comparative-vivo-study-gp96-adjuvanticity-frog-xenopus

Comparative <em>in vivo</em> Study of gp96 Adjuvanticity in the Frog <em>Xenopus laevis</em>

We have developed in the amphibian Xenopus laevis a unique non-mammalian model to study the ability of certain heat shock proteins (hsps) such as gp96 to ...

University of Rochester

Fibronectins &#x662F;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7CD6;&#xFF0C;&#x5C06;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5206;&#x53D1;&#x548C;&#x4E0D;&#x6EB6;&#xFF0C;multimeric &#x5230;&#x5168;&#x8EAB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E2D;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x627E;&#x5230;&#x3002;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; fibronectins &#x88AB;&#x805A;&#x5408;&#x6210;&#x4E0D;&#x6EB6;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28; (ECM) &#x7EA4;&#x7EF4;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;ECM &#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x529B;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x62C9;&#x4F38;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6784;&#x9020; &#xFF1B;&#x7ED3;&#x624E;&#x672F;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4EC5;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x89E6;&#x53D1;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6709;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E; ECM &#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x90E8;&#x5206;&#x4ECB;&#x5BFC; matricryptic &#x809D;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5185;&#x9996;&#x6B21; III1 &#x91CD;&#x590D; &#xFF08;FNIII1&#xFF09;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5230;&#x7FA4;&#x96C6;&#x7684;&#x78B1;&#x6027;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x3001; Arg613&#x3001; Trp614&#x3001; Arg615 &#x548C; Lys617 FNIII1 &#x7684;&#x809D;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x5B9A;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6765;&#x6A21;&#x4EFF; ECM &#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x6F14;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x4E5F;&#x662F;&#x523A;&#x6FC0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x65E5;&#x76CA;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7D27;&#x5BC6;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x5F53;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB; submaximally &#x4F20;&#x64AD; ECM &#x86CB;&#x767D;&#x6D82;&#x5C42;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x65F6;&#x5019;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4E0E;&#x809D;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x94FA;&#x5C55;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x6B63;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6700;&#x5927;&#x9650;&#x5EA6;&#x5730;&#x4F20;&#x64AD;&#x4E0E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5173;&#x7CFB;&#x6216;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECD;&#x5BF9;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x77E9;&#x9635;&#x6A21;&#x62DF;&#x4E0E;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x53D8;&#x5316;&#x4E0D;&#x6240;&#x9700;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; FNIII1 &#x7684; matricryptic &#x7F51;&#x7AD9;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4F5C;&#x51FA;&#x7B54;&#x590D;&#x3002;

&#x809D;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x6027;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x5185;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;, &#x8BC6;&#x522B;&#x91CD;&#x590D; III1&#xFF1A; &#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6269;&#x5C55;&#x548C;&#x589E;&#x957F;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x975E;&#x7ECF;&#x5178; MHC &#x7C7B; Ib &#xFF08;Ib &#x7C7B;&#xFF09; &#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x6240;&#x6709;&#x5939;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x4EA7;&#x54C1;&#x5047;&#x8BBE;&#x8981;&#x6709;&#x80DE;&#x5185;&#x5E94;&#x529B;&#x548C;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x6307;&#x6807;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53EF;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7ECF;&#x5178; MHC &#x7C7B; (class Ia) Ia &#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x8BC6;&#x522B;-&#x4F4E;-&#x6216;&#x8D1F;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x4E92;&#x52A8;&#x4E0E; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x548C;/&#x6216;&#x975E; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6291;&#x5236;&#x6216;&#x89E6;&#x53D1;&#x53D7;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; NK &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684;&#x9752;&#x86D9;&#xFF0C;&#x5206;&#x5B50;&#x4F34;&#x4FA3; gp96 &#x9488;&#x5BF9;&#x53EF;&#x79FB;&#x690D;&#x7684;&#x80F8;&#x817A;&#x80BF;&#x7624;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x6D89;&#x53CA;&#x7279;&#x5B9A;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x53E4;&#x5178;&#x7C7B;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1A;&#x76D1;&#x7763;&#x4E0D;&#x53D7;&#x9650;&#x5236;&#x5730; CD8 + CTL (CCU CTL) &#x5F3A;&#x6548;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94; (15/0)&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8868;&#x793A; Ia &#x7C7B;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#x975E;&#x7ECF;&#x5178;&#x7C7B; Ib &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1; (XNC) &#x53C2;&#x4E0E;&#x4ECB;&#x5BFC; gp96 CCU CTL &#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8C03;&#x67E5;&#x7C7B; Ib &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x751F;&#x6210; ectothermic &#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x3001; &#x7A33;&#x5B9A;&#x80BF;&#x7624; transfectants &#x8868;&#x793A;&#x77ED;&#x53D1;&#x5939; RNA (shRNA) &#x76F4;&#x63A5;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6216;&#x8005; XNC &#x6216; beta2m&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x7C7B; Ib &#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E2D;&#x7684;&#x9996;&#x6B21;&#x3002;15/0 Transfectants &#x4E24;&#x79CD;&#x66F4;&#x8010; CCU CTL &#x6740;&#x5BB3;&#xFF0C;&#x66F4;&#x81F4;&#x7624;&#x6027;&#x548C;&#x66F4;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684; NK &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6740;&#x4F24;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x517B;&#x62A4;&#x7C7B; Ib &#x53C2;&#x4E0E;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x7684; CD8 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x5E94;&#x975E;&#x7ECF;&#x5178; MHC &#x7C7B; Ib &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;

