This work was supported by a BBSRC project grant to DMcK, DMcC and RGN (BB/K002775/1) and a PhD studentship [to JP, BB/J013854/1]. We gratefully acknowledge the fantastic advice on technical equipment and field techniques that we received throughout the project from Nozrat Mirzai (Bioelectronics Unit University of Glasgow), Ross McLeod and Matthew Clavey (ThermalVision Research) as well as SCENE for all their logistic support of the field work. We would also like to thank Debbie Kelton at Veracity for generously providing equipment used to power the thermal imaging camera in the field.

بيان الأخلاق: وشمل العمل تم تنفيذ أسلوب محاصرة الروتيني للحرة المعيشة العصفوريات الصغيرة التي وافق عليها الصندوق الاستئماني البريطانية لعلم الطيور وبروتوكول القبض على انتزاع إجهاد خفيف في الطيور تحت الرخص UK زارة الداخلية. 1. مجموعة المتابعة للتصوير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إنشاء تصوير انشاء حيث يتم تشجيع الطيور لوضع أنفسهم أمام الكاميرا (الشكل 1). الطائر يدخل مجموعة المتابعة من خلال ثقب في جدار نهاية واحدة والوصول إلى وثيقة الطعام على الجدار نهاية المعاكس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل روض الطيور إلى مجموعة المتابعة، وتوفير الغذاء المناسب (على سبيل المثال، حبات الفول السوداني) في وحدة التغذية لعدة أسابيع قبل التسجيل. وبصرف النظر عن توفير الطعام، وترك الإعداد دون عائق. خلال هذه الفترة، ضع ترايبود وهمية أمام المغذية للسماح الطيور إلى روض أيضا إلى الكاميرا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في يوم تسجيل، والحد من availabiعنه lity من حبات الفول السوداني في مجموعة المتابعة عن طريق إزالة جميع المواد الغذائية المتبقية من وحدة التغذية واستبدالها بالغذاء الواردة في وعاء شفاف مع وجود ثقب صغير في المركز على رأس من خلالها الطيور يمكن الوصول إلى الغذاء. موقف هذه الحاوية الطعام في وسط القفص على العكس حد للحفرة المدخل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع مربع صغير من أسود شريط عزل الابتعاثية المعروفة إلى أن من إهاب الطبيعي في واحدة من زوايا شبكة من مربع بحيث يظهر في جميع الصور. إرفاق الشريط العازل السوداء إلى الحرارية على اتصال مع مسجل درجة الحرارة التي تسجل درجة حرارة الشريط العازل السوداء مع قرار من 0.1 درجة مئوية كل 1 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع كاميرا التصوير الحراري 50 سم من مركز فخ مربع بحيث كل مربع تناسبها في ميدان الكاميرا وجهة نظر، وسيتم وضع الطيور التغذية من الحاوية واضحة في منطقة الكاميرا من التركيز. توصيل الكاميرا إلى جهاز كمبيوتر محمول، ضبط الكاميرا<html> لتسجيل الصور في في المتوسط ​​من 7.5 لقطة في الثانية (مع طابع الوقت)، وإرسال الصور إلى القرص الصلب للكمبيوتر المحمول ليتم حفظها هناك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إرفاق خط الصيد إلى الباب الدورية للانشاء ولفة من ذلك على الموقف حيث يتم إخفاء مجرب من عرض من الطيور، ولكن لا يزال من الممكن لاحظ مجموعة المتابعة - حوالي 20 م من مجموعة المتابعة. </li></ol> 2. تصوير استجابة الطائر إلى الإجهاد الحاد الخفيف <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبمجرد أن يدخل طائر مربع التغذية، وترك الطيور دون عائق في مربع لكاليفورنيا. 5 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب خط الصيد بعد الطيور قضى كاليفورنيا. 5 ثانية في المربع لإغلاق مربع التغذية. الحرص على أن الطيور لا يزال في مكان ناء من مربع من أجل تقليل خطر إصابة الطيور. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نهج فورا مربع التغذية والوقوف بلا حراك وراء الكاميرا لحوالي 3 دقائق. ثم استرداد الطيور من منطقة الجزاء، وندعه يذهب. </li></ol>&quot;&gt; 3. استخراج العين منطقة درجة الحرارة من الصور الحرارية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخراج درجة الحرارة القصوى من كل إطار. ملاحظة: أقصى درجة حرارة تم تسجيلها تقريبا دائما من داخل المنطقة حول العين، يحدها من الجلد المكشوفة من الحلقة periophthalmic (الشكل 2)، ويشار إليها فيما يلي درجات الحرارة العين المنطقة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في التصوير الحراري برامج تحليل انقر بزر الماوس الأيمن على الصورة، &#39;إضافة&#39; مؤامرة جديدة لصورة كحد أقصى. ثم انقر بزر الماوس الأيمن على المؤامرة التي تصدر البيانات (درجة حرارة العين المنطقة والوقت الذي اتخذ فيه الإطار) إلى ملف CSV. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حذف من ملف CSV جميع الخطوط من الإطارات حيث كانت العين المنطقة من الطيور غير مرئية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مؤامرة درجة الحرارة القصوى ضد الزمن في R 27، تشير تحديد يدويا حيث ارتفاع درجة الحرارة&gt; +0.2 ºC بين قراءتين متتاليتين عندما تم سحب الغشاء الراف فوق العين (الرمش) ونقاط مع القيم المنخفضة outsidالبريد نطاق درجة حرارة الجسم للطيور 28 (أي عندما كانت هذه المنطقة العين مرئية ولكن عدم وضوح من خلال اقتراح عدة إطارات) ثم قم بإزالة خطوط ذات الصلة من ملف CSV البيانات التي تنتج أثناء الخطوة 3.1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس درجة حرارة الغرفة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحميل البيانات (الوقت ودرجة الحرارة مسجل) من مسجل درجة الحرارة على جهاز كمبيوتر والتصدير إلى جدول بيانات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للحصول على درجة الحرارة المحيطة من الصورة الحرارية في صورة حرارية برامج تحليل رسم مربع على الشريط العازل السوداء التي غطت التحقيق في درجة الحرارة المسجل، ثم انقر فوق الحق على الساحة وحدد &quot;إضافة مؤامرة جديدة &#39;لمتوسط ​​درجات الحرارة ساحة ل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم انقر بزر الماوس الأيمن تلك المؤامرة، لتصدير البيانات (الوقت ودرجة الحرارة IRT) إلى ملف CSV. دمج السلاسل الزمنية اثنين من الناتج درجة الحرارة لمسجل درجة الحرارة والحرارية صورة مطابقة للمرة إلى جدول واحد. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صحة العين المنطقة من درجات الحرارةإعادة ضد درجة حرارة الغرفة. تصدير جدول البيانات التي تم إنشاؤها في الخطوة 3.4 في ملف CSV مطابقة لكسب الوقت. إلى كل احتفظت درجة حرارة العين المنطقة بإضافة الفرق بين مسجل درجة الحرارة والمستمدة من التصوير قيم درجة الحرارة الحرارية (درجة الحرارة المسجل - درجة الحرارة IRT) يقاس في نفس الوقت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنفيذ الترشيح الآلي لإزالة أقل دقة القيم درجة حرارة العين المنطقة المنخفضة باستخدام خوارزمية البحث الذروة (انظر الرمز الإضافي ملف) لاستخراج أعلى (وبالتالي الأكثر دقة) نقطة في البيانات تلقائيا. ملاحظة: خوارزمية البحث الذروة تعيد ترتيب البيانات درجة الحرارة في ناقلات مع المعرفة العرض (مدى)، أوصى فترة = 3، واستخراج القيمة المركزية في الصفوف حيث الأرقام جانبي أقل، أي قمم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الخطية لإغلاق الثغرات التي تركها تسلسل عندما تم استخراج أي الذروة، وعندما كانت هذه المنطقة العين غير مرئية. استخدام na.approx الأمر (حديقة الحيوان حزمة v1.7-11 في R 27) لإعطاء قيمة درجة الحرارة واحدة في الثانية لكل فرد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في ملف البيانات CVS، إضافة قيمة من 0.2 إلى كل درجة حرارة العين المنطقة لتصحيح تأثير أخذ الصور من خلال شبكة. وأظهرت الاختبارات أنه عندما الجسم الأسود، يسخن لتقريب يعني درجة حرارة الجسم الطيور ~ 41 درجة مئوية في مرحلته النشطة 28، تم تصويرها من خلال النافذة شبكة بنفس حجم شبكة المستخدمة في تصوير انشاء ودرجات الحرارة التي سجلتها: مذكرة كانت كاميرا التصوير الحراري في المناطق التي لا تحجب الأسلاك 0.2 درجة مئوية أقل من القيم التي تم الحصول عليها من دون شبكة التدخل (الفرق = -0.2 درجة مئوية ± 0.085 SD، ن = 30، درجة الحرارة من الجسم الأسود = 41،6 حتي 42،5 درجة مئوية). ملاحظة: هذا هو معامل التصحيح محددة للشروط في هذه الدراسة، ومن المرجح أن تختلف مع أداة جعل، ونوع وعرض للشبكة بين الحيوانات والكاميرا، وفي كل حالة يجب أن تنشأ ليرة سوريةشروط الدراسة ecific. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من الحد الأقصى لدرجات الحرارة العين المنطقة المسجلة من قبل تم إغلاق مربع تحديد أعلى قيمة، والتي سوف تشكل الأساس الحرارة العين المنطقة من الطيور دون عائق. إضافة هذا الأساس درجات الحرارة العين المنطقة عمود جديد إلى ملف CVS (خط الأساس). ثم طرح قيمة خط الأساس من كل احتفظت القيمة القصوى درجة حرارة العين المنطقة، وتوليد عمود جديد في ملف البيانات CVS. ملاحظة: هذه القيمة الجديدة تعبير عن الآن استجابة الطيور للإجهاد الحاد المعتدل الانحراف من درجة حرارته الأساسية دون عائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رسم الانحرافات في درجة الحرارة القصوى العين المنطقة من خط الأساس الحرارة العين المنطقة لجميع الأفراد من بعد تم إغلاق فخ باستخدام ggplot الأمر (حزمة ggplot2 v1.0.0 في R 27). توليد ألبس الحذاء فواصل الثقة 95٪ باستخدام mean_cl_boot الخيار (حزمة ggplot2 v1.0.0 في R 27). لمزيد من التفاصيل راجع الملف رمز إضافي. </lI&gt; </ol>

