طريقة بسيطة معدلة لتحريض احتشاء عضلة القلب في الفئران

يقدم هذا التقرير نهجا فريدا لتحريض احتشاء عضلة القلب في الفئران. الطريقة الحالية سهلة وموفرة للوقت وتستخدم الأنابيب والمعدات الجراحية الموجودة بسهولة في معظم المختبرات. يوفر إنشاء نماذج احتشاء عضلة القلب فرضية للتحقيق في الآليات السابقة لإعادة تشكيل ما بعد MI ، وتنوع العلاجات الجديدة.

ضع كريم مزيل الشعر على صندوق الماوس ، وانتظر لمدة دقيقة واحدة. ثم امسح بلطف كريم مزيل الشعر والشعر بشاش مبلل. تأمين الماوس على منصة الجراحة في موقف ضعيف.

تطهير المنطقة الجراحية كما هو موضح في النص. ثم ضع ثنى معقم حول المنطقة المطهرة. قم بعمل قطع جلد 0.5 سم على طول الخط الذي يربط بين الخنجري والإبط ، وافصل بصراحة بين العضلات الصدرية الكبرى والصدرية الصغيرة باستخدام الملقط.

افتح المساحة الوربية الرابعة باستخدام مرقئ البعوض الصغير. أخرج القلب عن طريق دفعه نحو الفضاء الوربي الرابع بإصبع السبابة في اليد اليسرى. تأمين القلب باليد اليسرى وربط الفرع الأمامي الأيسر النازل مع خياطة 6/0 ثلاثة ملليمترات من أصله.

ضع القلب مرة أخرى في التجويف الصدري بسرعة. قم بإخلاء الهواء من التجويف الصدري عن طريق الضغط برفق على تجويف الصدر. لإدارة الألم بعد الجراحة ، حقن البوبرينورفين تحت الجلد كل أربع إلى ست ساعات لمدة تصل إلى اثنتين وسبعين ساعة بعد الجراحة.

ضع الماوس على وسادة التدفئة للتعافي من التخدير. قم بتأمين الماوس الرحيم على منصة الجراحة في وضع الاستلقاء. قم بعمل شق بطني من حوالي ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات في الجزء العلوي من البطن.

قطع الأضلاع من كلا جانبي تجويف الصدر ، ثم قم بإزالة الحجاب الحاجز. قم ببث القلب ب 10 ملليلتر من البرد أربع درجات مئوية 1X PBS من خلال الحقن داخل البطيني. ثم اجمع القلب عن طريق قطع جذر الأبهر ، وتخزينه على الفور عند 80 درجة مئوية تحت الصفر.

قطع القلب المتجمد إلى أقسام بسمك ملليمتر واحد على الثلج باستخدام شفرات الحلاقة. احتضان شرائح القلب المحضرة في محلول TTC 1٪ مذاب في واحد 1X PBS عند 37 درجة مئوية لمدة 10 إلى 15 دقيقة. ثم قم بتصوير الشرائح باستخدام كاميرا رقمية.

بعد ربط الشريان التاجي ، أشار تحليل تلطيخ TTC إلى تحريض ناجح لاحتشاء عضلة القلب ، والتغيرات الزمنية لحجم ندبة ما بعد MI. أظهرت نتائج تحليل البقاء على قيد الحياة وفيات علنية في غضون سبعة أيام بعد MI في ذكور وإناث الفئران C57BL / 6J. كان تمزق البطين سببا شائعا للوفاة بعد MI.

أظهر تقييم تخطيط صدى القلب بعد MI تحريضا ناجحا لضعف الانقباض وإعادة تشكيل البطين. عند محاولة إخراج القلب ، لا تضغط على تجويف الصدر أولا ، وبعد مقاومتنا ، يشير إلى الحاجة إلى ضبط الاتجاه مقابل الثناء المرجح. بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء الحقن داخل عضلة القلب للنواقل الفيروسية أو الخلايا لاختبار فعالية العلاجات الجينية أو العلاجات الخلوية في مسائل أمراض القلب.