تم الحصول على بعض البيانات التي تظهر هنا في مختبر الدكتور جاكلين N. كراولي في المعهد القومي الأميركي للصحة العقلية ونود أن نشكرها على إتاحة الفرصة لنا لإظهار البيانات في ورقة. نشكر أيضا كازو ناكانيشي لمساعدته في تطوير برنامج للImageFZ التحليل السلوكي. وأيد هذا البحث من قبل منحة في والمعونة للبحوث العلمية (B) (21300121)، منحة في والمعونة للبحوث العلمية في مجالات مبتكرة (شبكة الشامل علوم الدماغ) من وزارة التربية والتعليم والعلوم والرياضة والثقافة في اليابان ، منح من مركز اليابان Neuroinformatics (NIJC)، والمنح المقدمة من كريست اليابان العلوم والتكنولوجيا وكالة (JST).

<ol>
	<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> What's wrong with my mouse: behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , (2007).</li><li>Fanselow, M. S., Poulos, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuroscience+of+mammalian+associative+learning.">The neuroscience of mammalian associative learning.</a> Annu. Rev. Psychol. 56, 207-234 (2005).</li><li>LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emotion+circuits+in+the+brain.">Emotion circuits in the brain.</a> Annu. Rev. Neurosci. 23, 155-184 (2000).</li><li>Nakajima, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+behavioral+phenotyping+of+calpastatin-knockout+mice.">Comprehensive behavioral phenotyping of calpastatin-knockout mice.</a> Mol. Brain. 1, 7 (2008).</li><li>Ikeda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+YWHAE,+a+gene+encoding+14-3-3epsilon,+as+a+possible+susceptibility+gene+for+schizophrenia.">Identification of YWHAE, a gene encoding 14-3-3epsilon, as a possible susceptibility gene for schizophrenia.</a> Hum. Mol. Genet. 17, 3212-3222 (2008).</li><li>Sakae, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+lacking+the+schizophrenia-associated+protein+FEZ1+manifest+hyperactivity+and+enhanced+responsiveness+to+psychostimulants.">Mice lacking the schizophrenia-associated protein FEZ1 manifest hyperactivity and enhanced responsiveness to psychostimulants.</a> Hum. Mol. Genet. 17, 3191-3203 (2008).</li><li>Fukuda, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+protocadherin-alpha+A+isoforms+in+mice+changes+contextual+fear+conditioning+and+spatial+working+memory.">Down-regulation of protocadherin-alpha A isoforms in mice changes contextual fear conditioning and spatial working memory.</a> Eur. J. Neurosci. 28, 1362-1376 (2008).</li><li>Imayoshi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+continuous+neurogenesis+in+the+structural+and+functional+integrity+of+the+adult+forebrain.">Roles of continuous neurogenesis in the structural and functional integrity of the adult forebrain.</a> Nat. Neurosci. 11, 1153-1161 (2008).</li><li>Nakatani, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+behavior+in+a+chromosome-engineered+mouse+model+for+human+15q11-13+duplication+seen+in+autism.">Abnormal behavior in a chromosome-engineered mouse model for human 15q11-13 duplication seen in autism.</a> Cell. 137, 1235-1246 (2009).</li><li>Takao, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+behavioral+analysis+of+calcium/calmodulin-dependent+protein+kinase+IV+Knockout+mice.">Comprehensive behavioral analysis of calcium/calmodulin-dependent protein kinase IV Knockout mice.</a> PLoS ONE. 5, (2010).</li><li>Tamada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+exploratory+activity+in+a+mouse+model+of+15q+duplication+syndrome;+implications+for+disturbance+of+serotonin+signaling.">Decreased exploratory activity in a mouse model of 15q duplication syndrome; implications for disturbance of serotonin signaling.</a> PLoS ONE. 5, (2010).</li><li>Watanabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relaxin-3-deficient+mice+showed+slight+alteration+in+anxiety-related+behavior.">Relaxin-3-deficient mice showed slight alteration in anxiety-related behavior.</a> Front. Behav. Neurosci. 5, 50 (2011).</li><li>Takeuchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P301S+mutant+human+tau+transgenic+mice+manifest+early+symptoms+of+human+tauopathies+with+dementia+and+altered+sensorimotor+gating.">P301S mutant human tau transgenic mice manifest early symptoms of human tauopathies with dementia and altered sensorimotor gating.</a> PLoS ONE. 6, (2011).</li><li>Koshimizu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenomatous+polyposis+coli+heterozygous+knockout+mice+display+hypoactivity+and+age-dependent+working+memory+deficits.">Adenomatous polyposis coli heterozygous knockout mice display hypoactivity and age-dependent working memory deficits.</a> Front. Behav. Neurosci. 5, 85 (2011).</li><li>Yao, I., Takao, K., Miyakawa, T., Ito, S., Setou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+E3+ligase+SCRAPPER+in+contextual+fear+conditioning:+extensive+behavioral+phenotyping+of+Scrapper+heterozygote+and+overexpressing+mutant+mice.">Synaptic E3 ligase SCRAPPER in contextual fear conditioning: extensive behavioral phenotyping of Scrapper heterozygote and overexpressing mutant mice.</a> PLoS ONE. 6, (2011).</li><li>Shoji, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+behavioral+analysis+of+ENU-induced+Disc1-Q31L+and+-L100P+mutant+mice.">Comprehensive behavioral analysis of ENU-induced Disc1-Q31L and -L100P mutant mice.</a> BMC Res. Notes. 5, 108 (2012).</li><li>Anagnostaras, S. G., Josselyn, S. A., Frankland, P. W., Silva, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-assisted+behavioral+assessment+of+Pavlovian+fear+conditioning+in+mice.">Computer-assisted behavioral assessment of Pavlovian fear conditioning in mice.</a> Learn. Mem. 7, 58-72 (2000).</li><li>Miyakawa, T., Yamada, M., Duttaroy, A., Wess, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivity+and+intact+hippocampus-dependent+learning+in+mice+lacking+the+M1+muscarinic+acetylcholine+receptor.">Hyperactivity and intact hippocampus-dependent learning in mice lacking the M1 muscarinic acetylcholine receptor.</a> J. Neurosci. 21, 5239-5250 (2001).</li><li>Marchand, A. R., Luck, D., DiScala, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+an+improved+automated+analysis+of+freezing+behaviour+in+rats+and+its+use+in+trace+fear+conditioning.">Evaluation of an improved automated analysis of freezing behaviour in rats and its use in trace fear conditioning.</a> J. Neurosci. Methods. 126, 145-153 (2003).</li><li>Kopec, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+automated+method+to+analyze+rodent+motion+during+fear+conditioning.">A robust automated method to analyze rodent motion during fear conditioning.</a> Neuropharmacology. 