<ol>
	<li>Romero, L. M., Dickens, M. J., Cyr, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+reactive+scope+model+-+A+new+model+integrating+homeostasis,+allostasis,+and+stress.">The reactive scope model - A new model integrating homeostasis, allostasis, and stress.</a> Hormones and Behavior. 55, 375-389 (2009).</li><li>McEwen, B. S., Wingfield, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+concept+of+allostasis+in+biology+and+biomedicine.">The concept of allostasis in biology and biomedicine.</a> Hormones and Behavior. 43, 2-15 (2003).</li><li>Rensel, M. A., Schoech, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeatability+of+baseline+and+stress-induced+corticosterone+levels+across+early+life+stages+in+the+Florida+scrub-jay+(Aphelocoma+coerulescens).">Repeatability of baseline and stress-induced corticosterone levels across early life stages in the Florida scrub-jay (Aphelocoma coerulescens).</a> Hormones and Behavior. 59, 497-502 (2011).</li><li>Wingfield, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+endocrinology,+environment+and+global+change.">Comparative endocrinology, environment and global change.</a> General and Comparative Endocrinology. 157, 207-216 (2008).</li><li>Buwalda, B., Scholte, J., de Boer, S. F., Coppens, C. M., Koolhaas, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+acute+glucocorticoid+stress+response+does+not+differentiate+between+rewarding+and+aversive+social+stimuli+in+rats.">The acute glucocorticoid stress response does not differentiate between rewarding and aversive social stimuli in rats.</a> Hormones and Behavior. 61, 218-226 (2012).</li><li>Romero, L. M., Reed, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collecting+baseline+corticosterone+samples+in+the+field:+Is+under+3+min+good+enough.">Collecting baseline corticosterone samples in the field: Is under 3 min good enough.</a> Comparative Biochemistry and Physiology - A Molecular and Integrative Physiology. 140, 73-79 (2005).</li><li>Harper, J. M., Austad, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fecal+glucocorticoids:+a+noninvasive+method+of+measuring+adrenal+activity+in+wild+and+captive+rodents.">Fecal glucocorticoids: a noninvasive method of measuring adrenal activity in wild and captive rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 73, 12-22 (2000).</li><li>Bortolotti, G. R., Marchant, T. A., Blas, J., German, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corticosterone+in+feathers+is+a+long-term,+integrated+measure+of+avian+stress+physiology.">Corticosterone in feathers is a long-term, integrated measure of avian stress physiology.</a> Functional Ecology. 22, 494-500 (2008).</li><li>Oka, T., Oka, K., Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+and+mediators+of+psychological+stress-induced+rise+in+core+temperature.">Mechanisms and mediators of psychological stress-induced rise in core temperature.</a> Psychosomatic Medicine. 63, 476-486 (2001).</li><li>Bouwknecht, A. J., Olivier, B., Paylor, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+stress-induced+hyperthermia+paradigm+as+a+physiological+animal+model+for+anxiety:+a+review+of+pharmacological+and+genetic+studies+in+the+mouse.">The stress-induced hyperthermia paradigm as a physiological animal model for anxiety: a review of pharmacological and genetic studies in the mouse.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 31, 41-59 (2007).</li><li>Moe, R. O., Bakken, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Handling+and+Physical+Restraint+on+Rectal+Temperature,+Cortisol,+Glucose+and+Leucocyte+Counts+in+the+Silver+Fox+(Vulpes+vulpes).">Effects of Handling and Physical Restraint on Rectal Temperature, Cortisol, Glucose and Leucocyte Counts in the Silver Fox (Vulpes vulpes).</a> Acta Veterinaria Scandinavica. 38, 29-39 (1997).</li><li>Cabanac, M., Aizawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fever+and+tachycardia+in+a+bird+(Gallus+domesticus)+after+simple+handling.">Fever and tachycardia in a bird (Gallus domesticus) after simple handling.</a> Physiology, and Behavior. 69, 541-545 (2000).</li><li>Cabanac, A. J., Guillemette, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temperature+and+heart+rate+as+stress+indicators+of+handled+common+eider.">Temperature and heart rate as stress indicators of handled common eider.</a> Physiology, and Behavior. 74, 475-479 (2001).</li><li>Carere, C., van Oers, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shy+and+bold+great+tits+(Parus+major):+body+temperature+and+breath+rate+in+response+to+handling+stress.">Shy and bold great tits (Parus major): body temperature and breath rate in response to handling stress.</a> Physiology, and Behavior. 82, 905-912 (2004).</li><li>Gray, D. A., Maloney, S. K., Kamerman, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restraint+increases+afebrile+body+temperature+but+attenuates+fever+in+Pekin+ducks+(Anas+platyrhynchos).">Restraint increases afebrile body temperature but attenuates fever in Pekin ducks (Anas platyrhynchos).</a> American Journal of Physiology. Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 294, R1666-R1671 (2008).</li><li>Meyer, L. C. R., Fick, L., Matthee, A., Mitchell, D., Fuller, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperthermia+in+captured+Impala+(Aepyceros+melampus.):+A+fright+not+flight+response.">Hyperthermia in captured Impala (Aepyceros melampus.): A fright not flight response.</a> J. Wildl. Dis. 44, 404-416 (2008).</li><li>Busnardo, C., Tavares, R. F., Resstel, L. B. M., Elias, L. L. K., Correa, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paraventricular+nucleus+modulates+autonomic+and+neuroendocrine+responses+to+acute+restraint+stress+in+rats.">Paraventricular nucleus modulates autonomic and neuroendocrine responses to acute restraint stress in rats.</a> Autonomic Neuroscience: Basic, and Cinical. 158, 51-57 (2010).</li><li>Kramer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+conditioning+on+the+increase+of+heart+rate+and+body+temperature+provoked+by+handling+in+the+mouse.">Effect of conditioning on the increase of heart rate and body temperature provoked by handling in the mouse.</a> ATLA Alternatives to Laboratory Animals. 32, 177-181 (2004).</li><li>Lowe, T. E., Cook, C. J., Ingram, J. R., Harris, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+ear-pinna+temperature+as+a+useful+measure+of+stress+in+sheep+(Ovis+aries).">Changes in ear-pinna temperature as a useful measure of stress in sheep (Ovis aries).