تم تمويل هذا العمل برمته بمنحه من "مجلس البحوث الطبية في المملكة المتحدة" (منح المرجع: السيد/M007006/1) منحت كامبوج سانجيف وداس رافي. صقل عملية استرجاع الذاكرة ومصادر الصور جديلة كان يؤديها غيل نعمة. ونود أن أشكر كاتي والش وجوزي هانفورد على إسهامات من أجل تجريب الإجراء.

جميع المؤلفين قد لا الفكرية أو المالية أو الطبية الأحيائية تضارب المصالح، إلى الكشف عن.

البروتوكول في هذه الورقة وصف إجراء استرجاع الآلية الكحول الذي ينشئ خطأ التنبؤ بصراحة في تقديم المشروبات الكحولية (استرجاع + PE) إلى أقصى حد ممكن من الاحتمال أن الكحول طبيعي سوف تزعزع مرمس. يستغرق هذا الإجراء استرداد حساب الأعمال التجريبية الأخيرة تثبت ضرورة التنبؤ بالخطأ لزعزعة استقرار الذاكرة والانخراط في عملية الوحدة60. قد تبين أن إنتاج التغييرات العميقة في الأرقام القياسية للكحول مرمس من التدخلات السلوكية اللاحقة (كونتيركونديتيونينج وإعادة التقييم المعرفي) في ورقتين28،46 وهو حاليا المزيد التحقق من صحة في نماذج المخدرات. حيث يبدو أن هذا التأثير المستقل للتعلم من التاريخ، الإجراء الذي يمثل تحسنا كبيرا على تقنيات أخرى على إعادة تنشيط الذاكرة، التي لا تتضمن PE، وينبغي أن تستخدم كمنصة لتقييم زعزعة الاستقرار في مرحلة ما بعد تدخلات للحد من سلوك الشرب مهايئ. صقل هذه التقنيات من أهمية خاصة في ضوء نتائج فارغة في ميدان الوحدة (انظر أدناه). وعلاوة على ذلك، الأسلوب المقصود بالصندوق + PE له قدر كبير من الأهمية التطبيقية، وقد تكون واجبة التطبيق في تركيبة مع مجموعة متنوعة من أساليب relearning retrieval بعد. على سبيل المثال، قد أثبتنا الآثار في الذاكرة الدلالية وحنين استخدام الصندوق + PE متبوعاً بإعادة تقييم، أسلوب تنظيم عاطفة تكيفية تنميط يشيع استخدامها في العلاج الإدراكي السلوكي46.
يتم تعديل الإجراء بسهولة لتناسب تشاراكتيريسيتيكس مجموعة المشتركين. على سبيل المثال، يمكن تغيير المحفزات المستخدمة ك CS + s أثناء كونتيركونديتيونينج النبيذ الصور، إذا كان المشاركون هم يفضلون النبيذ أساسا. وبدلاً من ذلك، يمكن استخدام المحفزات المتصلة بالتدخين إذا كان يعمل الإجراء مدخني التبغ.
كونتيركونديتيونينج الفعال يعتمد على إشارات قوية من الاشمئزاز. لضمان relearning كافية خلال الوحدة، حدد إكس البصرية التي من المحتمل أن الحصول على ردود قوية من الاشمئزاز. ورغم أن هذه الإشارات المرئية، أنها ينبغي لها صلة بالاشمئزاز تذوق (مثلاً، والصور ذات الصلة بالتلوث؛ صور من تلف الأغذية). إذا كان يتم استخدام UCS تذوق بديلة (بخلاف ديناتونيوم بنزوات في التركيزات المستخدمة هنا)، نوصي بمركب بشدة تنشيط الاستجابات المرارة.
على الرغم من أننا نستخدم انتهاك المتوقع، فإنه من الممكن نظرياً لتوليد PE استخدام أساليب أخرى، على الرغم من أن فعاليتها في زعزعة استقرار قوة ترميز الذكريات مكافأة لم للتدليل على. لدينا تجربته إجراء بديل التي تنطوي على قيمة غير متوقعة من الكحول (باستخدام الكحول تذوق المر بشكل غير متوقع)، على الرغم من أننا لم تثبت مقنعة التعديلات الذاكرة باستخدام هذا الإجراء46.
وينبغي منع التعشيه مشاركين إلى مجموعات الاختلافات الأساسية في سمة الاستبيان تدابير. إذا كان هذا هو الحال، ومع ذلك، ينبغي أن تكون على غرار هذه الاختلافات كآثار عشوائية في تحليل آثار مختلطة من نتائج. اتباع نهج تكميلي، يوصي المؤلفون، أن تدرج يوم إضافي أساس قبل يوم استرجاع وكونتيركونديتيونينج. هذا يسمح لتقييم أفضل للقائمة من قبل مجموعة الاختلافات، موثوقية هذه الاختلافات، ويعطي الباحثين خيار العشوائية الطبقية للفئات لمنع مثل هذه الخلافات.
من أجل توليد PE فعالية، من الضروري أن المشاركين تجربة حدثاً مفاجئاً ذات صلة أثناء استرداد. إذا تم استخدام خرق المتوقع، كما هو موضح هنا، ضمان مراعاة المشاركين أثناء هذه الخطوة حيث أن أنهم لا يتناولون الكحول عند نقطة ما هي تعليمات بعدم عن غير قصد. المتصلة بذلك، من الضروري أن المشاركين لا يدركون باعتزام المجرب الامتناع عن الكحول بعد توليد توقعات مكافأة الكحول. على هذا النحو، يتضمن البروتوكول درجة اللازمة من الخداع. عند استخلاص المعلومات، ضمان المشاركين يدركون أنهم ينبغي إلا تناقش البروتوكول مع الآخرين.
أن هناك أدلة على أن الإجراء قوة يزعزع الذكريات، وقد صمم لتحقيق أقصى قدر من احتمال قيامها بذلك، فلا يوجد حاليا أي وسيلة مستقلة لتقييم عدم حدوث زعزعة الاستقرار. هذا حد من جميع الإجراءات زعزعة استقرار الذاكرة ووصف للتاريخ، وعلى هذا النحو، آثار فارغة لزعزعة الاستقرار بعد انتهاء التدخلات في اختبار يصعب تفسيره، كما أنها قد تكون بسبب انخفاض فعالية التدخل أو عدم الكفاية زعزعة استقرار مرمس في المقام الأول.
ملحوظة التعميم المقصود بالصندوق + PE كونتيركونديتيونينج تعتمد الآثار للمحفزات غير مدربين يجعل هذا النهج الواعدة جداً لتنفيذ السريرية. ومع ذلك، لدينا دليل على فعالية يقتصر على بيئة تجريبية (غير الطبية) مع المدمنين، الذين ليس لديهم اضطرابات استخدام الكحول.
فائدتين، على الرغم من أن هذا الإجراء تكييفها بسهولة، فإنه غير معروف ما إذا كان هذا الإجراء المقصود بالصندوق + PE ناجع وبالمثل (في صيغة معدلة) في زعزعة استقرار مرمس في الجوهر (غير مشروعة) مختلفة باستخدام السكان. ونحن نعتقد أنه سيكون فعالة، على الأقل كما مرمس الكحول ومن المرجح أن يكون أكثر أوفيرليرنيد، قوية، والصليب السياقية من مرمس لمعظم العقاقير غير المشروعة. يظل هذا التحقق منها تجريبيا ولكن، وغير معروف فعالية الإجراء مدى حساسية للتغيرات في عدد من الإشارات التي قدمت أو طبيعتها الدقيقة. ولذلك نشجع التجريب مع الإجراء في مختلف قطاعات السكان استخدام المخدرات والعظة استرداد مختلفة، فضلا عن زعزعة الاستقرار بعد انتهاء التدخلات لمكافأة سكانية محددة مالادابتيشنز الخياطة.
لمعالجة قضايا القياس المبينة أعلاه-إلا وهي الاعتماد على فعالية التدخل زعزعة الاستقرار بعد انتهاء للاستدلال على زعزعة استقرار الذاكرة الفعلية-تدابير مستقلة لزعزعة استقرار مطلوبة. تعمل حاليا على وضع تقنيات اليكترونسيفالوجرافيك وهوعباره لحل هذه المشكلة، وسيجعل هذه متوفرة عند الطلب عند الانتهاء.
مطلوب تنفيذها عبر طائفة الحدة للشرب مشكلة إنشاء المرافق السريرية لهذا الأسلوب. وعلاوة على ذلك، سريرياً المنحى الدراسات ضرورية لتحديد ما إذا كان هذا الإجراء سيكون مقبولاً لطالبي العلاج.