52, 228-233 (2007).</li><li>Wehner, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+trait+locus+analysis+of+contextual+fear+conditioning+in+mice.">Quantitative trait locus analysis of contextual fear conditioning in mice.</a> Nat. Genet. 17, 331-334 (1997).</li><li>Quirk, G. J., Armony, J. L., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fear+conditioning+enhances+different+temporal+components+of+tone-evoked+spike+trains+in+auditory+cortex+and+lateral+amygdala.">Fear conditioning enhances different temporal components of tone-evoked spike trains in auditory cortex and lateral amygdala.</a> Neuron. 19, 613-624 (1997).</li><li>Chaudhury, D., Christopher, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+modulation+of+learning+and+memory+in+fear-conditioned+mice.">Circadian modulation of learning and memory in fear-conditioned mice.</a> Behav. Brain Res. 133, 95-108 (2002).</li><li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+circadian+phase+on+context+and+cued+fear+conditioning+in+C57BL/6J+mice.">Effect of circadian phase on context and cued fear conditioning in C57BL/6J mice.</a> Learn. Behav. 29, 133-142 (2001).</li><li>Frankland, P. W., Bontempi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+organization+of+recent+and+remote+memories.">The organization of recent and remote memories.</a> Nat. Rev. Neurosci. 6, 119-130 (2005).</li><li>Contarino, A., Baca, L., Kennelly, A., Gold, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+assessment+of+conditioning+parameters+for+context+and+cued+fear+in+mice.">Automated assessment of conditioning parameters for context and cued fear in mice.</a> Learn. Mem. 9, 89-96 (2002).</li><li>Kinney, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficits+in+trace+cued+fear+conditioning+in+galanin-treated+rats+and+galanin-overexpressing+transgenic+mice.">Deficits in trace cued fear conditioning in galanin-treated rats and galanin-overexpressing transgenic mice.</a> Learn. Mem. 9, 178-190 (2002).</li><li>Hefner, K., Holmes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+fear-,+anxiety-+and+depression-related+behavior+across+adolescence+in+C57BL/6J+mice.">Ontogeny of fear-, anxiety- and depression-related behavior across adolescence in C57BL/6J mice.</a> Behav. Brain Res. 176, 210-215 (2007).</li><li>Wellman, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+stress-coping+and+fear+extinction+and+abnormal+corticolimbic+morphology+in+serotonin+transporter+knock-out+mice.">Impaired stress-coping and fear extinction and abnormal corticolimbic morphology in serotonin transporter knock-out mice.</a> J. Neurosci. 27, 684-691 (2007).</li><li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+measurement+of+mouse+freezing+behavior+and+its+use+for+quantitative+trait+locus+analysis+of+contextual+fear+conditioning+in+(BALB/cJ+&#215;+C57BL/6J)F2+mice.">Automated measurement of mouse freezing behavior and its use for quantitative trait locus analysis of contextual fear conditioning in (BALB/cJ &#215; C57BL/6J)F2 mice.</a> Learn. Mem. 5, 391-403 (1998).</li><li>Valentinuzzi, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+circadian+phase+on+context+and+cued+fear+conditioning+in+C57BL/6J+mice.">Effect of circadian phase on context and cued fear conditioning in C57BL/6J mice.</a> Learn. Behav. 29, 133-142 (2001).</li><li>Bothe, G. W. M., Bolivar, V. J., Vedder, M. J., Geistfeld, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+behavioral+differences+among+five+inbred+mouse+strains+commonly+used+in+the+production+of+transgenic+and+knockout+mice.">Genetic and behavioral differences among five inbred mouse strains commonly used in the production of transgenic and knockout mice.</a> Genes Brain Behav. 3, 149-157 (2004).</li><li>Chen, C., Kim, J. J., Thompson, R. F., Tonegawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+lesions+impair+contextual+fear+conditioning+in+two+strains+of+mice.">Hippocampal lesions impair contextual fear conditioning in two strains of mice.</a> Behav. Neurosci. 110, 1177-1180 (1996).</li><li>Anagnostaras, S. G., Gale, G. D., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampus+and+contextual+fear+conditioning:+Recent+controversies+and+advances.">Hippocampus and contextual fear conditioning: Recent controversies and advances.</a> Hippocampus. 11, 8-17 (2001).</li><li>Akirav, I., Maroun, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+medial+prefrontal+cortex-amygdala+circuit+in+stress+effects+on+the+extinction+of+fear.">The role of the medial prefrontal cortex-amygdala circuit in stress effects on the extinction of fear.</a> Neural Plast. , 1-11 (2007).</li><li>Johansen, J. P., Cain, C. K., Ostroff, L. E., LeDoux, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+fear+learning+and+memory.">Molecular mechanisms of fear learning and memory.</a> Cell. 147, 509-524 (2011).</li><li>Anagnostaras, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+assessment+of+pavlovian+conditioned+freezing+and+shock+reactivity+in+mice+using+the+video+freeze+system.">Automated assessment of pavlovian conditioned freezing and shock reactivity in mice using the video freeze system.</a> Front. Behav. Neurosci. 4, (2010).</li><li>Pham, J., Cabrera, S. M., Sanchis-Segura, C., Wood, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+scoring+of+fear-related+behavior+using+EthoVision+software.">Automated scoring of fear-related behavior using EthoVision software.</a> J. Neurosci. Methods. 178, 323-326 (2009).</li><li>Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crouching+as+an+index+of+fear.">Crouching as an index of fear.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 67, 370-375 (1969).</li><li>Frankland, P. W., Bontempi, B., Talton, L. E., Kaczmarek, L., Silva, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+involvement+of+the+anterior+cingulate+cortex+in+remote+contextual+fear+memory.">The involvement of the anterior cingulate cortex in remote contextual fear memory.</a> Science. 304, 881-883 (2004).</li><li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders:+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice.">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann. N. Y. Acad. Sci. 1086, 144-159 (2006).</li><li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+brain-behavior+phenotypying+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders.">Impact of brain-behavior phenotypying of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci. Res. 58, 124-132 (2007).</li></ol>

