نموذج حيواني قابل للنتاج مهم جداً لأبحاث عدوى العظام. ومع ذلك، لا يوجد حاليا أي نموذج أرنب الذي حالة العدوى وعدد من البكتيريا هو ثابت. يستخدم نموذج أرنب العدوى العظمية لدينا بكتيريا متسقة ويتم علاجه بواسطة كبريتات الكالسيوم المحملة بالفانكومايسين والشظايا الأوتوماتيكية.
ويمكن توسيع هذه التقنية نحو تشخيص عدوى العظام والعلاج غير اسكنون العظام، وفي فهم التسبب في عدوى العظام. هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة على نماذج عدوى العظام الأخرى في الفئران والفئران والخنازير. من الصعب تحميل نفس حجم التعليق البكتيري في نخاع العظم.
يمكن أن يساعد العرض التوضيحي المرئي الباحثين على تنفيذ الخطوات الحاسمة بسهولة ودقة. لإعداد التعليق البكتيري، أولاً حل 0.5 ملليغرام من مسحوق S.aureus تجميد المجففة في 0.3 ملليلتر من متوسطة ثقافة LB. مزيج التعليق بدقة، و streak البكتيريا على لوحات agar الصويا tryptic لاحتضانهم لمدة 16 ساعة في 37 درجة مئوية.
في صباح اليوم التالي، اختر وحدة واحدة لتشكيل مستعمرة بكتيرية لثقافة في أنابيب مرق الصويا المبتّكة لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية. عندما تكون البكتيريا في مرحلة النمو اللوغاريتمي الأوسط ، قم بنقل 1 ملليلتر من البكتيريا إلى أنبوب 1.5 ملليلتر ، وجمع البكتيريا عن طريق الطرد المركزي. ثم، وغسل بيليه الخلية البكتيرية ثلاث مرات في 100 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني لكل غسل، resuspending البكتيريا في 3 ملليلتر من برنامج تلفزيوني جديد بعد الغسيل النهائي.
لإقامة العفن عدوى العظام، تأكيد عدم وجود استجابة لقرصة مخلب في ثلاثة أشهر من العمر ثلاثة كيلوغرامات من الذكور نيوزيلندا أرنب أبيض، واستخدام آلة الحلاقة الكهربائية لإزالة الشعر من المنطقة التيبية القريبة ضد اتجاه نمو الشعر. تطهير الجلد المكشوف مع محلول اليود povidone، واستخدام القلم والمسطرة للاحتفال الطرف العلوي من الساق وموقف ثقب الحفر لحقن S.Aureus، مع الحرص على أن موقف ثقب الحفر هو في الوسط الأفقي للهضبة التيبية. بعد ذلك، استخدم مشرطًا رقم 11 لإجراء شق في الجلد، يليه شق سنتيمتر واحد في الصفاق.
باستخدام وحدة حفر العظام الكهربائية، لكمة ثقب قطرها ملليمترين في الساق، واضغط على الحفرة مع اثنين ملليمتر قطر اسطوانة طويلة من شمع العظام. إزالة أي شمع العظام الاحتياطية على طول الطائرة الأفقية من الهضبة القبية، وتأكد من أن الثقب مليء بالشمع العظام. ثم استخدم خياطة جراحية قابلة للامتصاص لخياطة الزجر والجلد في خياطة فراش عمودي لمنع الحيوان من مضغ الغرز.
واستخدام حاقن المليلتر لحقن ببطء مرة واحدة مرة واحدة إلى وحدات تشكيل المستعمرة ثمانية لكل ملليلتر من محلول S.Aureus في حفرة الحفر. في اليوم السابع و14 و21 و28 بعد الحقن، ضع الأرانب المصابة في مُقيد أرنب مع الرأس والأذن خارج المُقيد، وجمع عينات الدم من الأوردة العُلوية لخلايا الدم البيضاء وتحليل البروتين المتفاعل C. بعد التخدير، استخدم مشرط رقم 11 لصنع بشرة تيبالي سنتيمترية وشقوق الصفاق، وتنظيف شمع العظام.
بعد ذلك ، استخدم وحدة حفر العظام الكهربائية لكمة اثنين من الثقوب المجاورة قطرها 4.8 ملليمتر ل debride العظم النخري ، واستخدام ملعقة العظام ل debride نخاع العظام النخري والأنسجة المحببة. ثم، كشط وتنظيف الأنسجة العظمية بين الثقبين، ونشر ملليلتر واحد من نخاع العظم المُمتص على صحون أجار دم الأغنام لاحتضانها بين عشية وضحاها عند 37 درجة مئوية. في صباح اليوم التالي، حدد لوحات مع 30 إلى 300 مستعمرة، وحساب عدد وحدات تشكيل مستعمرة لكل مصاب.
