This study was supported by the NIH grant NS074559 (to C. K.). We thank all collaborators who contributed to our research articles that the present methodology report is based upon.

تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) من جامعة إيموري ويتبع المعاهد الوطنية للصحة المبدأ التوجيهي للرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية. 1. إعداد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد السرير الجراحي على لوحة ظاهرة الاحتباس اتصال مع مضخة الحرارة عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة على الأقل قبل الجراحة. وضع لفة الرقبة باستخدام برميل من 3 مل حقنة على السرير الجراحي. تحضير غاز التخدير مع 2٪ الأيزوفلورين في الهواء الطبي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد ملقط تعقيمها، مقص، وأصحاب الإبرة الصغيرة، مرقئ، ومسحات القطن والخيوط الجراحية. إعداد الغراء الأنسجة ومرهم للعين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد نظام نقص الأكسجة وتحكم في درجة الحرارة مع مصباح التدفئة والتحقيق المستقيم. يعد الغاز نقص الأكسجة مع 2٪ الأيزوفلورين في 7.5٪ O 2 متوازنة من 92.5٪ N 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ساعة واحدة قبل الجراحة، وanalgesized الفئران عن طريق الحقن تحت الجلد من بطء الإفراج ميلوكسيكام (4.0 ملغ / كلغ). </li></ol> &lt;ص الطبقة = &quot;jove_title&quot;&gt; 2. عابر الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية (الشكل 1B) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير C57BL الذكور 10-13 أسبوع من العمر / 6 الفئران وزنها 22-30 غ في تحريض غرفة التخدير مع 3٪ الأيزوفلورين حتى الحيوان لا يستجيب لضغط القدم، ثم قم بإزالة الشعر على حق الرقبة باستخدام ماكينة حلاقة الإلكترونية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الفئران على السرير الجراحي على اتصال مع 2٪ الأيزوفلورين في الهواء الطبي في معدل تدفق 2 لتر / دقيقة. امتدت الأمامية آمنة على طول لفة الرقبة على الجانبين باستخدام شريط الطبي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنظيف الموقع الجراحي لشق مع betadine تليها الكحول ثم مسحات القطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحت المجهر تشريح، وجعل شق 0.5 سم بزر الماوس الأيمن عنق الرحم باستخدام ملقط على التوالي، والمقص الصغير حوالي 0.2 سم الوحشي من الجلد خط الوسط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام زوج من ملقط مسنن غرامة لمزق اللفافة والأنسجة لفضح الصحيح الشريان السباتي المشترك (RCCA). فصل بعناية RCCA من العصب المبهم باستخدام زوج من الملقط السلس الجميلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يعيش عقدة اثنين قبل القطع 5-0 خياطة الحرير (نشره) على RCCA، ومن ثم خياطة الجلد باستخدام 4-0 النايلون حيدة خياطة (الشكل 1C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق مرهم العين في كلتا العينين لمنع جفاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل بسرعة الفئران لنظام نقص الأكسجة ووضع الأنف والفم وجها قناع مع 2٪ الأيزوفلورين في 7.5٪ O 2 في معدل تدفق 0.5-1 لتر / دقيقة لمدة 30 دقيقة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خلال نقص الأكسجة، استخدم تحكم في درجة الحرارة مع مصابيح التدفئة للسيطرة على درجة حرارة الجسم 37.5 ± 0.5 ° C. رصد معدل التنفس في 80-120 الأنفاس / دقيقة. الحفاظ على درجة حرارة الجسم فوق 37 درجة مئوية خلال نقص الأكسجين مهم لخلق احتشاء الدماغ ثابت. انخفاض معدل التنفس يحدث عادة بعد 20 دقيقة نقص الأكسجة. إزالة جها قناع والسماح العرض الجوي العادي في حالة انخفاض معدل التنفس أدناه إلى 40. وهذا يأخذ 1-2 دقيقة ولا يعول في 30 دقيقة مدة نقص الأكسجة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد نقص الأكسجين، ونقلالفئران إلى سرير العمليات الجراحية والافراج عن اثنين من الغرز RCCA. إغلاق الجرح باستخدام الغراء الأنسجة، ومن ثم العودة الفئران إلى القفص. استبعاد الحيوانات إذا تم الإفراج عن كل من هما عقدة الحية بشكل غير متوقع بعد نقص الأكسجين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الفئران لمدة 5-10 دقيقة للتعافي من نقص الأكسجين والتخدير. وضع الغذاء المبللة في القفص وإعادته إلى مرفق للرعاية الحيوان. ملاحظة: ترتبط الحيوانات تظهر خفيفة الى سلوك شديد تحلق في 24 ساعة بعد ثي مع مخالفة الدماغ. معظم الحيوانات مع أعراض النوبة يموتون قبل timepoint 24 ساعة بعد ثي. </li></ol> 3. الليزر الرقطة التباين التصوير ملاحظة: على الرغم من أن هذا ليس إجراء أساسيا من نموذج ثي، لطخة ليزر نظام التصوير النقيض ثنائي الأبعاد 16 يمكن أن تستخدم لوصف التغيرات في تدفق الدم الدماغي (البرازيلي) أثناء أو بعد عابرة نقص الأكسجة نقص التروية. لتوثيق التعديلات من الاتحاد البرازيلي تحت ثي، سجل فورا بعد الحاديالجيش الشعبي 2.6. بدلا من ذلك، لمقارنة الانتعاش البرازيلي بعد ثي إهانة، لا يمكن أن يؤديها هذه الإجراءات التالية الخطوة 2.10. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الماوس تخدير في وضعية الانبطاح وتنفيذ شق خط الوسط 1 سم طويل على فروة الرأس مع الجمجمة المكشوفة ولكن دون فتحها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد الاتحاد البرازيلي في كل من نصفي الكرة المخية تحت تصوير تدفق الدم وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة وبدء تسجيل تدفق الدم إلى المخ مباشرة بعد عملية جراحية CCAO (الخطوة 2.6). يستمر لمدة 50 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عرض الاتحاد البرازيلي صورة مع وحدات التعسفي في لوحة 16 لون وتحليل في الوقت الحقيقي في مناطق مختارة باستخدام برنامج MoorFLPI باتباع إرشادات الشركة المصنعة (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تسجيل الصورة البرازيلي، إغلاق فروة الرأس مع الغراء الأنسجة ويعود الحيوان إلى القفص. </li></ol> إدارة 4. سكتة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن الحيوانات في الوريد الذيل مع المذيب أو 10 مغ / كغ المؤتلف سكتة (220-300 &amp;# 956؛ ل 1 ملغ / م TPA) في 0.5، 1، أو 4 ساعات بعد tCCAo بالإضافة إلى نقص الأكسجة (الشكل 4). </li></ol> 5. تلف في الدماغ كشفها مع عدة خيارات مختلفة ملاحظة: لجمع عينات من الدماغ، الموت ببطء الفئران في 1 أو 4 أو 24 ساعة بعد ثي. