نود أن نعترف الأشخاص التالية أسماؤهم لمساهمتهم في هذا المشروع: Kakali ساركار، دكتوراه، Joani كريستنسن، BS، كيت Buretta، BS، نانس يوان، BS، وليام Lehao، MD، جوانا Grahammer، جورج Furtmüller، MD، ايرين رادا MD، محمد راكان MD، كريم سرحان العضو المنتدب، السآمي Khalifian، BS، ماو تشى، دكتوراه في الطب، وانجيلو يتو بارون MD، مختبر VCA، قسم جراحة التجميل والترميم، جامعة جونز هوبكنز للطب، جانيس تاوب، MD، علامة فيشر، دكتوراه في الطب، أقسام للأمراض الجلدية والأمراض، جامعة جونز هوبكنز للطب، سو ايلر، مركز تدريب جراحة المناظير، جامعة جونز هوبكنز للطب وتشنغ هونغ لين، وتشانغ مستشفى ميموريال الأمنيون MD، لينكو، تايوان. مصدر التمويل: معهد القوات المسلحة للطب التجديدي (وزارة الدفاع W81XWH-08-2-0032)

في هذا المنشور الفيديو، وأجريت كافة الإجراءات الحيوانية وفقا للبروتوكول الحيوانية التي وافقت عليها لجنة جامعة جونز هوبكنز المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC). 1. التخطيط قبل الجراحة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نحن نستخدم MHC-تعريف MGH الفطرية الخنازير مصغرة (15-20 كلغ) في الدراسات متعدية لدينا لزرع الطعم الخيفي أطرافهم حيث يوفر مانح واحد من الذكور أطرافه لمدة الإناث المستلمين (الشكل 1). قبل الجراحة، الحيوانات المانحة والمتلقية الخضوع التقييم السريري الدقيق من قبل طبيب بيطري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل تقليل الوقت التخدير ونقص التروية، وتجرى إجراءات المانحة والمتلقية في وقت واحد على ثلاثة جداول التشغيل في واحدة مخصصة غرفة العمليات الحيوانات الكبيرة. العمل الجماعي والتنسيق بين الفرق الجراحية وكذلك الموظفين البيطرية حاسمة لتحقيق النجاح العام لهذا الإجراء. وتناقش الخطة الجراحية مع الفريق البيطرية في اجتماع رسمي 1-2 أسابيع قبل يوم من الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع القسطرة الوريدية المركزية عبر نفق (7 الأب التجويف المزدوج هيكمان قسطرة) في الوريد الوداجي الخارجي أو الداخلي من كل حيوان المتلقي قبل زرع لرصد مستوى مناعة المخدرات والوريد من مناعة و / أو الأدوية المناعية. يتم وضع هذه القسطرة تحت الرؤية المباشرة من خلال تقنية قطع وريدي أسفل عبر نفق والخلفي للخروج عالية على الرقبة الظهرية وحيدة تأمين باستخدام الغرز غير ممتص والتفاف ضمادة لاصقة حول الرقبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إبقاء الحيوانات NPO (أي طعام صلب ولكن يسمح عفوي الماء) لا يقل عن 12 ساعة قبل الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في يوم من الجراحة، الحيوانات وقور مع الكيتامين 20 ملغ / كغ وزيلازين 2 ملغ / كغ IM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الأنبوب الرغامي بحجم مناسب وتوصيله إلى جهاز التخدير والتنفس الصناعي (الحفاظ على isoflurane و0.5-3٪) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع قسطرة وريدية في الوريد الأذن الهامشية وإدارة<html> الوزن على أساس 0.9٪ المالحة في جميع أنحاء الداخلي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة التسكين وقائية (البوبرينورفين 0.02 مغ / كغ IV). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة المضادات الحيوية وقائية (سيفازولين 20-25 ملغ / كغ IV) قبل شق الأولي لكلا المانحة والمتلقية الحيوانات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام تقنية معقمة في جميع الإجراءات لكلا المستفيدين والمانحين. وهذا يشمل استخدام الأدوات تعقيمها أو تعقيم الغاز، والأقنعة، والقبعات الرأس، العباءات الجراحية معقمة وقفازات معقمة. حلق منطقة شق مع المقص وتطهير بالتناوب مع بتدين حل والكحول. </li></ol> رصد أثناء العملية: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الاستقراء والتنبيب، والحفاظ على التخدير مع خليط استنشاق 0.5-3٪ isoflurane والأكسجين في. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد معدل ضربات القلب والنبض التأكسج، تخطيط القلب، نهاية المد CO 2 ودرجة حرارة الجسم بشكل مستمر وتسجيل كل 15 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> منع انخفاض حرارة الجسم مع بير مضيعة نعالها دافئ بطانية القسري في الهواء. </li></ol>&quot;jove_title&quot;&gt; Osteomyocutaneous الاطراف طعم خيفي الحصاد من الخنزير المانحة: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان المانحة في موقف ضعيف على طاولة العمليات وثنى بطريقة عقيمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تستخدم الهاتف قرب الأشعة تحت الحمراء ليزر الأوعية لتحديد الأوعية ثقب في الجلد أمامي إنسي. حقن الإندوسيانين الخضراء في حوالي الساعة 0.06 مغ / كغ المخفف في 2-5 مل من محلول ملحي من خلال الوصول الى الاوعية الدموية الطرفية. وبعد نحو 10 ثانية، نفذ 30 ثانية 2 دقيقة من التسجيلات الأشعة تحت الحمراء القريب. استخدام الفيديو من هذه التسجيلات لتحديد الثاقبة. استنادا الثاقبة، بمناسبة مساحة الجلد (حوالي 100 سم 2) للرصد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام مشرط لجعل شق الجلد في أعلى الفخذ في الاستمرارية مع علامات لمجداف الجلد (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد الأوعية الفخذ وعزلهم بشكل أقصى إلى مستوى الفروع فوق الركبة وقريب إلى مستوى الرباط الإربي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح الجلد والنسيج تحت الجلد بينما لحفز مجال مجداف الجلد. خياطة حواف الجلد لعضلات الكامنة لتجنب الانكماش خلال الحصاد رفرف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء العظم فقط فوق طرسوس باستخدام المنشار الترددية (كهرباء حملة القلم، سينثيس، غرب تشيستر PA). