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Improved Visualization and Quantitative Analysis of Drug Effects Using Micropatterned Cells

To date, most HCA (High Content Analysis) studies are carried out with adherent cell lines grown on a homogenous substrate in tissue-culture treated ...

Grenoble, France

&#x73B0;&#x5728;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x683C;&#x7684;&#x724C;&#x533E;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5B83;&#x7684;&#x4F53;&#x79EF;&#x76F8;&#x5173;&#x52A8;&#x8109;&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#x5E76;&#x53D1;&#x75C7;&#x3002;&#x6613;&#x635F;&#x6591;&#x5757;&#x5F80;&#x5F80;&#x5305;&#x542B;&#x5927;&#x91CF;&#x8102;&#x8D28;&#x6838;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5185;&#x5BB9;&#x7684;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;) &#x7684;&#x5171;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x662F;&#x53EF;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x52A8;&#x8109;&#x7CA5;&#x6837;&#x786C;&#x5316;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5982;&#x6B64;&#xFF0C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x53CA;&#x5176;&#x8C03;&#x8282;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x836F;&#x7269;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x660E;&#x786E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x4EBA; THP 1 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9; 92 kDa &#x660E;&#x80F6;&#x9176; B &#xFF08;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9&#xFF09; &#x5206;&#x6CCC; avasimibe&#x3001; &#x6C1F;&#x4F10;&#x4ED6;&#x6C40;&#x548C;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x7269;&#x9176;&#x4F53;&#x589E;&#x6B96;&#x7269;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;PPAR&#xFF09; &#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;THP 1 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597; 48 h&#xFF0C;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x86CB;&#x767D;&#x514D;&#x75AB;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3002;Avasimibe&#x3001; &#x6C1F;&#x4F10;&#x4ED6;&#x6C40;&#x548C; PPARalpha &#x7684;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242; &#xFF08;&#x975E;&#x8BFA;&#x8D1D;&#x9178;&#x548C; Wy 14643&#xFF09; &#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#xFF08;&#x6700;&#x5927;&#x4E3A; + /-5%&#x4E3A;&#x975E;&#x8BFA;&#x8D1D;&#x9178; 67) &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x9A8C; PPARgamma &#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7F57;&#x683C;&#x5217;&#x916E;&#x663E;&#x793A;&#x4F4E;&#x6548;&#x80FD;&#x6BD4;&#x5176;&#x4ED6;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E5F;&#x88AB;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x6240;&#x6709;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x836F;&#x7269;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x86CB;&#x767D;/&#x6D3B;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x539F;&#x56E0;&#x662F;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x5728;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 mRNA &#x7684;&#x8DCC;&#x5E45;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; THP 1 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5BF9;&#x6591;&#x5757;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x836F;&#x7269;&#x6291;&#x5236;&#x4EBA;&#x7684; THP 1 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x6D3B;&#x6027;&#x3002;

It is now recognized that atherosclerosis complications are related to the unstable character of the plaque rather than its volume. Vulnerable plaques often contain a large lipid core, a reduced content of smooth muscle cells, and accumulation of inflammatory cells. Colocalization of macrophages and active matrix metalloproteinases (MMPs) is likely relevant for atherosclerotic lesion disruption. Nevertheless, MMP activity and regulation by cardiovascular drugs remains poorly defined. In this study, we evaluated the effects of avasimibe, fluvastatin, and peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) ligands on 92-kDa gelatinase B (MMP-9) secretion by human THP-1 macrophages. THP-1 macrophages were treated with compounds for 48 h, and secreted MMP-9 protein was quantified by immunoassay. Avasimibe, fluvastatin, and PPARalpha agonists (fenofibric acid and Wy-14643) significantly reduced, in a concentration-dependent manner, MMP-9 protein (up to 67 +/- 5% for fenofibric acid). In these assays, the PPARgamma selective agonist rosiglitazone displayed a lower efficacy than other compounds. Enzymatic activity of MMP-9 was also decreased by all cardiovascular drugs tested. MMP-9 protein/activity inhibition by cardiovascular drugs was due, at least in part, to a decrease in MMP-9 mRNA. These results show that THP-1 macrophages could be an useful cellular model to investigate effects of compounds on plaque vulnerability through MMP-9 activity.

Cardiovascular drugs inhibit MMP-9 activity from human THP-1 macrophages.