بناء على العمل المنوي لويس والزملاء1 على مر السنوات العشرين الماضية قد أبرزت بإمكانيات لم يسبق لها مثيل اللدونة في ذكريات (الموحد) المنشأة عن طريق عملية الذاكرة الوحدة2،3 . الوحدة يحدث تحت ظروف معينة عندما تكون الذكريات المسترجعة4 ويتألف اثنان وقتيا5 و6 مراحل منفصلين جزيئيا: الأولى7 من زعزعة الاستقرار وقلاقل اللاحقة8 . وأثر عدم الاستقرار الناجم عن استرجاع الذاكرة، ذكريات أدخل دولة 'النشط'، طيع، التي عرضه للتعديل من خلال إدماج المعلومات رواية9،،من1011 , 12، أو إضعاف من خلال التدخل الدوائي مع المسارات الجزيئية المطلوبة لقلاقل13،14،،من1516. هذه 'الوحدة النافذة،' الفاصل بين زعزعة الاستقرار وقلاقل، يستمر ح 1 إلى 6، ويمثل فرصة فريدة من نوعها للتدخل مباشرة مع مكافأة مهايئ الذكريات (مرمس) التي يعتقد أنها تلعب دوراً أساسيا في المسببات المرضية 17وتقدم18وصيانة19،20 من مادة استخدام اضطرابات (رغوة) مثل اضطراب استخدام الكحول.
مرمس هي جمعيات تشكلت من خلال آليات Pavlovian التي تربط المحفزات البيئية أو 'المخدرات العظة' توافر، والمسكرة ومكافأة آثار المخدرات21. مرمس لإشراب العظة المخدرات مع تعزيز القيمة، بروز22، وخصائص تحفيزية مثل أن هذه العظة انتزاع اهتمام23، تثير الشهوة وتحفيز سلوك التماس واستخدام المخدرات في الناس مع رغوة الصابون. ولذلك يعتقد هذه مرمس يكون مسؤولاً عن إشعال الانتكاس عند مصادفة24العظة المخدرات. ولذلك يتمثل التحدي الرئيسي في الإدارة السريرية الطويلة الأجل لرغوة الصابون يقلل من قدرة مرمس تشجيع تعاطي المخدرات، التي، استطرادا، ينبغي الحد من حالات الانتكاس21. ويقدم الإطار الوحدة فرصة مثيرة لتحقيق هذا الهدف عن طريق تحديث مرمس بينما هم غير مستقرة بشكل يمكن أن يكون أقل احتمالاً للمساهمة في الانتكاس.
وقد أظهرت الأبحاث الأخيرة أن هذا يتحقق باستخدام التدخلات السلوكية بحتة10،25. يمكن أن تنتج هذه التخفيضات العميقة في المقاييس مكافأة تواق والمتصلة بالمخدرات في مدمني الهيروين26والمدخنون27، ويشربون الخطرة28. قبل إعطاء تذكرة موجزة من مرمس (مختصر عادة التعرض لمنبهات المخدرات) لزعزعة استقرار لهم، وبعد ذلك إعادة إقران العظة المخدرات مع عدم وجود المخدرات (الانقراض)، أو نتائج البرود (كونتيركونديتيونينج)29 حين مرمس غير مستقرة، إعادة الجمعيات بين العظة المخدرات والنتائج في شكل من أشكال محدثة والتكيف أكثر. هذه مرمس كتابة لم يعد دعم الانتكاس. والفرق الوحيد بين هذه والتدخلات الانقراض أو كونتيركونديتيونينج القياسية هو استرجاع وزعزعة الاستقرار في مرمس-موجز التعرض لمنبهات المخدرات-قبل التدخل التعلم التي تنتجها. أنهم ولذلك عادة ما يشار إلى 'استرداد-انقراض' أو 'استرجاع-كونتيركونديتيونينج' التدخلات.
ومع ذلك، هناك الآن مجموعة كبيرة من البحوث التي تبين نتائج غير متناسقة مع هذه التدخلات30،31،،من3233. قد يفسر هذا جزئيا بالفروق الفردية في التعبير عن تعزيز اللدونة البروتينات34. ومع ذلك، منذ استرجاع ضرورية لكنها غير كافية4،،من3536 لزعزعة استقرار الذاكرة، هناك أيضا بعض شروط الحدود التي تحدد ما إذا كانت ذاكرة يزعزع أم لا. مدى هذه شروط الحدود المنطوق المرجح أن يتفاوت أيضا من الدراسة للدراسة. ومن أهم هذه الشروط هي ذاكرة العمر (التسلسل الزمني)37 وقوة (تاريخ التعزيز)38،39، مدة المحاكمة تذكير5، وحدوث عدم تطابق35، 40 بين النتائج المتوقعة والفعلية أثناء استرداد، المعروفة بالتنبؤ بالخطأ (PE)41،،من4243. هذه العوامل مترابطة، PE مكافأة المركزية 'التعلم إشارة'44،45 ويقلل من خلال التعلم. ترميز PE الفرق بين النتيجة المتوقعة المشفرة في الذاكرة، والنتيجة الفعلية، مما يعكس عدم دقة التنبؤات المستفادة. ومن خلال تقليل حدوث PE التي تتراكم في التعلم. ذكريات قديمة، وعززت بشدة مثل مرمس-التي شكلت على مدى سنوات عديدة-لها القدرة التنبؤية جيدة للغاية للنتائج عبر حالات مختلفة. على هذا النحو، سيتم إنشاء PE قليلاً عندما يتم استرداد مرمس تحت ظروف طبيعية، تمنح هذه الآثار مع المقاومة زعزعة الاستقرار.
الاستفادة من هذه المعرفة، طورنا استرجاع والجيل PE (استرجاع + PE) الداخلي للكحول مرمس التي تهدف إلى تحقيق أقصى قدر من احتمال وقوع هذه الذكريات المزعزعة للاستقرار بتعظيم PE في استرجاع. وقد أظهرنا أن كونتيركونديتيونينج اللاحقة يتسبب تحديث شامل للكحول مرمس في يشربون الخطرة28،46. ويصف هذه المخطوطة تنفيذ استرداد + PE الداخلي لزعزعة استقرار الكحول مرمس، جنبا إلى جنب مع تقنية كونتيركونديتيونينج multisensory أن يعيد كتابة هذه الذكريات.
استرجاع + PE الإجراء ينطوي على استخدام التعليمات الشفهية تحقيق أقصى قدر من المشاركين المتوقع لمكافأة الكحول، ثم منع استهلاك الكحول في اللحظة الأخيرة. دون معرفة تاريخ التعلم الدقيق، هذا تعظيم PE مزعومة يزيد من احتمال زعزعة الاستقرار مرمس ويوفر منبرا لاختبار فعالية التدخلات السلوكية بعد زعزعة الاستقرار في تحسين مؤشرات مكافأة مهايئ الذاكرة. هنا ونحن تصف كيفية تنفيذ هذا الإجراء مع كونتيركونديتيونينج اللاحقة المستندة إلى الاشمئزاز، ونحن28 وآخرون29 أظهرت أن تكون طريقة فعالة لتعلم لتحديث مرمس. ومع ذلك، استرداد + PE الداخلي كما يمكن أن تستخدم في تركيبة مع التدخلات البديلة retrieval بعد المخدرات وأشكال أخرى عديدة من تدخلات تستند إلى التعلم25.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Multipipette M4 x 1</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>4982 000.012</td>
			<td>High-accuracy pipette for dosing Bitrex</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Combitips advanced 0.2ml x 1000</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>0030 089.413</td>
			<td>Syringe tip for use with Micropipette for dosing Bitrex</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Simax 100ml measuring cylinder</td>
			<td>Phillip Harris</td>
			<td>B8A73325</td>
			<td>Any suitable measuring cylinder may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bitrex (2.5% w/v aqueaous Denatonium Benzoate solution)</td>
			<td>Mcfarlan Smith</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Bitter solution for counterconditioning drink UCSs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>International Affective Picture System images</td>
			<td>International Affective Picture System (Lang et al, 2008)</td>
			<td>(http://csea.phhp.ufl.edu/media/iapsmessage.html)</td>
			<td>Upon request from Margaret Bradley&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulus presentation monitor with 1024 x768 colour display minimum</td>
			<td>Dell&#160;</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eyelink 1000 Core System</td>
			<td>SR Research</td>
			<td>Desktop-type mount</td>
			<td>Other eye-tracking systems can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Experiment Builder</td>
			<td>SR Resesarch</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Other systems (Presentation/MATLAB/ePrime/Psychopy etc) can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DataViewer</td>
			<td>SR Resesarch</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Use software as appropriate to eye tracker setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 21.0 for Windows</td>
			<td>IBM</td>
			<td>Base Package</td>
			<td>Use any appopriate statistical software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lion Alcometer 500</td>
			<td>Lion Laboratories</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any accurate alcohol breath testing device may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Terumo 5ml syringe</td>
			<td>MediSupplies</td>
			<td>PMCO595</td>
			<td>Any 5ml syringe may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Table Top Scale</td>
			<td>On Balance</td>
			<td>MTT-200</td>
			<td>Any high-accuracy scales may be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-alcoholic beer</td>
			<td>Bavaria</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any brand non-acloholic beer may be used</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a prediction error-driven retrieval procedure for destabilizing and rewriting maladaptive reward memories in hazardous drinkers

