Bir kimya şirketi piyasaya yeni bir kimyasal veya başka bir malzeme koymak istediğinde, bir dizi ekotoksisite testinden veri sunmaları gerekir. Alg testi yapılması gereken üç zorunlu testten biridir. Alg testi gerçekleştirmek için oldukça zor olduğu gerçeği muzdarip.
Bu nedenle LEVITATT test platformlarını geliştirdik. LEVITATT aşırı ısı üretimi ile ilgili sorunları önlemek için LED ışık kullanır. Ayrıca, tek tip bir ışık alanı sağlar.
Bu yosun testi gerçekleştirmek için çok yer gerekmez anlamına gelir, kompakt bir boyutu vardır, ama aynı zamanda, önce kimyasal analiz ve karakterizasyon gerçekleştirmek için yeterli örnek hacmi kullanarak izin verir, sırasında ve test ten sonra. Nanomalzemeleri test ederken bu özellikle önemlidir. Bu video nanomalzemeler ve diğer zor maddelerin yosun toksisite testi için LEVITAT kullanımını gösterecektir.
Gösteri aşağıdaki dört adımdan oluşur. İlk olarak, LEVITATT bileşenleriaçıklayın. İkinci adım yosun büyüme medya için çözüm hazırlamaktır.
Ve üçüncü adım bir yosun toksisite testi gerçekleştirmek için nasıl prosedürü genel bir bakış vermektir. Son adım florometre ile alg biyokütle artış ölçmektir. LEVITATT odanın Sıcaklık kontrollü kabine yerleştirilebilir.
Bu pozlama boyunca istikrarlı sıcaklık sağlar. Kurulum test sırasında örneklerin döndürülmesine izin vermek için bir orbital shaker yerleştirilir. Test, dört mililitre maruzkalma ortamı içeren 20 mililitrelik sintillasyon şişelerinde yapılır.
Delinmiş delikli bir vida kapağı, pozlama sırasında hava ile CO2 değişimi sağlar. LED kaynağı iki plastik levha arasında sıkışmış ve her kasa nın merkezinde yer alır. Yerleşim homojen bir ışık alanı oluşturur ve örnekler arasındaki gölgeliği en aza indirir.
Her kasa kelepçelerle monte edilir ve en fazla beş numune tutabilir. Kompakt boyutu, denemeyi gerçekleştirmek için gereken alanı en aza indirir. Stok çözeltilerini hazırlamak için, her bileşiğin uygun miktarını tartın.
Stok çözeltisi yosun büyümesi için hayati çeşitli tuzlar oluşur. Uygun miktarda tuz tartıldığında, ultra saf su ile seyreltilir. Stok çözeltileri filtrasyon veya otoklavlama ile sterilize edilir.
Sterilizasyondan sonra, stok çözeltileri karanlıkta dört santigrat derecede saklanabilir. Bir dizi pozlama konsantrasyonu hazırlayın. Maruz kalma konsantrasyonları arasındaki faktör 3.2'yi geçmemelidir.
Her test konsantrasyonuna katlanarak büyüyen yosunların uygun hacmi eklenir. Son hücre yoğunluğu mililitre başına yaklaşık 10.000 alg hücresi olmalıdır. Ön kültürün, testin geçerlilik ölçütlerini karşılamak için katlanarak artması çok önemlidir.
Ölçüm şişeleri örneklemeden önce yosun ve bileşiğin homojen bir dağılımına izin verecek şekilde karıştırılır. Örnekler gagalara dökülür ve dört mililitre 20 mililitrelik sintiplasyon şişelerine pipetlenir. Sintillation şişeleri şimdi şapkalı vardır.
Pipet her konsantrasyondan 0.4 mililitre. Hücre duvarını bozmak ve sıvı faza klorofil serbest bırakmak için 1.6 mililitre aseton ekleyin. Her cam şişe depolama sırasında aseton buharlaşmasını önlemek için şimdi sıkıca yakındır.
Kapaklı sintillasyon şişeleri şimdi rastgele LEVITATT dağıtılır ve 72 saat boyunca kuluçka. İstenilen kurallara uygunluğu sağlamak için kuluçka nın başlangıcında ve sonundaki ışık yoğunluğunu ve sıcaklığı ölçün. Alt örnekleme, her sintillasyon şişesinden 0,4 mililitrelik borular cam şişelere pipetleme ile 24 saat aralıkta yapılır.
Hücre duvarını bozmak ve sıvı faza klorofil serbest bırakmak için 1.6 milyon aseton ekleyin. Aseton eklendikten sonra kapakları sıkıca vidalayın ve analiz ene kadar numuneleri karanlıkta bırakın. Test süresi boyunca elde edilen numunedeki biyokütleyi ölçmek için bir florometre kullanın.
Florometredeki ayarlar uyarma dalga boyu olarak 420 nanometre ve 671 nanometre emisyon dalga boyu olmalıdır. Her bir örnek üç kez ölçülür ve göreli değerler belirtilir. Florometreden gelen göreli değerler, daha fazla veri işleme için kullanılacak büyüme oranını hesaplamak için kullanılır.
Doğrusal olmayan bir regresyon eğrisini hesaplanan büyüme hızı verilerine sığdırmak için istatistiksel bir yazılım kullanın. Doğrusal olmayan bir regresyon eğrisi örneği, geçerli işlevin logistik bir logistik olabilir. İlişkili%95 güven aralığı model uyumu yanında gösterilir.
Ekotoksisite testinin sonucunu bildirmek için %10, 20 ve %50 verimsiz gibi düzenli olarak etkili konsantrasyon değerleri kullanılır. Sonuç olarak, LEVITATT uluslararası standart kurallara uygun düzenli kimyasalların alg toksisite testi için kompakt bir platform sağlar. Ayrıca, kurulum nanomalzemeler veya renkli maddeler gibi alg, ışık geçişi ile müdahale zor maddelerin test etmek için sağlam bir platform sağlar.