Il est maintenant reconnu que les complications de l&#39;ath&eacute;roscl&eacute;rose sont li&eacute;es au caract&egrave;re instable de la plaque et non son volume. Plaques vuln&eacute;rables contiennent souvent un noyau lipidiques, une teneur r&eacute;duite des cellules musculaires lisses et l&#39;accumulation de cellules inflammatoires. La colocalisation des macrophages et active matrix metalloproteinases (MMPs) est vraisemblablement pertinents pour la rupture de la l&eacute;sion ath&eacute;roscl&eacute;reuse. N&eacute;anmoins, l&#39;activit&eacute; MMP et r&egrave;glement de m&eacute;dicaments cardiovasculaires reste mal d&eacute;finie. Dans cette &eacute;tude, nous &eacute;valuons les effets d&#39;avasimibe, fluvastatine et ligands du r&eacute;cepteur activ&eacute; par les prolif&eacute;rateurs (PPAR) peroxysome sur la s&eacute;cr&eacute;tion de 92 kDa g&eacute;latinase B (MMP-9) par les macrophages THP-1 humains. Macrophages THP-1 ont &eacute;t&eacute; trait&eacute;es avec des compos&eacute;s pendant 48 h, et la prot&eacute;ine s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e de MMP-9 a &eacute;t&eacute; quantifi&eacute; par dosage immunologique. Avasimibe, fluvastatine et PPARalpha agonistes (acide f&eacute;nofibrique et Wy-14643) consid&eacute;rablement r&eacute;duite, de mani&egrave;re dose-d&eacute;pendante, prot&eacute;ine de MMP-9 (jusqu&#39;&agrave; 67 +/-5 % pour l&#39;acide f&eacute;nofibrique). Dans ces essais, la rosiglitazone agoniste s&eacute;lectif de PPARgamma affich&eacute; moins efficace que les autres compos&eacute;s. Tous les m&eacute;dicaments cardiovasculaires test&eacute;s diminue &eacute;galement l&#39;activit&eacute; enzymatique de la MMP-9. Inhibition de la MMP-9 / l&#39;activit&eacute; de la prot&eacute;ine de m&eacute;dicaments cardiovasculaires est due, au moins en partie, &agrave; une diminution de l&#39;ARNm de MMP-9. Ces r&eacute;sultats montrent que les macrophages THP-1 pourraient &ecirc;tre un mod&egrave;le cellulaire utile pour &eacute;tudier les effets de compos&eacute;s sur la vuln&eacute;rabilit&eacute; de la plaque par le biais de l&#39;activit&eacute; MMP-9.

M&eacute;dicaments cardiovasculaires inhibent l&#39;activit&eacute; de la MMP-9 de macrophages humains de THP-1.

Herz-Kreislauf-Medikamente hemmen MMP-9-Aktivit&#xE4;t aus humanen THP-1-Makrophagen.

&Egrave; ormai riconosciuto che complicazioni aterosclerosi sono legate al carattere instabile della placca piuttosto che il suo volume. Placche vulnerabili spesso contengono un nucleo grande lipidica, un contenuto ridotto di cellule muscolari lisce e l&#39;accumulo di cellule infiammatorie. Presenza di macrofagi e active matrix metalloproteinasi (MMP) &egrave; probabilmente pertinente per perturbazione della lesione aterosclerotica. Tuttavia, attivit&agrave; MMP e regolamento da farmaci cardiovascolari rimane mal definiti. In questo studio, abbiamo valutato gli effetti dell&#39;avasimibe, fluvastatina e ligandi in peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) sulla secrezione di 92-kDa gelatinasi B (MMP-9) dai macrofagi THP-1 umani. THP-1 macrofagi sono stati trattati con composti per 48 h, e proteine secrete di MMP-9 &egrave; stata quantificata mediante dosaggio immunologico. Agonisti Avasimibe, fluvastatina e PPARalpha (acido fenofibric e Wy-14643) notevolmente ridotta, in modo concentrazione-dipendente, proteina di MMP-9 (fino a 67 + /-5% per l&#39;acido fenofibric). In questi saggi, il rosiglitazone selettivo agonista PPARgamma visualizzata un&#39;efficacia inferiore rispetto altri composti. Attivit&agrave; enzimatica della MMP-9 &egrave; stato anche diminuito da tutti i farmaci cardiovascolari testati. L&#39;inibizione della proteina/attivit&agrave; di MMP-9 da farmaci cardiovascolari era dovuta, almeno in parte, ad una diminuzione della MMP-9 mRNA. Questi risultati mostrano che il THP-1 macrofagi potrebbero essere un utile modello cellulare di indagare gli effetti dei composti su vulnerabilit&agrave; di placca attraverso l&#39;attivit&agrave; di MMP-9.