مكافأة مهايئ ذكريات (مرمس) يمكن أن تصبح غير مستقرة عقب استعادتها تحت ظروف معينة، مما يتيح التعديل عليها بواسطة التعلم الجديدة اللاحقة. ومع ذلك، قوية (التدرب عليها جيدا) ومرمس القديمة زمنياً، كتلك التي يقوم عليها مضمون استخدام اضطرابات، لا تزعزع استقرار بسهولة عند استردادها. مفتاح بعوض لزعزعة استقرار الذاكرة أثناء استرداد خطأ التنبؤ (PE). يصف لنا إجراء استرجاع للكحول مرمس في يشربون الخطرة التي تهدف على وجه التحديد إلى أقصى حد توليد PE، وبالتالي احتمال زعزعة الاستقرار إليه الرصد والإبلاغ. يتطلب الإجراء توليد صراحة أن المتوقع لاستهلاك الكحول وثم انتهاك هذا المتوقع (الامتناع عن الكحول) بعد تقديم مجموعة موجزة من الكحول تنميط الصور جديلة (استرجاع + PE). إجراءات الرقابة تنطوي على تقديم نفس الصور جديلة، ولكن السماح الكحول إلى أن تستهلك، توليد PE الحد الأدنى (أي استرداد PE) أو توليد PE دون استرجاع الكحول مرمس، عن طريق تقديم العظة عصير البرتقال (لا استرداد + PE). وفي وقت لاحق، يصف لنا إجراء multisensory كونتيركونديتيونينج المستندة إلى الاشمئزاز للتحقيق زعزعة الاستقرار إليه الرصد والإبلاغ عن طريق إعادة كتابة الكحول جديلة-مكافأة الجمعيات قبل الوحدة. العظة الكحول أزواج هذا الإجراء مع الصور التذرع بالاشمئزاز الممرض وحل الغاية المذاق المر (بنزوات ديناتونيوم)، تولد الاشمئزاز تطرب. بعد استرداد + PE، ولكن لا استرجاع + PE أو استرجاع أي PE، تنتج كونتيركونديتيونينج دليل لآلية الرصد والإبلاغ كتابة كما تفهرس دائم تخفيضات في التقييم جديلة الكحول والتقاط أتينشونال والكحول والتوق.

