يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في علم الأعصاب مثل التغيرات في الكيمياء العصبية خلال التاريخ الطبيعي للأمراض العصبية. الميزة الرئيسية لتقنية التحليل الدقيق المقترحة EEG هو أن مثل هذا النهج مجتمعة يسمح الاقتران من التغييرات في إطلاق الناقل العصبي ضمن مراحل محددة من تطور المرض والتقدم. تبدأ عن طريق التبديل على مكبر للصوت المتمركزة خارج قفص فاراداي.
افتح برنامج تخطيط تخطيط الكهربى وابدأ عملية الاستحواذ على تخطيط تخطيط الكهربى ومراقبة إشارة تخطيط الكهربى والكهربى الناتجة عن الكابلات غير المتصلة. بعد ذلك ، قم بتوصيل الحيوان بنظام تسجيل EEG المربوط عن طريق حمل رأس الحيوان بين إصبعين ممدودين من يد واحدة و الشد أسفل الموصلات إلى اللبند القطب باستخدام اليد الحرة الأخرى. تعيين عامل تضخيم على كل قناة من مكبر للصوت وفقا لإشارة القطب لحيوان واحد حتى إشارة تخطيط الكهرباحي في الحجم.
ثم دع الحيوان يستكشف القفص الجديد لمدة ساعة واحدة على الأقل تحت المراقبة المباشرة للباحث. ضبط الكابل وفقا بضاعة الحيوان، وضمان أن الكابلات لا تتداخل مع تحركات الحيوان ووضع الكذب. وأخيرا، تحقق من الصورة الصحيحة تأطير على كاميرات الفيديو ومن ثم بدء تسجيل الفيديو EEG.
ابدأ من خلال إعداد مسابير التحليل المجهري لأول مرة وفقًا لدليل المستخدم المصنع وملئها بحل Ringer. ثم، وقطع 10 قطع سنتيمتر طويلة من أنابيب FEP وربطها إلى مدخل وقنية منفذ من المسبار باستخدام محولات أنابيب من ألوان مختلفة. تأكد من أن الأنابيب اللمسات المحولات مع عدم وجود مساحة في جميع الاتصالات.
إزالة كانولا دمية من دليلها باستخدام الملاقط عن طريق عقد رأس الحيوان بحزم. إدراج مسبار غسيل المجهر في cannula دليل واستخدام الطين النمذجة لمزيد من شركة حتى قنية. بعد ذلك، قم بتوصيل الحيوان بنظام تسجيل EEG المربوط.
ثم وضع الحيوان في اسطوانة زجاج شبكي والسماح لها استكشاف البيئة الجديدة. اتبع حركات الفئران المستيقظة والمتحركة بحرية. ثم، قم بتوصيل مدخل المسبار بحقنة 2.5 ملليلتر مع إبرة قياس حادة 22 تحتوي على حل رينجر باستخدام محولات الأنابيب.
ادفع ملليلتر واحد من حل رينجر في المسبار في 10 ثوانٍ عن طريق دفع المكبس في حقنة 2.5 ملليلتر بشكل مستمر. تحقق من قطرة السائل التي تظهر على مأخذ للدلالة على متى يكون المسبار جاهزًا للاستخدام. وأخيرا، قم بملء المحاقن 2.5 ملليلتر متصلة أنابيب FEP بواسطة أنابيب محولات مع الحل Ringer وتركيبها على مضخة التسريب.
بدء المضخة في اثنين microliters في الدقيقة الواحدة والسماح لها تشغيل بين عشية وضحاها. بعد التحقق عن طريق الفيديو تسجيلات EEG عدم وجود المضبوطات في الساعات الثلاث السابقة لجمع العينات، ووقف المضخة التي تحمل أنابيب FEP معبّق الحقن المملوءة بحل رينجر. جبل مجموعة أخرى من 2.5 ملليلتر الحقن متصلة أنابيب FEP مع محولات الأنابيب مليئة حل رينجر المعدلة التي تحتوي على محلول البوتاسيوم 100 ملليمولار.