</a> Animal Welfare. 14, 35-42 (2005).</li><li>Ahola, L., Harri, M., Kasanen, S., Mononen, J., Pyyk&#246;nen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+family+housing+of+farmed+silver+foxes+(+Vulpes+vulpes+)+in+outdoor+enclosures+on+some+behavioural+and+physiological+parameters.">Effect of family housing of farmed silver foxes ( Vulpes vulpes ) in outdoor enclosures on some behavioural and physiological parameters.</a> Canadian Journal of Animal Science. 80, 427-434 (2000).</li><li>Harri, M., Mononen, J., Ahola, L., Plyusnina, I., Rekil&#228;, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+and+physiological+differences+between+silver+foxes+selected+and+not+selected+for+domestic+behaviour.">Behavioural and physiological differences between silver foxes selected and not selected for domestic behaviour.</a> Animal Welfare. 12, 305-314 (2003).</li><li>Van Bogaert, M. J. V., Groenink, L., Oosting, R. S., Westphal, K. G. C., Van Der Gugten, J., Olivier, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+autonomic+responses+to+stress.">Mouse strain differences in autonomic responses to stress.</a> Genes, Brain and Behavior. 5, 139-149 (2006).</li><li>Van Der Heyden, J. A. M., Zethof, T. J. J., Olivier, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress-induced+hyperthermia+in+singly+housed+mice.">Stress-induced hyperthermia in singly housed mice.</a> Physiology and Behavior. 62, 463-470 (1997).</li><li>Singer, C., Ruf, T., Schober, F., Fluch, G., Paumann, T., Arnold, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+versatile+telemetry+system+for+continuous+measurement+of+heart+rate,+body+temperature+and+locomotor+activity+in+freeranging+ruminants.">A versatile telemetry system for continuous measurement of heart rate, body temperature and locomotor activity in freeranging ruminants.</a> Methods in Ecology and Evolution. 1, 75-85 (2010).</li><li>McCafferty, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+thermal+imaging+in+avian+science.">Applications of thermal imaging in avian science.</a> Ibis. 155, 4-15 (2013).</li><li>Edgar, J. L., Nicol, C. J., Pugh, C. A., Paul, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+temperature+changes+in+response+to+handling+in+domestic+chickens.">Surface temperature changes in response to handling in domestic chickens.</a> Physiology, and Behavior. 119, 195-200 (2013).</li><li>R Core Team. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R:+A+language+and+environment+for+statistical+computing.">R: A language and environment for statistical computing.</a> R Foundation for Statistical Computing. , (2014).</li><li>Prinzinger, R., Pressmar, A., Schleucher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+temperature+in+birds.">Body temperature in birds.</a> Comparative Biochemistry and Physiology. 99, 499-506 (1991).</li><li>Moe, R. O., Stubsj&#248;en, S. M., Bohlin, J., Fl&#248;, A., Bakken, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+temperature+drop+in+response+to+anticipation+and+consumption+of+a+signaled+palatable+reward+in+laying+hens+(Gallus+domesticus).">Peripheral temperature drop in response to anticipation and consumption of a signaled palatable reward in laying hens (Gallus domesticus).</a> Physiology, and Behavior. 106, 527-533 (2012).</li><li>Secor, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+dynamic+action:+a+review+of+the+postprandial+metabolic+response.">Specific dynamic action: a review of the postprandial metabolic response.</a> Journal of Comparative Physiology B. 179, 1-56 (2009).</li><li>Midtg&#229;rd, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaling+of+the+brain+and+the+eye+cooling+system+in+birds:+A+morphometric+analysis+of+the+ophthalmicum.">Scaling of the brain and the eye cooling system in birds: A morphometric analysis of the ophthalmicum.</a> Journal of Experimental Zoology. 225, 197-207 (1983).</li><li>Edgar, J. L., Lowe, J. C., Paul, E. S., Nicol, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Avian+maternal+response+to+chick+distress.">Avian maternal response to chick distress.</a> Proceedings. Biological Sciences / The Royal Society. 278, 3129-3134 (2011).</li><li>Hammel, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infrared+emissivity+of+some+Arctic+fauna.">Infrared emissivity of some Arctic fauna.</a> Journal of Mammalogy. 37, 375-378 (1956).</li><li>Khaliq, I., Hof, C., Prinzinger, R., B&#246;hning-Gaese, K., Pfenninger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+variation+in+thermal+tolerances+and+vulnerability+of+endotherms+to+climate+change.">Global variation in thermal tolerances and vulnerability of endotherms to climate change.</a> Proceedings. Biological Sciences / The Royal Society. 281, 20141097 (2014).</li><li>Kant, G. J., Ra Bauman, ., Pastel, R. H., Myatt, C. A., Closser-Gomez, E., D&#8217;Angelo, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+controllable+vs.+uncontrollable+stress+on+circadian+temperature+rhythms.">Effects of controllable vs. uncontrollable stress on circadian temperature rhythms.</a> Physiology, and Behavior. 49, 625-630 (1991).</li><li>Endo, Y., Shiraki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavior+and+body+temperature+in+rats+following+chronic+foot+shock+or+psychological+stress+exposure.">Behavior and body temperature in rats following chronic foot shock or psychological stress exposure.</a> Physiology and Behavior. 71, 263-268 (2000).</li><li>Lin, H. P., Lin, H. Y., Lin, W. L., Huang, A. C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+stress,+depression,+and+their+interaction+on+heart+rate,+skin+conductance,+finger+temperature,+and+respiratory+rate:+Sympathetic-parasympathetic+hypothesis+of+stress+and+depression.">Effects of stress, depression, and their interaction on heart rate, skin conductance, finger temperature, and respiratory rate: Sympathetic-parasympathetic hypothesis of stress and depression.</a> Journal of Clinical Psychology. 67, 1080-1091 (2011).</li><li>Pavlidis, I., Eberhardt, N. L., Levine, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seeing+through+the+face+of+deception.">Seeing through the face of deception.</a> Nature. 415, 35 (2002).</li><li>Nakanishi, R., Imai-Matsumura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Facial+skin+temperature+decreases+in+infants+with+joyful+expression.">Facial skin temperature decreases in infants with joyful expression.</a> Infant Behavior and Development. 31, 137-144 (2008).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