في اليوم الثامن والعشرين بعد الإصابة، أضف غراماً واحداً من مسحوق فانكومايسين هيدروكلوريد إلى 9.5 جرام من كبريتات الكالسيوم الطبية، واستخدم ملعقة لتحريك الخليط بثلاثة ملليلترات من الملح الطبيعي لمدة 30 إلى 45 ثانية. يُضاف المنتج المختلط إلى قالب هلام السيليكا المرن، واسمح للمنتج بالجفاف في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة. ثم، فليكس القالب لإزالة فانكومايسين تحميل كبريتات الكالسيوم، أو VCS حبة.
لعلاج المضادات الحيوية وزرع العظام الذاتية ، أولا ، إعادة كشف الساق المصاب قبل حلق منطقة الذيل ، وتطهير الجلد الذيل المكشوفة مع محلول اليود povidone. استخدم المقص الجراحي لقطع الذيل، واستخدم خياطة جراحية قابلة للامتصاص لإغلاق الجلد في خياطة فراش عمودي لمنع الحيوان من مضغ الغرز. استخدام مشرط رقم 11 لقطع الجلد الذيل للكشف عن عظم الذيل.
إزالة أي العضلات, الأنسجة الرخوة, و periosteum, وفصل عظم الذيل في كل مفصل. نقل شظايا العظام إلى طبق بلاستيكي 100 ملليمتر يحتوي على ملح معقم. بعد ذلك ، استخدم المقص المنحني لزرع أربع قطع من حبة VCS في تجويف النخاع الظن ، واستخدم ملقطًا منحنية لملء عيب العظام بثماني قطع من شظايا عظم الذيل التلقائي.
ثم، إغلاق شقوق الاضطرابات الجلدية وشقوق الجلد مع الغرز الجراحية للامتصاص بطريقة خياطة فراش. C-التفاعل البروتين ومستويات خلايا الدم البيضاء هي أعلى في مجموعة نموذج العدوى العظام مما كانت عليه في الحيوانات التحكم. بعد أسبوعين وأربعة وستة وثمانية أسابيع من علاج العظام التلقائي VCS أو VCS ، يتم تقليل مستويات البروتين C التفاعلية وخلايا الدم البيضاء بشكل كبير.
تشير صور إعادة الإعمار ثنائية الأبعاد إلى زيادة تدريجية في حجم العظام خلال فترة الأسبوع 12 بعد العلاج باستخدام VCS أو VCS والعظام الذاتية ، في حين أن فقدان العظام كبير في مجموعة نموذج عدوى العظام غير المعالجة. لتحليل الفهارس الكمية تجديد العظام، يمكن إعادة بناء صور نموذج 3D باستخدام بيانات نقطية، ويمكن اختيار بيضاوية قطرها 4.8 ملليمتر من قبل 9.6 ملليمتر طول المنطقة البيضاوية من الفائدة في كل العظام. نسبة حجم العظام إلى حجم الأنسجة في مجموعة نموذج عدوى العظام غير المعالجة هي أقل بكثير من تلك التي تم قياسها في VCS ومجموعات العظام التلقائية VCS.
عدد trabecular ودرجات سمك في مجموعة العظام VCS autogenous هي أعلى بكثير من تلك الموجودة في نموذج عدوى العظام غير المعالجة والحيوانات VCS. وعلاوة على ذلك، فإن درجات الفصل trabecular في مجموعة العظام VCS autogenous هي أقل بشكل ملحوظ من تلك التي تقاس في نموذج عدوى العظام غير المعالجة ومجموعات VCS. الحرص على اختيار الأرانب مع وزن الجسم المناسب.
منع حل المكورات العنقودية الذهبية مع شمع العظام. Debride العظام النخرية تماما ، ولكمة اثنين من الثقوب المجاورة قطرها 4.8 ملليمتر. بعد الإجراء ، يمكن إجراء طريقة قياس تشخيصية أخرى مثل الموجات فوق الصوتية والأشعة والتصوير المقطعي للكمبيوتر لمراقبة العمليات المرضية للعدوى العظام وإصلاحها.
هذا النموذج المحسن عدوى العظام والجمع بين VCS وعلاج العظام autogenous يمكن أن تكون مفيدة في دراسة آلية التأكيد على عدوى العظام وتجديد العظام. كما مسحوق المكورات العنقودية aureus المجففة أمر خطير، ينبغي دائماً أن تكون مستعدة تعليق البكتيرية في مختبر البكتيريا المعزولة.