فلاش نانوبريسيتيشن ، أو تقنيات FNP أظهرت هنا توفر منصة قابلة للتطوير ومباشرة لتغليف المركبات المائية أو المهضّبة داخل الجسيمات النانوية البوليمرية. للوضوح، تسمى التقنية المستخدمة لتغليف البيولوجيا معكوسة الوميض نانوبريسيتيشن، أو IFNP. المبادئ الأساسية لم تتغير، ولكن بنية الجسيمات النانوية الناتجة تختلف.
عموما، يحتاج المستخدمون الجدد إلى ممارسة لتشغيل المحاقن مدخل باستمرار عند صنع دفعات صغيرة من الجسيمات النانوية يدويا. ويمكن إنتاج كميات أكبر مع مضخات حقنة الكمبيوتر التي تسيطر عليها. كما يوفر بروتوكولنا تفاصيل حول معالجة ما بعد حلول الجسيمات النانوية، والتي غالباً ما تكون حاسمة للتطبيق الناجح للصياغة.
قبل البدء في العملية، تحقق من التجهيزات خلاط CIJ، وتأكد من أن أنابيب منفذ غير مجعد. ثم، ملء اثنين من خمسة ميليلتر البولي بروبلين المطاط الحرة لوير قفل الحقن مع اثنين إلى ثلاثة ملليلتر من الأسيتون، أو مذيب تنظيف آخر. قفل الحقن في مداخل المحولات، وتعيين التجميع على حاوية النفايات.
اثبط باستمرار المكبس لإرسال المذيبات من خلال غرفة خلط على مدى بضع ثوان. ثم، إزالة المحاقن، وتجفيف الخليط مع تيار من غاز النيتروجين. بعد ذلك ، للبدء في إعداد تيار المدخلات المذيبات ، الماصات 0.25 ملليلتر من محلول 10 ملليغرام لكل ملليلتر من فيتامين E ، في رباعي هيدروفوران الحرة ، إلى أنبوب microcentrifuge 1.5 ملليلتر.
ثم, ماصة 0.25 ملليلتر من 10 ملليغرام في ملليلتر حل من كتلة مثبّت copolymer في THF في نفس الأنبوب. دوامة الخليط لمدة خمس إلى 10 ثوان، ثم الطرد المركزي في 100G لمدة خمس إلى 10 ثوان لاسترداد السائل التمسك الغطاء. إعداد أنبوب 1.5 ملليلتر الطرد المركزي التي تحتوي على 0.525 ملليلتر من المياه deionized كما مضادة للمذيبات.
ثم, ماصة أربعة ملليلتر من المياه الأيونية في 20 ملليلتر قارورة تلين لجعل حمام التبريد. ضع بار صغير في القارورة. ضع خلاط CIJ النظيف فوق حمام التبريد في رف أو كتلة أنبوب اختبار على لوحة ضجة.
ابدأ في تحريك حمام التبريد عند حوالي 75٪ من السرعة القصوى الممكنة. ثم، تناسب إبرة حادة يميل إلى حقنة مطاطية مجانية البولي بروبلين ملليلتر، ورسم المضادة للمذيبات. طرد بعناية فقاعات الهواء من الحقنة، ومن ثم إزالة والتخلص من الإبرة.
ضبط المكبس بحيث يأتي السائل فقط إلى نهاية الحقنة. ثم، إرفاق الحقنة إلى واحدة من مداخل CIJ. ارسم خليط المذيبات في حقنة ثانية بنفس الطريقة، واربطها بالمدخل الآخر.
لتشكيل الجسيمات النانوية، في وقت واحد كل من الغطاسات مع حركة موحدة على نحو سلس في أقل من 0.5 ثانية. من المهم جداً أن ينكمز المحاقن بسرعة، بالتساوي، وبسلاسة. يجب أن لا تضرب المحاقن فجأة ، ولكن يجب أن تبدأ الحركة بالفعل على اتصال مع قمم المحاقن.
بعد ذلك، تعيين خلاط CIJ على حاوية النفايات، دون إزالة المحاقن لضمان أن حجم التعطيل لا يستنزف في التشتت. أزل الشريط المُثير من قارورة التلألؤ، وكابها. ثم، وإزالة والتخلص من المذيبات والمذيبات المضادة للمذيبات.
تنظيف خلاط قبل محاكمة فلاش نانوبريسيتيشن المقبل. لإعداد عينة لتحليل تشتت الضوء الديناميكي ، الماصات 100 ميكرولترات من التشتت في cuvette. إضافة 900 ميكرولترات من مذيبات حمام التبريد، ومزيج جيد عن طريق pipetting قبل البدء في تحليل العينة.
لبدء تجميع MIVM الصغيرة، ضع O-ring في قرص هندسة المزج. محاذاة الثقوب في القرص خلط مع أوتاد على القرص العلوي، وتناسبها معا، مع الحرص على عدم إزاحة O-حلقة. تخفيف منفذ الأنابيب المناسب في المتلقي أسفل، ثم المسمار الأقراص المتصلة في المتلقي.
تناسب وجع مداس إلى أوتاد القرص العلوي، وتشديد الجمعية. تشديد منفذ الأنابيب المناسب بحيث يجلس بقوة ضد الوجه السفلي من القرص هندسة خلط. تأكد من أن تركيبات الحقن على القرص العلوي دافئ.