Nonclassical MHC class Ib (class Ib) genes are found in all jawed vertebrates, and their products are hypothesized to be indicators of intracellular stress and malignancy. They may be involved in immune recognition of classical MHC class Ia (class Ia)-low or -negative tumor cells through their interaction with T cell receptors and/or non-T cell inhibitory or triggering receptors expressed by NK cells and T cells. In the frog Xenopus, the molecular chaperone gp96 mediates a potent immune response involving antigen-specific classical class Ia-unrestricted CD8+ CTL (CCU-CTL) against a transplantable thymic tumor (15/0) that does not express class Ia molecules. We hypothesized that Xenopus nonclassical class Ib gene products (XNC) are involved in gp96-mediated CCU-CTL anti-tumor responses. To investigate the involvement of class Ib gene products in Xenopus anti-tumor responses, we generated, for the first time in ectothermic vertebrates, stable tumor transfectants expressing short hairpin RNA (shRNA) to silence either XNC directly or beta2m to prevent class Ib surface expression. Both types of 15/0 transfectants are more resistant to CCU-CTL killing, more tumorigenic and more susceptible to NK-like cell killing. This study provides in vitro and in vivo evidence of the evolutionary conservation of class Ib involvement in anti-tumor CD8+ T cell responses.

Involvement of nonclassical MHC class Ib molecules in heat shock protein-mediated anti-tumor responses.

Non classiques du CMH de classe Ib (classe Ib) g&#xE8;nes se trouvent dans tous les vert&#xE9;br&#xE9;s &#xE0; m&#xE2;choires, et leurs produits sont &#xE9;mis l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se d&#x26;#39;&#xEA;tre des indicateurs de stress intracellulaire et la malignit&#xE9;. Ils peuvent &#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans la reconnaissance immunitaire de la musique classique du CMH de classe Ia (classe Ia)-faible ou n&#xE9;gatif des cellules tumorales par le biais de leur interaction avec les r&#xE9;cepteurs cellulaires T et / ou inhibiteurs des cellules non-T ou des r&#xE9;cepteurs de d&#xE9;clenchement exprim&#xE9;es par les cellules NK et les lymphocytes T. Dans le Xenopus grenouille, l&#x26;#39;chaperon mol&#xE9;culaire gp96 m&#xE9;die une r&#xE9;ponse immunitaire puissante impliquant sp&#xE9;cifique de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne de classe Ia classique-libre CTL CD8 + (CCU-CTL) contre une tumeur du thymus transplantable (15/0) qui n&#x26;#39;exprime pas les mol&#xE9;cules de classe Ia. Nous avons suppos&#xE9; que Xenopus non classiques de la classe Ib produits g&#xE9;niques (XNC) sont impliqu&#xE9;s dans gp96-m&#xE9;diation CCU-CTL r&#xE9;ponses anti-tumorales. Pour enqu&#xEA;ter sur l&#x26;#39;implication de produits de classe de g&#xE8;nes Ib chez le x&#xE9;nope r&#xE9;ponses anti-tumorales, nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;, pour la premi&#xE8;re fois chez les vert&#xE9;br&#xE9;s ectothermes, stables transfectants tumorales exprimant en &#xE9;pingle &#xE0; cheveux courts ARN (shRNA) pour r&#xE9;duire au silence, soit directement ou XNC beta2m pour emp&#xEA;cher l&#x26;#39;expression de surface de classe Ib . Les deux types de 15/0 transfectants sont plus r&#xE9;sistants &#xE0; la CCU-CTL meurtre, plus tumorig&#xE8;ne et plus sensibles &#xE0; la destruction des cellules NK-like. Cette &#xE9;tude fournit in vitro et in vivo des preuves de la conservation de l&#x26;#39;&#xE9;volution de la classe Ib implication dans anti-tumorale CD8 + r&#xE9;ponses des lymphocytes T.

Implication des mol&#xE9;cules du CMH non classiques de cat&#xE9;gorie IB dans Heat Shock Protein-m&#xE9;di&#xE9;e r&#xE9;ponses anti-tumorales

Unorthodoxen MHC-Klasse-Ib (Ib-Klasse)-Gene sind in alle jawed Wirbeltieren gefunden, und ihre Produkte sind Indikatoren f&uuml;r die intrazellul&auml;re Stress und B&ouml;sartigkeit zu sein vermutet. Sind immun Anerkennung der klassischen MHC-Klasse-Ia (Klasse Ia) beteiligt-niedrig oder - negativ Tumorzellen durch ihre Interaktion mit T-ZELLREZEPTOREN und/oder T-Zell-hemmenden oder ausl&ouml;senden Rezeptoren ausgedr&uuml;ckt durch NK-Zellen und T-Zellen. In der Frosch Xenopus, vermittelt die molekularen Chaperon-gp96 eine starke Immunantwort Antigen-spezifische klassische Klasse Ia-uneingeschr&auml;nkten CD8 + CTL (CCU-CTL) gegen eine &uuml;bertragbare Thymustumor (15/0), das dr&uuml;ckt nicht Klasse Ia Molek&uuml;le. Wir die Hypothese, dass Xenopus unorthodoxen Klasse Ib Genprodukte (XNC) in gp96-vermittelte CCU-CTL Anti-Tumor-Reaktionen beteiligt sind. Um die Beteiligung der Klasse Ib Genprodukte in Xenopus Anti-Tumor-Antworten zu untersuchen, konnten wir zum ersten Mal in wechselwarme Wirbeltiere, stabile Tumor-Transfektanten zum Ausdruck bringen kurze Haarnadel RNA (ShRNA) zum entweder XNC direkt zu schweigen oder beta2m, Klasse Ib Oberfl&auml;che Ausdruck zu verhindern. Beide Arten von 15/0 Transfektanten sind widerstandsf&auml;higer gegen CCU-CTL t&ouml;ten, mehr tumorigenic und anf&auml;lliger f&uuml;r NK-wie Zelle t&ouml;ten. Diese Studie stellt in-vitro und in vivo Beweis der evolution&auml;ren Erhaltung der Klasse Ib Beteiligung an Anti-Tumor CD8 + T Zelle Antworten.