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء الكمي لحجم احتشاء قبل في الجسم الحي 2،3،5-Triphenyltetrazolium كلوريد (TTC) طريقة في 24 ساعة بعد ثي إهانة كما هو موضح السابق 17 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> البريتونى حقن الحيوانات مع 1.4 M حل مانيتول (~ 0.1 مل / غرام من وزن الجسم) 30 دقيقة قبل نضح transcardial. الفئران يروي Transcardial مع PBS تليها 10 مل من 2٪ TTC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الدماغ من الحيوانات مع الأدوات الجراحية بعد 10 دقيقة والمكان الى 4٪ امتصاص العرق لتثبيت ليلة وضحاها والقسم إلى 1 مم مع vibratome. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التقاط سلسلة من أربع شرائح الدماغ مقطوع بواسطة المجهر الرقمي وضليع في الرياضياتify حجم احتشاء كنسبة من منطقة محتشية (المنطقة البيضاء في الجانب الأيمن) لمنطقة التالفة، نصف الكرة الأرضية المقابل باستخدام برنامج يماغيج. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدلا من ذلك، نفذ تشكيل الجلطة المناعي في 1 ساعة بعد ثي الإهانة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجميد الدماغ ثابتة في مجمع أكتوبر وقسم العقول في 12 ميكرومتر سمك باستخدام ناظم البرد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتضان شريحة الدماغ مع أرنب الأجسام المضادة لمكافحة الفيبرينوجين (1: 100) التالية الماعز المضادة للأرنب اليكسا Fluro 488 صبغ (1: 200) لمراقبة مضان على المجهر الفلورسنت. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدلا من ذلك، نفذ السفينة عرقلة من قبل الذيل الوريد حقن 100 ميكرولتر 2٪ ايفانز صبغة زرقاء في 4 ساعات بعد ثي الإهانة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء الفئران وسرعان ما قطع رأسه لإزالة العقول إلى 4٪ امتصاص العرق بعد حقن ايفانز الأزرق. ملاحظة: يستغرق 5-10 دقيقة عن ايفانز تداول الأزرق مع اللون الأزرق من كلا fore- وهند أطرافه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Sectiعلى العقول ثابتة عند 100 سمك ميكرون باستخدام مشراح انزلاق ومراقبة مضان باستخدام فلتر انبعاث 680 نانومتر على المجهر الفلورسنت. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Broderick, J. P., Hacke, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+acute+ischemic+stroke:+Part+I:+recanalization+strategies.">Treatment of acute ischemic stroke: Part I: recanalization strategies.</a> Circulation. 106 (12), 1563-1569 (2002).</li><li>Hossmann, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiological+basis+of+translational+stroke+research.">Pathophysiological basis of translational stroke research.</a> Folia Neuropathol. 47 (3), 213-227 (2009).</li><li>Hossmann, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+two+pathophysiologies+of+focal+brain+ischemia:+implications+for+translational+stroke+research.">The two pathophysiologies of focal brain ischemia: implications for translational stroke research.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 32 (7), 1310-1316 (2012).</li><li>Macrae, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+stroke+research--advantages+and+disadvantages+of+the+most+common+rodent+models+of+focal+ischaemia.">Preclinical stroke research--advantages and disadvantages of the most common rodent models of focal ischaemia.</a> Br. J. Pharmacol. 164 (4), 1062-1078 (2011).</li><li>Niessen, F., Hilger, T., Hoehn, M., Hossmann, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+clot+preparation+determine+outcome+of+recombinant+tissue+plasminogen+activator+treatment+in+experimental+thromboembolic+stroke.">Differences in clot preparation determine outcome of recombinant tissue plasminogen activator treatment in experimental thromboembolic stroke.</a> Stroke. 34 (8), 2019-2024 (2003).</li><li>Orset, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+in+situ+thromboembolic+stroke+and+reperfusion.">Mouse model of in situ thromboembolic stroke and reperfusion.</a> Stroke. 38 (10), 2771-2778 (2007).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Prado, R., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Argon+laser-induced+arterial+photothrombosis.+Characterization+and+possible+application+to+therapy+of+arteriovenous+malformations.">Argon laser-induced arterial photothrombosis. Characterization and possible application to therapy of arteriovenous malformations.</a> J. Neurosurgery. 66 (5), 748-754 (1987).</li><li>Sun, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergy+of+combined+tPA-edaravone+therapy+in+experimental+thrombotic+stroke.">Synergy of combined tPA-edaravone therapy in experimental thrombotic stroke.</a> PLoS One. 9, e98807 (2014).