نحن نؤكد أنه لا توجد صراعات معروفة من الفائدة المرتبطة هذا المنشور وكان هناك أي دعم مالي كبير لهذا العمل الذي كان من الممكن أن تتأثر نتائجها.

الخوف تكييف اختبار السياقية وملقن هي واحدة من الأكثر استخداما على نطاق واسع نماذج لتقييم التعلم والذاكرة. هذا الاختبار هو شكل من أشكال تكييف بافلوف التي يتم فيها وجود ارتباط بين السياق و / أو حافزا مكيفة (جديلة السمعية) وحافزا مكره (footshock الكهربائية). حتى بعد الاقتران واحدة من سياق / جديلة السمعية وfootshock والفئران يحمل تجميد طويلة الأمد عندما تواجه مع أي سياق أو جديلة. في هذا الاختبار، يتم استخدام السلوك تجميد بمثابة مؤشر للذاكرة الخوف. وقد كشفت الدراسات الدوائية والآفة التي تكوين الذاكرة، وتوحيد، واسترجاعها ويتم تنظيم العديد من مناطق الدماغ مثل اللوزة، الحصين، وقشرة الفص الجبهي 3،33-35. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت دراسات علم الوراثة الجزيئية دور الجينات والجزيئات المشاركة في التعلم والذاكرة في هذه المناطق في الدماغ باستخدام الفئران المهندسة وراثيا 36 محددة. لذلك، هذا الاختبار هو بسيط داخه ومفيدة لاستكشاف أساس العصبية الحيوية الكامنة التعلم الخوف والذاكرة. في هذه المقالة الفيلم، قدمنا ​​بروتوكول جهدنا لتوفير المجربون مع معلومات تفصيلية لفهم وسهولة إجراء الاختبار. وكان كميا السلوك من خلال الملاحظة المباشرة تجميد من قبل المجربون الإنسان. ومن المتوقع أن تنتج موثوق بها، نتائج مستقرة عبر الملاحظات ومجرب المدربين تدريبا جيدا. ومع ذلك، وهذه الطريقة تنطوي على المشاكل المحتملة، مثل الاختلافات في طريقة الرصد، والتحيز ضد مراقب، وأخطاء بسيطة الكمي، مما يجعل من الصعب مقارنة النتائج مباشرة من المجربون مستقلة ومختبرات مختلفة. كما تم استخدام نظام قياس الكمبيوتر المستندة إلى photobeam الآلي 26،30-32. ومع ذلك، فإن هذا النظام يقدم أيضا المشاكل المحتملة في قياس السلوكيات تجميد. بسبب ترتيب الاستشعار، قد يكون هذا النظام غير قادر على الكشف عن الحركات رأس صغير من شأنه أن typicaLLY أن سجل باسم &#39;نشطة&#39; من خلال الملاحظة البشرية. بالإضافة إلى ذلك، يرتجف خلال تجميد يمكن اعتبارها nonfreezing لأنه عندما لوحظ على تجميد الحيوان، انقطاع متقطع في photobeam نتيجة ليرتجف. كطريقة بديلة، وقد وضعت المؤتمتة الصورة والفيديو تحليل النظم 17-20،37،38. Anagnostaras وآخرون 37 وصفت بعض الأنظمة مع برامج تحليل الصور التي لها صلاحية جيدة ويسجل تجميد جيدا 17،20،37-38. ومع ذلك، فإن معظم هذه النظم والبرامج تحليل يتعين الحصول عليها من شركات تجارية ومكلفة عادة. قمنا بتطوير برنامج حاسوبي ImageFZ لتحليل السلوك تجميد، ويتم توزيع هذا البرنامج كبرنامج البرمجيات الحرة. ImageFZ بالكشف عن الماوس بوصفه مجموعة من بكسل (الجسيمات) ويميز حركة الماوس خفية باسم &#39;تجميد&#39; أو &#39;غير تجميد&#39; اعتمادا على كمية منمساحة المناطق غير المتداخلة بين الجسيمات من كل زوج من الصور التوالي. كما هو مبين في نتائج ممثل، والقياسات باستخدام برنامج ImageFZ تتسق مع أو أكثر دقة من التي تم الحصول عليها باستخدام وسائل أخرى. وبالتالي، فإن البرنامج تلقائيا ImageFZ يقيس السلوك الذي نحكم المراقبين الإنسان عن تجميد باستخدام معايير محددة. بالإضافة إلى ذلك، البرنامج بحساب ImageFZ سافر مسافة (سم) قبل وأثناء وبعد التعرض footshock، وتسهيل إجراء تقييم للحساسية الصدمة وتحليل سلوك التجمد. توجد اختلافات منهجية بين المختبرات. قد يؤدي هذه الاختلافات في الصعوبة في مقارنة البيانات بين المختبرات وفي تكرار النتائج في مختبرات مختلفة. للحصول على بيانات أكثر استقرارا وقابلة للمقارنة، فمن الضروري لتوحيد بروتوكول الاختبار قدر الإمكان. نظام تحليل مع ImageFZ يؤدي إلى أتمتة إجراءات الاختبار، والتي يمكن أن تسهم فيتوحيد البروتوكولات المستخدمة في المختبرات. يجب النظر في العديد من الاستجابات السلوكية عند تحليل سلوك التجمد. الأولى، عندما يواجه وضعا الحيوانات خوفا، فإنها قد الفرار بدلا من تجميد 39. فرار هي واحدة من الاستجابات الخوف، وسوف يؤدي إلى حدوثه التقليل ذاكرة الخوف. الثانية، قد تجميد تعتمد على مستوى النشاط العام، ومستوى النشاط في الفئران التجريبية والضابطة يحتاج إلى دراسة. على سبيل المثال، على الرغم من أن الفئران التي تفتقر إلى مستقبلات أستيل المسكارينية M1 أظهرت انخفاض مستويات تجميد مقارنة البرية من نوع الفئران، أشارت الاختبارات السلوكية المختلفة التي يمكن أن تعزى النتائج إلى النمط الظاهري على فرط النشاط بدلا من ضعف ذاكرتهم 18. ImageFZ بحساب المسافة (سم) سافر من الموضوعات. تتوفر لفحص ما إذا كان أو لا وجود اختلافات في مستويات النشاط العام بين الموضوعات البيانات. إذا كان هناك فرق في المجموعةسافر مسافة نهج واحد ممكن لهذه المشكلة هو أن تنظر سافر المسافة خلال دقيقة 2 الأولى من التدريب مثل النشاط الأساسي واستخدام نسبة القمع (قمع نسبة = (نشاط أثناء الاختبار) / (النشاط خلال خط الأساس + النشاط خلال الاختبار)) باعتباره المؤشر الثانوي من الخوف 17،40. أخيرا، وجود اختلاف في حساسية الألم، الأمر الذي أدى إلى تغييرات في التفاعل إلى footshock الكهربائية، إن وجدت، قد يؤدي إلى تغيرات في السلوك التجمد. يحسب ImageFZ أيضا سافر مسافة (سم) بالتفصيل من 2 ثانية قبل التعرض لfootshock 2 ثانية إلى 2 ثانية بعد تعرضها (لمدة 6 ثانية)، والتي يمكن استخدامها بمثابة مؤشر للحساسية footshock. وقد تم تطوير أنظمة الفيديو تحليل لقياس السلوك تجميد البيضاء، السوداء، آغوطي، وتمييع الفئران البني. يستخدم ImageFZ صينية الطابق الأسود أسود وشبكات لدراسة الفئران البيضاء (انظر الشكل 1B). مصنوعة من شبكات أسود SPECI<html> معالجة حليف المعادن مع الطلاء الأسود المطلي ولها الموصلية الكهربائية مماثلة لتلك التي من شبكات معدنية noncoated، التي تستخدم عادة لالفئران السوداء. ImageFZ أيضا يحلل السلوك التجمد في الفئران والقوارض الأخرى من خلال إدخال تعديلات على المعلمات البرنامج. في الإصدار الحالي من ImageFZ، يتم تسجيل السلوك للموضوع باستخدام كاميرا الفيديو من الجدار العلوي لتحليل التجمد. ImageFZ ويمكن أيضا أن تستخدم في انشاء حيث يتم التقاط الصور من جانب الغرفة. بالإضافة إلى ذلك، تسيطر على ImageFZ بحد أقصى 4 أجهزة. هذه الميزة تسمح للباحث لدراسة الفئران في وقت واحد 4، وتوفير الوقت والحد من التأثيرات المحتملة من الاختلافات في وقت تنفيذ كل موضوع واختبار النظام على السلوك. وبالتالي، ImageFZ يبسط إجراءات اختبار وتحليل سلوك تجميد، ويسهل هذا البرنامج اختبار بعدد أقل من العمالة ودون أي تدريب للتجارب السلوكية. e_content &quot;&gt; في المختبر Miyakawa، قمنا بتقييم أكثر من 110 سلالات من الفئران المعدلة وراثيا والبرية من نوع الفئران التحكم في الخوف تكييف اختبار السياقية وملقن باستخدام نظام تحليل الفيديو لتوضيح آثار جين معين على التعلم والذاكرة 41-42 لقد حصلنا على مجموعة كبيرة من البيانات الخام لأكثر من 5،000 الفئران البيانات الخام التي تم استخدامها للالمقالات والبحوث المنشورة 4-16 مدرجة في &quot;قاعدة ماوس النمط الظاهري &#39;كقاعدة بيانات العام (URL:. العنوان التالي: / / www.mouse-phenotype.org/). وتنص المادة الفيلم على معلومات مفصلة بشأن تفاصيل الإجراء التجريبي لدينا، ويشجع على فهم حالة الاختبار.