Beteiligung der unorthodoxen MHC-Klasse-Ib-Molek&uuml;le in Hitze Schock Protein-vermittelte Anti-Tumor-Antworten.

Nonclassical MHC classe Ib (classe Ib) geni si trovano in tutti i vertebrati jawed, e loro prodotti sono ipotizzati per essere indicatori di stress intracellulari e malignit&agrave;. Essi possono essere coinvolti nel riconoscimento immunitario della classica classe MHC Ia (classe Ia)-basso o - negativo delle cellule tumorali attraverso la loro interazione con i recettori delle cellule T e/o delle cellule T inibitori o attivazione recettori espressi dalle cellule NK e cellule T. Nella rana Xenopus, il chaperone molecolare gp96 da intermediario una potente risposta immunitaria che coinvolgono antigene-specifiche classica classe Ia-unrestricted CD8 + CTL (CCU-CTL) contro un tumore del timo trapiantabili (15/0) che non esprimono molecole di classe Ia. Abbiamo ipotizzato che Xenopus prodotti del gene di nonclassical classe Ib (XNC) sono coinvolti in gp96-mediata risposta anti-tumorale CCU-CTL. Per indagare il coinvolgimento dei prodotti del gene di classe Ib in Xenopus risposte anti-tumorale, abbiamo generato, per la prima volta nei vertebrati eterotermi, tumore stabile transfettanti esprimendo short hairpin RNA (shRNA) al silenzio o XNC direttamente o beta2m per evitare che la classe espressione superficiale Ib. Entrambi i tipi di transfettanti 15/0 sono pi&ugrave; resistenti a CCU-CTL uccidendo, pi&ugrave; complesso e pi&ugrave; suscettibile di uccisione delle cellule NK-like. Questo studio fornisce prove in vitro e in vivo della conservazione evolutiva della classe coinvolgimento Ib nelle risposte di cellule T CD8 + anti-tumorale.

Coinvolgimento di molecole di Ib nonclassical MHC classe in calore shock mediato proteina anti-tumorale risposte.

&#x975E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#xFF08;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#xFF09;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6709;&#x984E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3068;&#x60AA;&#x6027;&#x306E;&#x6307;&#x6A19;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ia&#xFF08;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ia&#xFF09;&#x306E;&#x4F4E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9670;&#x6027;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E;T&#x7D30;&#x80DE;&#x963B;&#x5BB3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;NK&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;gp96&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ia&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x79FB;&#x690D;&#x80F8;&#x817A;&#x816B;&#x760D;&#xFF08;15/0&#xFF09;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;IA-&#x7121;&#x5236;&#x9650;&#x306E;CD8 + CTL&#x3092;&#xFF08;CCU-CTL&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x975E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#xFF08;XNC&#xFF09;&#x306F;gp96&#x5A92;&#x4ECB;CCU-CTL&#x306E;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x6E29;&#x6027;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x307E;&#x305F;&#x306F;beta2m&#x3069;&#x3061;&#x3089;XNC&#x3092;&#x9ED9;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x77ED;&#x9396;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3;RNA&#xFF08;shRNA&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3002; 15/0&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x6027;&#x3068;NK&#x69D8;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x6EC5;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x304F;&#x3001;CCU-CTL&#x6BBA;&#x50B7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x3088;&#x308A;&#x8010;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x6297;&#x816B;&#x760D;CD8 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306B;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x975E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;

&#xBAA8;&#xB4E0; jawed &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xB294; nonclassical MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; Ib (Ib &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC81C;&#xD488; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC640; &#xC545;&#xC758;&#xC758; &#xC9C0;&#xD45C; &#xC218;&#xC5D0; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC138;&#xC6E0;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; i (&#xD074;&#xB798;&#xC2A4; i a) A&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC778;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;-&#xB0AE;&#xC740; &#xB610;&#xB294;-T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC0F; &#xC218;&#xC6A9; NK &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xCCB4;&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBD80;&#xC815;. Xenopus &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xBD84;&#xC790; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; gp96 transplantable thymic &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; i a &#xBB34;&#xC81C;&#xD55C; CD8 + CTL (CCU CTL)&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; (15/0) &#xD558;&#xB294; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; i a &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; Xenopus nonclassical &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; Ib &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488; (XNC) CCU CTL &#xC548;&#xD2F0; &#xC885;&#xC591; &#xC751;&#xB2F5; gp96 &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;. Xenopus &#xC548;&#xD2F0; &#xC885;&#xC591; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; Ib &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xAD00;&#xB828; &#xC870;&#xC0AC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC131;, ectothermic &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;, &#xC9E7;&#xC740; &#xD5E4;&#xC5B4;&#xD540; RNA (shRNA) &#xC9C1;&#xC811; &#xC5B4;&#xB290; XNC &#xCE68;&#xBB35;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC885;&#xC591; transfectants &#xB610;&#xB294; beta2m &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; Ib &#xD45C;&#xBA74; &#xC2DD;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C;. 15/0 Transfectants&#xC758; &#xB450; &#xC720;&#xD615;&#xC740; &#xC800;&#xD56D; CCU CTL &#xC8FD;&#xC774;&#xACE0;, &#xB354; tumorigenic &#xD558; &#xACE0; &#xC8FD;&#xC774; NK &#xAC19;&#xC740; &#xC140;&#xC5D0; &#xB354; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD558;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC548;&#xD2F0; &#xC885;&#xC591; CD8 + T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; Ib &#xCC38;&#xC5EC; &#xC218;&#xC5C5;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xBCF4;&#xC874;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC99D;&#xAC70; &#xC81C;&#xACF5;.