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم عضلات الفخذ القريبة في استخدام كهربي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم عظم الفخذ في منتصف رمح ترك رفرف osteomyocutaneous على عنيق الأوعية الدموية. يحتوي على رفرف مجداف الجلد، وعضلات الفخذ الأساسية، مفصل الركبة، الفخذ القاصي والداني والتي تشمل الساق سليمة نخاع العظم أوعية دموية مع معالمه مناعية فريدة من نوعها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الشمع العظام لتحقيق الارقاء في المساحات نخاع. حواف ناعمة العظام باستخدام ronjeurs استعدادا للمتلقي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الكسب غير المشروع perfused على عنيق في الأوعية الدموية حتى يتم إعداد السفن الفخذ المستلم (الشكل 3). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة في تشريح المستلم كاملة، ligate الأوعية الفخذ المانحة والداني ممكنالثانية لبث الكسب غير المشروع مع الحامض الاميني التربتوفان كيتوغلوتارات (HTK، Custodiol، نيوتاون PA) قبل الزرع. ملاحظة: يتم زرعها وأطرافهم المانحة على الجانب المقابل للمتلقي أي طرف المانحة لترك الجانب الأيمن من المتلقي وأطرافهم المانحة الحق للجانب الأيسر من المتلقي). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الخنزير المانحة مباشرة بعد حصاد أطرافهم هند ثانية باستخدام 100 ملغ / كغ IV بنتوباربيتال الصوديوم. تأكيد حكم الاعدام من قبل الكوادر البيطرية في البروتوكول المعمول بها. </li></ol> 4. الإجراءات المتلقي (هند أطرافهم زرع الطعم الخيفي) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء تحريض المتلقي والتنبيب مباشرة بعد شق المانحة الأولي للسماح إعداد السفن المتلقي بينما يتم حصادها الطرف المانحة. هذا يلغي وقت الانتظار لا لزوم لها، ويقلل من الوقت التخدير الكلي للالمانحة والمتلقية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع مستلق الحيوان مع دوران 30 درجة على الجانب التشغيل لألوالتعرض ث من الجانب ظهراني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء شق في الفخذ وفضح الأوعية الفخذ؛ عزلهم بشكل أقصى إلى مستوى الفروع فوق الركبة وقريب إلى مستوى الرباط الإربي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إنشاء جيب تحت الجلد من الفخذ إلى جدار البطن ظهراني للأقحم الكسب غير المشروع (الشكل 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ligate الأوعية المانحة وتدفق الكسب غير المشروع مع HTK. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء أقحم الكسب غير المشروع على نحو مقلوب: هل مجداف الجلد التي تواجه ظهراني للسماح رصد سهل المناعة في وضع الوقوف وقطع نهايات الأوعية الفخذ التي تواجه نحو caudally الأوعية الدموية للسماح anastomoses نهاية إلى نهاية دون أي توتر على السفن ( الشكل 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كانت متوفرة، استخدام جهاز اقتران الأوعية الدموية (سانت بول MN Synovis،) لanastomoses وريدي (حجم 2.5-3.5 مناسبة للحيوانات 10-20 كلغ). وهذا يقلل كثيرا من الوقت نقص التروية بالمقارنة مع الطرق التقليدية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء anast الشرايينomoses باستخدام تقنية خياطة التقليدية مع خياطة 9-0 (سانت بول MN Synovis،) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تأكيد المباح الأوعية الدموية، وتأمين الكسب غير المشروع في مكان مع الغرز 3-0 PDS (الشكل 5). تتم خياطة عضلات الكسب غير المشروع إلى عضلات جدار البطن. لا ينبغي أن تخاط العضلات الكسب غير المشروع لعضلات الفخذ المتلقي لأنها يمكن أن تكون ضارة عندما يتحرك الحيوان حول القفص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من الداخل للظاهر مجداف الجلد على الجانب ظهراني لرصد المناعي (الشكل 6) وخياطة إلى الجلد المجاور باستخدام 3-0 VICRYL الغرز تحت الجلد وحيدة 4-0 امتصاص خيوط الجلد توقف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق الجلد في أعلى الفخذ في طبقات باستخدام 3-0 VICRYL الغرز تحت الجلد وحيدة 4-0 امتصاص خيوط الجلد توقف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع التصحيح 50-100 ميكروغرام / ساعة الفنتانيل لتسكين بعد العملية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد زرع طعم خيفي الخلفيتين أطرافهم، والعودة الحيوان إلى القلم لمرة واحدة مستيقظا والتنفس بشكل مريح من تلقاء نفسها.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Barth, R. N., Rodriguez, E. D., Mundinger, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+bone+marrow-based+immunosuppression+inhibits+rejection+of+vascularized+composite+allografts+in+nonhuman+primates.">Vascularized bone marrow-based immunosuppression inhibits rejection of vascularized composite allografts in nonhuman primates.</a> Am. J. Transplant. 11 (7), 1407-1416 (2011).