Farmaci cardiovascolari inibiscono l&#39;attivit&agrave; di MMP-9 da umane THP-1 macrofagi.

&#x4ECA;&#x5408;&#x4F75;&#x75C7;&#x52D5;&#x8108;&#x786C;&#x5316;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x6587;&#x5B57;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8106;&#x5F31;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x8102;&#x8CEA;&#x30B3;&#x30A2;&#x3001;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x3068;&#x708E;&#x75C7;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;Mmp&#xFF09; &#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x30A2;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;&#x6027;&#x52D5;&#x8108;&#x786C;&#x5316;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;MMP &#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x85AC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x4EBA;&#x9593;&#x306E; THP 1 &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x3088;&#x308B; avasimibe &#x3068;&#x30D5;&#x30EB;&#x30D0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (PPAR) &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x304C; 92 kDa &#x30BC;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; B (MMP-9) &#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;THP 1 &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; 48 h &#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3068;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x3001;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E; MMP 9 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9175;&#x7D20;&#x514D;&#x75AB;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5927;&#x5E45; Avasimibe&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30D0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073; PPARalpha &#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8; (fenofibric &#x9178;&#x3068; Wy 14643) &#x306B;&#x306F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B; MMP 9 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (67 +/-5 %fenofibric &#x9178;) &#x307E;&#x3067;&#x524A;&#x6E1B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3001;PPARgamma &#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30ED;&#x30B7;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BF;&#x30BE;&#x30F3;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x3044;&#x52B9;&#x679C;&#x4ED6;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x8868;&#x793A;&#x3002;MMP 9 &#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x85AC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x85AC;&#x306E; MMP 9 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x4E88;&#x5B9A; Mmp-9 &#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;THP 1 &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x8106;&#x5F31;&#x6027;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF; MMP 9 &#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x85AC;&#x4EBA;&#x9593; THP 1 &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304B;&#x3089;&#x306E; MMP 9 &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC9C0;&#xAE08; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACBD;&#xD654; &#xD569;&#xBCD1;&#xC99D;&#xC758; &#xBCFC;&#xB968; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;&#xC758; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD55C; &#xBB38;&#xC790; &#xAD00;&#xB828; &#xC778;&#xC2DD;. &#xCDE8;&#xC57D; &#xD55C; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C;&#xB294; &#xC885;&#xC885; &#xD070; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xCF54;&#xC5B4;, &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xACFC; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinases (MMPs)&#xC758; colocalization&#xB294; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xACBD; &#xD654;&#xC131; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC7A5;&#xC560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xB828;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, MMP &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC2EC;&#xD608; &#xAD00; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; THP 1 &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; 92 kDa gelatinase B (MMP 9) &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; avasimibe, fluvastatin, &#xBC0F; peroxisome proliferator &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (PPAR) ligands&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. THP 1 &#xB300; 48 h&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xACFC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC0F; &#xBE44; MMP 9 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; immunoassay&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACC4;&#xB7C9; &#xD588;&#xB2E4;. (Fenofibric &#xC0B0;&#xACFC; &#xC640;&#xC774;&#xC624;&#xBC0D; 14643) Avasimibe, fluvastatin, &#xBC0F; PPARalpha agonists &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C;, &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; (&#xCD5C;&#xB300; &plusmn; 5 %fenofibric &#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 67) MMP 9 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; PPARgamma &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; rosiglitazone &#xB2E4;&#xB978; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; &#xD6A8;&#xB2A5; &#xD45C;&#xC2DC;. MMP-9&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xB610;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC2EC;&#xD608; &#xAD00; &#xC57D;&#xBB3C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. MMP-9 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;/&#xD65C;&#xB3D9; &#xC800;&#xD574; &#xC2EC;&#xD608; &#xAD00; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, MMP 9 Mrna&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; &#xD560; &#xC608;&#xC815; &#xC774;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; THP 1 &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; MMP 9 &#xD65C;&#xB3D9; &#xD1B5;&#xD574; &#xD50C; &#xB77C;&#xD06C; &#xCDE8;&#xC57D;&#xC810;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBAA8;&#xB378; &#xB420; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2EC;&#xD608; &#xAD00; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; THP 1 &#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; MMP 9 &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5B5;&#xC81C;.