</li><li>Levine, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anoxic-ischemic+encephalopathy+in+rats.">Anoxic-ischemic encephalopathy in rats.</a> Am. J. Pathol. 36, 1-17 (1960).</li><li>Rice, J. E. 3. r. d., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+immaturity+on+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+rat.">The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat.</a> Annals Neurol. 9 (2), 131-141 (1981).</li><li>Vannucci, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+stroke+in+the+female+diabetic,+db/db,+mouse.">Experimental stroke in the female diabetic, db/db, mouse.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 21 (2), 52-60 (2001).</li><li>Adhami, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+ischemia-hypoxia+induces+intravascular+coagulation+and+autophagy.">Cerebral ischemia-hypoxia induces intravascular coagulation and autophagy.</a> Am. J. Pathol. 169 (2), 566-583 (2006).</li><li>Shereen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+diffusion+tensor+imaging+and+neuropathological+correlation+in+a+murine+model+of+hypoxia-ischemia-induced+thrombotic+stroke.">Ex vivo diffusion tensor imaging and neuropathological correlation in a murine model of hypoxia-ischemia-induced thrombotic stroke.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 31 (4), 1155-1169 (2011).</li><li>Michaud, J. P., Pimentel-Coelho, P. M., Tremblay, Y., Rivest, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+Ly6C+low+monocytes+after+cerebral+hypoxia-ischemia+in+adult+mice.">The impact of Ly6C low monocytes after cerebral hypoxia-ischemia in adult mice.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 34 (7), e1-e9 (2014).</li><li>Zoppo, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virchow's+triad:+the+vascular+basis+of+cerebral+injury.">Virchow's triad: the vascular basis of cerebral injury.</a> Rev. Neurol. Dis. 5, 12-21 (2008).</li><li>Dunn, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+speckle+contrast+imaging+of+cerebral+blood+flow.">Laser speckle contrast imaging of cerebral blood flow.</a> Annals Biomed. Eng. 40 (2), 367-377 (2012).</li><li>Sun, Y. Y., Yang, D., Kuan, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mannitol-facilitated+perfusion+staining+with+2,3,5-triphenyltetrazolium+chloride+(TTC)+for+detection+of+experimental+cerebral+infarction+and+biochemical+analysis.">Mannitol-facilitated perfusion staining with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) for detection of experimental cerebral infarction and biochemical analysis.</a> J. Neurosci. Methods. 203 (1), 122-129 (2012).</li><li>Lozano, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+and+regional+mortality+from+235+causes+of+death+for+20+age+groups+in+1990+and+2010:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study.">Global and regional mortality from 235 causes of death for 20 age groups in 1990 and 2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study.</a> Lancet. 380 (9859), 2095-2128 (2010).</li><li>Murray, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disability-adjusted+life+years+(DALYs)+for+291+diseases+and+injuries+in+21+regions,+1990-2010:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study.">Disability-adjusted life years (DALYs) for 291 diseases and injuries in 21 regions, 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study.</a> Lancet. 380 (9859), 2197-2223 (2012).</li><li>Dirnagl, U., Macleod, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+research+at+a+road+block:+the+streets+from+adversity+should+be+paved+with+meta-analysis+and+good+laboratory+practice.">Stroke research at a road block: the streets from adversity should be paved with meta-analysis and good laboratory practice.</a> Br. J. Pharm. 157 (7), 1154-1156 (2009).</li><li>Dirnagl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+concerted+appeal+for+international+cooperation+in+preclinical+stroke+research.">A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research.</a> Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).</li><li>Khatri, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revascularization+end+points+in+stroke+interventional+trials:+recanalization+versus+reperfusion+in+IMS-I.">Revascularization end points in stroke interventional trials: recanalization versus reperfusion in IMS-I.</a> Stroke. 36 (11), 2400-2403 (2005).</li><li>Rosenberg, R. D., Aird, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular-bed--specific+hemostasis+and+hypercoagulable+states.">Vascular-bed--specific hemostasis and hypercoagulable states.</a> New Eng. J. Med. 340 (20), 1555-1564 (1999).</li><li>Majid, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+vulnerability+to+permanent+focal+cerebral+ischemia+among+3+common+mouse+strains.">Differences in vulnerability to permanent focal cerebral ischemia among 3 common mouse strains.</a> Stroke. 31 (11), 2707-2714 (2000).</li></ol>