الخوف تكييف اختبار السياقية وملقن هو النموذج السلوكي المستخدمة لتقييم الخوف النقابي التعلم والذاكرة في القوارض 1-3. وقد تم هذا الاختبار يستخدم على نطاق واسع لفهم الآليات العصبية للتعلم والذاكرة في الخوف المعدلة وراثيا وخروج المغلوب الفئران 1،4-16. تجميد السلوك، الذي يعرف بأنه الجمود كاملة باستثناء التنفس، هو استجابة مشتركة لحالات الخوف. في هذا النموذج السلوكي، وبعد تتعرض الحيوانات إلى الاقتران من جديلة السمعية مع footshock الكهربائية، فإنها تستجيب لتحفيز إنتاج الخوف عن طريق عرض تجميد السلوك، والتي تقاس وذلك في مؤشر التعلم الخوف النقابي والذاكرة. هذا الاختبار يتطلب معدات أقل تفصيلا، أقل مجهود بدني من قبل المحقق، وأقل الكثير من الوقت لتدريب الفئران من غيرها من مهام التعلم والذاكرة، بل يتطلب عادة حوالي 5-10 دقيقة / يوم في الماوس لمدة 2 ايام. على الرغم من أن إجراء الاختبار هو الاشتراكيةmple ويتطلب القليل من الوقت للتنفيذ، يجب على المحقق مراقبة بعناية وقياس سلوك الماوس، وبالتالي، وضعت العديد من أنظمة القياس الآلي لإجراء التحليل السلوكي 17-20. لدينا نظام تحليل الفيديو، والتي قمنا بتطويرها مع برنامج حاسوبي ImageFZ، يتيح لنا تحليل السلوك بسهولة تجميد ونتائج موثوق بها للغاية. توفر هذه المقالة معلومات مفصلة عن إجراء اختبار لدينا ويصف كيفية استخدام برنامج حاسوبي ImageFZ.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="701">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#160;ImageFZ&#160; program</td>
			<td>Developed by Tsuyoshi Miyakawa</td>
			<td></td>
			<td>&#160;This program is available through O&#39;Hara &#38; Co., Tokyo, Japan and for free download at http://www.mouse-phenotype.org/. This software runs on 32-bit Windows XP/Vista/7.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conditioning chamber</td>
			<td>O&#39;Hara &#38; co., Japan</td>
			<td>CL-3002L</td>
			<td>For mouse.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cued test chamber</td>
			<td>O&#39;Hara &#38; co., Japan</td>
			<td>CLT-3002L</td>
			<td>For mouse.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Interface</td>
			<td>O&#39;Hara &#38; co., Japan</td>
			<td>CL-1040</td>
			<td>The interface includes a white noise/tone generator, which can be controlled by ImageFZ program.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scrambled shock generator</td>
			<td>O&#39;Hara &#38; co., Japan</td>
			<td>SGA-2040</td>
			<td>The shock generator can be controlled by ImageFZ program.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shock grid tester (ammeter)</td>
			<td>O&#39;Hara &#38; co., Japan</td>
			<td>SG-T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB video capture device</td>
			<td>XLR8</td>
			<td>USB2IVOSX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quad image splitter</td>
			<td>Wireless Tsukamoto Co., Ltd., Japan</td>
			<td>400AS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soundproof room</td>
			<td>O&#39;Hara &#38; co., Japan</td>
			<td>CL-4210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freeze Monitor</td>
			<td>San Diego Instruments, Inc., CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>16 x 16 photbeam array&#160; ( 2.5 cm spacing)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

contextual and cued fear conditioning test using a video analyzing system in mice

الخوف تكييف اختبار السياقية وملقن هي واحدة من الاختبارات السلوكية التي يقيم قدرة الفئران على التعلم والتذكر وجود ارتباط بين العظة البيئية والخبرات مكره. في هذا الاختبار، يتم وضع الفئران في غرفة تكييف وتعطى قصاصات من المثير الشرطي (وهو جديلة السمعية)، والتحفيز دون شروط مكره (وهي footshock الكهربائية). بعد تأخير الوقت، تتعرض الفئران لنفس تكييف غرفة وغرفة على شكل مختلف مع عرض جديلة السمعية. تجميد السلوك أثناء الاختبار يتم قياس بمثابة مؤشر للذاكرة الخوف. لتحليل السلوك تلقائيا، قمنا بتطوير نظام تحليل الفيديو باستخدام برنامج حاسوبي تطبيق ImageFZ، والذي يتوفر للتنزيل مجانا في http://www.mouse-phenotype.org/. هنا، لتظهر تفاصيل بروتوكول لدينا، ونحن لشرح الإجراء لدينا لالسياقية وملقن تكييف الخوف في الفئران C57BL/6J اختبار باستخدام SYST ImageFZم. بالإضافة إلى ذلك، ونحن لدينا بروتوكول التحقق من صحتها وتحليل أداء النظام الفيديو بمقارنة الوقت تجميد قياسها من قبل النظام ImageFZ أو نظام قياس الكمبيوتر المستندة إلى photobeam مع أن سجلها مراقب الإنسان. كما هو مبين في نتائج ممثلنا، كانت البيانات التي حصلت عليها ImageFZ مماثلة لتلك التي حللت من قبل المراقب الإنسان، مشيرا إلى أن التحليل السلوكي باستخدام نظام ImageFZ هو موثوق بها للغاية. تنص المادة الفيلم على معلومات مفصلة عن إجراءات الاختبار وسوف تعزز فهم الوضع التجريبية.