</li><li>Brandacher, G., Gorantla, V. S., Schneeberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand/Forearm+transplantation+using+a+novel+cell-based+immunomodulatory+protocol-experience+with+five+patients.">Hand/Forearm transplantation using a novel cell-based immunomodulatory protocol-experience with five patients.</a> Am. J. Transplant. 11, 190 (2011).</li><li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation.">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Res. C Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li><li>Brandacher, G., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand+transplantation.">Hand transplantation.</a> Hand Clin. 27, xiii-xiv (2011).</li><li>Hettiaratchy, S., Mendely, E., Randolph, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+to+composite+tissue+allografts+across+a+major+histocompatibility+barrier+in+miniature+swine.">Tolerance to composite tissue allografts across a major histocompatibility barrier in miniature swine.</a> Transplantation. 27, 514-521 (2004).</li><li>Ibrahim, Z., Busch, J., Awwad, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selected+physiologic+compatibilities+and+incompatibilities+between+human+and+porcine+organ+systems.">Selected physiologic compatibilities and incompatibilities between human and porcine organ systems.</a> Xenotransplantation. 13 (6), 488-499 (2005).</li><li>Kirk, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crossing+the+bridge:+large+animal+models+in+translational+transplantation+research.">Crossing the bridge: large animal models in translational transplantation research.</a> Immunol. Rev. 19, 176-196 (2003).</li><li>Lee, W. P., Rubin, J. P., Cober, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+swine+model+in+transplantation+of+vascularized+skeletal+tissue+allografts.">Use of swine model in transplantation of vascularized skeletal tissue allografts.</a> Transplant Proc. 30, 2743-2745 (1998).</li><li>Mathes, D. W., Hwang, B., Graves, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+to+vascularized+composite+allografts+in+canine+mixed+hematopoietic+chimeras.">Tolerance to vascularized composite allografts in canine mixed hematopoietic chimeras.</a> Transplantation. 92 (12), 1301-1308 (2011).</li><li>Mathes, D. W., Randolph, M. A., Solari, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Split+tolerance+to+a+composite+tissue+allotransplant+in+a+swine+model.">Split tolerance to a composite tissue allotransplant in a swine model.</a> Transplantation. 75 (1), 25-31 (2003).</li><li>Mezrich, J. D., Haller, G. W., Arn, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histocompatible+miniature+swine:+an+inbred+largeanimal+model.">Histocompatible miniature swine: an inbred largeanimal model.</a> Transplantation. 75 (6), 904-907 (2003).</li><li>Petruzzo, P., Lanzetta, M., Dubernard, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+International+Registry+on+Hand+and+Composite+Tissue+Transplantation.">The International Registry on Hand and Composite Tissue Transplantation.</a> Transplantation. 90, 1590-1594 (2010).</li><li>Sucher, R., Lin, C., Zanoun, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+hind+limb+transplantation:+a+new+composite+tissue+allotransplantation+model+using+nonsuture+supermicrosurgery.">Mouse hind limb transplantation: a new composite tissue allotransplantation model using nonsuture supermicrosurgery.</a> Transplantation. 90, 1374-1380 (2010).</li><li>Ust&#252;ner, E. T., Majzob, R. K., Ren, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swine+composite+tissue+allotransplant+model+for+preclinical+hand+transplant+studies.">Swine composite tissue allotransplant model for preclinical hand transplant studies.</a> Microsurgery. 20, 400-406 (2000).</li><li>Ust&#252;ner, E. T., Zdichavsky, M., Ren, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+composite+tissue+allograft+survival+in+a+porcine+model+with+cyclosporine/mycophenolate+mofetil+therapy.">Long-term composite tissue allograft survival in a porcine model with cyclosporine/mycophenolate mofetil therapy.</a> Transplantation. 661, 581-587 (1998).</li><li>Wachtman, G. S., Wimmers, E. G., Gorantla, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biologicals+and+donor+bone+marrow+cells+for+targeted+immunomodulation+in+vascularized+composite+allotransplantation:+a+translational+trial+in+swine.">Biologicals and donor bone marrow cells for targeted immunomodulation in vascularized composite allotransplantation: a translational trial in swine.</a> Transplant Proc. 43, 3541-3544 (2011).</li></ol>