قارن الفريق الوسائل في الأساس للتدابير الذاتية. المجموعات ينبغي أن يكون معادلاً في الأساس في تناول الكحول والاشمئزاز حساسية/الميل وعشرات سقراط و NAEQ، ولحظة حنين (ACQ-الآن). إذا كان هناك اختلافات في هذه التدابير في الأساس، ينبغي مواصلة التحليل باستخدام نماذج التأثيرات المختلطة، وهذه التدابير ينبغي أن تدرج كالآثار العشوائية59. أداء هذه التحليلات لا يرد هنا. تقييم تواتر القراءات فشلهما الكحول الإيجابي في كل مجموعة والتقرير هذا كنتيجة.
تصنيفات اللطف CS + s وخدمات العملاء-s لم تختلف في الأساس (قبل كونتيركونديتيونينج)، ولكن اختلفت خلال محاكمات كونتيركونديتيونينج، مع تصنيفات اللطف للبيرة CS + s الحد إلى حد كبير عن طريق تكرار الاقتران مع مصورة و شراب المر إكس. إذا CS + s وخدمات العملاء-s تختلف في الأساس، استخدم نموذج آثار مختلطة مع اعتراض عشوائي والمنحدرات لتحليل هذه البيانات. CS-s تقترن ابدأ إكس، حيث لا تظهر انخفاضا في اللطف. وهذا يمثل نوع CS (CS + مقابل CS-) × التفاعل المحاكمة (خط الأساس، ومحاكمة 1 و 2 و 3 و 4) إذا كونتيركونديتيونينج كانت ناجحة، كما هو مبين في الشكل 2 (بيانات تمثيلية من Das et al. 28)
توفير الأدلة للشبكات الآلية في إعادة كتابة بتخفيض معمم في تصنيفات اللطف للمحفزات الكحول، والمحفزات ليست محايدة في متابعة (8 اليوم). في المجموعة المقصود بالصندوق + PE، تصنيفات اللطف المخفضة كانت واضحة في استجابة CS + s المستخدمة في مهمة استرجاع/كونتيركونديتيونينج (البيرة CS + s)، فضلا عن رواية البيرة والنبيذ الصور تصنيفها للمرة الأولى في متابعة. إحصائيا وكان هذا واضحا في نوع CS (البيرة CS + المحايدة CS، البيرة الرواية، رواية النبيذ) x فريق (ليس المقصود بالصندوق + PE، والمقصود بالصندوق + PE، RET لا PE) التفاعل. نتائج المثال يظهر هذا النمط من Das et al. ويبين الشكل 3 28 .
تفحص هذا النمط من النتائج المهمة التحيز أتينشونال الاختياري. التحيز أتينتيونال يحسب وقت يسكن في صورة الكحول مستهدفة-الوقت يسكن في صورتها مطابقة تكوين زوج غير المستهدفة. نقاط 0 يشير إلى أي انحياز، نقاط إيجابية أتينشونال انحياز المحفزات الكحول، ونقاط سلبية oculomotor نفور صور الكحول. الممثل النتائج المأخوذة من Das et al. ويبين الشكل 4 28 . يمكن أن ينظر إلى أن نفور oculomotor الكحول الصور في متابعة (8 اليوم) أنتجت في المجموعة المقصود بالصندوق + PE فقط، وأشار إلى مجموعة كبيرة x CS نوع التفاعل.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56097/56097fig1.jpg"> الشكل 1: تخطيطي استرجاعها المجموعات الثلاث والتنبؤ بخطأ في الإجراءات. مفتاح المختصرات: المقصود بالصندوق + PE = استرجاع + خطأ التنبؤ؛ المجموعة الذين استرجاع الذكريات الكحول ويتوقع الكحول المحتجزة. ريت + أي بي = استرجاع + أي خطأ التنبؤ؛ الفريق الذي يسترجع ذكريات الكحول واستهلاك الكحول كما هو متوقع. لا ريت + PE = لا استرجاع + خطأ التنبؤ؛ هذه المجموعة لا يقوم باسترداد ذكريات الكحول والمتوقع على عصير البرتقال المحتجزة. في فيفو شراب: 150 مل كوب من البيرة في المقصود بالصندوق + PE والمقصود بالصندوق + لا PE أو كوب 150 مل من عصير البرتقال في المجموعة ليس المقصود بالصندوق. 1) في فيفو الشراب: الشراب ذات الصلة إلى فريق المشتركين يوضع أمام المشاركين ويقال لهم أنهم سوف تستهلك هذا المشروب وفقا للمطالبات سوف يرونه على الشاشة؛ وبعد تصنيف سلسلة من الصور اللطف. 2) جديلة تصنيف الصورة: معدل المشتركين في الصندوق، والمقصود بالصندوق + PE PE لا أربع صور من البيرة وصورتين للمشروبات الغازية (البن وكولا) عن اللطف. موجز في فيفو التعرض للبيرة وتصنيف لاسترجاع مشغلات الصور البيرة للشرب الذكريات في هذه المجموعات. RET لا المجموعة معدلات أربع صور من عصير البرتقال والصور المشروبات الغازية من أجل اللطف وهكذا لا استرجاع الذكريات الكحول. 3) خطأ التنبؤ: وقال جميع المشاركين أن أنهم سوف تشرب الشراب في فيفو في بداية الإجراء، هو ولدها PE في منع المشاركين في الصندوق + PE ولا ريت + PE من استهلاك المشروبات أمامهم. يستهلك الشراب في المقصود بالصندوق + بي أي، كما هو متوقع، مراعاة المنظور الجنساني في لا بي. 4) ديستراكتورس: يتم تنفيذ مهام الذاكرة العاملة عالية (نذكر النثر وتمتد أرقام، والفئة والطلاقة اللفظية) يصرف المشاركين والانسحاب منها من مهمة استرجاعها. 5) التدخل: مهمة كونتيركونديتيونينج فيها الصور البيرة المقترنة مع الصور حمل الاشمئزاز والمشروبات مريرة جداً. ويهدف هذا الإجراء إنشاء اقتران بين الصور البيرة وتجربة الاشمئزاز أن الجمعيات الموجودة في الصندوق + PE بالكتابة فوق المجموعة بسبب زعزعة استقرار ذكريات الكحول. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56097/56097fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56097/56097fig2.jpg"> رقم 2: يعني تصنيفات اللطف (± SEM) من منبهات محايدة والبيرة أثناء كونتيركونديتيونينج. الممثل التغييرات في تصنيفات اللطف CS + s (البيرة الصور وإرفاقها مع نتائج مثيرة للاشمئزاز) وخدمات العملاء-s (صور محايدة يقترن نتائج محايدة) على مدى كونتيركونديتيونينج، مأخوذة من Das et al. 28 كونتيركونديتيونينج تهدف الاحتجاج بالاشمئزاز مكيفة ردا على الصور البيرة، ينبغي الحد من اللطف المتصورة لهذه الصور أثناء كونتيركونديتيونينج. تصنيفات لا تختلف في الأساس، ولكن الحد من CS + s على مدى كونتيركونديتيونينج. * * = CS + > CS-في ف< 0.001. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56097/56097fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56097/56097fig3.jpg"> الشكل 3: تعني اللطف تصنيفات (± SEM) العظة الكحول كونتيركونديتيونيد، والرواية ومنبهات محايدة في test. الممثل المعمم تخفيضات في تصنيفات اللطف (تروق) من الصور الكحول سبعة أيام بعد إجراء كونتيركونديتيونينج بعد استرجاع (الصندوق) مع خطأ التنبؤ (PE) (المقصود بالصندوق + PE) من Das et al. 28 هذا النمط يتسق مع إعادة كتابة لمكافأة الجمعيات ذات الصلة بالكحول في المقصود بالصندوق + PE. مفتاح: محايدة لخدمات العملاء-- = صور القهوة والكولا يقترن الصور محايدة أثناء كونتيركونديتيونينج. البيرة CS + = البيرة الصور المقترنة مع نتائج مثيرة للاشمئزاز أثناء كونتيركونديتيونينج. رواية البيرة = الصور البيرة الغيب سابقا. النبيذ = الغيب بريفيوسي النبيذ الصور. * = مقارنات عشوائية كبيرة في ف< بونفيروني 0.05، تصحيحه. