبي المركزي في المجموعات القوارض

تقديم وكلاء العلاجية من خلال Intracerebroventricular (ICV) ، وحقن في الوريد (رابعا) في الفئران

الحقن المباشر لناقل لينتيفيرال يسلط الضوء على عدة مسارات الحركية في الحبل الشوكي الفئران

توصيل البراز المضاد للندرة في الجهاز العصبي المركزي للفئران

التسليم داخل الشرايين للخلايا الجذعية العصبية إلى الدماغ الفئران والفأر: تطبيق على الإقفاري الدماغي

Stereotaxic Intracranial Delivery of Chemicals, Proteins or Viral Vectors to Study Parkinson's Disease

الحقن في الوريد في الفئران حديثي الولادة

Intraventricular Drug Delivery and Sampling for Pharmacokinetics and Pharmacodynamics Study

حقن داخل المخ البطيني الحر في الفئران

حقن داخل المخ البطيني الحر في الفئران