بدء المضخة في اثنين microliters في الدقيقة الواحدة والسماح لها تشغيل. تحقق من عدم وجود فقاعات الهواء في النظام والتأكد من أن الأنابيب تلامس المحولات مع عدم وجود مساحة ميتة في جميع الاتصالات. ثم تحقق من قطرة السائل التي تظهر على منفذ للدلالة على متى المسبار جاهز للاستخدام.
المقبل، وربط أنابيب FEP من المحاقن مليئة الحل رينجر إلى القنية مدخل من التحقيق في كل وانتظر ظهور قطرة السائل على غيض من منفذ. توصيل منفذ المسبار إلى أنابيب FEP الذي يؤدي إلى جمع في أنبوب الاختبار. أدخل أنابيب FEP في أنبوب اختبار 0.2 ملليلتر مغلق مع غطاء مثقبة وتأكد من أن الأنبوب يبقى في مكانه عن طريق إصلاحه بقطعة من طين النمذجة.
بعد تشغيل المضخة في اثنين microliters في الدقيقة لمدة 60 دقيقة دون جمع عينات لتكدير النظام، وجمع خمس عينات متتالية 30 دقيقة dialysate في ظل ظروف خط الأساس، وتخزين العينات على الجليد. بعد 10 دقائق، قم بتبديل الأنابيب من المحاقن التي تحتوي على محلول رينغر البوتاسيوم 100 ملليمولر إلى حل رينجر العادي والسماح بتشغيل المضخة. بعد جمع من الخامس بعد الإكوازاء الطلب، جمع 20 microliter dialysate الكسور كل 10 دقيقة لمدة ساعة واحدة.
ثم جمع ثلاث عينات إضافية 30 دقيقة dialysate ووقف المضخة. وأخيراً، قم بتخزين العينات عند درجة حرارة سالبة 80 درجة مئوية بعد التجربة حتى تحليل HPLC. بعد اكتمال التجربة، شطف مسابير التحليل الدقيق المستخدمة بالماء المقطر وتخزينها في قارورة مليئة بالماء المقطر النظيف حتى الاستخدام التالي.
وأخيراً، شطف كامل إعداد التحليل الدقيق بالماء المقطر تليها 70 في المائة الإيثانول. استبدال الإيثانول مع الهواء، وتخزين الإعداد في بيئة معقمة. هذه هي آثار EEG التمثيلية المسجلة من قرن آمون السيطرة والجرذان الصرع خلال المرحلة المزمنة من المرض.
لم يلاحظ أي تغيير في تخطيط الكهربية في الفئران المسيطرة ، في حين لوحظ نشاط متزامنة لـ epiysmal عن طريق الصرع حوالي 500 مللي ثانية قبل وأثناء النوبات السلوكية في الفئران الصرعية. وكان تركيز الغلوتامات القاعدية الموجود في فئران الصرع المزمنة أعلى بكثير مما هو عليه في الحيوانات التي تتحكم فيها. أثار ارتفاع البوتاسيوم إطلاقًا إضافيًا من الغلوتامات لمدة 30 دقيقة في الفئران المسيطرة و لمدة 60 دقيقة في الفئران الصرعية المزمنة.
أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن نتذكر أن الحيوانات المزروعة مع الجهاز عرضة لفقدانه على مدار فترة من التجربة المطولة ، لذلك استخدم مجموعة رأس خفيفة وكابلات طويلة بما يكفي لتجنب التدخل في حركة الحيوان. اعتمادا على توافر مقال تحليلي مناسب، يمكن استخدام الطريقة لاختبار الجزيئات القابلة للذوبان مختلفة في الدماغ عند استخدام تسجيل EEG في نفس الوقت. بعد تطورها ، سمحت هذه التقنية للباحثين في مجال علم الصرع بتقديم نظرة ثاقبة حول التعديلات في الإرسال العصبي الإثارة في حالة صرع الفص الصدغي.
بعد مشاهدة هذا الفيديو، ونحن على ثقة من أنك سوف يكون أفضل فهم كيفية أداء في التحليل الدقيق في الجسم الحي جنبا إلى جنب مع عمق القطب EEG تسجيل في الفئران الصرع تتحرك بحرية.