&#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xC911;&#xC7AC; &#xC548;&#xD2F0; &#xC885;&#xC591; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0;&#xC11C; nonclassical MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; Ib &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;.

No cl&#xE1;sicas MHC de clase Ib (clase Ib) los genes se encuentran en todos los vertebrados con mand&#xED;bulas, y sus productos son la hip&#xF3;tesis de ser indicadores de estr&#xE9;s intracelular y la malignidad. Ellos pueden estar involucrados en el reconocimiento inmunol&#xF3;gico de la cl&#xE1;sica Ia MHC de clase (clase Ia), bajo o negativas las c&#xE9;lulas tumorales a trav&#xE9;s de su interacci&#xF3;n con los receptores de c&#xE9;lulas T y / o no inhibidores de c&#xE9;lulas T o de los receptores de activaci&#xF3;n expresados &#x200B;&#x200B;por las c&#xE9;lulas NK y c&#xE9;lulas T. En la rana Xenopus, la chaperona molecular gp96 media una potente respuesta inmune ant&#xED;geno-espec&#xED;fica la participaci&#xF3;n de la clase Ia cl&#xE1;sica-sin restricciones CTL CD8 + (CCU-CTL) contra un tumor t&#xED;mico trasplantables (15/0) que no expresa mol&#xE9;culas de clase Ia. La hip&#xF3;tesis de que Xenopus no cl&#xE1;sicas de clase Ib productos g&#xE9;nicos (XNC) est&#xE1;n involucrados en la gp96, mediadas por CCU-CTL respuestas antitumorales. Para investigar la participaci&#xF3;n de los productos de la clase de genes Ib en Xenopus respuestas antitumorales, que hemos generado, por primera vez en los vertebrados ectot&#xE9;rmicos, transfectantes estables tumorales que expresan corta horquilla de ARN (shRNA) para silenciar a cualquiera, directa o XNC beta2m para evitar que la clase Ib expresi&#xF3;n en la superficie . Ambos tipos de 15/0 transfectantes son m&#xE1;s resistentes a CCU-CTL asesinato, tumorig&#xE9;nico m&#xE1;s y m&#xE1;s susceptibles a la muerte de las c&#xE9;lulas NK-like. Este estudio proporciona in vitro y en pruebas in vivo de la conservaci&#xF3;n evolutiva de clase implicaci&#xF3;n Ib en antitumoral CD8 + respuestas de c&#xE9;lulas T.

Participaci&#xF3;n de los no cl&#xE1;sicos mol&#xE9;culas MHC de clase Ib en prote&#xED;na de choque t&#xE9;rmico mediada por respuestas antitumorales

&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x4E0E;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; (&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;) gp96 &#x53EF;&#x4EE5;&#x5F81;&#x6C42;&#x70C8;&#x6027;&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027; CD8 T &#x7EC6;&#x80DE; (Ctl) &#x6548;&#x5E94;&#x5668;&#xFF0C;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x81EA;&#x7136;&#x6740;&#x624B; (NK) &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5176;&#x5B83;&#x8F83;&#x5C11;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x719F;&#x77E5;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E5F;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x7956;&#x4F20;&#x4EE3;&#x7406;&#x5546;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x76D1;&#x6D4B; &#xFF1B;&#x548C;&#x5047;&#x8BBE;&#x5176;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x5E94;&#x88AB;&#x4FDD;&#x7559;&#x5728;&#x8FDB;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x6B63;&#x8C03;&#x67E5;&#x4F7F;&#x7528;&#x552F;&#x4E00;&#x975E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x6BD4;&#x8F83;&#x80BF;&#x7624;&#x514D;&#x75AB;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x9752;&#x86D9;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4F7F;&#x5F97;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x4E13;&#x6CE8;&#x4E8E;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x7ECF;&#x5178; MHC &#x7C7B; Ia&#x3001; &#x4E0E;&#x975E;&#x7ECF;&#x5178; MHC &#x7C7B; Ib &#x5206;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x5B9A;&#x4E49;&#x514B;&#x9686;&#x722A;&#x87FE;&#x7684;&#x79FB;&#x690D;&#x6027;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6B63;&#x5728;&#x751F;&#x6210;&#x4E0E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6216;&#x62C6;&#x88C5; &#xFF08;RNAi&#xFF09; &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x9752;&#x86D9;&#x3002;

&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#xFF0C;&#x552F;&#x4E00;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6A21;&#x578B;&#x4EE5;&#x514D;&#x75AB;&#x76D1;&#x6D4B;&#x63A2;&#x8BA8;&#x67D0;&#x4E9B;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x975E;&#x7ECF;&#x5178; MHC &#x7C7B; Ib &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The heat shock proteins (HSPs) gp96 and hsp70 can elicit potent anti-tumor responses and as such have significant clinical potential. Besides cytotoxic CD8 T cell (CTLs) effectors, evidence suggests that natural killer (NK) cells and other less well-characterized cell types also play a critical role in HSP-mediated anti-tumor responses. Owing to their high degree of phylogenetic conservation, we have proposed that HSPs are ancestral agents of immune surveillance; and postulated that their immunological properties, if important, should have been conserved during evolution. We are investigating this issue using a unique non-mammalian comparative tumor-immunity model in the frog Xenopus, which allows us to focus on the relationship between HSPs, classical MHC class Ia, and non-classical MHC class Ib molecules. In addition to a transplantable lymphoid tumor in genetically defined cloned Xenopus, we are generating transgenic frogs with inducible or knocked-down (RNAi) gene expression.