يعلن الكتاب أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة.

تاريخيا، تضمنت الخلفيتين بروتوكول زرع الأطراف الاصطناعية منتبذ الاهتمام لأمور ظاهرية من مجداف الجلد لجدار البطن بطني وكانت anastomosed السفن بطريقة نهاية إلى الجانب (Hettiarachty 2004). ومع ذلك، في أسلوبنا تعديل، ورفرف مقلوب insetting ونهاية إلى نهاية anastomoses جعل الجلد أكثر مجداف أفق?...

أوعية دموية المجمع زرع الطعم الخيفي (VCA) مثل اليد والوجه زرع هي الآن حقيقة واقعة السريرية مع العديد من عمليات زرع اليد والوجه أجريت في جميع أنحاء العالم 12. على الرغم من أن النتائج المبكرة والوسيطة مواتية ومشجعة للغاية 2، شرط المناعة المتعددة المزمنة لا تزال تحد من تطبيقه السريرية واسعة النطاق. التقدم في نماذج الفئران من VCA بما في ذلك anastomoses فائقة المجهرية وتقنيات الكفة nonsuture 13، 3 مهدت الطريق لفهم أفضل للمنيع للمستضد الخيفي الردود في VCA. وقد اقترحت أعداد كبيرة من البروتوكولات المناعية للتطبيقات السريرية المبنية على فهم أفضل لدينا من آليات المناعة في VCA ولكنها تحتاج إلى التحقق من صحة في نموذج حيواني الكبيرة التي سيكون التنبؤية معقولة لأدائهم في البشر 7. على أساس التشابه الفسيولوجية والمناعية بين أجهزة الجسم البشري والخنازير <sup&gt; 6، يمكن اعتبار نماذج VCA الخنازير بدائل موثوقة وفعالة من حيث التكلفة لالناب 9 ونماذج الرئيسيات غير البشرية 1. توفر هذه المقالة لمحة مفصلة عن المنهجية المستخدمة في منطقتنا MHC محددة الخنازير الخلفيتين منتبذ أطرافهم نموذج زرع، والتي هي بمثابة الأساس لاستراتيجياتنا المناعية الحالية والمستقبلية التي تهدف الى اقناع التسامح المناعي لVCA، وبالتالي توسيع تطبيقاتها السريرية. نحن نستخدم الخنازير الفطرية تتميز جيدا ولدت لزيجوت متماثلة الألائل في الخنازير الكريات البيض مستضد موضع خصيصا لاستخدامها في البحوث المتعلقة زرع 11. نرفع رفرف osteomyocutaneous أوعية دموية تقوم على السفن الفخذ. يحتوي على رفرف سليمة نخاع العظم أوعية دموية في عظم الفخذ القاصي والداني الساق. يتم تضمين الجلد الفخذ الأمامي الإنسي أيضا في الكسب غير المشروع وexteriorized إلى الجانب ظهراني الحيوان المتلقي لرصد المناعة من العنصر الأكثر مناعة سو في VCA. المواقع ظهراني يسهل الفحص السريري في الوقوف والجلوس مواقف وأيضا تحافظ على الجلد طعم خيفي نظيفة نسبيا. Ustener وآخرون. قدم واحدة من أولى نماذج متعدية الحيوانات الكبيرة في VCA عن طريق زرع شعاعي اللوحات forelimb osteomyocutaneous في مزرعة الخنازير الأباعد 15. تستخدم المجموعة هذا النموذج لإثبات لأول مرة أن الرفض الحاد في VCA التي تضمنت عنصرا الجلد مناعة عالية يمكن أن يتأخر وتعامل مع استراتيجية ذات الصلة سريريا دون مضاعفات المخدرات محددة هامة والآثار الجانبية. النتائج التي تم الحصول عليها مواتية في هذه الدراسة بنيت في وقت لاحق خطوة تأسيسية في تصميم نظم المخدرات لزرع الترميمية الإنسان. على الرغم من أن هذه النماذج VCA الخنازير في وقت مبكر وكانت مناسبة تماما لوضع بروتوكولات لمنع رفض الجلد والعضلات والعظام والأعصاب والأوعية أنها تفتقر إلى الهياكل المتخصصة مثل مفصلي cartilagه والأغشية الزليلي للمفاصل. وتركزت الجهود اللاحقة بما في ذلك على أرقام الإنسي من الحيوان، مما استدعى كامل طول التنسيب الزهر لمنع الكسب غير المشروع الخلع 14. على الرغم من أن مناسبة للتحقيق في رفض كل المكونات الرئيسية لزرع الأطراف الاصطناعية، كان واحدا من القيود الرئيسية لهذا النموذج بعد زرع صعوبة الإسعافية بسبب يلقي التنسيب. وبالتالي، منتبذ نماذج أطرافهم زرع الطعم الخيفي الخنازير، ويتألف من الساق، تم إنشاؤها الشظية، مفصل الركبة، الفخذ القاصي والعضلات المحيطة، ومجداف الجلد، لدراسة الجوانب المناعية في المقام الأول من VCA بينما يسمح للحيوان لتجول بحرية بعد العمل الجراحي مع الحد الأدنى من morbidit 8 . أدى تطور جيدا اتسم الخنازير الفطرية جيش تحرير السودان محددة من خلال العمل الرائد الدكتور ديفيد H. ساكس لحقبة جديدة من الأبحاث VCA متعدية. الاستفادة من وجود الخلفيتين منتبذ أطرافهم نموذج زرع في إعداد مستضد عدم تطابق طفيفة، بساط[هس] وآخرون. 10 تظاهر البقاء إلى أجل غير مسمى من مكونات العضلات والعظام مع دورة قصيرة من العلاج السيكلوسبورين. بقاء عنصر الجلد، ومع ذلك، كان لفترة طويلة فقط بالمقارنة مع عدم وجود ضوابط العلاج. ويعزى فقدان عنصر الجلد من الكسب غير المشروع إلى استجابة مناعية قوية للغاية ومعزولة، على وجه الخصوص، إلى البشرة. وبالمثل، وذلك باستخدام الخنازير غير متطابقة تماما مع استنفاد خلايا T، دورة قصيرة من السيكلوسبورين وخلوى حشد المانحين المحيطية وحيدات النوى خلايا الدم الناجم عن التسامح فقط لمكونات العضلات والعظام والجلد المكون ما زال رفض 5. جلبت هذه الظاهرة، ودعا &#39;التسامح تقسيم &quot;، نقلة نوعية في مجال البحوث VCA مع زيادة التركيز على المكون الجلد مناعة عالية، والتي هي جزء لا يتجزأ من الغالبية العظمى من عمليات زرع الترميمية تنفيذ حتى الآن. في هذا النموذج تعديل، ونحن الاستفادة نهاية إلى نهاية مفاغرة بواسطة ligatinز المتلقي شريان الفخذ وتناوب عليه رأسيا (الشكل 1). هذا لا يقلل فقط من الوقت نقص التروية من خلال السماح للاستخدام جهاز اقتران التقليدية ولكن أيضا يقلل من فرص فشل توصيلي. ونحن لم يلحظ أي أحداث الدماغية التالية ربط الشريان الفخذي في المتلقين لدينا تشير إلى أن تداول ضمانات كافية لتوفير الأوعية الدموية في الساق الأصلية. بالإضافة إلى ذلك، في هذا الأسلوب تعديل، وحشد مكون الجلد تخريجها على أساس السفن ثقب الكامنة ويتوضع أفقيا (الشكل 1) وعلى النقيض من موقف الفخذ بطني في النموذج التقليدي 10. وهذا يسمح التصور سهل من الكسب غير المشروع لرصد المناعة في الوقوف أو وضع الجلوس للحيوان. وبالتالي، وهذا نموذج الحيوانات الكبيرة موثوق بها وقابلة للتكرار أمر ضروري لتحقيق استراتيجيات الحث التسامح تجاه المكون من الجلد وVCA لتطوير الرواية ناستراتيجيات oninvasive الرصد المناعي للتنبؤ أفضل للبقاء الكسب غير المشروع.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name of the Reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>REAGENTS</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HTK</td>
			<td>Custodial</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>EQUIPMENT</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Electric Pen Drive</td>
			<td>Synthes, Westchester PA </td>
			<td>05.001.011 </td>
			<td>Reciprocating saw</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Vascular Coupling device</td>
			<td>Synovis, Newtown PA</td>
			<td>21003B</td>
			<td></td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