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56097/56097fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56097/56097fig4.jpg"> الشكل 4: تعني التحيز أتينشونال الكحول كونتيركونديتيونيد، رواية العظة ومنبهات محايدة في test. الممثل المعمم إلغاء التحيز أتينشونال لجميع المحفزات الكحول في المجموعة التي خضعت كونتيركونديتيونينج بعد المقصود بالصندوق + PE من Das et al28. وتبين أشرطة يعني عشرات التحيز أتينشونال، تحسب كمتوسط الفرق في مجموع الوقت تبحث في 'صورة مستهدفة' التي تحتوي على الكحول مرئي مقابل مطابقة تكوين 'هدف غير' إيماجيلاكينج الكحول مرئية. أشرطة الخطأ هي SEMs. محايدة لخدمات العملاء-- = صور القهوة والكولا يقترن الصور محايدة أثناء كونتيركونديتيونينج. البيرة CS + = البيرة الصور المقترنة مع نتائج مثيرة للاشمئزاز أثناء كونتيركونديتيونينج. رواية البيرة = الصور البيرة الغيب سابقا. النبيذ = الصور النبيذ الغيب سابقا. * = مقارنات عشوائية كبيرة في ف< بونفيروني 0.05، تصحيحه. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56097/56097fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>عدد المحاكمات</td>
			<td colspan="2">نوع CS</td>
			<td colspan="2">نوع UCS</td>
			<td colspan="2">اسم الملف UCS</td>
		</tr>
<tr>
<td>1</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 1</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>2</td>
			<td colspan="2">1 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7020.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>3</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 1</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>4</td>
			<td colspan="2">2 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7019.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>5</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 4</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">rotten_foot.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>6</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 3</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">9325.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>7</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 2</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>8</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 4</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">9325.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>9</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 3</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">rotten_foot.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>10</td>
			<td colspan="2">1 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7020.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>11</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 1</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>12</td>
			<td colspan="2">2 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7019.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>13</td>
			<td colspan="2">1 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7019.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>14</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 2</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>15</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 4</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">9405.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>16</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 1</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>17</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 4</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">9301.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>18</td>
			<td colspan="2">2 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7019.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>19</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 3</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">9405.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>20</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 2</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>21</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 3</td>
			<td colspan="2">مصورة</td>
			<td colspan="2">9301.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>22</td>
			<td colspan="2">2 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7019.jpg</td>
		</tr>
<tr>
<td>23</td>
			<td colspan="2">البيرة CS + 2</td>
			<td colspan="2">تطرب</td>
			<td colspan="2">DRINK_SCREEN. بابوا غينيا الجديدة</td>
		</tr>
<tr>
<td>24</td>
			<td colspan="2">1 CS محايدة</td>
			<td colspan="2">محايدة</td>
			<td colspan="2">7020.jpg</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 1: بسيودوراندوميزيد للمحاكمة من أجل المهمة كونتيركونديتيونينج المستخدمة في داس وآخرون . 28 نوع CS = نوع التحفيز مشروط. وهناك أربعة صور البيرة المستخدمة في كونتيركونديتيونينج. وهذه مرقمة تعسفاً البيرة CS + 1 إلى 4. الصورتين محايدة للقهوة والكولا تستخدم أيضا وهذه هي مرقمة تعسفاً المحايدة CS-1 والمحايدة CS-2. نوع UCS = نوع التحفيز أونكونديتيونيد. جوستاتوري أونكونديتيونيد المحفزات هي عبارة "شرب الآن" التي تظهر على الشاشة، والمشاركين تستهلك 15 مل 0.067% بنزوات ديناتونيوم الحل. مصورة إكس هي الصور غير سارة/مثير للاشمئزاز من مصادر من قاعدة بيانات نظام الصورة الدولية العاطفية (IAPS) والإنترنت. محايدة إكس هي اثنين من الصور المستمدة من قاعدة البيانات IAPS التي يتم تصنيفها محايدة. اسم ملف UCS: هذا العمود يعطي صوراً محددة ليتم عرضها كنتائج في كل محاكمة. أسماء ملفات رقمية تشير إلى إعداد قاعدة بيانات IAPS. هذه الصور متاحة عند الطلب إلى قاعدة IAPS. الصور الأخرى متوفرة من المؤلفين بناء على طلبها.