في اختبار تكييف الخوف، المجربون الانسان يستخدم لقياس السلوك من خلال تجميد كثيفة العمالة الملاحظة المباشرة 26-29، ولكن تم استخدام أنظمة قياس الكمبيوتر مؤخرا على أساس photobeam (مثل نظام &quot;مراقب تجميد &#39;) وصورة، تحليل تلقائيا قياس السلوك تجميد 26،30-32. ImageFZ هو نظام تحليل الصورة-الآلي، والتي تنتج نتائج مماثلة لتلك التي حصلنا عليها من خلال الملاحظة البشرية، كما هو موضح أدناه. هنا، ونحن مقارنة نتائج المراقبة الإنسان مع تلك التحليل ImageFZ تحت معلمات متفاوتة: &#39;معدل (إطار / ثانية)&#39; و &#39;تجميد المعيار (بكسل).&#39; في هذه التجربة، وخمسة الفئران C57BL/6J الذكور (يعني وزن الجسم ± SD (ز)، 31.4 ± 3.55؛ يعني حجم الجسم ± SD (بكسل)، 351.6 ± 62.2) واستخدمت في 15-27 أسابيع من العمر. أبديت ملاحظة الإنسان باستخدام برنامج الحدث تسجيل (برنامج حاسوبي ماكنتوش OS9)؛ حدثا رئيسيا الملحة التي تستمرواعتبر د لمدة 2 ثانية أو أكثر عندما ماوس عرض نوبة من أي حركة &#39;تجميد&#39;. تم حساب النسبة المئوية للتجميد كل 60 ثانية في كل اختبار وتستخدم لتحليل الارتباط. في المئة من تجميد وسجل المراقبون 2 (الموثوقية بين الفاحصين، لتكييف، ص = 0.879؛ لاختبار السياق، ص = 0.957؛ لاختبار ملقن، ص = 0.866، لجميع الحالات، ص = 0.888) وكان متوسط ​​لتوليد الإنسان يسجل. تم فحص الارتباط بين النسب المئوية التي تقاس من خلال تجميد ImageFZ مع كل معدل الإطار (أي 1، 2، و 4 في الثانية) وتلك التي حصلنا عليها من خلال الملاحظات الإنسان. كما هو موضح في الشكل (4)، والنسب المئوية محسوبة من خلال تجميد ImageFZ (1، 2، و 4 في الثانية) ويرتبط ارتباطا وثيقا متوسط ​​القيمة التي تم الحصول عليها من قياسات المراقبين 2. والجدير بالذكر أن التقاط الصور بمعدل أعلى الإطار لا تنتج دائما أفضل الارتباط. تحليل الصور في 1 في الثانية ولدت نتائج مماثلة لتلك التي تم الحصول عليها من المراقبين الإنسان في البريداختبار منظمة العمل ضد الجوع. تم فحص الارتباط بين نسب تجميد قياسها من خلال الملاحظات الإنسان واستخدام ImageFZ تحت كل حالة من &#39;معيار التجميد (بكسل)&#39; (أي 20، 30، و 40 بكسل). النسب المئوية تجميد حسابها باستخدام ImageFZ في &quot;المعيار التجميد (بكسل)&quot; 20، 30، و 40 بكسل تم، في جميع الحالات، مرتبطة إلى حد كبير مع تلك التي تم الحصول عليها من خلال الملاحظات الإنسان (الشكل 5). كما هو مبين في الشكل 5D، عندما يتم تعيين المعيار التجميد إلى قيمة منخفضة، وحركة خفية على فأرة الحاسوب، نظرت إلى أن &#39;تجميد&#39; مراقبون الإنسان، يعتبر &quot;غير تجميد &#39;باستخدام ImageFZ. على العكس، إذا تم تعيين المعيار إلى قيمة عالية، حركة الماوس، وسجل باسم &#39;غير تجميد&#39; مراقبون الإنسان، سينظر &#39;تجميد&#39; باستخدام ImageFZ (أرقام 5C، 5F، و5I). وبالتالي، للحصول على النتائج الأكثر موثوقية، يجب معايرة لنا كل معلمة من برنامج ImageFZجي من خلال البيانات وسجل الملاحظات الإنسان في كل بيئة الاختبار. بالإضافة إلى ذلك، قمنا بمقارنة النتائج التي تم إنشاؤها بواسطة مراقب الإنسان، وذلك باستخدام نظام قائم على القياس photobeam الكمبيوتر (نظام مراقبة تجميد)، لتلك التي حصلنا عليها باستخدام ImageFZ (انظر الشكل 6). أصيب بالعمى المراقب الإنسان لمجموعة العلاج ونتائج ImageFZ التهديف. لإعدادات المعلمة من نظام مراقبة تجميد، كنا 3 تدابير من النسبة المئوية للتجميد من نظام التحقق من صحة سابقا 30. لفترة وجيزة، وعدد من فترات 10 ثانية في الحيوانات التي يتطلب أكثر من 1 أو 2 ثانية لعبور أول شعاع جديد من الفاصل الزمني (10sec و1sec الجيش و2sec 10sec و، على التوالي) والكمون بين بداية كل فترة 5 ثوانى و تم قياس ثالث انقطاع شعاع جديد في هذا الفاصل الزمني (Latency3). النسب المئوية لفترات خلالها الماوس تم تجميد أو نسبة من المبلغ الإجمالي من الوقت صequired لكسر حسبت photobeam الثالث. ويوضح النسب المئوية للتجميد قياس في كل نظام في الشكل 6. وتمت مقارنة المجموعات باستخدام اتجاهين التدابير المتكررة ANOVA تليها تي الاختبارات (انظر الجدول 1). وكانت النسب المئوية تجميد قياسها باستخدام ImageFZ (الشكل 6B) أكثر مماثلة لتلك التي سجلت خلال الملاحظة البشرية (الشكل 6A) من البيانات التي تم الحصول عليها باستخدام نظام قائم على photobeam (أرقام 6C-E). النسب المئوية تجميد قياسها باستخدام برنامج ImageFZ في كل اختبار كانت مرتبطة إلى حد كبير مع تلك أحرز من خلال الملاحظة الإنسان (تكييف، ص = 0.947؛ اختبار السياق، ص = 0.970؛ ملقن الاختبار، ص = 0.934)، في حين أن العلاقات المتبادلة بين النسب المئوية تجميد قياس باستخدام نظام قياس الكمبيوتر المستندة إلى photobeam (10sec و1sec الجيش، 2sec 10sec و، أو Latency3) وكان المراقب الإنسان أقل (تكييف، ص = 0.503، 0.593، 0.761 و؛ سياق ربتوقيت شرق الولايات المتحدة، ص = 0.772، 0.819، 0.912 و) مقارنة مع الارتباطات بين النسب المئوية تجميد قياسها باستخدام ImageFZ والمراقبة الإنسان (أرقام 7A و7B). بالإضافة إلى ذلك، يكشف الشكل 7 أن الاختلافات بين النسب المئوية تجميد الحصول عليها من خلال الملاحظة البشرية واستخدام الماوس في كل ImageFZ كانت أصغر الخلافات. وأشارت هذه النتائج إلى أن نسب تجميد قياسها باستخدام ImageFZ كانت مشابهة لتلك التي حصلنا عليها من خلال الملاحظة البشرية والتي ImageFZ هو درجة عالية من الدقة عند قياس كمية التجمد. <img alt="الشكل 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1.jpg" /> الشكل 1. أجهزة لالسياقية وملقن تكييف الخوف الاختبار. (A) دائرة مربع الاكريليك لتكييف وسياق الاختبار، ( <strأونج&gt; B) شبكات معدنية على أرضية من البلاستيك الأبيض للأسود، آغوطي، أو تمييع الفئران البني (أعلى) وelectrifiable شبكات معدنية سوداء على أرضية من البلاستيك الأسود للفئران البيضاء (أسفل)، ويتم عرض صور مكبرة للشبكات في الحق لوحة، (C) بيضاء ضجيج المولدات / لهجة ومولد الصدمة، (D) غرفة عازلة للصوت، و (E) وغرفة الثلاثي الاكريليك مع أرضية مسطحة لاختبار ملقن. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.</a> <img alt="الرقم 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2.jpg" /> الشكل 2. التمثيل التخطيطي للبروتوكول. (A) لمحة عامة عن السياقية وملقن تكييف الخوف الاختبار، (B) تكييف، (C) جاختبار ontext، و (D) ملقن الاختبار. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.