الإجهاد هو المفهوم المركزي في علم الأحياء، واصفا الاستجابة لحالات الطوارئ للكائن الحي ردا على التحدي البيئي محاولة لاستعادة التوازن 1،2. تحت الضغط، السكر في الدم، والأحماض الدهنية ومستويات الأحماض الأمينية، ومعدل ضربات القلب ومعدل التنفس ومعدل الأيض عن الزيادة، والدم يتم تحويل من المحيط إلى الأجهزة الأساسية 2. هذا النمط من عام التغيرات الفسيولوجية يعبي الحيوان لتكون قادرة على الاستجابة بسرعة وبتكيف لمجموعة من التحديات الاجتماعية والفسيولوجية. مع الاعتراف وفهم التوتر هو في قلب كل البحتة والتطبيقية البحوث الحيوانية، وتقييم الإجهاد في الحيوانات غير المقيد لا يزال يشكل تحديا. A علامة الفسيولوجية التي تستخدم على نطاق واسع من الإجهاد هو زيادة في مستويات الهرمونات تعميم الاستيرويد، مثل الكورتيزول والكورتيزون 1،2. A قوة كبيرة من هذا النهج هو أن تركيزاتها تزيد طن نسبة إلى الضغوطات كثافة، مما يسمح للإجهاد أن يكون كميا. ومع ذلك، السكرية ليست &#39;الضغط&#39; الهرمونات في حد ذاته، ولكن mobilisers من مخازن الطاقة 2. ومع تغير هذه المستويات القشرية السكرية أيضا مع متطلبات الطاقة والوقت من اليوم والعمر والحالة الإنجاب 3،4، وكذلك استجابة لحالات إيجابية على ما يبدو، مثل التزاوج فرصة 5. مستويات القشرية السكرية، وبالتالي، يجب أن تفسر بحذر وضمن السياق. قياس استجابة القشرية السكرية إلى التوتر الحاد لديها أيضا بعض القيود. من الضغوطات الحاد يتسبب في الاستجابة الديناميكية لزيادة مبدئيا مستويات الاستيرويد والعودة بعد ذلك إلى مستوى خط الأساس 1،2. وعادة ما يتم الحصول على عينات القشرية السكرية جراحية، من خلال اخذ عينات من الدم وهو عامل ضغط في حد ذاته، وبالتالي يمكن أن يؤثر على مستويات الاستيرويد قياس 6. وعلاوة على ذلك مستويات القشرية السكرية لا يمكن إلا أن يقاس في واحدة أو عدد قليل جدا من الوقت عoints، والتي قد لا التقاط التباين في مستويات الذروة وتوقيت أو استجابة مدة، مما يحد من قدرتنا على دراسة التغير عبر الزمن من الاستجابة للضغط النفسي الديناميكي داخل الأفراد. أساليب غير الغازية هرمون أخذ العينات، مثل من البراز 7 أو الشعر أو الريش 8، قياس متوسط ​​مستويات القشرية السكرية على مدى فترة زمنية أطول، لأيام أو شهور، على الرغم من المفيد دراسة الضغوطات المزمنة، ليست قابلة للتطبيق لدراسة اضطرابات نفسية حادة . حتى أفضل الطرق التي أنشئت تقدم سوى منظور محدود على الاختلاف في التوتر الحاد بين الأفراد هناك حاجة لمنهجية بديلة في القياسات الإجهاد الفسيولوجية. كما ينطوي على الاستجابة للضغط النفسي على عدد من الآثار الفسيولوجية هناك مرشحين آخرين يمكن أن تشير إلى الإجهاد. من بين أمور أخرى، بوساطة بتعاطف قنوات تضيق الأوعية الدموية من المحيط إلى جوهر الجسم. هذا التركيز من الدم، وبالتالي الحرارة، جنبا إلى جنب مع شكل مختلفالصورة من توليد الحرارة الناجمة عن الإجهاد، وارتفاع درجة حرارة لب 9. على هذا النحو، والاحترار الأساسية، ووصف كما تم استخدام الإجهاد الناجم عن ارتفاع الحرارة (SIH) كعلامة من التوتر الحاد في البحوث الصيدلانية 10. SIH يثير عادة درجة حرارة الجسم الأساسية من قبل 0.5-1.5 درجة مئوية في غضون 10-15 دقيقة من الإجهاد الحاد 10. إنها ظاهرة نسبيا موثقة جيدا أن الضغوطات التجريبية تطبق عادة في صيد والتعامل مع حيوان يمكن أن ترفع درجة حرارة الجسم الأساسية في مجموعة من الثدييات والطيور الأنواع 11-17. الأهم من ذلك، SIH يرتبط مع المؤشرات الأخرى التي تنشأ من الإجهاد، مثل معدل ضربات القلب 18، ومستويات القشرية السكرية 19 والسلوك 20،21. ومثل مستويات القشرية السكرية، ودرجة الحرارة الأساسية ارتبط خطيا أن نؤكد مستوى في بعض الأنواع 22. ومع ذلك، كما هو الحال مع اخذ عينات من الدم، وقياس درجة الحرارة الأساسية هي الغازية في حد ذاتها، والتي تتطلب إدخال سص غرس مسبار 10. درجة الحرارة الأساسية الأساسية يزيد تدريجيا في كل مرة عند التعامل مع أو التحقيق الإدراج الذي يحفز التوتر يجب أن يتكرر 23. التطورات الأخيرة في المعدات تسجيل درجات الحرارة التي تسمح الوصول إلى البيانات عن بعد قد توفر حلا، على الأقل بالنسبة للحيوانات الكبيرة 24. ضمن نفس الآلية التي تولد SIH، على الرغم من تقع بعد علامة أخرى محتملة للإجهاد: وتضيق الأوعية المحيطية التي تتحرك في الدم، ومعها حرارة، إلى جوهر يبرد الجلد في وقت واحد 17. على عكس درجة الحرارة الأساسية، درجة حرارة الجلد ويمكن قياس تماما غير جراحية، من خلال الحراري بالأشعة تحت الحمراء (IRT). IRT تحويل الأشعة تحت الحمراء المنبعثة من سطح الجسم إلى درجة حرارة 25. كما سطح حيوان عادة لديها عدد قليل من بقع عارية من أي درجة حرارة الجلد يمكن أن تستمد مباشرة، فإنه يتطلب الوصول إلى الجلد المعرضة بشكل طبيعي (على سبيل المثال، المنطقة المحيطة ركان العين) أو خلق رقعة عارية بواسطة تقليم الفراء أو الريش. توفير الوصول إلى منطقة مناسبة المكشوفة من الجلد والحيوان يمكن أن تظل في مجال الرؤية من الكاميرا، يمكن استخدام كاميرات IRT لجمع قياسات درجة حرارة الجلد المستمر عن بعد، وربما السماح للاستجابة درجات الحرارة كاملة ليتم تصويره ومقارنة بين الأفراد . في الوقت الذي سبق ان بينت في الدجاج التي السطح درجة الحرارة وتستجيب لالحادة التوتر 26، والجدة من هذه الدراسة هو أنه يقيس درجة حرارة الجسم السطحية من الحيوانات البرية في القرار الزماني أدق من الدراسات السابقة، وأيضا يدل على أن انخفاض درجة حرارة الجلد المتوقع يمكن يتم الكشف في الحقل حيث درجة الحرارة والرطوبة والطقس متغيرة. والهدف من هذه الورقة هو وصف منهجية اللازمة لقياس درجة حرارة الجلد من حيوان غير المقيد باستخدام التصوير الحراري. نحن نستخدم التقاط للحث على التوتر الحاد المعتدل في الحر المعيشة الثدي الزرقاء (Cyanistes caeruleus، لينيوس 1758 </م&gt;) وتصف كيفية التقاط الصور المناسبة، وتحليل الصور ومعالجة البيانات لإنتاج منحنيات استجابة درجات الحرارة مع الزمن أن يبرهن على وجود تبريد كبير من درجة حرارة الجلد الطيور &quot;ردا على الضغوطات معتدل. هذا يمكن أن يوفر طريقة بديلة لتقييم قيمة التوتر في الحيوانات البرية والأسيرة مفيدة لمجموعة واسعة من الباحثين من علماء البيئة، وعلماء الأحياء الحفظ وفسيولوجي للباحثين الرفق بالحيوان. وقد أجريت الدراسة في الفترة ما بين 17 ديسمبر 2013، و 4 يناير 2014 البلوط متساقط (البلوط النيابة.) الغابات في المركز الاسكتلندي للحفاظ على البيئة والبيئة الطبيعية (المشهد)، جامعة غلاسكو في الساحل الشرقي من بحيرة لوموند، غرب وسط اسكتلندا (56.13 درجة شمالا، 4.13 ° W). ويشمل البروتوكول ثلاث خطوات رئيسية: (1) وضع الشروط المناسبة التي بموجبها لالتقاط الصور الحرارية من حيوان مجانا النطاق، (2) applyiنانوغرام من الضغوطات الحادة أثناء التقاط الفيديو الحرارية، و (3) استخراج ومعالجة البيانات من الصور الحرارية التي يمكن بعد ذلك أن تستخدم لوصف استجابة الحيوان للإجهاد حاد. في حالتنا نحن جذبت المعيشة حرة الجاثمة، وحلمة الثدي الزرقاء إلى مربع التغذية (تصوير انشاء) حيث تم تحسين شروط الحرارية التقاط الصور، ومن ثم تطبيق الضغط القبض عن طريق إغلاق مربع التغذية عن بعد عندما كان الطائر داخل . وصف الحراري التقاط الصور واستخراج البيانات تقتصر على معدات كنا، وربما تختلف بين أنظمة التصوير الحراري. يوصف معالجة البيانات باستخدام برمجيات المصدر المفتوح.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Thermal Imaging Camera</td>
			<td>FLIR</td>
			<td>A65 (f=25mm)</td>
			<td>Compact (106 &#215; 40 &#215; 43 mm) &#38; low cost</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermal Image Analysis Software</td>
			<td>FLIR</td>
			<td>ResearchIR v3.4</td>
			<td>Allows high speed thermal video recording and thermal pattern analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature logger</td>
			<td>Gemini Data Loggers</td>
			<td>Tinytag Talk 2 TK-4023-PK</td>
			<td>Monitors from -40 to +125&#176;C using accompanying temperature probe</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

