ستسمح لنا هذه الطريقة بتقييم دور تجويف التامور الذي يحيط بالقلب ومحتوياته في إصلاح القلب بعد احتشاء عضلة القلب. بالمقارنة مع طرق ربط الشريان التاجي التقليدية لنمذجة احتشاء عضلة القلب ، تحافظ طريقتنا على تجويف التامور سليما ، مما يسمح بتحديد المحتويات وتتبع أدوارها بعد إصابة نقص تروية القلب. سيوفر فهم مساهمة تجويف التامور واستجابة إصابة القلب رؤى مهمة حول الاستراتيجيات العلاجية التي تستهدف التأمور لتحسين شفاء القلب.
لتبدأ بالتخدير اللاحق ، قم بتقييد مخالب الفأر ووضعها على طاولة الجراحة. بعد تحضير الفأر للجراحة كما هو موضح في المخطوطة ، قم بتهوية الفأر بنسبة 2٪ إيزوفلوران و 100٪ أكسجين كغاز حامل باستخدام جهاز تهوية تجاري. ثم اضبط معدل 110 نفسا في الدقيقة ، وحجم المد والجزر 250 ميكرولتر ، وضغط الزفير النهائي الإيجابي لأربعة ملليمترات من الزئبق.
لف الماوس بنسبة 30٪ على جانبه الأيمن لوضع الجانب الأيسر من الصدر لإجراء الجراحة. ثم قم بعمل شق جانبي من 2 إلى 3 سنتيمترات في جلد الصدر لتصور عضلات الصدر على الجانب الأيسر. قم بعمل شق سنتيمتر واحد من خط الوسط إلى الخارج لقطع الصدر الكبير والثانوي.
تجنب النزيف المفرط في جميع أنحاء الكي من الأوعية النزيف. تصور العضلات الوربية بين الضلعين الثالث والرابع. قم بعمل شق بطول سنتيمترين في العضلة الوربية اليسرى لإدخال الهواء في تجويف الصدر والسماح للقلب والرئتين بالسقوط بعيدا عن الشق.
لشق الوربي دون نزيف ، أوقف جهاز التنفس الصناعي مؤقتا وقم بتوسيع الفتحة باستخدام جهاز الكي. باستخدام المبعدات ، اسحب الأضلاع لفضح القلب. ثم راقب التامور والقلب الأساسي تحت مجهر ستيريو.
ضع الملقط برفق على سطح التأمور لتقليل التأمور وحركة القلب الكامنة. معلم بصريا الشريان التاجي LAD من خلال تتبع ظهوره تحت الزائدة اليسرى. باستخدام محرك الإبرة الدقيقة ، قم بتوجيه خياطة مناسبة من خلال التامور تحت LAD.
راقب الخيط الناشئ على الجانب الآخر من LAD والتامور. يمثل نموذج الربط الدائم ، اربط الخيط لتقييد تدفق الدم عبر الشريان التاجي ، مما يجعل ابيضاض الجزء الأمامي من البطين الأيسر مرئيا. ثم تقليم خياطة الزائدة بمساعدة مقص.
توفير حقن الصيانة من مسكن تحت الجلد كل 12 ساعة لمدة 72 ساعة بعد الجراحة. بعد تقليل الأيزوفلوران إلى 1٪ ، قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران مع الحفاظ على التهوية بالأكسجين. بمجرد أن يظهر الحيوان علامات التنفس ، قم بإزالة أنبوب القصبة الهوائية قياس 23 من الفم ووضع الفأر في قفص الاسترداد لمراقبة استئناف التنفس.
اسمح للماوس بالتعافي في القفص مع وضع جزء من القفص على وسادة تدفئة لتوفير مصدر حرارة خارجي. راقب الحالة الصحية للفأر يوميا لمدة سبعة أيام من خلال تقييم الشقوق وعدم ارتياح الحيوان. إذا لزم الأمر ، قم بتطبيق المضادات الحيوية للتعافي الناجح بعد الجراحة الغازية.
