عندما تريد شركة كيميائية طرح مادة كيميائية جديدة أو مادة أخرى في السوق، فإنها تحتاج إلى تقديم بيانات من سلسلة من اختبارات السمية الإيكولوجية. اختبار الطحالب هو واحد من ثلاثة اختبارات إلزامية التي تحتاج إلى إجراء. اختبار الطحالب يعاني من حقيقة أنه من الصعب جدا لأداء.
لهذا السبب، قمنا بتطوير منصة اختبار LEVITATT. يستخدم LEVITATT ضوء LED لتجنب المشاكل مع توليد الحرارة المفرطة. وعلاوة على ذلك، فإنه يضمن حقل ضوء موحد.
لديها حجم صغير، وهذا يعني أنك لا تحتاج مساحة كبيرة لإجراء اختبار الطحالب، ولكن في الوقت نفسه، فإنه يسمح لاستخدام حجم عينة كافية لإجراء التحليل الكيميائي وتوصيف قبل وأثناء وبعد الاختبار. وهذا مهم بشكل خاص عند اختبار المواد النانوية. هذا الفيديو سوف يدل على استخدام LEVITATT لاختبار سمية الطحالب من المواد النانوية وغيرها من المواد الصعبة.
تتكون المظاهرة من الخطوات الأربع التالية. أولاً، وصف مكونات LEVITATT. الخطوة الثانية هي إعداد الحل لوسائط نمو الطحالب.
والخطوة الثالثة هي إعطاء لمحة عامة عن الإجراء الخاص بكيفية إجراء اختبار سمية الطحالب. وينبغي أن تكون الخطوة الأخيرة هي قياس الزيادة في الكتلة الحيوية الطحالب بواسطة مقياس الفلور. يمكن وضع LEVITATT في خزانة درجة الحرارة التي تسيطر عليها من الغرفة.
وهذا يسمح لدرجات حرارة مستقرة في جميع أنحاء التعرض. يتم وضع الإعداد على شاكر المدارية للسماح لدوران العينات أثناء الاختبار. ويجرى الاختبار في قنينات متألقة بـ 20 ملليلتر تحتوي على أربعة ملليلترات متوسطة.
يسمح غطاء المسمار مع ثقب حفر لتبادل CO2 مع الهواء أثناء التعرض. يقع مصدر LED بين صفائحتين من البلاستيك ويقع في وسط كل غلاف. ينشئ الموضع حقل ضوء متجانس ويقلل التظليل بين العينات.
يتم تركيب كل غلاف مع المشابك ويمكن أن تعقد ما يصل إلى خمس عينات. يقلل الحجم الصغير من المساحة المطلوبة لإجراء التجربة. لإعداد حلول الأسهم، تزن كمية مناسبة من كل مركب.
يتكون المحلل من أملاح مختلفة حيوية لنمو الطحالب. عندما يكون وزن الكمية المناسبة من الأملاح ، يتم تخفيفها بالماء النقي للغاية. يتم تعقيم حلول الأسهم إما عن طريق الترشيح أو autoclaving.
بعد التعقيم، يمكن تخزين حلول الأسهم في الظلام عند أربع درجات مئوية. إعداد سلسلة من تركيزات التعرض. وينبغي ألا يتجاوز العامل بين تركيزات التعرض 3.2.
يضاف الحجم المناسب من الطحالب المتنامية أضعافاً مضاعفة إلى كل تركيز اختبار. يجب أن تكون كثافة الخلية النهائية حوالي 10,000 خلية الطحالب لكل ملليلتر. ومن المهم أن ثقافة ما قبل تنمو أضعافا مضاعفة للوفاء بمعايير صلاحية الاختبار.
وتختلط قارورة القياس للسماح بتوزيع متجانس للطحالب والمركب قبل أخذ العينات. يتم صب العينات في القارص ، وأربعة ملليلتر يتم الأنابيب في قوارير 20 ملليلتر. قوارير التلألؤ متوجة الآن.
الماصات 0.4 ملليلتر من كل تركيز. إضافة 1.6 الالليلتر الأسيتون لتعطيل جدار الخلية والإفراج عن الكلورو إلى مرحلة السائل. كل قارورة زجاجية الآن قريبة بإحكام لتجنب تبخر الأسيتون أثناء التخزين.
وتتوزع قارورة التلألؤ المغطاة الآن بشكل عشوائي في LEVITATT وتحتضن لمدة 72 ساعة. قياس شدة الضوء ودرجة الحرارة في بداية ونهاية الحضانة لضمان الامتثال للمبادئ التوجيهية المطلوبة. يتم أخذ العينات الفرعية في 24 ساعة'الفاصلة عن طريق الأنابيب 0.4 ملليلتر من كل قارورة متألقة في قارورة الزجاج.
إضافة 1.6 مليون الأسيتون لتعطيل جدار الخلية والإفراج عن الكلورو إلى مرحلة السائل. بعد إضافة الأسيتون، المسمار الأغطية على بإحكام وترك العينات في الظلام حتى التحليل. استخدام مقياس الفلور لتحديد حجم الكتلة الحيوية في العينة المكتسبة طوال فترة الاختبار.
وينبغي أن تكون الإعدادات على مقياس الفلور 420 نانومتر كطول موجي إثارة وطول موجة من الانبعاثات من 671 نانومتر. يتم قياس كل عينة على حدة ثلاث مرات، ويتم ملاحظة القيم النسبية. وتستخدم القيم النسبية من مقياس الفلور لحساب معدل النمو الذي سيستخدم في معالجة البيانات الأخرى.
استخدم برنامجًا إحصائيًا لاحتواء منحنى الانحدار غير الخطي مع بيانات معدل النمو المحسوب. مثال على منحنى الانحدار غير الخطي يمكن أن يكون log-logistic دالة قابلة للحياة. يظهر الفاصل الزمني المقترن ثقة 95٪ إلى جانب احتواء النموذج.
وتستخدم قيم التركيز الفعالة بانتظام مثل 10 و 20 و 50٪ غير فعالة للإبلاغ عن نتيجة اختبار السمية البيئية. وفي الختام، يوفر LEVITATT منصة مدمجة لاختبار سمية الطحالب للمواد الكيميائية العادية المتوافقة مع المبادئ التوجيهية الدولية الموحدة. وعلاوة على ذلك، يوفر الإعداد منصة قوية لاختبار المواد الصعبة التي تتداخل مع مرور الضوء نحو الطحالب، مثل المواد النانوية أو المواد الملونة.