السكتة الدماغية هي مسألة صحية رئيسية من تزايد أهمية لأي مجتمع مع شيخوخة السكان. على الصعيد العالمي، والسكتة الدماغية هي ثاني سبب رئيسي للوفاة ما يقدر ب 5.9 مليون الأحداث القاتلة في عام 2010، أي ما يعادل 11.1٪ من مجموع الوفيات 18. السكتة الدماغية هي أيضا السبب الرئيسي ?...

الجلطات وإعادة الاستقناء هي العلاج الأكثر فعالية من السكتة الدماغية الحادة في الممارسة السريرية 1. بعد، تم تنفيذ معظم الأبحاث العصبية قبل السريرية في نموذج عابر ميكانيكي عرقلة (داخل اللمعة خياطة المتوسطة انسداد الشريان الدماغي) التي تنتج التعافي السريع من تدفق الدم إلى المخ على إزالة انسداد الأوعية الدموية ويظهر قليل من دون فوائد قبل سكتة الجلطات. وقد أشير إلى أن اختيار مشكوك فيها من نماذج السكتة الدماغية ساهم، جزئيا على الأقل، إلى صعوبة في ترجمة علاج الأعصاب لمرضى 2،3. وبالتالي، هناك دعوة متزايدة لتوظيف نماذج الانسداد التجلطي السكتة الدماغية سكتة متجاوبة في مجال البحوث قبل السريرية، ولكن لديها مثل هذه النماذج أيضا المشاكل التقنية (انظر مناقشة) 4-7. نحن هنا وصف نموذجا السكتة الدماغية الجلطات جديد يقوم على جانب واحد عابرة التأكسج الدماغية (ثي) إهانة وردودها على العلاج عن طريق الحقن الوريدي سكتة 8. تم تطوير نموذج السكتة الدماغية ثي على أساس الإجراء ليفين (ربط دائم من جانب واحد الشريان السباتي المشترك يليه التعرض لنقص الأكسجين عابرة في غرفة) التي اخترعت لإجراء التجارب مع الفئران الكبار في عام 1960 9. تلاشى الإجراء ليفين الأصلي إلى الغموض ل انها تنتج سوى تلف في الدماغ متغير، ولكن تسبب نفس إهانة الأعصاب ثابت في الجراء القوارض عندما أعيد تطبيقها من قبل روبرت Vannucci وزملاؤه نموذجا من الأطفال حديثي الولادة بنقص التأكسج اعتلال الدماغ الإقفاري (عجل) في عام 1981 (10). وفي السنوات الأخيرة، بعض المحققون أعادت تكييف نموذج ليفين-Vannucci لفئران بالغة عن طريق ضبط درجة الحرارة في غرفة ميتة 11. فمن المعقول أن آفات الدماغ غير متناسقة في الإجراء ليفين الأصلي قد تنشأ من تذبذب درجة حرارة الجسم من القوارض الكبار في غرفة ميتة. لاختبار هذه الفرضية، ونحن تعديل الإجراء ليفين بالإدارة الغاز ميتةمن خلال قناع، مع الحفاظ على درجة الحرارة الأساسية القوارض في 37 ° C على طاولة الجراحة 12. كما هو متوقع، والتحكم في درجة حرارة الجسم صرامة زيادة كبيرة في استنساخ مرحبا الناجم عن أمراض الدماغ. الإهانة مرحبا أيضا يؤدي تجلط الدم، الالتهام الذاتي، وgray- وإصابة 13 بيضاء المسألة. وقد استخدم باحثون آخرون أيضا نموذج مرحبا للتحقيق في ما بعد السكتة الدماغية الاستجابات الالتهابية 14. ومن المزايا الفريدة لنموذج مرحبا السكتة الدماغية هي أنها تتابع عن كثب ثالوث فيرشو لتشكيل خثرة، بما في ذلك ركود تدفق الدم، والإصابة البطانية (على سبيل المثال بسبب الإجهاد التأكسدي مرحبا يسببها)، وفرط التجلط (تنشيط صفائح الدم مرحبا يسببها) ( الشكل 1A) 15. على هذا النحو، فإن النموذج مرحبا قد قبض على بعض الآليات الفيزيولوجية المرضية ذات الصلة السكتة الدماغية في العالم الحقيقي. مع هذه الفكرة في الاعتبار، ونحن المكرر كذلك نموذج مرحبا مع ربط عكسها للأمم المتحدةilateral الشريان السباتي المشترك (وبالتالي لخلق مرحبا إهانة عابرة)، واختبار ردودها على سكتة الجلطات مع أو بدون Edaravone. Edaravone هو زبال الجذور الحرة وافقت بالفعل في اليابان لعلاج السكتة الدماغية في غضون 24 ساعة من بداية 9. وأظهرت تجاربنا أن مختصرة قدر 30 دقيقة عابرة مرحبا يطلق احتشاء الخثاري، والتي تجمع بين العلاج سكتة-Edaravone تمنح فوائد التآزر 8. نحن هنا وصف العمليات الجراحية مفصلة والاعتبارات المنهجية للنموذج ثي، والتي يمكن استخدامها لتحسين العلاجات ضخه من السكتة الدماغية الحادة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>adult male mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>C57BL/6&#160;</td>
			<td>10~13 weeks old (22~30 g)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mobile Laboratory Animal Anesthesia System</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>901807</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical air (Compressed) air tank</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>UN1002</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Healthcare</td>
			<td>NDC 66794-013-25</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-Station Lab Animal AnesthesiaSystem</td>
			<td>Surgivet</td>
			<td>V703501</td>
			<td>hypoxia system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7.5% O2 balanced by 92.5% N2 tank</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>UN1956</td>
			<td>hypoxia system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature Controller with heating lamp&#160;</td>
			<td>Cole Parmer&#160;</td>
			<td>EW-89000-10</td>
			<td>temperature controllers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectal probe</td>
			<td>Cole Parmer&#160;</td>
			<td>NCI-00141PG</td>
			<td>temperature controllers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope&#160;</td>
			<td>Olympus&#160;</td>
			<td>SZ40</td>
			<td>surgical setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat pump with warming pad</td>
			<td>Gaymar&#160;</td>
			<td>TP700</td>
			<td>surgical setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine curved forceps (serrated)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11370-31</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine curved forceps (smooth)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11373-12</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micro scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-03</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micro needle holders</td>
			<td>FST</td>
			<td>12060-01</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-Mosquito hemostats</td>
			<td>FST</td>
			<td>13008-12</td>
			<td>surgical instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-0 silk suture&#160;</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>624143</td>
			<td>surgical supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Nylon monofilament suture</td>
			<td>LOOK</td>
			<td>766B</td>
			<td>surgical supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue glue</td>
			<td>Abbott Laboratories</td>
			<td>NC9855218</td>
			<td>surgical supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Vet ointment</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>NC0138063&#160;</td>
			<td>eye dryness prevention&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MoorFLPI-2 blood flow imager</td>
			<td>Moor</td>
			<td>780-nm laser source</td>
			<td>Laser Speckle Contrast Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mannitol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M4125</td>
			<td>in-vivo TTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC)&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8877</td>
			<td>in-vivo TTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51425</td>
			<td>brain section for in-vivo TTC&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital microscope</td>
			<td>Dino-Lite</td>
			<td>AM2111</td>
			<td>whole-braina imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T compound</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit Alexa Fluro 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A11008</td>
			<td>Immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Vibratome</td>
			<td>ultrapro 5000</td>
			<td>brain section for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evans blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E2129</td>
			<td>Detecting vascular perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>5000</td>
			<td>brain section for histology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Avertin (2, 2, 2-Tribromoethanol)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T48402</td>
			<td>euthanasia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>DP73</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a thrombotic stroke model based on transient cerebral hypoxia-ischemia

