تحديد وتحليل السلف العضلي في الجسم الحي أثناء إصابة العضلات الهيكلية الحادة عن طريق قياس الكتلة الخلوية أحادية الخلية عالية الأبعاد

يبحث بحثنا في الآليات الجزيئية الكامنة وراء خلل الخلايا الجذعية في الشيخوخة والمرض. هدفنا هو فهم كيفية تفاعل الخلايا الجذعية والسلفية مع الخلايا الأخرى في البيئة المكروية للعضلات لتحقيق التجدد الفعال. نحن ندرس أيضا ما إذا كان اتصال الخلايا القاحلة يؤثر على وظيفة الخلايا الجذعية العضلية في الشيخوخة والمرض.

كان أحد العوائق الرئيسية أمام التحقيق في اتصال الخلايا الخلوية داخل مكانة الخلايا الجذعية هو الافتقار إلى التقنيات التي توفر دقة خلية واحدة. يسمح قياس الكتلة الخلوية أحادية الخلية بالتحليل الكمي عالي الإنتاجية في وقت واحد على أنواع متعددة من الخلايا والأنماط الظاهرية الجزيئية في الأنسجة المعقدة. يتيح بروتوكولنا التنقية والتنميط العميق للخلايا الجذعية النادرة والنسل أثناء تجديد العضلات باستخدام الأجسام المضادة لعلامات سطح الخلية وعوامل النسخ العضلي.

تساعدنا دراسة هذه الخلايا على فهم كيفية التحكم في مصير الخلايا الجذعية العضلية ، والكشف عن الشبكات التي تدفع انتقالات حالة الخلية التي تقوم بالتجديد الفعال. يعد قياس ما يصل إلى 50 سطح خلية وبروتين داخل الخلايا في وقت واحد على مستوى خلية واحدة نهجا قيما للتحقيق في الوظيفة الخلوية في الأنسجة العضلية. يمكن لهذه التقنية تحديد التوقيعات الجزيئية الفريدة والكشف عن آليات جديدة لخلل الخلايا الجذعية العضلية في الشيخوخة والمرض.

يسمح هذا البروتوكول بالتحقيق في كيفية تأثير انتقال حالة الخلية على تجديد الأنسجة في الصحة والمرض. إن توقيع الخلايا الجذعية المنشطة الذي نقدمه هنا يتيح إجراء دراسات على هدوء الخلايا الجذعية. لم تكن ممكنة من قبل.

يمكننا الآن تنقية الخلايا الجذعية المنشطة ، CD98 High ، CD44 High ، بناء على علامة سطح الخلية فقط ، ودراسة لأول مرة ، كيف تعود إلى السكون.