Xenopus, a unique comparative model to explore the role of certain heat shock proteins and non-classical MHC class Ib gene products in immune surveillance.

Les prot&#xE9;ines de choc thermique (HSP) gp96 et hsp70 peut provoquer de puissants r&#xE9;ponses anti-tumorales et en tant que telle un important potentiel clinique. Outre CD8 cytotoxiques des cellules T (CTL) effecteurs, les preuves sugg&#xE8;rent que les tueuses naturelles (cellules NK) et moins d&#x26;#39;autres bien caract&#xE9;ris&#xE9;s types cellulaires jouent aussi un r&#xF4;le crucial dans la HSP-m&#xE9;di&#xE9;e r&#xE9;ponses anti-tumorales. En raison de leur haut degr&#xE9; de conservation phylog&#xE9;n&#xE9;tique, nous avons propos&#xE9; que les HSP sont des agents de la surveillance immunitaire ancestrales, et &#xE9;mis l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que leurs propri&#xE9;t&#xE9;s immunologiques, si importante, aurait d&#xFB; &#xEA;tre conserv&#xE9;e au cours de l&#x26;#39;&#xE9;volution. Nous &#xE9;tudions cette question en utilisant un unique non-mammif&#xE8;re comparative tumeur immunit&#xE9; dans le mod&#xE8;le Xenopus grenouille, ce qui nous permet de se concentrer sur la relation entre les HSP, classique du CMH de classe Ia, et non-classiques mol&#xE9;cules du CMH de classe Ib. En plus d&#x26;#39;une tumeur transplantable lympho&#xEF;de g&#xE9;n&#xE9;tiquement d&#xE9;fini clon&#xE9; Xenopus, nous g&#xE9;n&#xE9;rons des grenouilles transg&#xE9;niques avec inductible ou assomm&#xE9; l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes (ARNi).

Xenopus, un mod&#xE8;le unique compar&#xE9; &#xE0; explorer le r&#xF4;le de certaines prot&#xE9;ines de choc thermique et non-classiques du CMH de classe Gene Produits Ib dans la surveillance immunitaire

Die Hitze-Schock-Proteine (HSP)-gp96 hsp70 potente Anti-Tumor-Antworten zu entlocken und als solche haben signifikante Klinisches Potenzial. Neben zytotoxische CD8-T-Zelle (CTLs)-Effektoren gibt Hinweise, dass die nat&uuml;rlichen Killerzellen (NK) und andere weniger gut charakterisierten Zelltypen, spielen eine wichtige Rolle auch im HSP-vermittelten Anti-Tumor-Antworten. Aufgrund ihrer hohen Grad der phylogenetischen Erhaltung haben wir vorgeschlagen, dass HSPs Vorfahren Agenten der immun-&Uuml;berwachung sind; und postulierte, dass ihre immunologischen Eigenschaften, wenn wichtige, Verlauf der Evolution konserviert worden haben sollte. Wir untersuchen diese Frage mit einem einzigartigen nicht-S&auml;uger vergleichende Tumor-Immunit&auml;t-Modell in der Frosch Xenopus, erm&ouml;glicht es uns auf die Beziehung zwischen HSPs, klassischen MHC-Klasse Ia und nicht-klassischen MHC-Klasse-Ib-Molek&uuml;le zu konzentrieren. Neben eine &uuml;bertragbare Lymphoider Tumor in genetisch definierten geklonte Xenopus generieren wir transgene Fr&ouml;sche mit Induktion oder klopfte-Down (RNAi)-Genexpression.

Xenopus, ein einzigartiges vergleichende Modell die Rolle bestimmter Hitze-Schock-Proteine und nicht-klassischen MHC-Klasse-Ib-Genprodukte in immun-&Uuml;berwachung zu erkunden.

La heat shock (HSP) proteine gp96 e hsp70 pu&ograve; suscitare risposte antitumorale potente e come tali hanno potenziale clinico significativo. Oltre a effettori citotossici (CTL) di cellule T CD8, l&#39;evidenza suggerisce che le cellule natural killer (NK) e altri meno tipi di cellule ben caratterizzati anche svolgere un ruolo critico nella HSP-mediata risposta anti-tumorale. A causa del loro alto grado di conservazione filogenetica, abbiamo proposto che le HSP sono agenti ancestrali della sorveglianza immunitaria; e postul&ograve; che loro propriet&agrave; immunologiche, se importante, deve avere conservato durante l&#39;evoluzione. Stiamo studiando questo problema utilizzando un modello unico mammiferi comparativa tumore-immunit&agrave; in rana Xenopus, che ci permette di concentrarsi sul rapporto tra HSP, classica MHC classe Ia e molecole MHC classe Ib di stivali. Oltre a un tumore linfoide trapiantabili in Xenopus clonato geneticamente definito, stiamo generando transgeniche rane con viscoelastica o abbattuto espressione genica (RNAi).

Xenopus, un unico modello comparativo per esplorare il ruolo di talune proteine di scossa di calore e non-classiche MHC classe Ib gene prodotti nella sorveglianza immunitaria.

