ابتكر الدكتور دارين فريد جهاز ESLP هذا ، ويستخدم تقنية وبرامج تهوية الضغط السلبي الحاصلة على براءة اختراع ، والتي لا يمكن رؤيتها في أي مكان آخر في مجال أبحاث ESLP. أظهر مختبرنا سابقا أن التهوية بالضغط السلبي تسبب إصابة أقل في الرئة أثناء ESLP مقارنة بالتهوية بالضغط الإيجابي. من المحتمل أن يكون هذا بسبب الآلية الفسيولوجية للتهوية ذات الضغط السلبي.
تم تصميم هذا الجهاز والبروتوكول لتمديد وقت الحفظ الآمن لرئتي المتبرع وتجديد الرئتين الهامشية وفقا لمعايير الزرع المقبولة. الجهاز نفسه سهل التشغيل للغاية. التحدي الأكبر هو إزالة رئتي الخنازير اليافعة جراحيا دون التسبب في أي إصابة.
إنها هشة للغاية مقارنة برئتي الإنسان البالغ. ابدأ بالحفاظ على حجم المد والجزر الزفيري البالغ 10 ملليلتر لكل كيلوغرام عن طريق زيادة ضغوط الذروة لتحقيق أقصى قدر من التوظيف السنخي. إجراء بضع القص خط الوسط.
استخدم الكي الكهربائي لشق الجلد والأنسجة تحت الجلد. تشريح بصراحة مرفقات الأنسجة الرخوة من الجدول الخلفي للعظم السفلي. استخدم منشار القص لتقسيم القص.
أدخل ضامنا القصيا وافتحه على مصراعيه. بعد إجراء استئصال القلب ، افتح غشاء الجنب المنصف وأزله بشكل ثنائي لكشف الرئتين. ثم قسم المرفقات الجنبية من الحجاب الحاجز باتجاه الفص الرئوي السفلي الأيسر ، باستخدام ضامد ديفر لتثبيت الحجاب الحاجز لأعلى.
الآن ، قسم الرباط الرئوي السفلي على اليسار واستمر في اتجاه الهيلوم. بعد ذلك ، قسم الوريد الأجوف السفلي والمرفقات الجنبية من الحجاب الحاجز ، ثم اسحب الحجاب الحاجز لأعلى باستخدام ضامد ديفر. قسم الرباط الرئوي السفلي على الجانب الأيمن واستمر صعودا نحو الهيلوم.
ثم قسم الوريد المرشح والأوعية المقوسة لفضح القصبة الهوائية. بعد تشريح الأنسجة المحيطة بالقصبة الهوائية بصراحة ، قم بتثبيت القصبة الهوائية باستخدام مشبك أنبوب عند الاستنشاق الأقصى ، مما يضمن أن حجم المد والجزر الزفيري هو 10 ملليلتر لكل كيلوغرام. قم بتحريك القصبة الهوائية وارفع جزء المشبك لأعلى لتوفير الجر الجراحي.
ثم تشريح القصبة الهوائية الخلفية من المريء باستخدام تشريح حاد مع مقص Metzenbaum الثقيل واليد الحرة. قسم أي مرفقات جنبية متبقية. انقل الشريان الأورطي أعلى وأسفل القصبة الهوائية اليسرى وأزل الرئتين من الصدر بجزء من الشريان الأورطي النازل.
بعد وزن الرئتين بالمشبك ، قم بتخزينها بسرعة في مبرد مليء بالثلج. ابدأ بإضافة 500 ملليلتر من خلايا الدم الحمراء المعبأة إلى دائرة التروية للوصول إلى الحجم النهائي البالغ 1.5 لتر من البيرفوسات. التقط صورا للرئتين لسجلات البيانات.
بالنسبة لخزعة الرئة ، قم بتطويق جزء سنتيمتر مكعب واحد بدون خياطة حريرية واربطه. ثم استأصل هذا الجزء المربوط ، باستخدام مقص لتحليل الأنسجة كما هو موضح في مخطوطة النص ، وقسم جزء الخزعة. بعد ذلك ، لتأمين محول الأنبوب 3/8 نصف بوصة إلى الشريان الرئوي الرئيسي ، أمسك الجوانب المقابلة للشريان الرئوي الرئيسي باستخدام ملقط أو طقطات.
بعد ذلك ، أدخل المحول مع جزء نصف بوصة في الشريان الرئوي الرئيسي وثبته في مكانه مع تثبيت المحول في موضعه في نفس الوقت باستخدام روابط حرير أو إيثيبوند صفرية. الآن ضع الرئتين في وضع ضعيف على غشاء دعم السيليكون وقم بتوصيلهما بجهاز ESLP. ضع مشبك أنبوب ثان على القصبة الهوائية بالقرب من موقع القصبة الهوائية.
بعد إزالة المشبك البعيد ، قم بتنبيب القصبة الهوائية بالأنبوب الرغامي وثبته في موضعه باستخدام رباطين مضغوطين. ثم قم بتثبيت خط التهوية باستخدام مشبك أنبوب قبل تحرير المشبك القريب من القصبة الهوائية. قم بتوصيل محول الشريان الرئوي بخط الشريان الرئوي.
بمجرد إزالة تهوية الشريان الرئوي الرئيسي، ابدأ وقت التروية. في صفحة الإعدادات ، انقر فوق بدء تشغيل السخان واضبط درجة الحرارة على 38 درجة مئوية. أدخل وزن الخنزير لحساب تدفق النتاج القلبي.