Ahora se reconoce que las complicaciones de la ateroesclerosis se relacionan con el car&aacute;cter inestable de la placa en lugar de su volumen. Placas vulnerables a menudo contienen un n&uacute;cleo lip&iacute;dico grande, un contenido reducido de c&eacute;lulas musculares lisas y acumulaci&oacute;n de c&eacute;lulas inflamatorias. Colocalizaci&oacute;n de macr&oacute;fagos y metaloproteinasas de matriz activa (MMPs) es probable pertinentes para la interrupci&oacute;n de la lesi&oacute;n ateroscler&oacute;tica. Sin embargo, la actividad MMP y regulaci&oacute;n de f&aacute;rmacos cardiovasculares sigue mal definidos. En este estudio, se evaluaron los efectos de la avasimibe, fluvastatina y ligandos de peroxisoma receptor proliferator-activado (PPAR) sobre la secreci&oacute;n de 92 kDa gelatinasa B (MMP-9) por humanos macr&oacute;fagos THP-1. Los macr&oacute;fagos THP-1 fueron tratados con compuestos por 48 h, y prote&iacute;na secretada de MMP-9 se cuantific&oacute; por inmunoensayo. Agonistas Avasimibe, fluvastatina y PPARalpha (&aacute;cido fenof&iacute;brico y Wy-14643) redujeron significativamente, de una manera dependiente de la concentraci&oacute;n, prote&iacute;na de MMP-9 (hasta 67 +-5% de &aacute;cido fenof&iacute;brico). En estos ensayos, el PPARgamma agonista selectivo rosiglitazona muestra una menor eficacia que otros compuestos. Actividad enzim&aacute;tica de MMP-9 tambi&eacute;n fue disminuida por todos los medicamentos cardiovasculares probados. Inhibici&oacute;n de la prote&iacute;na/actividad de MMP-9 por f&aacute;rmacos cardiovasculares fue debida, al menos en parte, a una disminuci&oacute;n en el mRNA de MMP-9. Estos resultados muestran que los macr&oacute;fagos THP-1 podr&iacute;an ser un modelo celular &uacute;til para investigar los efectos de compuestos sobre la vulnerabilidad de la placa a trav&eacute;s de la actividad de la MMP-9.

F&aacute;rmacos cardiovasculares inhiben la actividad de la MMP-9 de humanos macr&oacute;fagos THP-1.

&#x57FA;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D; (BER) &#x662F;&#x8D1F;&#x8D23;&#x62C6;&#x9664;&#x7684;&#x6240;&#x8C13;&#x5C0F; DNA &#x75C5;&#x53D8;&#x5982;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x7AD9;&#x70B9; &#xFF08;AP &#x7AD9;&#x70B9;&#xFF09;&#x3001; &#x5C3F;&#x5627;&#x5576; (U)&#x3001; 8-&#x7FB0;&#x57FA;-7&#xFF0C;8-dihydroguanine (8oxoG)&#x3001; &#x80F8;&#x817A;&#x5627;&#x5576;&#x4E59;&#x4E8C;&#x9187; (Tg) &#x7684;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x8001;&#x5316;&#x5BF9;&#x51E0;&#x79CD;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x5E95;&#x75C5;&#x53D8;&#x5207;&#x9664;&#x672F;&#x7597;&#x6548;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x7684; AP &#x7F51;&#x7AD9;&#x591A;&#x8DEF;&#x590D;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x65B9;&#x6CD5; &#xFF08;&#x5E76;&#x884C;&#x5316;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x5288;&#x88C2;&#x8BD5;&#x9A8C;&#xFF09; &#x7684;&#x652F;&#x6301;&#x3002;&#x6838;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269; 29 &#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x5E74;&#x9F84;&#x6BB5;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x540C;&#x65F6;&#x5BF9;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D88;&#x8D39;&#x7A0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;&#x663E;&#x7136;&#xFF0C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7FA4;&#x4F53;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x51FA;&#x73B0;&#x6839;&#x636E;&#x5176;&#x88C2;&#x89E3;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#xFF1A; &#x4E00;&#x4E2A;&#x5C55;&#x793A;&#x5F88;&#x9AD8;&#x9176;&#x5207;&#x6548;&#x7387; &#xFF08;AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x548C; U &#x4E0E; G &#x914D;&#x5BF9;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x663E;&#x793A;&#x4E2D;&#x95F4;&#x5288;&#x88C2;&#x6548;&#x7387; &#xFF08;&#x4E0E; U &#x914D;&#x5BF9; A &#x548C; Tg)&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x7EC4;&#x5305;&#x62EC; 8oxoG&#xFF0C;A &#x4E0E; 8oxoG&#xFF0C;&#x5728;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C;&#x7F51;&#x7AD9;&#x548C;&#x6B21;&#x9EC4;&#x560C;&#x5464; (Hx) T &#x914D;&#x5BF9;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x5DEE;&#x4FEE;&#x590D;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x662F;&#x663E;&#x8457;&#x5173;&#x8054;&#x5207;&#x9664;&#x6548;&#x7387;&#x4E3A; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x3001; &#x5C3F;&#x5627;&#x5576;&#x3001; Tg &#x548C; 8oxoG &#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x3002;&#x4FEE;&#x590D;&#x7387;&#x4E0B;&#x964D;&#x524D;&#x4E09;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D; U:A.&#x5947;&#x602A;&#xFF0C;&#x5207;&#x9664;&#x672F; 8oxoG &#x589E;&#x52A0;&#x8868;&#x660E;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x8001;&#x5316;&#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6700;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x6216;&#x542F;&#x52A8;&#x6B65;&#x9AA4;&#x8FD9;&#x9002;&#x5E94;&#x6709;&#x5173;&#x5177;&#x4F53;&#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x4FEE;&#x6539;&#x57FA;&#x5730;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6;&#x3002;