Watch this Scientific Journal Video about A Prediction Error-driven Retrieval Procedure for Destabilizing and Rewriting Maladaptive Reward Memories in Hazardous Drinkers at JoVE.com

A Prediction Error-driven Retrieval Procedure for Destabilizing and Rewriting Maladaptive Reward Memories in Hazardous Drinkers

ويصف هذه المخطوطة إجراء استرجاع ذاكرة لزعزعة استقرار ذكريات مكافأة قوية وإعادة كتابة لهم مع كونتيركونديتيونينج قبل هذه الوحدة.

إجراء استرجاع يحركها خطأ التنبؤ لزعزعة الاستقرار وإعادة كتابة ذكريات مكافأة مهايئ في يشربون الخطرة

Maladaptive reward memories (MRMs) can become unstable following retrieval under certain conditions, allowing their modification by subsequent new ...

a-prediction-error-driven-retrieval-procedure-for-destabilizing

Research

JoVE Journal

Neuroscience

9.7K Views.  University College London. ويصف هذه المخطوطة إجراء استرجاع ذاكرة لزعزعة استقرار ذكريات مكافأة قوية وإعادة كتابة لهم مع كونتيركونديتيونينج قبل هذه الوحدة.

Video: A Prediction Error-driven Retrieval Procedure for Destabilizing and Rewriting Maladaptive Reward Memories in Hazardous Drinkers

SDS-PAGE/Immunoblot Detection of A&beta; Multimers in Human Cortical Tissue Homogenates using Antigen-Epitope Retrieval

The anomalous folding and polymerization of the &beta;-amyloid (A&beta;) peptide is thought to initiate the neurodegenerative cascade in Alzheimer's disease pathogenesis1. A&beta; is predominantly a 40- or 42-amino acid peptide that is prone to self-aggregation into &beta;-sheet-rich amyloid fibrils that are found in the cores of cerebral senile plaques in Alzheimer's disease. Increasing evidence suggests that low molecular weight, soluble A&beta; multimers are more toxic than fibrillar A&beta; amyloid2. The identification and quantification of low- and high-molecular weight multimeric A&beta; species in brain tissue is an essential objective in Alzheimer's disease research, and the methods employed also can be applied to the identification and characterization of toxic multimers in other proteopathies3. Naturally occurring A&beta; multimers can be detected by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis followed by immunoblotting with A&beta;-specific antibodies. However, the separation and detection of multimeric A&beta; requires the use of highly concentrated cortical homogenates and antigen retrieval in small pore-size nitrocellulose membranes. Here we describe a technique for the preparation of clarified human cortical homogenates, separation of proteins by SDS-PAGE, and antigen-epitope retrieval/Western blotting with antibody 6E10 to the N-terminal region of the A&beta; peptide. Using this protocol, we consistently detect A&beta; monomers, dimers, trimers, tetramers, and higher molecular weight multimers in cortical tissue from humans with Alzheimer's pathology.

SDS-PAGE/Immunoblot Detection of A&#946; Multimers in Human Cortical Tissue Homogenates using Antigen-Epitope Retrieval

We describe a technique for the preparation of clarified human cortical homogenates, protein separation by SDS-PAGE, antigen retrieval and immunoblotting with an antibody to the A&beta; peptide. Using this protocol, we consistently detect monomeric and multimeric A&beta; in cortical tissue from humans with Alzheimer's pathology.

SDS-PAGE/Immunoblot الكشف عن Multimers Aβ في الأنسجة البشرية القشرية الخليط باستخدام مستضد استرجاع حاتمة

The anomalous folding and polymerization of the &beta;-amyloid (A&beta;) peptide is thought to initiate the neurodegenerative cascade in Alzheimer's ...