thermal imaging to study stress non-invasively in unrestrained birds

الإجهاد، وهو مفهوم مركزي في علم الأحياء، ويصف مجموعة من الاستجابات لحالات الطوارئ لمواجهة التحديات. ومن بين الردود الأخرى، والإجهاد يؤدي إلى تغيير في تدفق الدم الذي يؤدي إلى تدفق صافي من الدم إلى الأعضاء الرئيسية وزيادة في درجة الحرارة الأساسية. ويستخدم هذا ارتفاع الحرارة التوتر الناجم عن لتقييم الإجهاد. ومع ذلك، وقياس درجة الحرارة الأساسية غير الغازية. كما يتم إعادة توجيه تدفق الدم إلى القلب، ومحيط الجسم يمكن أن تبرد. وتصف هذه الورقة بروتوكول حيث يتم قياس درجة حرارة الجسم الطرفية غير جراحية في الثدي الزرقاء البرية (Cyanistes caeruleus) باستخدام الحراري بالأشعة تحت الحمراء. في مجال أنشأنا مجموعة المتابعة جلب الطيور إلى وضع مثالي أمام الكاميرا باستخدام مربع اصطاد. تلتقط الكاميرا قصيرة الحراري تسجيل الفيديو من الطيور دون عائق أمام تطبيق الإجهاد المعتدل (إغلاق مربع، وبالتالي التقاط الطيور)، ويتم تسجيل رد الطيور إلى الوقوع في الفخ. الجلد العارية للمنطقة العين هوأحر منطقة في الصورة. هذا يسمح للاستخراج الآلي لأقصى درجة حرارة العين المنطقة من كل إطار الصورة، تليها خطوات أخرى من دليل تصفية البيانات إزالة المصادر الأكثر شيوعا من الأخطاء (الضبابية، وامض). يوفر هذا البروتوكول سلسلة زمنية من درجة حرارة العين المنطقة مع القرار الزماني الرائع الذي يتيح لنا دراسة ديناميات الاستجابة للضغط النفسي غير جراحية. يحتاج إلى مزيد من العمل لإثبات جدوى طريقة لتقييم الإجهاد، وعلى سبيل المثال للتحقيق في ما إذا كانت استجابة درجات الحرارة العين منطقة يتناسب مع قوة من الضغوطات. إذا كان هذا يمكن تأكيد، فإنه سيتم توفير طريقة بديلة قيما للتقييم الإجهاد في الحيوانات، وسوف يكون من المفيد لمجموعة واسعة من الباحثين من علماء البيئة، وعلماء الأحياء الحفظ، فسيولوجي للباحثين الرفق بالحيوان.