a modified heterotopic swine hind limb transplant model for translational vascularized composite allotransplantation (vca) research

أوعية دموية المجمع زرع الطعم الخيفي (VCA) مثل اليد والوجه زرع تمثل خيارا قابلا للتطبيق لمعالجة الصدمة العضلية الهيكلية المعقدة وفقدان الأنسجة المدمرة. على الرغم من نتائج وظيفية مواتية ومشجعة للغاية في وقت مبكر والمتوسطة، رفض المكون الجلد مناعة عالية من VCA والآثار الضارة المحتملة للكبت المناعة المزمن للأدوية المتعددة لا تزال تعوق التطبيق السريري على نطاق واسع من VCA. وبالتالي، والبحوث في هذا المجال رواية يحتاج إلى التركيز على الدراسات المتعلقة متعدية ميزات فريدة من نوعها المناعية من VCA ووضع استراتيجيات جديدة لتعديل مناعي المناعية وتحريض التسامح التالية VCA دون الحاجة لكبت المناعة على المدى الطويل. يصف هذا المقال نموذجا كبيرة متعدية موثوق بها وقابلة للتكرار من الحيوان VCA التي تتكون من رفرف osteomyocutaneous في الخنازير منتبذ هند أطرافهم زرع الطعم الخيفي MHC محددة. بريefly، يتم التعرف على مجداف الجلد أوعية دموية جيدا في منطقة الفخذ الأمامي الإنسي باستخدام الأشعة تحت الحمراء القريبة تصوير الأوعية الليزر. ويتم حصاد عضلات الكامنة، مفصل الركبة، الفخذ القاصي والداني الساق على الأوعية الدموية عنيق الفخذ. ويمكن اعتبار هذا طعم خيفي على حد سواء VCA والعظام أوعية دموية زرع نخاع مع ميزات فريدة من نوعها متميزة المناعي. يتم زرع الكسب غير المشروع إلى جيب في البطن تحت الجلد في الحيوان المتلقي مع عنصر الجلد exteriorized إلى المنطقة لرصد ظهراني المناعي. ثلاثة فرق جراحية العمل في نفس الوقت بطريقة منسقة تنسيقا جيدا للحد من التخدير والأوقات نقص التروية، وبالتالي تحسين كفاءة هذا النموذج والحد من الإرباك المحتملة في البروتوكولات التجريبية. يقدم هذا النموذج بوصفه الأساس لاستراتيجيات علاجية مستقبلية تهدف إلى الحد ويحتمل أن تكون مما يلغي الحاجة لكبت المناعة المزمن للأدوية المتعددة في VCA.