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse. Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the neurobiology and phenomenology of relapse to drug use. Although procedural variations have emerged over the past several decades, the most conventional reinstatement procedures are based on the drug self-administration (SA) model. In this model, an animal is trained to perform an operant response to obtain drug. Subsequently, the behavior is extinguished by withholding response-contingent reinforcement. Reinstatement of drug seeking is then triggered by a discrete event, such as an injection of the training drug, re-exposure to drug-associated cues, or exposure to a stressor 1.
Reinstatement procedures were originally developed to study the ability of acute non-contingent exposure to the training drug to reinstate drug seeking in rats and monkeys 1, 2. Reinstatement procedures have since been modified to study the role of environmental stimuli, including drug-associated cues and exposure to various forms of stress, in relapse to drug seeking 1, 3, 4.
Over the past 15 years, a major focus of the reinstatement literature has been on the role of stress in drug relapse. One of the most commonly used forms of stress for studying this relationship is acute exposures to mild, intermittent, electric footshocks. The ability of footshock stress to induce reinstatement of drug seeking was originally demonstrated by Shaham and colleagues (1995) in rats with a history of intravenous heroin SA5. Subsequently, the effect was generalized to rats with histories of intravenous cocaine, methamphetamine, and nicotine SA, as well as oral ethanol SA 3, 6.
Although footshock-induced reinstatement of drug seeking can be achieved reliably and robustly, it is an effect that tends to be sensitive to certain parametrical variables. These include the arrangement of extinction and reinstatement test sessions, the intensity and duration of footshock stress, and the presence of drug-associated cues during extinction and testing for reinstatement. Here we present a protocol for footshock-induced reinstatement of cocaine seeking that we have used with consistent success to study the relationship between stress and cocaine seeking.

Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the role of stress in relapse to drug seeking. Here, we report on a method for inducing the reinstatement of cocaine seeking in laboratory rats via acute exposures to mild, intermittent electric footshock.

إجراء دراسة لإعادة Footshock الناتج عن السعي من الكوكايين في فئران التجارب

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

طريقة عامة لتقييم الحضانة لالتوق السكروز في الجرذان

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

A Lightweight, Headphones-based System for Manipulating Auditory Feedback in Songbirds

Experimental manipulations of sensory feedback during complex behavior have provided valuable insights into the computations underlying motor control and sensorimotor plasticity1. Consistent sensory perturbations result in compensatory changes in motor output, reflecting changes in feedforward motor control that reduce the experienced feedback error. By quantifying how different sensory feedback errors affect human behavior, prior studies have explored how visual signals are used to recalibrate arm movements2,3 and auditory feedback is used to modify speech production4-7. The strength of this approach rests on the ability to mimic naturalistic errors in behavior, allowing the experimenter to observe how experienced errors in production are used to recalibrate motor output.
Songbirds provide an excellent animal model for investigating the neural basis of sensorimotor control and plasticity8,9. The songbird brain provides a well-defined circuit in which the areas necessary for song learning are spatially separated from those required for song production, and neural recording and lesion studies have made significant advances in understanding how different brain areas contribute to vocal behavior9-12. However, the lack of a naturalistic error-correction paradigm - in which a known acoustic parameter is perturbed by the experimenter and then corrected by the songbird - has made it difficult to understand the computations underlying vocal learning or how different elements of the neural circuit contribute to the correction of vocal errors13.
The technique described here gives the experimenter precise control over auditory feedback errors in singing birds, allowing the introduction of arbitrary sensory errors that can be used to drive vocal learning. Online sound-processing equipment is used to introduce a known perturbation to the acoustics of song, and a miniaturized headphones apparatus is used to replace a songbird's natural auditory feedback with the perturbed signal in real time. We have used this paradigm to perturb the fundamental frequency (pitch) of auditory feedback in adult songbirds, providing the first demonstration that adult birds maintain vocal performance using error correction14. The present protocol can be used to implement a wide range of sensory feedback perturbations (including but not limited to pitch shifts) to investigate the computational and neurophysiological basis of vocal learning.

We describe the design and assembly of miniaturized headphones suitable for replacing a songbird&#x2019;s natural auditory feedback with a manipulated acoustic signal. Online sound processing hardware is used to manipulate song output, introduce real-time errors in auditory feedback via the headphones, and drive vocal motor learning.

خفيفة الوزن، القائم على نظام سماعات لمعالجة ملاحظات السمعية في العصافير

Experimental manipulations of sensory feedback during complex behavior have provided valuable insights into the computations underlying motor control and ...

A Procedure for Implanting Organized Arrays of Microwires for Single-unit Recordings in Awake, Behaving Animals

In vivo electrophysiological recordings in the awake, behaving animal provide a powerful method for understanding neural signaling at the single-cell level. The technique allows experimenters to examine temporally and regionally specific firing patterns in order to correlate recorded action potentials with ongoing behavior. Moreover, single-unit recordings can be combined with a plethora of other techniques in order to produce comprehensive explanations of neural function. In this article, we describe the anesthesia and preparation for microwire implantation. Subsequently, we enumerate the necessary equipment and surgical steps to accurately insert a microwire array into a target structure. Lastly, we briefly describe the equipment used to record from each individual electrode in the array. The fixed microwire arrays described are well-suited for chronic implantation and allow for longitudinal recordings of neural data in almost any behavioral preparation. We discuss tracing electrode tracks to triangulate microwire positions as well as ways to combine microwire implantation with immunohistochemical techniques in order to increase the anatomical specificity of recorded results.

Implanting organized arrays of microwires for use in single-unit electrophysiological recordings presents a number of technical challenges.&#160;Methods for performing this technique and the equipment necessary are described.&#160;Also, the beneficial use of organized microwire arrays to record from distinct neural subregions with high spatial selectivity is discussed.

إجراء لغرس صالحة المنظمة من Microwires للتسجيلات واحدة وحدة في استيقظ، تتصرف الحيوانات

In vivo electrophysiological recordings in the awake, behaving animal provide a powerful method for understanding neural signaling at the single-cell ...

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

Studies in the mammalian neocortex have enabled unprecedented resolution of cortical structure, activity, and response to neurodegenerative insults by repeated, time-lapse in vivo imaging in live rodents. These studies were made possible by straightforward surgical procedures, which enabled optical access for a prolonged period of time without repeat surgical procedures. In contrast, analogous studies of the spinal cord have been previously limited to only a few imaging sessions, each of which required an invasive surgery. As previously described, we have developed a spinal chamber that enables continuous optical access for upwards of 8 weeks, preserves mechanical stability of the spinal column, is easily stabilized externally during imaging, and requires only a single surgery. Here, the design of the spinal chamber with its associated surgical implements is reviewed and the surgical procedure is demonstrated in detail. Briefly, this video will demonstrate the preparation of the surgical area and mouse for surgery, exposure of the spinal vertebra and appropriate tissue debridement, the delivery of the implant and vertebral clamping, the completion of the chamber, the removal of the delivery system, sealing of the skin, and finally, post-operative care. The procedure for chronic in vivo imaging using nonlinear microscopy will also be demonstrated. Finally, outcomes, limitations, typical variability, and a guide for troubleshooting are discussed.