وتعرض النتائج من 9 الثدي الزرقاء حرة المعيشة التي توضح المعلومات التي يمكن الحصول عليها من التصوير الحراري وإثبات أن إشارة توقع الإجهاد في العين المنطقة درجة حرارة الطائر ويمكن الكشف على الحيوانات خالية من النطاق. وقد تم تصوير كل الطيور لمدة متوسطها 5.1 ± 0.9 ثانية (ن = 9) قبل خانة &quot;تم إغلاق الباب. يسمح هذا الحساب من الطيور دون عائق في العين منطقة درجة الحرارة (درجة الحرارة المرجعية) التي جميع التدابير لاحقة يمكن الإشارة إليها. في التجارب التي أجريت على 20 ثانية لقطات الفيديو الحراري من الثدي الزرقاء دون عائق القادمين والتغذية داخل فخ (ن = 9 الطيور تختلف عن تلك التي تستخدم لتطبيق إجهاد خفيف)، الارتباط من ص&gt; 0.7 تم العثور في الوجود بين الحد الأقصى درجة الحرارة العين المنطقة سجلت خلال 5 ثوانى الأول، والحد الأقصى سجلت في اول 10 و 15 و 20 ثانية (الشكل 3). وفسر ذلك بأنه يدل على أن الحد الأقصى لفاسجلت LUE في الثواني القليلة الأولى بعد أن كان دخول فخ ممثل على مستوى المدى الطويل، وكانت تستخدم في متوسط ​​درجة حرارة العين المنطقة خلال ما يقرب من 5 ثوانى السابقة مباشرة إغلاق مربع حيث بلغت قيمة خط الأساس. كان الثدي الزرقاء في هذه العينة ومتوسط ​​درجة الحرارة الأساسية العين منطقة 38.4 ± 0.5 ° C (يعني ± SE) وتراوحت 35،8-39،9 ° C (ن = 9). مرة واحدة تغذية الطيور لمدة 5 ثانية للسماح للحساب أساسية درجة حرارة العين المنطقة، وأغلقت الباب مربع من قبل المجرب. لاحظ جميع الطيور إغلاق مربع كما يتضح من رحلات الهروب حاول بهم. على إغلاق الفخ، انخفضت درجة الحرارة العين المنطقة بسرعة وصلت إلى الحد الأدنى من درجة حرارة العين المنطقة ~ 1.3 درجة مئوية تحت درجة حرارة خط الأساس بعد ~ 10 ثانية (الشكل 4). الشكل 4 يوضح منحنى مركب يقوم على الحد الأقصى للعيان درجة حرارة المنطقة من جميع الأشخاص التسعة المتوسط ​​لكل ثانية. كماتوقيت وحجم انخفاض درجة الحرارة العين المنطقة يختلف بين الأفراد أقنعة منحنى المركبة المدى الحقيقي للاستجابة درجة الحرارة. انخفاض درجات الحرارة يعني تحسب لكل فرد على حدة هي 2.0 ± 0.2 ° C وصلت إلى أدنى نقطة بعد 9.4 ± 2.8 ثانية (يعني ± SE). ومنذ ذلك الحين، ودرجة الحرارة العين المنطقة عاد تدريجيا نحو الأساسية درجة حرارة العين المنطقة خلال 2-3 دقائق التالية ولكن لم تصل الى حد بعيد خط الأساس بحلول نهاية المحاكمة. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/53184/53184fig1.jpg" /> وقد تم تصميم الشكل 1. الساحة التصوير. وانشاء في هذا المجال لجذب الطيور إلى مجال الرؤية للكاميرا حيث يمكن تطبيق الإجهاد الحاد المعتدل، وذلك باستخدام مربع التغذية. مجموعة المتابعة يتألف من 25 14 سم و 16.5 سم مربع عالية مبنية من الخشب الرقائقي، مع اللوحة الأمامية للأسلاك المجلفنة مع الاحجام الفتحة(ه) 1 بنسبة 2.5 سم. شبكة تسمح الأشعة تحت الحمراء بالمرور، مما يجعل من الممكن لتصوير الطيور أثناء تواجدها في مجموعة المتابعة. وقد تم اختيار شبكة سلكية، مثل الزجاج ومعظم المواد البلاستيكية لا تنقل الأشعة تحت الحمراء. تم قطع ثقب 60 مم في جدار الطرف الأيسر للسماح الطيور دخول مجموعة المتابعة والحصول على الطعام وضعت في الطرف الأيمن من منطقة الجزاء. وترد التحقيق في درجة الحرارة المسجل تقع بين اثنين من المربعات السوداء الشريط العازل (تميزت السهم الأسود) إلى الزاوية اليمنى العليا من اللوحة الأمامية لتسجيل درجة الحرارة المرجعية. يتم تطبيق الإجهاد الحاد المعتدل إلى الطيور داخل عن طريق إغلاق مربع. سحب على خط الصيد تعلق على باب الدورية في حفرة مدخل سمح المجرب لإغلاق مربع عند الطيور هو في الداخل. وكاميرا التصوير الحراري المنصوص عليها في الجبهة من فخ تسجل سلسلة كاملة من الأحداث. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53184/53184fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض أكبر نسخة س</a>و هذا الرقم. <img alt="الرقم 2" src="/files/ftp_upload/53184/53184fig2.jpg" /> الشكل 2. صورة الحرارية لتيط الأزرق. غالبية جسم الجاثمة غير معزول بشكل جيد من قبل الريش (أو بدرجة أقل بقشور الساق)، ولكن يتعرض الجلد حول العين ويشع معظم الحرارة في ظل الظروف العادية، وغير وتحيط بها إهاب برودة أو الخلفية. هذا هو مبين في هذه الصورة الحرارية من اللون الأصفر (أعلى درجة حرارة) حول العين، والبرتقالي والأحمر والأرجواني والأزرق يعني انخفاض درجات الحرارة وبرودة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53184/53184fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/53184/53184fig3.jpg" /> الشكل 3. Repeatabilities درجة الحرارة الأساسية قياس سفترات مختلفة الاصدار من الزمن. معاملات الارتباط بين أقصى درجة حرارة سجلت في الثانية 1-8 الأول من مقطع و &quot;متوسط ​​إلى الحدود القصوى&quot; ضمن 0.5º من أعلى قيمة سجلت لأول 10 و 15 و 20 ثانية لل كليب (ممثلة بخطوط حمراء والأزرق والأخضر، على التوالي). وكانت كل لقطات 20 ثانية في مدة (ن = 9). خلال التحليل الأولي باستخدام مجموعة بيانات أكبر، وحسبت عدد من &#39;طريق القصوى &quot;من قيمة 1 فقط، وأعطى نفس القيمة لرو في جميع المقارنات. أزيلت هذه مقاطع من التحليل، ولم يتبق سوى تلك التي حسبت سيلة من أكثر من 3 القياسات. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53184/53184fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الرقم 4" src="/files/ftp_upload/53184/53184fig4.jpg" /> الرقم 4. الاستجابةدرجة الحرارة العين المنطقة لمحاصرة. وهناك إشارة واضحة جدا وضوحا لهذا الحدث محاصرة تنعكس في تغير درجة الحرارة العين المنطقة مع مرور الوقت. المقارنة بين مختلف الأفراد التي تختلف في درجة حرارة خط الأساس، المتبقية درجة حرارة العين المنطقة، واختلاف درجة الحرارة الفعلية ودرجة الحرارة الأساسية أن الفرد، هو تآمر على المحور الرأسي. يتم رسم هذا مع الزمن مع إغلاق فخ النحو 0 والطيور إزالتها من فخ بعد 3 دقائق. يظهر خط أحمر متوسط ​​درجة الحرارة المتبقية وتمثل الفرقة الرمادية فاصل الثقة 95٪. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53184/53184fig4large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Thermal Imaging to Study Stress Non-invasively in Unrestrained Birds at JoVE.com

Thermal Imaging to Study Stress Non-invasively in Unrestrained Birds

هناك حاجة لإجراء تقييم غير الغازية من الإجهاد. وتصف هذه الورقة بروتوكول بسيط باستخدام التصوير الحراري للكشف عن استجابة كبيرة في درجات الحرارة العين المنطقة في الثدي الزرقاء البرية إلى الإجهاد الحاد المعتدل.

التصوير الحراري لدراسة الإجهاد غير جراحية في طيور بلا حدود

Stress, a central concept in biology, describes a suite of emergency responses to challenges. Among other responses, stress leads to a change in blood ...

thermal-imaging-to-study-stress-non-invasively-in-unrestrained-birds

Research

JoVE Journal

Neuroscience

13.3K Views.  University of Glasgow.  هناك حاجة لإجراء تقييم غير الغازية من الإجهاد. وتصف هذه الورقة بروتوكول بسيط باستخدام التصوير الحراري للكشف عن استجابة كبيرة في درجات الحرارة العين المنطقة في الثدي الزرقاء البرية إلى الإجهاد الحاد المعتدل. 

Video: Thermal Imaging to Study Stress Non-invasively in Unrestrained Birds

Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

Painful diabetic neuropathy (PDN) is characterized by hyperalgesia i.e., increased sensitivity to noxious stimulus, and allodynia i.e., hypersensitivity to normally innocuous stimuli1. Hyperalgesia and allodynia have been studied in many different rodent models of diabetes mellitus2. However, as stated by B&ouml;lcskei et al, determination of "pain" in animal models is challenging due to its subjective nature3. Moreover, the traditional methods used to determine behavioral responses to noxious thermal stimuli usually lack reproducibility and pharmacological sensitivity3. For instance, by using the hot-plate method of Ankier4, flinch, withdrawal and/or licking of either hind- and/or fore-paws is quantified as reflex latencies at constant high thermal stimuli (52-55 &deg;C). However, animals that are hyperalgesic to thermal stimulus do not reproducibly show differences in reflex latencies using those supra-threshold temperatures3,5. As the recently described method of B&ouml;lcskei et al.6, the procedures described here allows for the rapid, sensitive and reproducible determination of thermal nociceptive thresholds (TNTs) in mice and rats. The method uses slowly increasing thermal stimulus applied mostly to the skin of mouse/rat plantar surface. The method is particularly sensitive to study anti-nociception during hyperalgesic states such as PDN. The procedures described bellow are based on the ones published in detail by Alm&aacute;si et al 5 and B&ouml;lcskei et al 3. The procedures described here have been approved the Laboratory Animal Care and Use Committee (LACUC), Wright State University.