أجريت أربع وعشرين جيش تحرير السودان محددة الخنازير منتبذ زرع الخلفيتين أطرافه باستخدام تقنية لدينا تعديل مع الوقت نقص التروية متوسط ​​78 دقيقة (المدى: 62-94 دقيقة). وقد تحققت أقحم الكسب غير المشروع وظهراني المواقع مجداف الجلد دون صعوبة في جميع الحيوانات. وأظهرت الأشعة ...

Watch this Scientific Journal Video about A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research at JoVE.com

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

أصبحت أوعية دموية المركب Allotransplantations (VCA) واقع السريرية. ومع ذلك، التطبيق السريري واسعة من VCA محدودة بسبب كبت المناعة المزمن للأدوية المتعددة. والكتاب يقدم نموذجا الحيوانات الكبيرة موثوقة وقابلة للتكرار لترجمة استراتيجيات المناعية الرواية التي يمكن أن تقلل أو تقضي على احتمال الحاجة لكبت المناعة في VCA.

A معدلة غيري مكاني الخنازير هند أطرافهم نموذج زرع أوعية دموية لبالحركة المجمع زرع الطعم الخيفي (VCA) بحوث

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

a-modified-heterotopic-swine-hind-limb-transplant-model-for

Research

JoVE Journal

Medicine

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

12.4K Views.  Johns Hopkins University School of Medicine.  أصبحت أوعية دموية المركب Allotransplantations (VCA) واقع السريرية. ومع ذلك، التطبيق السريري واسعة من VCA محدودة بسبب كبت المناعة المزمن للأدوية المتعددة. والكتاب يقدم نموذجا الحيوانات الكبيرة موثوقة وقابلة للتكرار لترجمة استراتيجيات المناعية الرواية...

Video: A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents available. A difficulty is presented due to the small size of the animal and the considerable technical challenges of the microsurgery involved in heart transplantation. In particular, a high rate of technical failure early after transplantation may result from recipient death and post-operative complications such as hind limb paralysis or a non-beating heart. Here, the complete technique for heterotopic mouse heart transplantation is demonstrated, involving harvesting the donor heart and its subsequent implantation into a recipient mouse. The donor heart is harvested immediately following in situ perfusion with cold heparinized saline and transection of the ascending aorta and pulmonary artery. The recipient operation involves preparation of the abdominal aorta and inferior vena cava (IVC), followed by end-to-side anastomosis of the donor aorta with the recipient aorta using a single running 10-0 microsuture and a similar anastomosis of the donor pulmonary artery with the recipient IVC. Following the operation the animal is injected with 0.6 ml normal saline subcutaneously and allowed to recover on a 37&#160;&#176;C heating pad. The results from 227 mouse heart transplants are summarized with a success rate at 48 hr of 86.8%. Of the 13.2% failures within 48 hr, 5 (2.2%) experienced hind limb paralysis, 10 (4.4%) had a non-beating heart due to graft ischemic injury and/or thrombosis, while 15 (6.6%) died within 48 hr.

A technique is demonstrated for the microsurgical procedure for heterotopic transplantation of hearts in mice, including simplified methods for donor harvesting and recipient vessel anastomosis.

وهناك طريقة معدلة لغيري مكاني ماوس القلب Transplantion

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique was developed and reported in 2001 by Niimi. Described here are the techniques that have evolved over more than a decade in the hands of three surgeons (Plenter, Grazia, Pietra) in our center. These techniques are now being passed on to a younger generation of surgeons and researchers.
Based largely on the Niimi experience, the procedures used have evolved in the fine details - details which we will endeavor to relate here in such a way that others may be able to use this very useful model. Like Niimi, we have found that a video aid to learning is a priceless resource for the beginner.

The manuscript describes the steps required to perform the heterotopic heart transplant in the mouse.

الفئران غيري مكاني القلب زرع تقنية

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression must be pursued. Employing vascularized bone marrow transplantation and co-transplantation of the thymus have shown promise in this regard in various animal models.1-11 Vascularized bone marrow transplantation allows for the uninterrupted transfer of donor bone marrow cells within the preserved donor microenvironment, and the incorporation of thymus tissue with vascularized bone marrow transplantation has shown to increase T-cell chimerism ultimately playing a supportive role in the induction of immune regulation. The combination of solid organ and vascularized composite allotransplantation can uniquely combine these strategies in the form of a novel transplant model. Murine models serve as an excellent paradigm to explore the mechanisms of acute and chronic rejection, chimerism, and tolerance induction, thus providing the foundation to propagate superior allograft survival strategies for larger animal models and future clinical application. Herein, we developed a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique. The experience in syngeneic and allogeneic transplant settings is described for future broader immunological investigations via an instructional manuscript and video supplement.

To study combined solid organ and vascularized composite allotransplantation, we describe a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique.