وقد عانى البحوث السكتة الدماغية العديد من النكسات في ترجمة العلاجات اعصاب في الممارسة السريرية. في المقابل، فإن العلاج في العالم الحقيقي (TPA الجلطات) نادرا ما تنتج فوائد في النماذج التجريبية الميكانيكية المستندة إلى انسداد، التي تهيمن على أبحاث السكتة الدماغية قبل السريرية. هذا الانقسام بين مقاعد البدلاء، والسرير يوحي الحاجة إلى استخدام نماذج سكتة متجاوبة في مجال البحوث السكتة الدماغية قبل السريرية. تحقيقا لهذه الغاية، واخترع نموذجا السكتة الدماغية الخثاري بسيطة وسكتة التفاعلي وصفها هنا. ويتكون هذا النموذج من انسداد عابرة من جانب واحد مشترك الشريان السباتي والتسليم من 7.5٪ من الأكسجين من خلال القناع عن وجهه في فئران بالغة لمدة 30 دقيقة، مع الحفاظ على درجة حرارة الجسم في الحيوان 37.5 ± 0.5 ° C. على الرغم من أن ربط عكسها من الشريان السباتي من جانب واحد أو نقص الأكسجة قمعت كل تدفق الدم إلى المخ عابر فقط، والجمع بين كل من الشتائم تسبب العجز ضخه، الفيبرين وترسب الصفائح الدموية، وinfar كبير دائمط م في الأراضي التي يتم توفيرها من الشريان الدماغي المتوسطة. الأهم من ذلك، قدمت حقن المؤتلف سكتة عند 0.5، 1، أو 4 ساعات بعد ثي (10 ملغ / كلغ) الوريد ذيل الحد تعتمد على الوقت من معدل الوفيات واحتشاء الحجم. هذا النموذج السكتة الدماغية الجديد هو بسيط، ويمكن أن تكون موحدة في جميع أنحاء مختبرات لمقارنة النتائج التجريبية. وعلاوة على ذلك، فإنه يدفع الجلطة دون قطع القحف أو إدخال الصمات شكلت مسبقا. ونظرا لهذه المزايا الفريدة، ونموذج ثي هو إضافة مفيدة إلى مرجع للبحوث السكتة الدماغية قبل السريرية.