</a> <img alt="الرقم 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3.jpg" /> الرقم 3. تحليل الصور بواسطة برنامج حاسوبي ImageFZ. لكل زوج من الصور المتعاقبة، يتم حساب مقدار المساحة (بكسل) التي من خلالها تحريك الماوس عن طريق ImageFZ. عندما يكون هذا المجال هو دون عتبة معينة (مثلا 30 بكسل)، والحكم على السلوك أن &#39;تجميد&#39;. عندما كمية من مساحة تساوي أو تتجاوز عتبة، ويعتبر السلوك لتكون &quot;غير تجميد &#39;. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.</a> <img alt="الرقم 4" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" width="500" /> الشكل 4. وأجريت مقارنات بين نسب تجميد حسابها من الصور في الإطار معدلات مختلفة باستخدام ImageFZ مع تلك التي تقاس من خلال الملاحظة البشرية. الاختبارات تكييف الخوف باستخدام C57BL/6J الفئران الذكور (ن = 5). خلال الاختبارات، وسجل اثنين من المراقبين سلوك تجميد. في الوقت نفسه، تم القبض على الصور الحية في 4 إطارا في الثانية باستخدام برنامج ImageFZ. تم تقليص حجم الملفات التي استولت في 4 إطارا في الثانية بعد استخراج إطارات لتتوافق مع الصور التي تم التقاطها في 1 أو 2 إطارا في الثانية في الثانية. قيم المعلمات من &#39;معدل (إطار / ثانية)&#39; تم تعيين إلى 1 أو 2 أو 4 إطارا في الثانية، وحسبت النسب المئوية تجميد في كل 60 ثانية من بن ملفات الصور باستخدام ImageFZ تحليل غير متصل. تمثل كل نقطة مئوية تجميد كل 60 ثانية بن. تم حساب معاملات ارتباط بيرسون بين البيانات التي تم الحصول عليها من الملاحظة البشرية وتحليل ImageFZ.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" target="_blank">انقر هنا لمشاهدة صورة أكبر.</a> <img alt="الرقم 5" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" width="500" /> الرقم 5. وتمت مقارنة نسب تجميد حساب من الصور في مختلف القيم معيار التجميد باستخدام ImageFZ وتلك التي تقاس من خلال الملاحظات الإنسان. وأجريت اختبارات تكييف الخوف باستخدام C57BL/6J الفئران الذكور (ن = 5). خلال الاختبارات، وسجلت اثنين من المراقبين سلوك تجميد، وتم القبض على الصور الحية باستخدام برنامج ImageFZ. تم حساب النسب المئوية تجميد في كل 60 ثانية بن من الصور (1 إطار / ثانية) من خلال ImageFZ حاليا تحليل، وتحديد القيم المعلمة من &#39;معيار التجميد (بكسل)&#39; إلى 20، 30، أو 40 بكسل. تمثل كل نقطة مئوية تجميد كل 60 ثانية بن. بيرسون الارتباط المشتركحسبت efficients بين البيانات التي تم الحصول عليها من الملاحظة البشرية وتحليل ImageFZ في كل اختبار. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.</a> <img alt="الرقم 6" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6.jpg" /> الرقم 6. تم قياس نسب التجميد باستخدام النظم الآلية والمراقبة الإنسان في مجموعات دون شروط ومكيفة من الفئران C57BL/6J الذكور (ن = 5، كل مجموعة). (A) الملاحظة الإنسان، (B) ImageFZ، (C) تجميد نظام مراقبة 1 (1sec الجيش 10sec و)، (D) تجميد نظام مراقبة 2 (2sec 10sec و)، و (E) تجميد نظام مراقبة 3 (Latency3). وأجريت مقارنات المجموعة باستخدام اتجاهين التدابير المتكررة ANOVA تليها تي اختبارات (غير متحدمجموعة nditioned مقابل مجموعة مكيفة، *، P &lt;0.05؛ †، ف &lt;0.01). البيانات التي تم الحصول عليها باستخدام ImageFZ كانت مشابهة لتلك التي سجلت خلال الملاحظة البشرية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.</a> <img alt="الرقم 7" fo:content-width="4.3in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" width="420" /> الرقم 7. وتظهر علاقة وتوزيع الترددات للفروق بين النسب المئوية التجميد، وتقاس باستخدام النظم الآلية والمراقبة الإنسان. (AB) المؤامرات مبعثر ومعاملات ارتباط بيرسون بين النسب المئوية تجميد سجل من خلال النظم الآلية والمراقبة الإنسان. نسب التجميد، وتحسب باستخدام ImageFZ، كانت مرتبطة إلى حد كبير مع تلك التي تم الحصول عليها من خلال الملاحظة البشرية. (CF) تكرارات أقل من 10٪ المتنوعةference بين النسب المئوية تجميد الحصول عليها من النظم الآلية مقابل الملاحظة البشرية كانت أعلى عند تحليل البيانات باستخدام قورنت مع تلك ImageFZ تحليلها من خلال الملاحظة البشرية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدة صورة أكبر.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td> ANOVAs </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> حالة </td><td> وقت </td><td> حالة X مرة </td></tr><tr><td> يوم 1 (تكييف) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> بشري </td><td> F (1،8) = 28.53، ع = 0.0007 </td><td> F (7،56) = 20.79، ع &lt;0.0001 </td><td> F (7،56) = 16.58، ع &lt;0.0001 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1،8) = 13.97، ع = 0.0057 </td><td> F (7،56) = 21.40، ع &lt;0.0001 </td><td> F (7،56) = 11.69، ع &lt;0.0001 </td></tr><tr><td> مراقب تجميد (1sec10sec) </td><td> F (1،8) = 5.16، ع = 0.0528 </td><td> F (7،56) = 2.39، ع = 0.0329 </td><td> F (7،56) = 0.72، ع = 0.6572 </td></tr><tr><td> مراقب تجميد (2sec10sec) </td><td> F (1،8) = 4.07، ع = 0.0782 </td><td> F (7،56) = 3.44، ع = 0.0039 </td><td> F (7،56) = 1.52، ع = 0.1803 </td></tr><tr><td> مراقب تجميد (Latency3) </td><td> F (1،8) = 4.44، ع = 0.0682 </td><td> F (7،56) = 9.94، ف &lt;0.0001 </td><td> F (7،56) = 4.33، ع = 0.0007 </td></tr><tr><td> يوم 2 (السياق) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> بشري </td><td> F (1،8) = 42.94، ع = 0.0002 </td><td> F (4،32) = 1.91، ع = 0.1336 </td><td> F (4،32) = 1.48، ع = 0.2302 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1،8) = 49.61، ع = 0.0001 </td><td> F (4،32) = 2.06، ع = 0.1087 </td><td> F (4،32) = 0.83، ع = 0.5174 </td></tr><tr><td> مراقب تجميد (1sec10sec) </td><td> F (1،8) = 20.28، ع = 0.002 </td><td> F (4،32) = 1.63، ع = 0.1918 </td><td> F (4،32) = 0.55، ع = 0.6997 </td></tr><tr><td> مراقب تجميد (2sec10sec) </td><td>F (1،8) = 40.20، ع = 0.0002 </td><td> F (4،32) = 2.66، ع = 0.0504 </td><td> F (4،32) = 1.20، ع = 0.3306 </td></tr><tr><td> مراقب تجميد (Latency3) </td><td> F (1،8) = 35.30، ع = 0.0003 </td><td> F (4،32) = 2.49، ع = 0.0626 </td><td> F (4،32) = 1.09، ع = 0.3793 </td></tr></tbody></table> الجدول 1. مقارنات بين الإحصاءات.