A المجهرية نموذج رواية لمنتبذ، جناح كتلة جدار الصدر، الغدة الصعترية، وزرع القلب في الفئران

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and translational research in the field of transplantation medicine. A vast array of reagents is available exclusively in this setting, including mono- and polyclonal antibodies for both diagnostic and interventional applications. In addition, a vast number of genotyped, inbred, transgenic, and knock out strains allow detailed investigation of the individual contributions of humoral and cellular components to the complex interplay of an immune response and make the mouse the gold standard for immunological research. 
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) delineates a novel field of transplantation using allografts to replace "like with like" in patients suffering traumatic or congenital tissue loss. This surgical methodological protocol shows the use of a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis in an orthotopic mouse hind limb transplantation model. The model specifically allows for comparison between established paradigms in solid organ transplantation with a novel form of transplants consisting of various different tissue components. Uniquely, this model allows for the transplantation of a viable vascularized bone marrow compartment and niche that have the potential to exert a beneficial effect on the balance of immune acceptance and rejection. This technique provides a tool to investigate alloantigen recognition and allograft rejection and acceptance, as well as enables the pursuit of functional nerve regeneration studies to further advance this novel field of transplantation.

This novel model for orthotopic hind limb transplantation in the mouse, applying a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis, provides a powerful tool for in&#160;vivo mechanistic immunological research related to vascularized composite allotransplantation (VCA).

مثلي هند الاطراف زرع في ماوس

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.

نموذج الماوس لزرع البنكرياس باستخدام تقنية تعديل الكفة

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic options have significant risk of failure and substantial morbidity.
Use of bone vascularized composite allotransplantation (VCA) would offer both a close match of resected bone size and shape and the healing and remodeling potential of living bone. At present, life-long drug immunosuppression (IS) is required. Organ toxicity, opportunistic infection and neoplasm risks are of concern to treat such non-lethal indications.
We have previously demonstrated that bone and joint VCA viability may be maintained in rats and rabbits without the need of long-term-immunosuppression by implantation of recipient derived vessels within the VCA. It generates an autogenous, neoangiogenic circulation with measurable flow and active bone remodeling, requiring only 2 weeks of IS. As small animals differ from man substantially in anatomy, bone physiology and immunology, we have developed a porcine bone VCA model to evaluate this technique before clinical application is undertaken. Miniature swine are currently widely used for allotransplantation research, given their immunologic, anatomic, physiologic and size similarities to man. Here, we describe a new porcine orthotopic tibial bone VCA model to test the role of autogenous surgical angiogenesis to maintain VCA viability.
The model reconstructs segmental tibial bone defects using size- and shape-matched allogeneic tibial bone segments, transplanted across a major swine leukocyte antigen (SLA) mismatch in Yucatan miniature swine. Nutrient vessel repair and implantation of recipient derived autogenous vessels into the medullary canal of allogeneic tibial bone segments is performed in combination with simultaneous short-term IS. This permits a neoangiogenic autogenous circulation to develop from the implanted tissue, maintaining flow through the allogeneic nutrient vessels for a short time. Once established, the new autogenous circulation maintains bone viability following cessation of drug therapy and subsequent nutrient vessel thrombosis.

Currently any kind of vascularized composite allotransplantation depends on long-term-immunosuppression, difficult to support for non-life-critical indications. We present a new porcine tibial VCA model that can be used to study bone VCA and demonstrate the use of surgical angiogenesis to maintain bone viability without the need of long-term immune-modulation.

الأوعية الجراحية في اللوترانسبلانتيشن قصبي الخنزير: Vascularized العظام حيوانية كبيرة جديدة نموذج مركب اللوترانسبلانتيشن

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular disease is the development of ischemia. In severe cases, patients can develop critical limb ischemia in which they experience constant pain and an increased risk of limb amputation. Current therapies for peripheral ischemia include bypass surgery or percutaneous interventions such as angioplasty with stenting or atherectomy to restore blood flow. However, these treatments often fail to the continued progression of vascular disease or restenosis or are contraindicated due to the overall poor health of the patient. A promising potential approach to treat peripheral ischemia involves the induction of therapeutic neovascularization to allow the patient to develop collateral vasculature. This newly formed network alleviates peripheral ischemia by restoring perfusion to the affected area. The most frequently employed preclinical model for peripheral ischemia utilizes the creation of hind limb ischemia in healthy rabbits through femoral artery ligation. In the past, however, there has been a strong disconnect between the success of preclinical studies and the failure of clinical trials regarding treatments for peripheral ischemia. Healthy animals typically have robust vascular regeneration in response to surgically induced ischemia, in contrast to the reduced vascularity and regeneration in patients with chronic peripheral ischemia. Here, we describe an optimized animal model for peripheral ischemia in rabbits that includes hyperlipidemia and diabetes. This model has reduced collateral formation and blood pressure recovery in comparison to a model with a higher cholesterol diet. Thus, the model may provide better correlation with human patients with compromised angiogenesis from the common co-morbidities that accompany peripheral vascular disease.

We describe a surgical procedure used to induce peripheral ischemia in rabbits with hyperlipidemia and diabetes. This surgery acts as a preclinical model for conditions experienced in peripheral artery disease in patients. Angiography is also described as a means to measure the extent of introduced ischemia and recovery of perfusion.