&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;HSP&#xFF09;gp96&#x304A;&#x3088;&#x3073;Hsp70&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x6B21;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;CD8 T&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CTL&#xFF09;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30C1;&#x30E5;&#x30E9;&#x30EB;&#x30AD;&#x30E9;&#x30FC;&#xFF08;NK&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x3088;&#x304F;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x306F;&#x3001;HSP&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7CFB;&#x7D71;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306E;&#x304A;&#x304B;&#x3052;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;HSP&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x76E3;&#x8996;&#x306E;&#x5148;&#x7956;&#x306E;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x304C;&#x3001;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306F;&#x305A;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;HSP&#x306F;&#x3001;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ia&#x3001;&#x975E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x975E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x816B;&#x760D;&#x514D;&#x75AB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7CFB;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x76E3;&#x8996;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x975E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;Ib&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x63A2;&#x6C42;&#x3059;&#x308B;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;

&#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (HSPs) gp96 &#xBC0F; hsp70 &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC548;&#xD2F0; &#xC885;&#xC591; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xC640; &#xAC19;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC784;&#xC0C1; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cytotoxic CD8 T &#xC138;&#xD3EC; (Ctl) &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xC678; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; well-characterized &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC740; &#xB35C; &#xC790;&#xC5F0; &#xD0AC;&#xB7EC; (NK) &#xC138;&#xD3EC; &#xB4F1;&#xB3C4; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC548;&#xD2F0; &#xC885;&#xC591; &#xC751;&#xB2F5; HSP &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; phylogenetic &#xC808;&#xC57D; &#xB54C;&#xBB38; &#xC6B0;&#xB9AC; HSPs &#xBA74;&#xC5ED; &#xAC10;&#xC2DC;;&#xC758; &#xC870;&#xC0C1; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC18D;&#xC131; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;, &#xD55C;&#xB2E4;&#xAC00; &#xB418;&#xC5B4; &#xBCF4;&#xC874; &#xC9C4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; postulated. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; Xenopus HSPs, &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; i a, &#xBC0F; &#xBE44;-&#xD074;&#xB798;&#xC2DD; MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; Ib &#xBD84;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xB9DE;&#xCD9C; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBE44; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xBE44;&#xAD50; &#xC885;&#xC591; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; Xenopus transplantable &#xB9BC;&#xD504; &#xC885;&#xC591;, &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB610;&#xB294; &#xB178;&#xD06C; &#xB2E4;&#xC6B4; (RNAi) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Xenopus, &#xBA74;&#xC5ED; &#xAC10;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xBE44; &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; Ib &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBE44;&#xAD50; &#xBAA8;&#xB378;.

Las prote&#xED;nas de choque t&#xE9;rmico (HSP) gp96 y HSP70 puede provocar potentes respuestas antitumorales y como tal tienen un potencial cl&#xED;nico significativo. Adem&#xE1;s citot&#xF3;xicas CD8 de las c&#xE9;lulas T (CTL) efectores, la evidencia sugiere que las asesinas naturales (NK) y otros menos bien caracterizados los tipos de c&#xE9;lulas tambi&#xE9;n desempe&#xF1;an un papel cr&#xED;tico en la HSP-mediada por respuestas antitumorales. Debido a su alto grado de conservaci&#xF3;n filogen&#xE9;tica, hemos propuesto que las HSP son agentes ancestrales de la vigilancia inmunol&#xF3;gica, y postula que sus propiedades inmunol&#xF3;gicas, si es importante, deber&#xED;a haber sido conservado durante la evoluci&#xF3;n. Estamos investigando este problema usando una t&#xE9;cnica &#xFA;nica de animales no mam&#xED;feros comparativa de tumores en el modelo de la inmunidad rana Xenopus, que nos permite centrarnos en la relaci&#xF3;n entre las HSP, la cl&#xE1;sica de MHC de clase Ia, y no cl&#xE1;sicas mol&#xE9;culas MHC de clase Ib. Adem&#xE1;s de un tumor linfoide en trasplantables definidas gen&#xE9;ticamente clonada de Xenopus, estamos generando las ranas transg&#xE9;nicas con inducible o derribado (RNAi), la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica.

Xenopus, un modelo &#xFA;nico comparativo para explorar el papel de ciertas prote&#xED;nas de choque t&#xE9;rmico y no cl&#xE1;sicas MHC de clase Ib productos de los genes en la vigilancia inmune

&#x722A;&#x87FE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x66FF;&#x4EE3;&#x9F20;&#x6807;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5373;&#x4F7F;&#x4E3A;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684;&#x4EE3;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x51E0;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5DF2;&#x88AB;&#x6539;&#x7F16;&#x4E3A;&#x5341;.&#x87FE;/gilli (LG) &#x5F02;&#x4F53;&#x514B;&#x9686;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A; LG &#x514B;&#x9686;&#x901A;&#x8FC7;&#x96CC;&#x6838;&#x53D1;&#x80B2;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x4E0D;&#x9002;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x878D;&#x5165;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86; LG &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4E09;&#x79CD;&#x5907;&#x9009;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A; phiC31 &#x6574;&#x5408;&#x9176;&#x3001; &#x7761;&#x7F8E;&#x4EBA;&#x8F6C;&#x548C;-SceI meganuclease&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E09;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x751F;&#x4EA7;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; LG &#x514B;&#x9686; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;-SceI meganuclease &#x662F;&#x6700;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x3002;&#x5B83;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6548;&#x7387; (35-50%)&#x3001; &#x660E;&#x4EAE; nonmosaic &#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7A33;&#x5B9A;&#x751F;&#x6B96;&#x4F20;&#x8F93;&#x7528; 100%&#x7684;&#x643A;&#x5E26;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x540E;&#x4EE3;&#x3002;&#x751F;&#x4EA7;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; LG &#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x5C06;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x8C03;&#x8282;&#x514D;&#x75AB;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5341;.&#x87FE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6210;&#x56E0; 00:1-7&#xFF0C;2011&#x5E74;&#x3002;&copy; 2011&#x5E74;&#x5A01;&#x5229;&#x671F;&#x520A;&#xFF0C;Inc.