Watch this Scientific Journal Video about Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice at JoVE.com

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

تقدم هذه المقالة بروتوكول لالسياقية وملقن الخوف تكييف الاختبار باستخدام نظام تحليل الفيديو لتقييم الخوف التعلم والذاكرة في الفئران.

السياقية وملقن الخوف تكييف اختبار باستخدام نظام تحليل الفيديو في الفئران

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

contextual-cued-fear-conditioning-test-using-video-analyzing-system

Research

JoVE Journal

Behavior

50.9K Views.  Fujita Health University.  تقدم هذه المقالة بروتوكول لالسياقية وملقن الخوف تكييف الاختبار باستخدام نظام تحليل الفيديو لتقييم الخوف التعلم والذاكرة في الفئران. 

Video: Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Trace Fear Conditioning in Mice

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings between a neutral stimulus and an unconditioned stimulus. There is a 20 sec trace period that separates each conditioning trial. On the following day freezing is measured during presentation of the conditioned stimulus (CS) and trace period. On the third day there is an 8 min test to measure contextual memory. The representative results are from mice that were presented with the aversive unconditioned stimulus (shock) compared to mice that received the tone presentations without the unconditioned stimulus. Trace fear conditioning has been successfully used to detect subtle learning and memory deficits and enhancements in mice that are not found with other fear conditioning methods. This type of fear conditioning is believed to be dependent upon connections between the medial prefrontal cortex and the hippocampus. One current controversy is whether this method is believed to be amygdala-independent. Therefore, other fear conditioning testing is needed to examine amygdala-dependent learning and memory effects, such as through the delay fear conditioning.

In the following experiment we describe a protocol for trace fear conditioning in mice. This type of associative memory includes a trace period that separates the neutral stimulus and the unconditioned stimulus.

تتبع تكييف الخوف في الفئران

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

Using the Threat Probability Task to Assess Anxiety and Fear During Uncertain and Certain Threat

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical components. Both anxiety and fear can be studied in the laboratory by measuring the potentiation of the startle reflex. The startle reflex is a defensive reflex that is potentiated when an organism is threatened and the need for defense is high. The startle reflex is assessed via electromyography (EMG) in the orbicularis oculi muscle elicited by brief, intense, bursts of acoustic white noise (i.e., &#8220;startle probes&#8221;). Startle potentiation is calculated as the increase in startle response magnitude during presentation of sets of visual threat cues that signal delivery of mild electric shock relative to sets of matched cues that signal the absence of shock (no-threat cues). In the Threat Probability Task, fear is measured via startle potentiation to high probability (100% cue-contingent shock; certain) threat cues whereas anxiety is measured via startle potentiation to low probability (20% cue-contingent shock; uncertain) threat cues. Measurement of startle potentiation during the Threat Probability Task provides an objective and easily implemented alternative to assessment of negative affect via self-report or other methods (e.g., neuroimaging) that may be inappropriate or impractical for some researchers. Startle potentiation has been studied rigorously in both animals (e.g., rodents, non-human primates) and humans which facilitates animal-to-human translational research. Startle potentiation during certain and uncertain threat provides an objective measure of negative affective and distinct emotional states (fear, anxiety) to use in research on psychopathology, substance use/abuse and broadly in affective science. As such, it has been used extensively by clinical scientists interested in psychopathology etiology and by affective scientists interested in individual differences in emotion.

Potentiation of the startle reflex is measured via electromyography of the orbicularis oculi muscle during low (uncertain) and high (certain) probability electric shock threat in the Threat Probability Task. This provides an objective measure of distinct negative emotional states (fear/anxiety) for research on psychopathology, substance use/abuse, and broad affective science.

العمل باستخدام التهديد الاحتمالات لتقييم القلق والخوف وخلال التهديد غير مؤكد وبعض

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical ...

Quantifying Social Motivation in Mice Using Operant Conditioning

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered shuttle boxes were equipped with two operant levers (left and right) and a food receptacle in one chamber, which was then divided from the second chamber by an automated guillotine door covered by a wire grid. Different stimulus mice, rotated across testing days, served as a social stimulus behind the wire grid, and were only visible following the opening of the guillotine door. Test mice were trained to lever press in order to open the door and gain access to the stimulus partner for 15 sec. The number of lever presses required to obtain the social reward progressively increased on a fixed schedule of 3. Testing sessions ended after test mice stopped lever pressing for 5 consecutive minutes. The last reinforced ratio or breakpoint can be used as a quantitative measure of social motivation. For the second paradigm, test mice were trained to discriminate between left and right lever presses in order to obtain either a food reward or the social reward. Mice were rewarded for every 3 presses of each respective lever. The number of food and social rewards can be compared as a measurement of the value placed upon each reward. The ratio of each reward type can also be compared between mouse strains and the change in this ratio can be monitored within testing sessions to measure satiation with a given reward type. Both of these operant conditioning paradigms are highly useful for the quantification of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

This article describes a new protocol for the quantitative measurement of social motivation in mice using operant conditioning for a social reward. The protocol is useful for the measurement of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

قياس الدافع الاجتماعي في الفئران عن طريق تكييف هواء فعال

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered ...

Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback Test

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, sex, condition, and genetic background of the emitting animal. Although many studies have characterized these differences, whether receiver mice can discriminate among objectively different USVs and show preferences for particular sound traits remains to be elucidated. To determine whether mice can discriminate between different characteristics of USVs, a playback experiment was developed recently, in which preference responses of mice to two different USVs could be evaluated in the form of a place preference.
First, USVs from mice were recorded. Then, the recorded USVs were edited, trimmed accordingly, and exported as stereophonic sound files. Next, the USV amplitudes generated by the two ultrasound emitters used in the experiment were adjusted to the same sound pressure level. Nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitters were used to play the USVs back. Finally, to investigate the preference of subject mice to selected USVs, pairs of two differing USV signals were played back simultaneously in a two-choice test box. By repeatedly entering a defined zone near an ultrasound emitter and searching the wire mesh in front of the emitter, the mouse reveals its preference for one sound over another. This model allows comparing the attractiveness of the various features of mouse USVs, in various contexts.

Ultrasonic vocalizations (USVs) in mice differ depending on age, sex, condition, and genetic background. Using two ultrasound emitters broadcasting simultaneously in different locations, this two-choice test can evaluate murine recognition and preference responses to different characteristics of USVs.

تحديد تفضيلات بالموجات فوق الصوتية غناء في الفئران باستخدام تشغيل اختبار اثنين الاختيار

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, ...

Whisker-signaled Eyeblink Classical Conditioning in Head-fixed Mice

Eyeblink conditioning is a common paradigm for investigating the neural mechanisms underlying learning and memory. To better utilize the extensive repertoire of scientific techniques available to study learning and memory at the cellular level, it is ideal to have a stable cranial platform. Because mice do not readily tolerate restraint, they are usually trained while moving about freely in a chamber. Conditioned stimulus (CS) and unconditioned stimulus (US) information are delivered and eyeblink responses recorded via a tether connected to the mouse's head. In the head-fixed apparatus presented here, mice are allowed to run as they desire while their heads are secured to facilitate experimentation. Reliable conditioning of the eyeblink response is obtained with this training apparatus, which allows for the delivery of whisker stimulation as the CS, a periorbital electrical shock as the US, and analysis of electromyographic (EMG) activity from the eyelid to detect blink responses.

The preparation presented here for whisker-signaled eyeblink conditioning in head-fixed mice precisely stimulates specific whiskers while allowing mice to ambulate on a cylindrical treadmill. A whisker stimulation conditioned stimulus (CS) paired with a periorbital shock unconditioned stimulus (US) results in reliable associative learning on this apparatus.

