هذه التقنية مفيدة في توصيف فسيولوجيا الرئة وعلم الأمراض عن طريق قياس الأنشطة الأيضية ووظيفة الجهاز التنفسي. يسمح نظام تغلغل الرئة المعزول بالعمل مع جهاز وظيفي كامل مما يجعل من الممكن دراسة وظيفة فسيولوجية مستمرة مع إعادة التهوية والتشويش. يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة في توصيف القدرات غير التنفسية للأنسجة الرئوية ، مثل النشاط الأيضي وأنشطة المكونات المختلفة مثل الضامة السنفية والأنسجة البطانية.
لتبدأ، وتجميع جهاز العمل، وضمان أنه يحتوي على عمود الصلب الرئيسي التي شنت على لوحة قاعدة عقد الصدر الاصطناعي مع مقياس التنفس ومحول الوزن تقع فوق العمود وخلف لفائف التسخين مع فخ فقاعة. توصيل جميع المحولات إلى وحدة الالكترونيات المركزية وإعداد نظام التهوية إلى جانب الجهاز. بعد حلق الموقع الجراحي للأرانب المخدرة ، قم بعمل شق خط وسطي بطني يتراوح بين ثلاثة وخمسة سنتيمترات من عظم القص حتى الرقبة.
استخدام مقص التشغيل لقطع الأمامي 2/3 من القصبة الهوائية بين حلقات الغضاريف. أدخل قنية القصبة الهوائية عيار خمسة ملليمترات من خلال الغشاء الليفي القصبي وإصلاح القنية بعناية مع خياطة حريرية 4-0. ضع ملقط أو ملاقط تحت القصبة الهوائية لضمان عدم انحناء القنية ضد القصبة الهوائية.
قم بتوصيل مضخة التنفس بقنية القصبة الهوائية، وحدد حجم المد والجزر عند 10 ملليلترات للكيلوغرام الواحد، وابدأ التهوية بسرعة بعد استئصال القصبة الهوائية وقبل فتح الصدر للحفاظ على الضغط الإيجابي في الرئتين لمنع انهيار الرئة أثناء الجراحة. للوصول إلى تجويف الصدر، استخدم مشرط أو مقص لفتح جدار الصدر وإجراء استئصال القص الوسيط حتى الثلث العلوي من الصدر. عقد نصفي الصدر مفتوحة مع اثنين من السحب.
توطين الخضار متفوقة وأدنى كافا والعلامة لهم مع المواضيع. قبل إستئصال الحيوان، حدد البطين الأيمن وحقن 1000 وحدة دولية لكل كيلوغرام من الهيبارين. مباشرة بعد الحقن، ligate فينا كافا متفوقة وأدنى مع الموضوع قبل حلقة.
قطع من خلال ستيرني manubrium لتمديد القص المتوسط نحو قنية القصبة الهوائية، والإفراج عن القصبة الهوائية على كلا الجانبين من ربط الأنسجة. الآن استئصال القصبة الهوائية فوق قنية القصبة الهوائية وسحب بلطف حتى القنية في محور الجمجمة / caudal. بعد الاستئصال لحصاد كتلة القلب والرئة، استخدم تشريح الرقمية المباشرة أو مقص الربيع لفصل النسيج الضام وإزالة الرئتين من الصدر.
بعد ذلك ، تشريح الأوعية والمريء. ارفع الرئتين المعزولتين من الصدر وضع الرئتين بعناية فوق شاش معقم على طبق بيتري. لمنع atelectasis، تهوية الرئتين باستخدام التهوية الضغط الإيجابي مع ضغط الزواية نهاية إيجابية تعيين في سنتيمترين من عمود الماء.
قطع البطينين قبالة القلب على مستوى الأخدود البطين. بعد فتح البطينين، أدخل قنية الشريان الرئوي عبر الشريان الرئوي الأيمن وقنية الأذين الأيسر من خلال الصمام التاجي إلى الأذين الأيسر. إصلاح cannulae مع خياطة الحرير 4-0 بما في ذلك الأنسجة المحيطة بها في أربطة الشريان الرئوي والأذين الأيسر لتجنب التفكك الهيكلي.
حقن 250 ملليلتر من محلول متساوي التوتر المالحة من خلال القنية الشريانية لطرد الدم المتبقي من السرير الوعائي. لإعداد التشوه، ضع الرئتين المعزولتين بعناية في غرفة الرئة. إرفاق القصبة الهوائية إلى محول على غطاء الغرفة وربط الأوعية المعلبة إلى نظام التخثر، ثم إغلاق وتأمين الغرفة مع القفل الدوار.
