כאשר חברה כימית רוצה לשים כימיקל חדש או חומר אחר לשוק, הם צריכים לספק נתונים מסדרה של בדיקות ecotoxicity. בדיקת האצות היא אחת משלוש בדיקות החובה שיש לבצע. מבחן האצות סובל מהעובדה שזה די מאתגר לבצע.
מסיבה זו, פיתחנו את פלטפורמת הבדיקה LEVITATT. ה- LEVITATT משתמש באור LED כדי למנוע בעיות עם ייצור חום מוגזם. יתר על כן, הוא מבטיח שדה אור אחיד.
יש לו גודל קומפקטי, כלומר אתה לא צריך הרבה מקום כדי לבצע את בדיקת האצות, אבל באותו זמן, זה מאפשר להשתמש בנפח מדגם מספיק כדי לבצע ניתוח כימי ואפיון לפני, במהלך, ואחרי הבדיקה. זה חשוב במיוחד כאשר אתה בודק ננו. וידאו זה ידגים את השימוש LEVITATT לבדיקת רעילות אצות של ננו וחומרים קשים אחרים.
ההפגנה מורכבת מארבעת השלבים הבאים. תחילה, תאר את רכיבי LEVITATT. השלב השני הוא להכין את הפתרון למדיית צמיחת אצות.
והצעד השלישי הוא לתת סקירה כללית של ההליך של איך לבצע בדיקת רעילות אצות. השלב האחרון הוא למדוד את הגידול ביומסה אצות על ידי פלואורמטר. ניתן להציב את ה-LEVITATT בארונות החדרים המבוקרים בטמפרטורה.
זה מאפשר טמפרטורה יציבה לאורך כל החשיפה. ההתקנה ממוקמת על שייקר מסלולית כדי לאפשר סיבוב של הדגימות במהלך הבדיקה. הבדיקה מתבצעת בבקבוקוני 20 מיליליטר עם חשיפה בינונית של ארבעה מיליליטר.
כובע בורג עם חור שנקדח מאפשר חילופי CO2 עם אוויר במהלך החשיפה. מקור ה-LED דחוק בין שני יריעות פלסטיק וממוקם במרכז כל מעטפת. המיקום יוצר שדה אור הומוגני וממזער את ההצללה בין הדגימות.
כל מעטפת מותקנת עם מלחציים והוא יכול להכיל עד חמש דגימות. הגודל הקומפקטי ממזער את השטח הדרוש לביצוע הניסוי. כדי להכין את פתרונות המניות, לשקול את הכמות המתאימה של כל מתחם.
פתרון המלאי מורכב ממלחים שונים החיוניים לצמיחת האצות. כאשר הכמות המתאימה של מלחים נשקלה, הם מדוללים במים טהורים במיוחד. פתרונות המלאי מעוכלים על ידי פילטרציה או שכפול אוטומטי.
לאחר עיקור, ניתן לאחסן את פתרונות המלאי בחושך בארבע מעלות צלזיוס. הכינו סדרה של ריכוזי חשיפה. הגורם בין ריכוזי החשיפה לא יעלה על 3.2.
הנפח המתאים של אצות הגדלות באופן אקספוננציאלי מתווסף לכל ריכוז בדיקה. צפיפות התאים הסופית צריכה להיות כ-10,000 תאי אצות למיליליטר. זה המפתח כי תרבות טרום גדל באופן אקספוננציאלי כדי למלא את הקריטריונים תוקף של המבחן.
בקבוקוני המדידה מעורבבים כדי לאפשר הפצה הומוגנית של אצות ותרכובת לפני הדגימה. הדגימות נשפכות לתוך בירות, וארבעה מיליליטר הוא pipetted לתוך בקבוקונים 20 מיליליטר נוצץ. בקבוקוני ההיסוס מכוסים כעת.
פיפטה 0.4 מיליליטר מכל ריכוז. הוסף אצטון 1.6 מיליליטר כדי לשבש את קיר התא ולשחרר את הכלורופיל לשלב הנוזלי. כל בקבוקון זכוכית קרוב כעת בחוזקה כדי למנוע אידוי של אצטון במהלך האחסון.
בקבוקוני ההברקה הכתומים מופצים כעת באופן אקראי ב-LEVITATT ומופצים במשך 72 שעות. למדוד את עוצמת האור ואת הטמפרטורה בתחילת וסוף הדגירה כדי להבטיח עמידה בהנחיות הרצויות. דגימת משנה נעשית במרווח של 24 שעות על ידי צינורות 0.4 מיליליטר מכל בקבוקוני נצנוץ לתוך בקבוקוני זכוכית.
הוסף 1.6 מיליון אצטון כדי לשבש את קיר התא ולשחרר את הכלורופיל לשלב הנוזלי. לאחר הוספת אצטון, בורג את המכסים בחוזקה ולהשאיר את הדגימות בחושך עד ניתוח. השתמש פלואורומטר לכמת את הביומסה המדגם שנרכש לאורך כל תקופת הבדיקה.
ההגדרות על הפלואורומטר צריך להיות 420 ננומטר כמו אורך גל העירור ואורך גל פליטה של 671 ננומטר. כל מדגם בודד נמדד שלוש פעמים, והערכים היחסיים נרשמים. הערכים היחסיים של הפלואורומטר משמשים לחישוב קצב הגדילה שישמש להמשך טיפול בנתונים.
השתמש בתוכנה סטטיסטית כדי להתאים עקומת רגרסיה לא ליניארית לנתונים מחושבים של קצב גידול. דוגמה לעקומה של רגרסיה לא ליניארית יכולה להיות פונקציה לוגיסטית-לוגיסטית של פונקציה בת קיימא. מרווח הזמן המשויך של 95%confidence מוצג לצד התאמה לדגם.
ערכי ריכוז יעילים באופן קבוע כגון 10, 20 ו- 50% לא יעילים משמשים לדיווח על התוצאה של בדיקת אקוטוקסיות. לסיכום, LEVITATT מספק פלטפורמה קומפקטית לבדיקת רעילות אצות של כימיקלים רגילים התואמים להנחיות סטנדרטיות בינלאומיות. יתר על כן, ההתקנה מספקת פלטפורמה חזקה לבדיקת חומרים קשים המפריעים למעבר האור לכיוון האצות, כגון ננו או חומרים צבעוניים.