تم استخدام ثنائي الأبعاد التصوير رقطة الليزر المقابل (LSCI) 16 لمقارنة التغيرات في تدفق الدم الدماغي (البرازيلي) من خلال 30 دقيقة عابرة انسداد الشريان السباتي من جانب واحد (tCCAO)، والتعرض 30 دقيقة لنقص الأكسجة (7.5٪ أكسجين)، و 30 دقيقة من جانب واحد السباتي ربط ظل نقص الأكس...

Watch this Scientific Journal Video about A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia at JoVE.com

A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

Thromboembolic stroke models are vital tools for optimizing the recanalization therapy. Here we report a murine thrombotic stroke model based on transient cerebral hypoxic-ischemic (tHI) insult, which triggers thrombosis and infarction, and responds favorably to tissue plasminogen activator (tPA)-mediated fibrinolysis in a therapeutic window similar to those in stroke patients.

A السكتة الدماغية نموذج الخثاري بناء على عابر الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA ...

a-thrombotic-stroke-model-based-on-transient-cerebral-hypoxia-ischemia

Research

JoVE Journal

Medicine

14.7K Views.  The Emory University School of Medicine. Thromboembolic stroke models are vital tools for optimizing the recanalization therapy. Here we report a murine thrombotic stroke model based on transient cerebral hypoxic-ischemic (tHI) insult, which triggers thrombosis and infarction, and responds favorably to tissue plasminogen activator (tPA)-mediated fibrinolysis in a therapeutic window similar to those in stroke patients. 

Video: A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are very limited. To meet the need for novel therapeutic approaches, experimental stroke research frequently employs rodent models of focal cerebral ischaemia. Most researchers use permanent or transient occlusion of the middle cerebral artery (MCA) in mice or rats.
Proximal occlusion of the middle cerebral artery (MCA) via the intraluminal suture technique (so called filament or suture model) is probably the most frequently used model in experimental stroke research. The intraluminal MCAO model offers the advantage of inducing reproducible transient or permanent ischaemia of the MCA territory in a relatively non-invasive manner. Intraluminal approaches interrupt the blood flow of the entire territory of this artery. Filament occlusion thus arrests flow proximal to the lenticulo-striate arteries, which supply the basal ganglia. Filament occlusion of the MCA results in reproducible lesions in the cortex and striatum and can be either permanent or transient. In contrast, models inducing distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA occlusion typically spare the striatum and primarily involve the neocortex. In addition these models do require craniectomy. In the model demonstrated in this article, a silicon coated filament is introduced into the common carotid artery and advanced along the internal carotid artery into the Circle of Willis, where it blocks the origin of the middle cerebral artery. In patients, occlusions of the middle cerebral artery are among the most common causes of ischaemic stroke. Since varying ischemic intervals can be chosen freely in this model depending on the time point of reperfusion, ischaemic lesions with varying degrees of severity can be produced. Reperfusion by removal of the occluding filament at least partially models the restoration of blood flow after spontaneous or therapeutic (tPA) lysis of a thromboembolic clot in humans.
In this video we will present the basic technique as well as the major pitfalls and confounders which may limit the predictive value of this model.

Filamentous occlusion of the Middle cerebral artery is a common model for studying ischemic stroke in mice.

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران -- الشرق انسداد الشريان الدماغي مع نموذج الشعيرة

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United States in 20091,2. The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was developed by Koizumi4 in 1986 to simulate this 
impactful human pathology in the rat. A modification of the MCAO method was later presented by Longa3. Both techniques have been widely used to identify 
molecular mechanisms of brain injury resulting from ischemic stroke and potential therapeutic modalities5. This relatively noninvasive method in rats has been 
extended to use in mice to take advantage of transgenic and knockout strains6,7. To model focal cerebral ischemia, an intraluminal suture is advanced via 
the internal carotid artery to occlude the base of the MCA. Retracting the suture after a specified period of time mimics spontaneous reperfusion, but the 
suture can also be permanently retained. This video will be demonstrating the two major approaches for performing intraluminal MCAO procedure in mice in a 
stepwise fashion, as well as providing insights for potential drawbacks and pitfalls. The ischemic brain tissue will subsequently be stained by 
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to evaluate the extent of cerebral infarction8.

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is the most frequent used model among experimental ischemic stroke models. Here we will demonstrate the entire model in detail with the guide of Laser Doppler flowmetry, and its representative results.

الشريان الدماغي الأوسط انسداد داخل اللمعة (MCAO) النموذجي للاصابة بالسكتة الدماغية مع توجيه الليزر دوبلر Flowmetry في الفئران

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a subsequent damaging ischemic insult. We have established bilateral common carotid artery occlusion as a preconditioning stimulus to induce early ischemic tolerance to transient focal cerebral ischemia in C57Bl6/J mice. In this video, we will demonstrate the methodology used for this study.

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning (PC) &#x2013; a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a subsequent damaging ischemic insult. We established bilateral common carotid artery occlusion (BCCAO) as a preconditioning stimulus to induce early ischemic tolerance (IT) to transient focal cerebral ischemia (induced by middle cerebral artery occlusion, MCAO) in C57Bl6/J mice.