&#x4F18;&#x5316;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6280;&#x672F;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;/gilli &#x5F02;&#x4F53;&#x514B;&#x9686;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Xenopus laevis provides a unique animal model, alternative to mouse, to study immunology. Even though, several methodologies have been developed for the generation of transgenic Xenopus, to date none have been adapted for the X. laevis/gilli (LG) isogenetic clones that are essential for immunological studies. Since LG clones are generated via gynogenesis, transgenic methods using transgene integration into the sperm nuclei are not suited. Therefore, we have tested three alternative methods for LG transgenesis: the phiC31 integrase, the Sleeping Beauty transposase, and the I-SceI meganuclease. All three techniques produced transgenic LG clones; however, the I-SceI meganuclease was most effective. It resulted in high transgenesis efficiency (35-50%), bright nonmosaic GFP expression as well as stable germline transmission with 100% of the progeny carrying the transgene. Production of transgenic LG clones will allow us to modulate immune gene expression and further strengthen X. laevis as a biomedical model. genesis 00:1-7, 2011. Â© 2011 Wiley Periodicals, Inc.

Optimized transgenesis in Xenopus laevis/gilli isogenetic clones for immunological studies.

Xenopus laevis fournit un mod&#xE8;le animal unique, alternative &#xE0; la souris, pour &#xE9;tudier l&#x26;#39;immunologie. M&#xEA;me si, plusieurs m&#xE9;thodologies ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;es pour la production de transg&#xE9;niques Xenopus, &#xE0; aucun jour ont &#xE9;t&#xE9; adapt&#xE9;s pour le X. laevis / Gilli (LG) clones isogenetic qui sont essentielles pour les &#xE9;tudes immunologiques. Depuis clones LG sont g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s via gynogen&#xE8;se, m&#xE9;thodes transg&#xE9;niques en utilisant int&#xE9;gration du transg&#xE8;ne dans le noyau des spermatozo&#xEF;des ne sont pas adapt&#xE9;s. Par cons&#xE9;quent, nous avons test&#xE9; trois m&#xE9;thodes alternatives pour la transgen&#xE8;se LG: l&#x26;#39;int&#xE9;grase phiC31, la transposase Belle au Bois Dormant, et la m&#xE9;ganucl&#xE9;ase I-Scel. Tous les trois techniques de production transg&#xE9;niques clones LG, mais la m&#xE9;ganucl&#xE9;ase I-Scel &#xE9;tait plus efficace. Il en est r&#xE9;sult&#xE9; l&#x26;#39;efficacit&#xE9; transg&#xE9;n&#xE8;se &#xE9;lev&#xE9;e (35-50%), lumineux expression de la GFP nonmosaic ainsi que la transmission germinale stable avec 100% de la descendance portant le transg&#xE8;ne. La production de clones transg&#xE9;niques LG va nous permettre de moduler l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes immunitaire et renforcer X. laevis comme un mod&#xE8;le biom&#xE9;dical. gen&#xE8;se 00:1-7, 2011. &#xA9; 2011 Wiley Periodicals, Inc

La transgen&#xE8;se Optimis&#xE9; &#xE0; Clones Xenopus laevis / Gilli Isogenetic d&#x26;#39;&#xE9;tudes immunologiques

Xenopus Laevis bietet eine einzigartige Tiermodell, alternative zur Maus, Immunologie zu studieren. Obwohl mehrere Methoden wurden f&uuml;r die Generierung von transgenen Xenopus entwickelt, bis heute wurden keine angepasst f&uuml;r die X. Laevis/Gilli (LG) Isogenetic Klone sind, die f&uuml;r immunologische Studien unverzichtbar. Da LG Klone &uuml;ber Gynogenesis erzeugt werden, sind transgene Methoden mithilfe der Transgen-Integration in die Sperma-Kerne nicht geeignet. Daher haben wir drei alternative Methoden f&uuml;r LG Transgenese getestet: die phiC31-Integrase, die Dornr&ouml;schen-Transposase und -SceI-Meganuclease. Alle drei Techniken produziert transgene LG-Klone; Allerdings war die Meganuclease SceI am effektivsten. Es f&uuml;hrte zu hohen Transgenese Wirkungsgrad von 35-50 %, helle Nonmosaic-GFP-Expression sowie stabile Germline Getriebe mit 100 % von den Nachkommen, die Durchf&uuml;hrung der Transgene. Produktion von transgenen LG Klonen k&ouml;nnen wir modulieren immun Genexpression und X. Laevis als biomedizinische Modell weiter zu st&auml;rken. Genese 00:1-7, 2011. &copy; 2011 Wiley-Zeitschriften, Inc.

Optimierte Transgenese in Xenopus Laevis/Gilli Isogenetic klont f&uuml;r immunologische Studien.

Xenopus laevis fornisce un unico modello animale, alternativo al mouse, lo studio di immunologia. Anche se, sono state sviluppate diverse metodologie per la generazione di Xenopus transgenici, fino ad oggi nessuno &egrave; stato adattato per lo X. laevis/gilli (LG) isogenetic i cloni che sono essenziali per gli studi immunologici. Dal momento che LG cloni sono generati tramite gynogenesis, transgenici metodi mediante integrazione del transgene nei nuclei di sperma non sono adatti. Pertanto, abbiamo testato tre metodi alternativi per LG transgenesi: Il integrase phiC31, ha la bella addormentata e il meganuclease SceI. Tutte le tre tecniche prodotti transgenici LG cloni; Tuttavia, la meganuclease SceI era pi&ugrave; efficace. Esso ha portato nella transgenesi ad alta efficienza (35-50%), espressione di GFP nonmosaic brillante, nonch&eacute; trasmissione germinale stabile con il 100% della prole che trasportano il transgene. Produzione di cloni LG transgenici ci permetter&agrave; di modulare l&#39;espressione genica immunitaria e rafforzare ulteriormente X. laevis come un modello biomedico. Genesi 00:1-7, 2011. &copy; 2011 Wiley periodici, Inc.