Here, we describe a rapid reliable and simple procedure to determine the lowest temperature at which rats or mice show nocifensive behavior, i.e. the thermal nociceptive threshold (TNT). This method applies a slowly increasing thermal stimulus allowing precise and reproducible estimation of TNTs with minimum, if any, stress to the animals.

سريع تحديد العتبة Nociceptive الحرارية في الفئران المصابة بمرض السكر

Painful diabetic neuropathy (PDN) is characterized by hyperalgesia i.e., increased sensitivity to noxious stimulus, and allodynia i.e., hypersensitivity ...

Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of thermal nociceptors1,2 while the second involves a wholesale (global) activation of most or all such neurons3. Together, these techniques allow visualization and quantification of the behavioral functions of Drosophila nociceptive sensory neurons.
The Drosophila larva is an established model system to study thermal nociception, a sensory response to potentially harmful temperatures that is evolutionarily conserved across species1,2. The advantages of Drosophila for such studies are the relative simplicity of its nervous system and the sophistication of the genetic techniques that can be used to dissect the molecular basis of the underlying biology4-6 In Drosophila, as in all metazoans, the response to noxious thermal stimuli generally involves a "nocifensive" aversive withdrawal to the presented stimulus7. Such stimuli are detected through free nerve endings or nociceptors and the amplitude of the organismal response depends on the number of nociceptors receiving the noxious stimulus8. In Drosophila, it is the class IV dendritic arborization sensory neurons that detect noxious thermal and mechanical stimuli9 in addition to their recently discovered role as photoreceptors10. These neurons, which have been very well studied at the developmental level, arborize over the barrier epidermal sheet and make contacts with nearly all epidermal cells11,12. The single axon of each class IV neuron projects into the ventral nerve cord of the central nervous system11 where they may connect to second-order neurons that project to the brain.
Under baseline conditions, nociceptive sensory neurons will not fire until a relatively high threshold is reached. The assays described here allow the investigator to quantify baseline behavioral responses or, presumably, the sensitization that ensues following tissue damage. Each assay provokes distinct but related locomotory behavioral responses to noxious thermal stimuli and permits the researcher to visualize and quantify various aspects of thermal nociception in Drosophila larvae. The assays can be applied to larvae of desired genotypes or to larvae raised under different environmental conditions that might impact nociception. Since thermal nociception is conserved across species, the findings gleaned from genetic dissection in Drosophila will likely inform our understanding of thermal nociception in other species, including vertebrates.

Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of thermal nociceptors1,2 while the second involves a wholesale (global) activation of most or all such neurons3. Together, these techniques allow visualization and quantification of the behavioral functions of Drosophila nociceptive sensory neurons.

المحلية والعالمية طرق تقييم Nociception الحرارية في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; يرقات

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system and has served as guiding model to study synaptic structure and function. In mouse NMJs motor axon terminals form pretzel-like contact sites with muscle fibers. The motor axon and its terminal are sheathed by SCs. Over the past decades, several transgenic mice have been generated to visualize motor neurons and SCs, for example Thy1-XFP1 and Plp-GFP mice2, respectively.
Along motor axons, myelinating axonal SCs are arranged in non-overlapping internodes, separated by nodes of Ranvier, to enable saltatory action potential propagation. In contrast, terminal SCs at the synapse are specialized glial cells, which monitor and promote neurotransmission, digest debris and guide regenerating axons. NMJs are tightly covered by up to half a dozen non-myelinating terminal SCs - these, however, cannot be individually resolved by light microscopy, as they are in direct membrane contact3.
Several approaches exist to individually visualize terminal SCs. None of these are flawless, though. For instance, dye filling, where single cells are impaled with a dye-filled microelectrode, requires destroying a labelled cell before filling a second one. This is not compatible with subsequent time-lapse recordings3. Multi-spectral "Brainbow" labeling of SCs has been achieved by using combinatorial expression of fluorescent proteins4. However, this technique requires combining several transgenes and is limited by the expression pattern of the promoters used. In the future, expression of "photo-switchable" proteins in SCs might be yet another alternative5. Here we present sequential photo-bleaching, where single cells are bleached, and their image obtained by subtraction. We believe that this approach - due to its ease and versatility - represents a lasting addition to the neuroscientist's technology palette, especially as it can be used in vivo and transferred to others cell types, anatomical sites or species6.
In the following protocol, we detail the application of sequential bleaching and subsequent confocal time-lapse microscopy to terminal SCs in triangularis sterni muscle explants. This thin, superficial and easily dissected nerve-muscle preparation7,8 has proven useful for studies of NMJ development, physiology and pathology9. Finally, we explain how the triangularis sterni muscle is prepared after fixation to perform correlated high-resolution confocal imaging, immunohistochemistry or ultrastructural examinations.

Visualizing individual cells in densely packed tissues, such as terminal Schwann cells (SCs) at neuromuscular junctions (NMJs), is challenging. "Sequential photo-bleaching" allows delineating single terminal SCs, for instance in the triangularis sterni muscle explant, a convenient nerve-muscle preparation, where sequential bleaching can be combined with time-lapse imaging and post-hoc immunostainings.

صور متتابعة تبيض لتحديد خلايا شوان واحدة عند تقاطع الاعصاب

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with increasing connective tissue and decreased neuronal viability that occur with age. Here, we describe a methodology for the dissociation of healthy hypothalamic neurons from adult-aged mice. The ability to study neurons from adult-aged mice allows the use of disease models that manifest at a later age and might be more developmentally accurate for certain studies. Fluorescence imaging of dissociated neurons can be used to study the activity of a population of neurons, as opposed to using electrophysiology to study a single neuron. This is particularly useful when studying a heterogeneous neuronal population in which the desired neuronal type is rare such as for hypothalamic glucose sensing neurons. We utilized membrane potential dye imaging of adult ventromedial hypothalamic neurons to study their responses to changes in extracellular glucose. Glucose sensing neurons are believed to play a role in central regulation of energy balance. The ability to study glucose sensing in adult rodents is particularly useful since the predominance of diseases related to dysfunctional energy balance (e.g.&#160;obesity) increase with age.

The activity of single neurons from adult-aged mice can be studied by dissociating neurons from specific brain regions and using fluorescent membrane potential dye imaging. By testing responses to changes in glucose, this technique can be used to study the glucose sensitivity of adult ventromedial hypothalamic neurons.

غشاء المحتملة صبغ التصوير من بطني إنسي المهاد الخلايا العصبية من الفئران الكبار لدراسة الجلوكوز الاستشعار

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network dynamics in neuronal cultures. In contrast with more traditional methods, such as patch-clamping, which can only record activity from a single cell, MEAs can record simultaneously from multiple sites in a network, without requiring the arduous task of placing each electrode individually. Moreover, numerous control and stimulation configurations can be easily applied within the same experimental setup, allowing for a broad range of dynamics to be explored. One of the key dynamics of interest in these in vitro studies has been the extent to which cultured networks display properties indicative of learning. Mouse neuronal cells cultured on MEAs display an increase in response following training induced by electrical stimulation. This protocol demonstrates how to culture neuronal cells on MEAs; successfully record from over 95% of the plated dishes; establish a protocol to train the networks to respond to patterns of stimulation; and sort, plot, and interpret the results from such experiments. The use of a proprietary system for stimulating and recording neuronal cultures is demonstrated. Software packages are also used to sort neuronal units. A custom-designed graphical user interface is used to visualize post-stimulus time histograms, inter-burst intervals, and burst duration, as well as to compare the cellular response to stimulation before and after a training protocol. Finally, representative results and future directions of this research effort are discussed.

Mouse neuronal cells cultured on multi-electrode arrays display an increase in response following electrical stimulation. This protocol demonstrates how to culture neurons, how to record activity, and how to establish a protocol to train the networks to respond to patterns of stimulation.