رفع لوحة المحمول على وقف خلاط لإبقائه بعيدا عن الطريق، ثم وضع خلاط تجميعها على الموقف، مع منفذ الأنابيب مترابطة من خلال لوحة الدعم. بعد ذلك، ضع أنبوب طرد مركزي 15 ملليلتر يحتوي على 5.25 ملليلتر من الكلوروفورم كحمام التبريد تحت أنابيب المنفذ. ثم، رسم 0.75 ملليلتر من الحل A، وهو خمسة مليغرام لكل ميل مليلتر من بيضاوي في ثنائي الفينيل السلفوكسيد في 10٪ من المياه من حيث الحجم، في واحد ملليلتر الغاز ضيق حقنة قفل لور مع إبرة حادة يميل.
طرد بعناية فقاعات الهواء، وإزالة الإبرة، ورئيس الحل لنهاية تركيب Luer. قم بتوصيل الحقنة بمدخل خلاط. كرر هذه العملية مع 0.75 ملليلتر كل من الحل B، وهو ستة ملليغرام لكل ملليلتر من كتلة استقرار copolymer في DMSO، والحل C، وهو THF.
توصيل المحاقن إلى مداخل خلاط في اتجاه عقارب الساعة، في الترتيب الأبجدي. إعداد حقنة ضيقة الغاز 2.5 ملليلتر تحتوي على 1.85 ملليلتر من الحل D، وهو الكلوروفورم، وربطه إلى المدخل الرابع. تأكد من عدم وجود فرق كبير في ارتفاعات الحقنة.
ثم، قبضة بعناية على تحمل السكن على كل جانب من لوحة المحمول، وخفض ببطء لوحة حتى أنها مجرد بالكاد يستريح بالتساوي على رأس المحاقن. لتوليد الجسيمات النانوية، باطراد وبسلاسة اكتئاب لوحة في حوالي 0.5 إلى ثانية واحدة. ثم، وإزالة وغطاء أنبوب حمام التبريد.
تفكيك وتنظيف خلاط عند الانتهاء. للعمل مع وحدات التخزين الكبيرة، قم بتحميل الحلول في محاقن الغاز الضيقة، وتوصيل أنابيب البوليتيترافلورو إيثيلين مع تركيبات Luer بالمحاقن. رئيس الحلول إلى نهايات الأنابيب.
المشبك المحاقن في مضخات الحقن، وإرفاق الأنابيب إلى مداخل خلاط المناسبة. ضع قارورة صغيرة تحت أنابيب المنفذ لجمع حجم بدء التشغيل. يُعدّ الحمام المُروّي ويُبقيه في مكان قريب.
في الوقت نفسه، بدء تشغيل المضخات، والسماح لنحو خمسة ملليلتر من النفايات السائلة تتدفق في قارورة النفايات. ثم، بدء جمع الجسيمات النانوية في حمام التبريد كالمعتاد. ويمكن استخدام لوحة اثارة لخلط حمام التبريد إذا رغبت في ذلك.
وأظهرت أربعة نسخ متماثلة من FNP من الجسيمات النانوية البوليمرية مع نواة مبيدة للماء ، أعدت في خلاط CIJ ، قابلية تكرار عالية ، وكانت أحادية اللون نسبيًا ، بمتوسط قطر 107 نانومتر. ممثل سوء اطلاق النار من الاكتئاب حقنة بطيئة أو غير متكافئة، أنتجت جزيئات أكبر قليلا، في حين أن تعدد التخصصات لم تتأثر في هذا المثال، يمكن أن يؤدي سوء إطلاق النار في المزيد من التوزيعات تعدد. تسوست وظيفة الارتباط التلقائي DLS بسلاسة لعينة نانوية بوليمرية تمثيلية.
لم يلاحظ هذا الانحلال السلس عندما تمت محاولة التركيب بدون مثبت الكوبوليمر الكتلي ، الذي أنتج قطرات زيت صغيرة الحجم بدلاً من ذلك. الكمية النسبية من المواد الأساسية لتثبيت تسيطر على حجم الجسيمات، كما هو مبين هنا، في الجسيمات النانوية مع نواة البوليسترين. وكان مؤشر PDI أقل من 0.15 في كل تركيبة.
جسيمات نانوية مع النوى المائية حيث تنتجها IFNP. وكانت الجزيئات ذات النواة المالتوديسترين، التي أعدت في خلاط CIJ، حوالي 65 نانومتر في القطر، وكان PDI من 0.08. وكانت الجزيئات ذات النواة البيضاوية المعدة في MIVM الصغرى حوالي 125 نانومتر في القطر، وكان PDI من 0.16.
FNP و IFNP هي أدوات قوية لمعالجة الجزيئات والجسيمات النانوية. قبل تنفيذ أي من التقنية، تأكد من النظر في solubilities من كل مكون في جميع المذيبات، أو المذيبات، لضمان تشبع السوبر عالية أثناء الاختلاط. التقنية الأساسية هي واضحة، ولكن اتقان خطوات الاكتئاب حقنة يأخذ بعض الممارسة.
إذا كان لديك مشكلة مع هذا، والنظر في استخدام حقنة مضخة الإعداد مثل واحد هو مبين في هذا الفيديو لتحسين الاتساق. بالنسبة للجزيئات المائية المشحونة، أو الجزيئات ذات القابلية للذوبان الوسيطة، يمكن دمج FNP مع اقتران الأيونات الماعور لتمكين التغليف الفعال. كما يمكن استخدام FNP لتغليف مركبات متعددة في نفس نواة الجسيمات النانوية.
استشر النص والموارد الأدبية الأخرى لمعرفة كيفية أفضل لإزالة المذيبات العضوية من تشتت الجسيمات النانوية في التطبيق المطلوب. وهناك أيضا مجموعة من التقنيات لتثبيت الجسيمات النانوية أثناء التخزين.
