Ce rapport présente une approche unique pour l’induction de l’infarctus du myocarde chez la souris. La méthode actuelle est simple, permet de gagner du temps et utilise les tubes chirurgicaux et l’équipement que l’on trouve facilement dans la plupart des laboratoires. L’établissement de modèles d’infarctus du myocarde fournit une prémisse pour étudier les mécanismes passés du remodelage post-IM et la variation de nouvelles thérapies.
Appliquez la crème dépilatoire sur la poitrine de la souris et attendez une minute. Essuyez ensuite délicatement la crème dépilatoire et les cheveux avec de la gaze humide. Fixez la souris sur une plate-forme chirurgicale en position couchée sur le dos.
Désinfectez la zone chirurgicale comme décrit dans le texte. Placez ensuite un champ stérile autour de la zone désinfectée. Faites une incision cutanée de 0,5 centimètre le long de la ligne reliant le xiphoïde et l’aisselle, et séparez carrément les muscles pectoraux majeurs et pectoraux mineurs à l’aide de pinces.
Ouvrez le quatrième espace intercostal à l’aide d’un hémostat Micro-Mosquito. Extériorisez le cœur en le poussant vers le quatrième espace intercostal avec l’index de la main gauche. Fixez le cœur avec la main gauche et ligaturez la branche descendante antérieure gauche avec une suture 6/0 à trois millimètres de son origine.
Replacez rapidement le cœur dans la cavité thoracique. Évacuez l’air de la cavité thoracique en appuyant doucement sur la cavité thoracique. Pour la gestion de la douleur postopératoire, injectez de la buprénorphine par voie sous-cutanée toutes les quatre à six heures jusqu’à soixante-douze heures après la chirurgie.
Placez la souris sur un coussin chauffant pour récupérer de l’anesthésie. Fixez la souris euthanasiée sur la plate-forme chirurgicale en position couchée. Faites une incision ventrale d’environ trois à quatre centimètres dans la partie supérieure de l’abdomen.
Coupez les côtes des deux côtés de la cavité thorax, puis retirez le diaphragme. Perfuser le cœur avec 10 millilitres de PBS froid à quatre degrés Celsius 1X par injection intraventriculaire. Ensuite, collectez le cœur en coupant la racine aortique et en le stockant immédiatement à moins 80 degrés Celsius.
Coupez le cœur congelé en sections d’un millimètre d’épaisseur sur de la glace à l’aide de lames de rasoir. Incuber les tranches de cœur préparées dans une solution à 1 % TTC dissoute dans un PBS 1X à 37 degrés Celsius pendant 10 à 15 minutes. Photographiez ensuite les tranches à l’aide d’un appareil photo numérique.
Après la ligature de l’artère coronaire, l’analyse de coloration TTC a indiqué une induction réussie de l’infarctus du myocarde et des changements temporels de la taille de la cicatrice post-IM. Les résultats de l’analyse de survie ont montré une mortalité manifeste dans les sept jours suivant l’infarctus du myocarde chez les souris mâles et femelles C57BL/6J. La rupture ventriculaire était une cause fréquente de décès après l’IM.
L’évaluation échocardiographique post-IM a démontré l’induction réussie d’un dysfonctionnement contractile et d’un remodelage ventriculaire. Lorsque vous essayez d’extérioriser le cœur, n’appuyez pas d’abord sur la cavité thoracique et, en suivant notre résistance, indique un besoin d’ajuster la direction par rapport à la louange pondérée. À la suite de cette procédure, une injection intramyocardique de vecteurs ou de cellules virales peut être réalisée pour tester l’efficacité des thérapies géniques ou des thérapies cellulaires en matière de maladies cardiaques.