الثنائية انسداد الشريان السباتي المشترك باعتباره المحفز شروط مسبقة كافية للحث على التسامح الدماغية المبكرة إلى نقص التروية الدماغية البؤري

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in 20091, 2. Several models of cerebral ischemia have been developed to mimic the human condition of stroke. It has been suggested that up to 80% of all strokes result from ischemic damage in the middle cerebral artery (MCA) area3. In the early 1990s, endothelin-1 (ET-1) 4 was used to induce ischemia by applying it directly adjacent to the surface of the MCA after craniotomy. Later, this model was modified 5 by using a stereotaxic injection of ET-1 adjacent to the MCA to produce focal cerebral ischemia. The main advantages of this model include the ability to perform the procedure quickly, the ability to control artery constriction by altering the dose of ET-1 delivered, no need to manipulate the extracranial vessels supplying blood to the brain as well as gradual reperfusion rates that more closely mimics the reperfusion in humans5-7. On the other hand, the ET-1 model has disadvantages that include the need for a craniotomy, as well as higher variability in stroke volume8. This variability can be reduced with the use of laser Doppler flowmetry (LDF) to verify cerebral ischemia during ET-1 infusion. Factors that affect stroke variability include precision of infusion and the batch of the ET-1 used6. Another important consideration is that although reperfusion is a common occurrence in human stroke, the duration of occlusion for ET-1 induced MCAO may not closely mimic that of human stroke where many patients have partial reperfusion over a period of hours to days following occlusion9, 10. This protocol will describe in detail the ET-1 induced MCAO model for ischemic stroke in rats. It will also draw attention to special considerations and potential drawbacks throughout the procedure.

Several animal models of cerebral ischemia have been developed to simulate the human condition of stroke. This protocol describes the endothelin-1 (ET-1) induced middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke in rats. In addition, important considerations, advantages, and shortcomings of this model are discussed.

Endothelin-1 المستحثة انسداد الشريان الدماغي الأوسط نموذج للالسكتة الدماغية مع التوجيه بالليزر Flowmetry دوبلر في الجرذ

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal models of acute ischemic stroke allows to confirm successful arterial occlusion and exclude subarachnoid hemorrhage. Cerebral perfusion monitoring can also be used to study intracranial collateral circulation, which is emerging as a powerful determinant of stroke outcome and a possible therapeutic target. Despite a recognized role of Laser Doppler perfusion monitoring as part of the current guidelines for experimental cerebral ischemia, a number of technical difficulties exist that limit its widespread use. One of the major issues is obtaining a secure and prolonged attachment of a deep-penetration Laser Doppler probe to the animal skull. In this video, we show our optimized system for cerebral perfusion monitoring during transient middle cerebral artery occlusion by intraluminal filament in the rat. We developed in-house a simple method to obtain a custom made holder for twin-fibre (deep-penetration) Laser Doppler probes, which allow multi-site monitoring if needed. A continuous and prolonged monitoring of cerebral perfusion could easily be obtained over the intact skull.

Cerebral perfusion monitoring has been demonstrated to improve accuracy in ischemic stroke models. Technical difficulties often limit the use of this essential tool for cerebrovascular research. In this video, an optimized system is shown to obtain a single or multi-site hemodynamic monitoring during intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.

الأمثل نظام لرصد الإرواء الدماغي في نموذج الفئران من السكتة الدماغية داخل اللمعة انسداد الشريان الدماغي الأوسط

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of Willis perforation (CWp) and proven by intracranial pressure (ICP) monitoring. Thereby a homogenous blood distribution in subarachnoid spaces surrounding the arterial circulation and cerebellar fissures is achieved. Animal physiology is maintained by intubation, mechanical ventilation, and continuous on-line monitoring of various physiological and cardiovascular parameters: body temperature, systemic blood pressure, heart rate, and hemoglobin saturation. Thereby the cerebral perfusion pressure can be tightly monitored resulting in a less variable volume of extravasated blood. This allows a better standardization of endovascular filament perforation in mice and makes the whole model highly reproducible. Thus it is readily available for pharmacological and pathophysiological studies in wild type and genetically altered mice.

A standardized mouse model of subarachnoid hemorrhage by intraluminal Circle of Willis perforation is described. Vessel perforation and subarachnoid bleeding are monitored by intracranial pressure monitoring. In addition various vital parameters are recorded and controlled to maintain physiologic conditions.