نموذج قبل السريرية من نقص التروية الأطراف هند في الأرانب السكري

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand and face transplants and, more recently, abdominal wall, uterus, and urogenital transplants. Functional outcomes have exceeded initial expectations, and most recipients enjoy an improved quality of life. However, as clinical experience accumulates, chronic rejection and complications from the immunosuppression must be addressed. In many cases where grafts have failed, the causative pathology has been ischemic vasculopathy. <span style="font-size: 11pt; line-height: 115%; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(41, 43, 49); background-image: initial; background-position: initial; background-size: initial; background-repeat: initial; background-attachment: initial; background-origin: initial; background-clip: initial;">The biological mechanisms of the acute and chronic rejection associated with VCA, especially ischemic vasculopathy, are important areas of research. However, due to the very small number of VCA patients, the evaluation of proposed mechanisms is better addressed in an experimental model. Multiple groups have used animal models to address some of the relevant unsolved questions in VCA rejection and vasculopathy. Several model designs involving a variety of species are described in the literature. Here we present a reproducible model of VCA heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap in the rat that can be utilized for translational VCA research. This model allows for the serial evaluation of the graft, including biopsies and different imaging modalities, while maintaining a low level of morbidity.

Vascularized composite allograft offers life-altering benefits to transplant recipients, but the biological causes of graft rejection and vasculopathy remain poorly understood. The rodent surgical model presented here offers a reproducible, clinically relevant model of transplantation, allowing researchers to evaluate rejection events and potential therapeutic strategies to prevent their occurrence.

المعدلة المغايرة الأوستيوميوكوتانيوس رفرف النموذج في الفئران لنقل الاوعيه الدموية المركبة المركب البحوث

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand ...

A Mouse Model of Vascularized Heterotopic Spleen Transplantation for Studying Spleen Cell Biology and Transplant Immunity

The spleen is a unique lymphoid organ that plays a critical role in the homeostasis of the immune and hematopoietic systems. Patients that have undergone splenectomy regardless of precipitating causes are prone to develop an overwhelming post-splenectomy infection and experience increased risks of deep venous thrombosis and malignancies. Recently, epidemiological studies indicated that splenectomy might be associated with the occurrence of cardiovascular diseases, suggesting that physiological functions of the spleen have not yet been fully recognized. Here, we introduce a mouse model of vascularized heterotopic spleen transplantation, which not only can be utilized to study the function and behavioral activity of splenic immune cell subsets in different biologic processes, but also can be a powerful tool to test the therapeutic potential of spleen transplantation in certain diseases. The main surgical steps of this model include donor spleen harvest, the removal of recipient native spleen, and spleen graft revascularization. Using congenic mouse strains (e.g., mice with CD45.1/CD45.2 backgrounds), we observed that after syngeneic transplantation, both donor-derived splenic lymphocytes and myeloid cells migrated out of the graft as early as post-operative day 1, concomitant with the influx of multiple types of recipient cells, thus generating a unique chimera. &#160;Despite relatively challenging techniques, this procedure can be performed with &#62;90% success rate. This model allows tracking the fate, longevity, and function of splenocytes during steady state and in a disease setting following a spleen transplantation, thereby offering a great opportunity to discover the distinct role for spleen-derived immune cells in different disease processes.

This protocol details the surgical steps of a mouse model of vascularized heterotopic spleen transplantation, a technically challenging model that can serve as a powerful tool in studying the fate and longevity of spleen cells, the mechanisms of distinct spleen cell populations in disease progression, and transplant immunity.

نموذج الماوس من الاوعيه الدموية غير المتجانسة زرع الطحال لدراسة البيولوجيا خليه الطحال وزرع المناعة

The spleen is a unique lymphoid organ that plays a critical role in the homeostasis of the immune and hematopoietic systems. Patients that have undergone ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current limitations in immunosuppression and functional neuromotor recovery. Many animal models have been developed for studying unique features of VCA, but here we present a robust reproducible model of orthotopic hind limb transplant in rats designed to simultaneously investigate both aspects of current VCA limitation: immunosuppression strategies and functional neuromotor recovery. At the core of the model rests a commitment to meticulous, time-tested microsurgical techniques such as hand sewn vascular anastomoses and hand sewn neural coaptation of the femoral nerve and the sciatic nerve. This approach yields durable limb reconstructions that allow for longer lived animals capable of rehabilitation, resumption of daily activities, and functional testing. With short-term treatment of conventional immunosuppressive agents, allotransplanted animals survived up to 70 days post-transplant, and isotransplanted animals provide long lived controls beyond 200 days post-operatively. Evidence of neurologic functional recovery is present by 30 days post operatively. This model not only provides a useful platform for interrogating immunological questions unique to VCA and nerve regeneration, but also allows for in vivo testing of new therapeutic strategies specifically tailored for VCA.

This protocol presents a robust, reproducible model of vascularized composite allotransplant (VCA) geared toward simultaneous study of immunology and functional recovery. The time invested in meticulous technique in a right mid-thigh hind limb orthotopic transplant with hand sewn vascular anastomoses and neural coaptation yields the ability to study functional recovery.

اتخاذ الخطوة التالية: تقويم العظام العصبية هند نموذج لزرع الأطراف لتعظيم الانتعاش الوظيفي في الفئران

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...