Transgenesi ottimizzato in Xenopus laevis/gilli isogenetic cloni per studi immunologici.

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x306F;&#x3001;&#x65E5;&#x4ED8;&#x3092;none&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;/&#x30B8;&#x30EA;&#xFF08;LG&#xFF09;isogenetic&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; LG&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x96CC;&#x6027;&#x767A;&#x751F;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x6838;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D71;&#x5408;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; phiC31&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x7720;&#x308C;&#x308B;&#x68EE;&#x306E;&#x7F8E;&#x5973;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30B6;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x3001;I-SCEI&#x30E1;&#x30AC;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;LG&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;LG&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;I-SCEI&#x30E1;&#x30AC;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x52B9;&#x7387;&#xFF08;35&#x304B;&#x3089;50&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#xFF09;&#x3001;&#x660E;&#x308B;&#x3044;nonmosaic&#x306E;GFP&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x5B50;&#x5B6B;&#x306E;100&#xFF05;&#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x751F;&#x6B96;&#x7CFB;&#x5217;&#x4F1D;&#x9054;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;LG&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5275;&#x4E16;&#x8A18;00:1-7&#x3001;2011&#x3002; &#xA9;2011&#x30EF;&#x30A4;&#x30EA;&#x30FC;&#x96D1;&#x8A8C;&#x682A;&#x5F0F;&#x4F1A;&#x793E;

&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;/&#x30B8;&#x30EA;Isogenetic&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;

Xenopus laevis &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB300;&#xCCB4; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; Xenopus &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC544;&#xBB34;&#xB3C4; X. laevis &#xB9DE;&#xAC8C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;/gilli (lg &#xC804;&#xC790;) isogenetic &#xBCF5;&#xC81C;&#xB3C4; &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. LG &#xD074;&#xB860; gynogenesis&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xBBC0;&#xB85C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBC29;&#xBC95; transgene &#xD1B5;&#xD569; &#xC815;&#xC790; &#xD575;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC801;&#xD569; &#xD558;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB300;&#xCCB4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; lg &#xC804;&#xC790; transgenesis &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;: phiC31 integrase, &#xC7A0;&#xC790;&#xB294; &#xBBF8;&#xB140; transposase &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB09C; SceI meganuclease. &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAE30;&#xC220; &#xBAA8;&#xB450; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; LG &#xD074;&#xB860;; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB0B4;&#xAC00; SceI meganuclease &#xAC00;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83; &#xB4E4;&#xACE0;&#xB294; transgene &#xC790;&#xC190;&#xC758; 100% &#xC548;&#xC815; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC804;&#xC1A1; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB192;&#xC740; transgenesis &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; (35-50%), &#xBC1D;&#xC740; nonmosaic GFP &#xC2DD; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; LG &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xACE0; &#xC758;&#xCE58; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; X. laevis &#xAC15;&#xD654;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D;. &#xCC3D;&#xC138;&#xAE30; 00:1-7, 2011&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &copy; 2011&#xC640; &#xC77C;&#xB9AC; &#xC815;&#xAE30; &#xAC04;&#xD589;&#xBB3C; &#xC8FC;&#xC2DD; &#xD68C;&#xC0AC;

Xenopus laevis/gilli isogenetic&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; transgenesis &#xBA74;&#xC5ED;&#xD559; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC81C;.

Xenopus laevis es un modelo animal &#xFA;nico, alternativa a la del rat&#xF3;n, para estudiar la inmunolog&#xED;a. A pesar de que, diversas metodolog&#xED;as han sido desarrolladas para la generaci&#xF3;n de transg&#xE9;nicos de Xenopus, a la fecha ninguno ha sido adaptado para la X. laevis / Gilli (LG) isog&#xE9;nicas clones que son esenciales para los estudios inmunol&#xF3;gicos. Desde clones LG se generan a trav&#xE9;s ginog&#xE9;nesis, los m&#xE9;todos transg&#xE9;nicos utilizando integraci&#xF3;n de los transgenes en los n&#xFA;cleos de espermatozoides no son adecuados. Por lo tanto, hemos probado tres m&#xE9;todos alternativos para la transg&#xE9;nesis LG: la integrasa phiC31, la transposasa Bella Durmiente, y el meganuclease I-SCE. Las tres t&#xE9;cnicas producen clones transg&#xE9;nicos LG, sin embargo, la meganuclease I-CPE fue m&#xE1;s eficaz. Se tradujo en la eficiencia transg&#xE9;nesis alta (35-50%), la expresi&#xF3;n brillante nonmosaic GFP as&#xED; como la transmisi&#xF3;n de l&#xED;nea germinal estable con 100% de la progenie que lleva el transg&#xE9;n. La producci&#xF3;n de clones transg&#xE9;nicos de LG nos permite modular la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica inmunol&#xF3;gico y fortalecer a&#xFA;n m&#xE1;s X. laevis como modelo biom&#xE9;dico. G&#xE9;nesis 00:1-7, 2011. &#xA9; 2011 peri&#xF3;dicos, Wiley, Inc.

Hristina Nedelkovska

Department of Microbiology and Immunology

University of Rochester

Comparative in vivo Study of gp96 Adjuvanticity in the Frog Xenopus laevis

Hristina Nedelkovska

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Microbiology and Immunology

University of Rochester

Comparative in vivo Study of gp96 Adjuvanticity in the Frog Xenopus laevis

Department of Microbiology and Immunology