A نموذج من الفئران تحت العنكبوتية نزف

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As such, primary or &#39;neuronal-like&#39; cell culture systems are commonly utilized. While&#160;these systems are relatively easy to work with, and are useful model systems in which various functional outcomes (such as cell death) can be readily quantified, the examined outcomes and pathways in cultured immature neurons (such as excitotoxicity-mediated cell death pathways) are not necessarily the same as those observed in mature brain, or in intact tissue. Therefore, there is the need to develop models in which cellular mechanisms in mature neural tissue can be examined. We have developed an in vitro technique that can be used to investigate a variety of molecular pathways in intact nervous tissue. The technique described herein utilizes rat cortical tissue, but this technique can be adapted to use tissue from a variety of species (such as mouse, rabbit, guinea pig, and chicken) or brain regions (for example, hippocampus, striatum, etc.). Additionally, a variety of stimulations/treatments can be used (for example, excitotoxic, administration of inhibitors, etc.). In conclusion, the brain slice model described herein can be used to examine a variety of molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

We have developed a brain slice model which can be used to examine molecular mechanisms involved in excitotoxicity-mediated brain injury.&#160;This technique generates viable mature brain tissue and reduces animal numbers required for experimentation, whilst keeping the neuronal circuitry, cellular interactions, and postsynaptic compartments partly intact.

excitotoxic المواد تحفيز الدماغ باعتبارها Microslices<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج من السكتة الدماغية

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical options are available for a small proportion of stroke patients in the acute phase. Current research is intensively searching for novel therapeutic strategies and is increasingly focusing on the sub-acute and chronic phase after stroke because more patients might be eligible for therapeutic interventions in a prolonged time window. These delayed mechanisms include important pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity and regeneration. In order to analyze these mechanisms and to subsequently evaluate novel drug targets, experimental stroke models with clinical relevance, low mortality and high reproducibility are sought after. Moreover, mice are the smallest mammals in which a focal stroke lesion can be induced and for which a broad spectrum of transgenic models are available. Therefore, we describe here the mouse model of transcranial, permanent coagulation of the middle cerebral artery via electrocoagulation distal of the lenticulostriatal arteries, the so-called &#8220;coagulation model&#8221;. The resulting infarct in this model is located mainly in the cortex; the relative infarct volume in relation to brain size corresponds to the majority of human strokes. Moreover, the model fulfills the above-mentioned criteria of reproducibility and low mortality. In this video we demonstrate the surgical methods of stroke induction in the &#8220;coagulation model&#8221; and report histological and functional analysis tools.

Various murine models of middle cerebral artery occlusion (MCAO) are widely used in experimental brain research. Here, we demonstrate the model of transcranial permanent distal MCAO which produces consistent cortical infarction of a size corresponding to damage imposed by the majority of human ischemic strokes.

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران: التخثر الدائم من الشريان الدماغي الأوسط القاصي

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic stroke. However, the use of tPA is limited by its narrow therapeutic window and by increased risk of hemorrhagic transformation. There is an urgent need to develop suitable stroke models to study new thrombolytic agents and strategies for treatment of ischemic stroke. At present, two major types of ischemic stroke models have been developed in rats and mice: intraluminal suture MCAO and embolic MCAO. Although MCAO models via the intraluminal suture technique have been widely used in mechanism-driven stroke research, these suture models do not mimic the clinical situation and are not suitable for thrombolytic studies. Among these models, the embolic MCAO model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical investigation of thrombolytic therapy. This embolic model was first developed in rats by Overgaard et al.1 in 1992 and further characterized by Zhang et al. in 19972. Although embolic MCAO has gained increasing attention, there are technical problems faced by many laboratories. To meet increasing needs for thrombolytic research, we present a highly reproducible model of embolic MCAO in the rat, which can develop a predictable infarct volume within the MCA territory. In brief, a modified PE-50 tube is gently advanced from the external carotid artery (ECA) into the lumen of the internal carotid artery (ICA) until the tip of the catheter reaches the origin of the MCA. Through the catheter, a single homologous blood clot is placed at the origin of the MCA. To identify the success of MCA occlusion, regional cerebral blood flow was monitored, neurological deficits and infarct volumes were measured. The techniques presented in this paper should help investigators to overcome technical problems for establishing this model for stroke research.

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.

صمي الأوسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) لالدماغية السكتة الدماغية مع مثلي تجلط الدم في الجرذان

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Simultaneous PET/MRI Imaging During Mouse Cerebral Hypoxia-ischemia

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics disturbance in affected cells. Diffusion weighted magnetic resonance imaging (MRI) identifies regions that are damaged, potentially irreversibly, by hypoxia-ischemia. Alterations in glucose utilization in the affected tissue may be detectable by positron emission tomography (PET) imaging of 2-deoxy-2-(18F)fluoro-&#7429;-glucose ([18F]FDG) uptake. Due to the rapid and variable nature of injury in this animal model, acquisition of both modes of data must be performed simultaneously in order to meaningfully correlate PET and MRI data. In addition, inter-animal variability in the hypoxic-ischemic injury due to vascular differences limits the ability to analyze multi-modal data and observe changes to a group-wise approach if data is not acquired simultaneously in individual subjects. The method presented here allows one to acquire both diffusion-weighted MRI and [18F]FDG uptake data in the same animal before, during, and after the hypoxic challenge in order to interrogate immediate physiological changes.

The method presented here uses simultaneous positron emission tomography and magnetic resonance imaging. In the cerebral hypoxia-ischemia model, dynamic changes in diffusion and glucose metabolism occur during and after injury. The evolving and irreproducible damage in this model necessitates simultaneous acquisition if meaningful multi-modal imaging data are to be acquired.

في وقت واحد التصوير PET / MRI خلال الماوس الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية

Dynamic changes in tissue water diffusion and glucose metabolism occur during and after hypoxia in cerebral hypoxia-ischemia reflecting a bioenergetics ...