بعد الحفاظ على الماوس تحت التخدير العام بالأكسجين ، ضع الماوس في وضع ضعيف على منصة مرحلة ساخنة وإرفاق الكفوف بأسلاك تخطيط القلب. ثم غضب الصدر. الحصول على صور ECG باستخدام مسبار محول الطاقة وهلام الاتصال وتحليلها باستخدام البرنامج المناسب.
بعد تقييم تخطيط القلب غير الباضع ، قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران وأعد الماوس إلى القفص. إصلاح القلب في 10 ٪ الفورمالين لمدة 24 ساعة على الأقل. قطع العينة باستخدام شفرة حلاقة مستقيمة من خلال البطين الأيمن والحاجز بين البطينين والبطين الأيسر ، مما يضمن مرور الشق عبر مركز منطقة الاحتشاء.
ثم يقوم البارافين بتضمين عينات الأنسجة. ثم يتم وضع المقاطع المقطوعة في كاسيت متصاعد لمزيد من تضمين البارافين والتقسيم اللاحق إلى أقسام بسمك خمسة ميكرومتر. بعد وضع أقسام الأنسجة على الشرائح ، قم بإزالة البارافين باستخدام التولوين وغسول الكحول المتدرج بالماء منزوع الأيونات.
ثم إعادة ترطيب. بعد ذلك ، قم بتلطيخ القسم ب 0.1٪ أحمر سيريوس في حمض البكريك لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. اغسل القسم بحمض الخليك 0.5٪ لمدة ثلاث دقائق متبوعا بالشطف بنسبة 70٪ إيثانول لمدة دقيقة واحدة.
قم بتجفيف القسم باستخدام الترتيب العكسي للغسيل بتركيزات الإيثانول المتزايدة والمتدرجة قبل التركيب للتقييم المجهري. تم تقييم تحريض احتشاء عضلة القلب الناجح مع ربط الشريان التاجي المعدل من خلال فحص المعلمات الوظيفية للقلب والسمات الهيكلية. بالنسبة للوظيفة ، تم تقييم انخفاض جزء طرد البطين الأيسر عن طريق تخطيط صدى القلب في غضون ثلاثة إلى أربعة أسابيع من احتشاء عضلة القلب بعد ذلك.
أظهر التلوين النسيجي أن التغيرات الوظيفية كانت مصحوبة بتليف كبير في جدار البطين الأيسر ، والذي تم تأكيده بشكل أكبر من خلال القياس الكمي للتليف الملون باللون الأحمر picrosirius في المقاطع العرضية للقلب في أربعة أسابيع بعد الاحتشاء مع نماذج ربط التامور التاجية المضطربة أو السليمة. قدم الجمع بين طريقة وضع العلامات على حبة الفلورسنت مع تحليل قياس التدفق الخلوي نهجا لتتبع الضامة التامورية الإيجابية Gata6 المقيمة. الأهم من ذلك ، تم الكشف عن القليل من العلامات أو عدم وجود علامات في القلب أو الدم.
بعد احتشاء عضلة القلب ، يمكن تتبع نقل الخلايا عن طريق قياس التدفق الخلوي والتصوير. يظهر القياس الكمي للخرزة الفلورية المسماة خلايا التامور النخاعية مع أو بدون احتشاء عضلة القلب. يجب توخي الحذر لمنع تعطيل أو تمزق التامور الرقيق عن غير قصد أثناء العملية.
يمكن دمج هذه الطريقة مع تتبع النسب الخلوي أو الحصار المستجيب ، مما سيسمح بتتبع وتحديد تأثير مكون التامور على استجابة الشفاء في القلب المحتشى. لقد حددنا أن تجويف التامور يحمي القلب بعد الإصابة ، والذي يتم بوساطة جزئية بواسطة بلاعم التامور المقيمة. يفتح هذا النهج مجالا بحثيا جديدا لأمراض القلب والأوعية الدموية.