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

In this video, we describe a procedure for implanting a chronic optical imaging chamber over the dorsal spinal cord of a live mouse. The chamber, surgical procedure, and chronic imaging are reviewed and demonstrated.

إجراء لغرس الدائرة العمود الفقري للالطولية<em&gt; في فيفو</em&gt; التصوير من الحبل الشوكي ماوس

Studies in the mammalian neocortex have enabled unprecedented resolution of cortical structure, activity, and response to neurodegenerative insults by ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life. The cold plantar assay allows the objective and inexpensive assessment of cold sensitivity in mice, and can quantify both analgesia and hypersensitivity. Mice are acclimated on a glass plate, and a compressed dry ice pellet is held against the glass surface underneath the hindpaw. The latency to withdrawal from the cooling glass is used as a measure of cold sensitivity.
Cold sensation is also important for survival in regions with seasonal temperature shifts, and in order to maintain sensitivity animals must be able to adjust their thermal response thresholds to match the ambient temperature. The Cold Plantar Assay (CPA) also allows the study of adaptation to changes in ambient temperature by testing the cold sensitivity of mice at temperatures ranging from 30 &#176;C to 5 &#176;C. Mice are acclimated as described above, but the glass plate is cooled to the desired starting temperature using aluminum boxes (or aluminum foil packets) filled with hot water, wet ice, or dry ice. The temperature of the plate is measured at the center using a filament T-type thermocouple probe. Once the plate has reached the desired starting temperature, the animals are tested as described above.
This assay allows testing of mice at temperatures ranging from innocuous to noxious. The CPA yields unambiguous and consistent behavioral responses in uninjured mice and can be used to quantify both hypersensitivity and analgesia. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

The Cold Plantar Assay (CPA) measures cold responsiveness between 30 &#176;C and 5 &#176;C, and can also measure cold adaptation. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

طريقة بسيطة وغير مكلفة لتحديد الباردة الحساسية والتكيف في الفئران

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Polygraphic Recording Procedure for Measuring Sleep in Mice

Recording of the epidural electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) in small animals, like mice and rats, has been pivotal to study the homeodynamics and circuitry of sleep-wake regulation. In many laboratories, a cable-based sleep recording system is used to monitor the EEG and EMG in freely behaving mice in combination with computer software for automatic scoring of the vigilance states on the basis of power spectrum analysis of EEG data. A description of this system is detailed herein. Steel screws are implanted over the frontal cortical area and the parietal area of 1 hemisphere for monitoring EEG signals. In addition, EMG activity is monitored by the bilateral placement of wires in both neck muscles. Non-rapid eye movement (Non-REM; NREM) sleep is characterized by large, slow brain waves with delta activity below 4 Hz in the EEG, whereas a shift from low-frequency delta activity to a rapid low-voltage EEG in the theta range between 6 and 10 Hz can be observed at the transition from NREM to REM sleep. By contrast, wakefulness is identified by low- to moderate-voltage brain waves in the EEG trace and significant EMG activity.

The recording of electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) in freely behaving mice is a critical step to correlate behavior and physiology with sleep and wakefulness. The experimental protocol described herein provides a cable-based system for acquiring EEG and EMG recordings in mice.

تسجيل الطباعة الداخلي لقياس النوم في الفئران

Recording of the epidural electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) in small animals, like mice and rats, has been pivotal to study the ...

Simultaneous Detection of c-Fos Activation from Mesolimbic and Mesocortical Dopamine Reward Sites Following Naive Sugar and Fat Ingestion in Rats

This study uses cellular c-fos activation to assess effects of novel ingestion of fat and sugar on brain dopamine (DA) pathways in rats. Intakes of sugars and fats are mediated by their innate attractions as well as learned preferences. Brain dopamine, especially meso-limbic and meso-cortical projections from the ventral tegmental area (VTA), has been implicated in both of these unlearned and learned responses. The concept of distributed brain networks, wherein several sites and transmitter/peptide systems interact, has been proposed to mediate palatable food intake, but there is limited evidence empirically demonstrating such actions. Thus, sugar intake elicits DA release and increases c-fos-like immunoreactivity (FLI) from individual VTA DA projection zones including the nucleus accumbens (NAC), amygdala (AMY) and medial prefrontal cortex (mPFC) as well as the dorsal striatum. Further, central administration of selective DA receptor antagonists into these sites differentially reduce acquisition and expression of conditioned flavor preferences elicited by sugars or fats. One approach by which to determine whether these sites interacted as a distributed brain network in response to sugar or fat intake would be to simultaneous evaluate whether the VTA and its major mesotelencephalic DA projection zones (prelimbic and infralimbic mPFC, core and shell of the NAc, basolateral and central-cortico-medial AMY) as well as the dorsal striatum would display coordinated and simultaneous FLI activation after oral, unconditioned intake of corn oil (3.5%), glucose (8%), fructose (8%) and saccharin (0.2%) solutions. This approach is a successful first step in identifying the feasibility of using cellular c-fos activation simultaneously across relevant brain sites to study reward-related learning in ingestion of palatable food in rodents.

The goal of this study is to identify reward-related distributed brain networks by delineating a reliable immunohistological technique using cellular c-fos activation to measure simultaneous changes in dopamine pathways and terminal sites after novel ingestion of fat and sugar in rats.

كشف في وقت واحد ج-فو التنشيط من مواقع مكافأة Mesolimbic والقشري المتوسطي الدوبامين بعد ساذج السكر والدهون الابتلاع في الجرذان

This study uses cellular c-fos activation to assess effects of novel ingestion of fat and sugar on brain dopamine (DA) pathways in rats. Intakes of sugars ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

طريقة بسيطة لقياس التغيرات في السلوك المكافأة التماس طريق<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...