، أشار الطولي Eyeblink تكييف الكلاسيكية في الفئران ثابت رئيس

Eyeblink conditioning is a common paradigm for investigating the neural mechanisms underlying learning and memory. To better utilize the extensive ...

Reducing State Anxiety Using Working Memory Maintenance

The purpose of this protocol is to explain how to examine the relationship between working memory processes and anxiety by combining the Sternberg Working Memory (WM) and the threat of shock paradigms. In the Sternberg WM paradigm, subjects are required to maintain a series of letters in the WM for a brief interval and respond by identifying whether the position of a given letter in the series matches a numerical prompt. In the threat of shock paradigm, subjects are exposed to alternating blocks where they are either at risk of receiving unpredictable presentations of a mild electric shock or are safe from the shock. Anxiety is probed throughout the safe and threat blocks using the acoustic startle reflex, which is potentiated under threat (Anxiety-Potentiated Startle (APS)). By conducting the Sternberg WM paradigm during the threat of shock and probing the startle response during either the WM maintenance interval or the intertrial interval, it is possible to determine the effect of WM maintenance on APS.

This protocol demonstrates how to measure anxiety-potentiated startle during the Sternberg Working Memory paradigm.

تقليل قلق الدولة باستخدام صيانة الذاكرة العاملة

The purpose of this protocol is to explain how to examine the relationship between working memory processes and anxiety by combining the Sternberg Working ...

Using Electroencephalography Measurements and High-quality Video Recording for Analyzing Visual Perception of Media Content

This article explores a method to detect differences in visual perception in humans. The method used is based on the psychological (or "cognitive") function of eyeblinks. Participants' eyeblinks are detected and acquired while watching videos specifically created for the investigation. The detection and acquisition of eyeblinks are carried out with the help of a 20-channel electroencephalographic (EEG) wireless device. The international 10-20 system for electrode placement is followed. A high-definition (HD) video camera is used to record participants' facial expressions, for contrast purposes. Instead of using pre-existing media content, purpose-made video content has been created following specific criteria of interest for this investigation, with stimuli enabling researchers to manage the precise parameters of interest. Otherwise, results could be contaminated with uncontrolled variables. The synchronization of the presentation of video stimuli with EEG recordings needs to be done in milliseconds. Analysis of collected data is performed with robust software for working with big matrices. Statistically significant differences in eyeblink rate related to media professionalization and editing style are found with the reported experimental procedures.

We present detection, acquisition, and analysis of eyeblink rates while watching media content.

استخدام قياسات المخ وتسجيل الفيديو عالية الجودة لتحليل الإدراك البصري لمحتوى الوسائط

This article explores a method to detect differences in visual perception in humans. The method used is based on the psychological (or "cognitive") ...

Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. The Barnes maze can also assess other mouse behaviors, such as general motivation to escape from the maze platform and exploratory behavior. The Barnes maze can measure whether a genetic mutation or environmental variable can impact the acquisition and retention of spatial memories, as well as provide information about the search strategy employed by the mice. Here we use the Barnes maze to detect a memory deficit in adult mice following a single developmental ethanol exposure event. The newly described Damsel-in-Distress paradigm exposes a male mouse to a female mouse trapped in a chamber in the open center field of the arena. It provides an opportunity for the mouse to socially respond to the trapped female and exhibit prosocial behavior. The Damsel-in-Distress paradigm can also be used to examine mouse behavior in a novel arena and measure locomotor activity. Both the Barnes Maze and the Damsel-in-Distress protocols require minimal financial investment and most aspects of the tests can be constructed from common lab supplies. These flexible and accessible tools can also be used to detect behavioral changes over the course of development.

This protocol measures spatial learning and memory using the Barnes maze. A novel Damsel-in-Distress paradigm is used to assess locomotor activity and prosocial behavior in mice.

تحليل المكاني التعلم والسلوك بروسوسيال في الفئران باستخدام المتاهة بارنز ونماذج الفتاة في محنة

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. ...

Visual Classical Conditioning in Wood Ants

Several species of insects have become model systems for studying learning and memory formation. Although many studies focus on freely moving animals, studies implementing classical conditioning paradigms with harnessed insects have been important for investigating the exact cues that individuals learn and the neural mechanisms underlying learning and memory formation. Here we present a protocol for evoking visual associative learning in wood ants through classical conditioning. In this paradigm, ants are harnessed and presented with a visual cue (a blue cardboard), the conditional stimulus (CS), paired with an appetitive sugar reward, the unconditional stimulus (US). Ants perform a Maxilla-Labium Extension Reflex (MaLER), the unconditional response (UR), which can be used as a readout for learning. Training consists of 10 trials, separated by a 5-minute intertrial interval (ITI). Ants are also tested for memory retention 10 minutes or 1 hour after training. This protocol has the potential to allow researchers to analyze, in a precise and controlled manner, the details of visual memory formation and the neural basis of learning and memory formation in wood ants.

We present a protocol for the classical conditioning of harnessed ants that permits researchers to study visual learning and memory formation at a level of analysis not possible with freely moving individuals.

الاشراط الكلاسيكي البصرية في الخشب النمل

Several species of insects have become model systems for studying learning and memory formation. Although many studies focus on freely moving animals, ...

Fear Incubation Using an Extended Fear-Conditioning Protocol for Rats

Emotional memory has been primarily studied with fear-conditioning paradigms. Fear conditioning is a form of learning through which individuals learn the relationships between aversive events and otherwise neutral stimuli. The most-widely utilized procedures for studying emotional memories entail fear conditioning in rats. In these tasks, the unconditioned stimulus (US) is a footshock presented once or several times across single or several sessions, and the conditioned response (CR) is freezing. In a version of these procedures, called cued fear conditioning, a tone (conditioned stimulus, CS) is paired with footshocks (US) during the training phase. During the first test, animals are exposed to the same context in which training took place, and freezing responses are tested in the absence of footshocks and tones (i.e., a context test). During the second test, freezing is measured when the context is changed (e.g., by manipulating the smell and walls of the experimental chamber) and the tone is presented in the absence of footshocks (i.e., a cue test). Most cued fear conditioning procedures entail few tone-shock pairings (e.g., 1-3 trials in a single session). There is a growing interest in less common versions involving an extensive number of pairings (i.e., overtraining) related to the long-lasting effect called fear incubation (i.e., fear responses increase over time without further exposure to aversive events or conditioned stimuli). Extended fear-conditioning tasks have been key to the understanding of fear incubation&#8217;s behavioral and neurobiological aspects, including its relationship with other psychological phenomena (e.g., post-traumatic stress disorder). Here, we describe an extended fear-conditioning protocol that produces overtraining and fear incubation in rats. This protocol entails a single training session with 25 tone-shock pairings (i.e., overtraining) and a comparison of conditioned freezing responses during context and cue tests 48 h (short-term) and 6 weeks (long-term) after training.

We describe an extended fear-conditioning protocol that produces overtraining and fear incubation in rats. This protocol entails a single training session with 25 tone-shock pairings (i.e., overtraining) and a comparison of conditioned freezing responses during context and cue tests 48 h (short-term) and 6 weeks (long-term) after training.

حضانة الخوف باستخدام بروتوكول تكييف الخوف الموسعة للفئران

Emotional memory has been primarily studied with fear-conditioning paradigms. Fear conditioning is a form of learning through which individuals learn the ...