زيادة تعتمد على الوقت في استجابة الشبكة لتحفيز الثقافات خلية الخلايا العصبية على صفائف الدقيقة الكهربائي

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...

A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae

Many animals, including the fruit fly, Drosophila melanogaster, are capable of discriminating minute differences in&#160;environmental temperature, which enables them to seek out their preferred thermal landscape. To define the temperature preferences of larvae over a defined linear range, we developed an assay using a temperature gradient. To establish a single-directional gradient, two aluminum blocks are connected to independent water baths, each of which controls the temperature of individual blocks. The two blocks set the lower and upper limits of the gradient. The temperature gradient is established by placing an agarose-coated aluminum plate over the two water-controlled blocks so that the plate spans the distance between them. The ends of the aluminum plate that is set on the top of the water blocks defines the minimum and maximum temperatures, and the regions in-between the two blocks form a linear temperature gradient. The gradient assay can be applied to&#160;larvae of different ages and can be used to identify mutants that exhibit phenotypes, such as those with mutations affecting genes encoding TRP channels and opsins, which are required for temperature discrimination.

A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae

Here, we present a protocol to determine the preferred environmental temperature of Drosophila larvae using a continuous thermal gradient.

مقايسة تدرج درجة الحرارة لتحديد تفضيلات الحرارية يرقات المورفولوجية

Many animals, including the fruit fly, Drosophila melanogaster, are capable of discriminating minute differences in&#160;environmental temperature, which ...

Combining Behavior and EEG to Study the Effects of Mindfulness Meditation on Episodic Memory

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has examined the behavioral and neural effects of mindfulness meditation on episodic memory. Here we present a protocol that combines mindfulness meditation training, an episodic memory task, and EEG to examine how mindfulness meditation changes behavioral performance and the neural correlates of episodic memory. Subjects in a mindfulness meditation experimental group were compared to a waitlist control group. Subjects in the mindfulness meditation experimental group spent four weeks training and practicing mindfulness meditation. Mindfulness was measured before and after training using the Five Facet Mindfulness Questionnaire (FFMQ). Episodic memory was measured before and after training using a source recognition task. During the retrieval phase of the source recognition task, EEG was recorded. The results showed that mindfulness, source recognition behavioral performance, and EEG theta power in right frontal and left parietal channels increased following mindfulness meditation training. In addition, increases in mindfulness correlated with increases in theta power in right frontal channels. Therefore, results obtained from combining mindfulness meditation training, an episodic memory task, and EEG reveal the behavioral and neural effects of mindfulness meditation on episodic memory.

Here we present a protocol for combining mindfulness meditation training, an episodic memory task, and EEG to understand the behavioral and neural effects of mindfulness meditation on episodic memory.

الجمع بين السلوك وتخطيط كهربية الدماغ لدراسة آثار التأمل الذهني على الذاكرة العرضية

Although there has been recent interest in how mindfulness meditation can affect episodic memory as well as brain structure and function, no study has ...

Super-Resolution Imaging to Study Co-Localization of Proteins and Synaptic Markers in Primary Neurons

Synapses are the functional elements of neurons and their defects or losses are at the basis of several neurodegenerative and neurological disorders. Imaging studies are widely used to investigate their function and plasticity in physiological and pathological conditions. Because of their size and structure, localization studies of proteins require high-resolution imaging techniques. In this protocol, we describe a procedure to study in primary neurons the co-localization of target proteins with synaptic markers at a super-resolution level using structured illumination microscopy (SIM). SIM is a patterned-light illumination technique that doubles the spatial resolution of wide-field microscopy, reaching a detail of around 100 nm. The protocol indicates the required controls and settings for robust co-localization studies and an overview of the statistical methods to analyze the imaging data properly.

This protocol shows how to employ super-resolution microscopy to study protein co-localization in primary neuronal cultures.

التصوير فائق الدقة لدراسة التعريب المشترك للبروتينات وعلامات متشابك في الخلايا العصبية الأولية

Synapses are the functional elements of neurons and their defects or losses are at the basis of several neurodegenerative and neurological disorders. ...

In vivo Calcium Imaging in Mouse Inferior Olive

Inferior olive (IO), a nucleus in the ventral medulla, is the only source of climbing fibers that form one of the two input pathways entering the cerebellum. IO has long been proposed to be crucial for motor control and its activity is currently considered to be at the center of many hypotheses of both motor and cognitive functions of the cerebellum. While its physiology and function have been relatively well studied on single-cell level in vitro, presently there are no reports on the organization of the IO network activity in living animals. This is largely due to the extremely challenging anatomical location of the IO, making it difficult to subject to conventional fluorescent imaging methods, where an optic path must be created through the entire brain located dorsally to the region of interest.
Here we describe an alternative method for obtaining state-of-the-art -level calcium imaging data from the IO network. The method takes advantage of the extreme ventral location of the IO and involves a surgical procedure for inserting a gradient-refractive index (GRIN) lens through the neck viscera to come into contact with the ventral surface of the calcium sensor GCaMP6s-expressing IO in anesthetized mice. A representative calcium imaging recording is shown to demonstrate the feasibility to record IO neuron activity after the surgery. While this is a non-survival surgery and the recordings must be conducted under anesthesia, it avoids damage to life-critical brainstem nuclei and allows conducting large variety of experiments investigating spatiotemporal activity patterns and input integration in the IO. This procedure with modifications could be used for recordings in other, adjacent regions of the ventral brainstem.

In vivo Calcium Imaging in Mouse Inferior Olive

We present a protocol to expose the brainstem of adult mouse from the ventral side. By using a gradient-refractive index lens with a miniature microscope, calcium imaging can be used to examine the activity of inferior olive neural somata in vivo.

في الجسم الحي تصوير الكالسيوم في الزيتون السفلي الماوس

Inferior olive (IO), a nucleus in the ventral medulla, is the only source of climbing fibers that form one of the two input pathways entering the ...

Assessment of Sensory Thresholds in Dogs Using Mechanical and Hot Thermal Quantitative Sensory Testing

Quantitative sensory testing (QST) is used to evaluate the function of the somatosensory system in dogs by assessing the response to applied mechanical and thermal stimuli. QST is used to determine normal dogs&#39; sensory thresholds and evaluate alterations in peripheral and central sensory pathways caused by various disease states, including osteoarthritis, spinal cord injury, and cranial cruciate ligament rupture. Mechanical sensory thresholds are measured by electronic von Frey anesthesiometers and pressure algometers. They are determined as the force at which the dog exhibits a response indicating conscious stimulus perception. Hot thermal sensory thresholds are the latency to respond to a fixed or ramped temperature stimulus applied by a contact thermode.
Following a consistent protocol for performing QST and paying attention to details of the testing environment, procedure, and individual study subjects are critical for obtaining accurate QST results for dogs. Protocols for the standardized collection of QST data in dogs have not been described in detail. QST should be performed in a quiet, distraction-free environment that is comfortable for the dog, the QST operator, and the handler. Ensuring that the dog is calm, relaxed, and properly positioned for each measurement helps produce reliable, consistent responses to the stimuli and makes the testing process more manageable. The QST operator and handler should be familiar and comfortable with handling dogs and interpreting dogs&#39; behavioral responses to potentially painful stimuli to determine the endpoint of testing, reduce stress, and maintain safety during the testing process.

This work describes a standard protocol for mechanical and hot thermal quantitative sensory testing to evaluate the somatosensory system in dogs. Sensory thresholds are measured using an electronic von Frey anesthesiometer, pressure algometer, and hot contact thermode.

تقييم العتبات الحسية في الكلاب باستخدام الاختبارات الحسية الكمية الميكانيكية والحرارية الساخنة

Quantitative sensory testing (QST) is used to evaluate the function of the somatosensory system in dogs by assessing the response to applied mechanical ...