في الصفحة الرئيسية ، اضبط ضغط مجرى الهواء الإيجابي المستمر على 20 سم من الماء وانقر فوق بدء ضغط مجرى الهواء الإيجابي المستمر. عندما تبدأ التهوية ، قم بفك خط التهوية. بعد تصفير مستشعر الضغط الشرياني ، قم بتثبيت خط الشريان الرئوي فوق مستشعر الضغط باستخدام مشبك الأنبوب.
افتح المستشعر ، وانقر فوق صفر ضغط الشريان الرئوي وصفر تدفق الدم في صفحة الإعدادات وتأكد من أن القراءات صفر على الصفحة الرئيسية. أغلق محبس مستشعر الضغط لقراءة ضغط الخط. افتح الخط إلى قنية الشريان الرئوي.
حدد 10٪ من النتاج القلبي على الصفحة الرئيسية. انقر فوق العودة إلى دليل PA وقم بفك تثبيت الخط الرئوي. قم بتبديل محلول البيروسات في الغطاء العلوي قبل تثبيته في الجهاز لمنع تكوين التكثيف أثناء ESLP.
ارسم 10 ملليلتر من البيرفوسات لتحليل الطرد المركزي وارسم وقتا صفرا من غازات الدم الشرياني. ضع العينة على الثلج قبل الطرد المركزي. بمجرد أن يتم ترشيح الرئتين لمدة 10 دقائق ، قم بزيادة التدفق إلى 20٪ من النتاج القلبي.
عندما تصل درجة حرارة البيروسات إلى 32 درجة مئوية ، ثبت غطاء الحجرة في مكانه بمشابك لإنشاء ختم محكم الإغلاق. تأكد من وضع الرئتين على النحو الأمثل وإصلاح تسرب الهواء. مع تأمين الغطاء ، قم بتثبيت أنبوب التهوية قبل إيقاف ضغط مجرى الهواء الإيجابي المستمر.
في صفحة الإعدادات، حدد صفر ضغط داخل الصدر وضغط مجرى الهواء وتدفق الهواء. ثم يتم تأكيد القراءات على الصفحة الرئيسية. انقر فوق بدء CPAP قبل فك أنبوب التهوية.
اضبط معلمات التهوية المذكورة في المخطوطة النصية وانقر فوق اضغط لبدء التهوية لتنشيط التهوية بالضغط السلبي. قم بتوصيل أنبوب تهوية المنفذ الجانبي بالغرفة. خلال الأنفاس القليلة التالية ، حافظ على معلمات التهوية كما هو مذكور في مخطوطة النص.
بعد 10 دقائق من التروية ، قم بزيادة التدفق إلى 20٪ وبعد 20 دقيقة من التروية ، قم بزيادة التدفق إلى 30٪ من النتاج القلبي. أضف سكر العنب والأنسولين إلى النظام. تقييم وظائف الرئة ، باستخدام 50٪ من النتاج القلبي وغاز المسح المختلط غير المؤكسج على مدى خمس دقائق ، وفقا لتعليمات المخطوطة.
في كل ساعة فردية أثناء وضع الحفظ ، ارسم عينة 10 ملليلتر من perfusate لتحليلها في المستقبل. اسحب ملليلترا واحدا من عينة غازات الدم الشرياني قبل مزيل الأكسجين كل ساعة ومن منافذ مزيل الأكسجين قبل وبعد وضع التقييم بعد خمس دقائق من وضع التقييم. يمكن أن تتأثر الاتجاهات في متوسط ضغط الشريان الرئوي ، والامتثال الديناميكي ، ومقاومة الأوعية الدموية الرئوية على مدار 12 ساعة من التروية والتهوية بالبروتوكول التجريبي المحدد ESLP المستخدم.
يتم هنا توضيح اتجاه نموذجي لنسبة الضغط الجزئي للأكسجين الشرياني وجزء الأكسجين المستوحى عند نقاط زمنية للتقييم تبلغ خمس ساعات و 11 ساعة طوال تهوية الضغط السلبي خارج التروية الرئوية في الموقع. تشكيل الوذمة هو مؤشر مهم آخر للالتهاب المرتبط بنفاذية البطانة ، مما يدل على زيادة الوزن النموذجية بنسبة 30 ٪ في نهاية 12 ساعة من التهوية ذات الضغط السلبي خارج التروية الرئوية خارج الموقع. يعمل perfusate كمؤشر بديل لحالة الرئة العامة.
لذلك ، يوفر تحليل غازات الدم من perfusate معلومات شاملة عن الحالة الأيضية للرئتين. أثناء نموذج تقييم ESLP ، والذي يحدث في ثلاث وخمس وسبع وتسع و 11 ساعة خلال 12 ساعة ، لوحظ اتجاه تصاعدي في الضغط الجزئي الشرياني الأيسر للأكسجين. من المهم جدا أن تكون لطيفا قدر الإمكان عند إزالة الرئتين جراحيا وأن تتحرك أيضا بسرعة وكفاءة.
أدى إنشاء هذا الجهاز والبروتوكول والمختبر إلى تجربة سريرية ناجحة والعديد من الاكتشافات التي تطيل الحفاظ على رئتي المتبرع وتجديدها.