بعد ذلك، نعلق غطاء الغرفة والتبديل على stopcock للتحول من التهوية الضغط الإيجابي إلى السلبي. Perfuse الرئتين مع 200 ملليلتر من perfusate الاصطناعي خالية من الدم بدءا من تدفق في ثلاثة ملليلتر في الدقيقة الواحدة للكيلوغرام الواحد، ثم بطء تكثيف تدفق أكثر من خمس دقائق إلى خمسة ملليلتر في الدقيقة الواحدة للكيلوغرام الواحد. وللدقائق الخمس التالية، اسمح للتدفق بالوصول إلى ثمانية ملليلترات في الدقيقة للكيلوغرام الواحد، يليه تدفق أقصى قدره 10 ملليلترات في الدقيقة للكيلوغرام لمدة خمس دقائق.
تهوية الرئتين مع الهواء المرطب على تردد 30 نبضة في الدقيقة الواحدة، وحجم المد والجزر من 10 ملليلتر للكيلوغرام الواحد وضغط انتهاء الصلاحية من سنتيمترين من عمود الماء. لتحقيق المنطقة ثلاثة شروط، انتظر لمدة 10 إلى 15 دقيقة للحصول على توازن يتميز بحالة الجاذبية ISO، وضمان أن الضغط الوريدي مستقر في جميع أنحاء السجل. تأكد من أن وزن الرئة لا يزال ثابتا وأن تكون الضغوط الشريانية والأصطنائية اليسرى مستقرة لتحقيق المنطقة الثالثة من الشروط لفتح أكبر عدد ممكن من الأوعية الرئوية والحفاظ على محتوى السرير الأوعية الدموية الدقيقة أثناء التجربة.
للتحكم الإلكتروني ومعالجة الإشارات، تأكد من أن تدفق الجهاز التنفسي، وتغيرات الوزن، وضغط الأوعية الدموية الدقيقة، وحجم المد والجزر، ومقاومة الأوعية الدموية، من بين أمور أخرى، مسجلة على وحدة إلكترونيات مركزية متعددة تدمج الإشارات القادمة من المحولات وتعرضها على نظام التقييم. تم تقييم تركيز 5-HT وأوكسيديز أحادي الأمين المشاركة في عملية التمثيل الغذائي للرئة و نفاذية الأوعية الدموية. بلغ تركيز 5-HT وأوكسيديز أحادي الأمين ذروته بعد 15 دقيقة من الحفظ ثم انخفض خلال الساعات الست التالية.
بعد ذلك ، أظهرت مستويات التشوه زيادة غير ذات دلالة إحصائية تصل إلى 24 ساعة. وأشارت معدلات إطلاق 5-HT وأوكسيديز أحادي الأمين إلى أنه خلال الساعة الأولى من الحفظ ، ارتفعت مستويات 5-HT أعلى من أوكسيداز مونوامين وانخفضت في غضون ست ساعات بعد استعادتها من قبل الخلايا البطانية والصفائح الدموية ، وكذلك استقلاب أحادي الأمين بوساطة الأوكسيديز. وازداد نشاط الاندوبتيداز المحايد في تسع ساعات ثم انخفض وظل مستقرا خلال 12 إلى 24 ساعة.
انخفض نشاط إنزيم تحويل الأنجيوتنسين بعد أربع ساعات ، ثم زاد وظل مستقرا خلال الوقت حتى 24 ساعة. تم تقييم تأثير الحفاظ الرئوي في نفاذية الشعرية لمدة 24 ساعة ، مما يشير إلى أن الرئة المتغلغلة عانت من زيادة تدريجية في معامل الترشيح الشعري. تم فحص تأثير الإضافات المختلفة في نفاذية الشعرية لنظام تغلغل الرئة المعزول في ظل ظروف متنوعة ولوحظت زيادة قصوى في نفاذية الأتروبين.
أهم مناورة هي وضع الرئتين بشكل صحيح في غرفة الرئة وربط الأوعية المعلبة بنظام التخثر. تمتد آثار هذه التقنية نحو التفاعلات بين المواد الدورة الدموية وآثار المواد المستنشقة أو المتغلغلة كما هو الحال في اختبار الأدوية وأمراض الرئة المختلفة.