Base Excision Repair (BER) is the predominant repair pathway responsible for removal of so-called small DNA lesions such as abasic sites (AP site), uracil (U), 8-oxo-7,8-dihydroguanine (8oxoG), thymine glycol (Tg). In this study, we investigated effect of aging on excision efficacy of several endogenous base lesions and AP sites using an in vitro multiplexed fluorescent approach on support (parallelized oligonucleotide cleavage assay). Human fibroblasts nuclear extracts from 29 donors of different ages were characterized in their ability to simultaneously excise the different lesions. Clearly, three different groups of lesions emerged according to the efficiency of their cleavage: one exhibited very high cleavage efficiency (AP sites and U paired with G), one showed intermediate cleavage efficiency (U paired with A and Tg). The third group included 8oxoG, A paired with 8oxoG, T at CpG site and hypoxanthine (Hx) and displayed poor repair. Aging was significantly associated with modification of excision efficiency for AP sites, uracil, Tg and 8oxoG. Repair rate decreased for the first three lesions and the most drastic effects were observed for repair of U:A. Surprisingly, excision of 8oxoG increased with aging suggesting a completely different regulation or adaptation for the initiation step of this related specific repair pathway.

Age-associated modifications of Base Excision Repair activities in human skin fibroblast extracts.

R&eacute;paration d&#39;Excision base (BER) est la voie de r&eacute;paration principal responsable de l&#39;enl&egrave;vement de ce qu&#39;on appelle petites l&eacute;sions de l&#39;ADN comme sites duprojet (site de l&#39;AP), uracile (U), 8-oxo-7, 8-dihydroguanine (8oxoG), glycol thymine (Tg). Dans cette &eacute;tude, nous avons &eacute;tudi&eacute; les effets du vieillissement sur l&#39;efficacit&eacute; de l&#39;excision de plusieurs l&eacute;sions base endog&egrave;nes et sites d&#39;AP &agrave; l&#39;aide d&#39;un in-vitro multiplex&eacute;s approche fluorescent sur support (essai de clivage parall&eacute;lis&eacute;e oligonucl&eacute;otide). Fibroblastes humains des extraits nucl&eacute;aires de 29 donneurs d&#39;&acirc;ges diff&eacute;rents ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;es dans leur capacit&eacute; &agrave; simultan&eacute;ment d&#39;accise les l&eacute;sions diff&eacute;rentes. De toute &eacute;vidence, trois groupes diff&eacute;rents de l&eacute;sions apparues selon l&#39;efficacit&eacute; de leur clivage : efficacit&eacute; d&#39;un clivage tr&egrave;s expos&eacute;es (sites de l&#39;AP et U jumel&eacute; avec G), l&#39;efficacit&eacute; d&#39;un clivage interm&eacute;diaire a montr&eacute; (U jumel&eacute; avec A et Tg). Le troisi&egrave;me groupe compris 8oxoG, A jumel&eacute; avec 8oxoG, T au site du CpG et d&#39;hypoxanthine (Hx) et affiche la mauvaise r&eacute;paration. Vieillissement &eacute;tait significativement associ&eacute;e &agrave; la modification de l&#39;efficacit&eacute; de l&#39;excision des AP sites, uracile, Tg et 8oxoG. Taux de r&eacute;paration a diminu&eacute; pour les trois premi&egrave;res l&eacute;sions et les effets plus drastiques ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es pour la r&eacute;paration des U:A. &eacute;tonnamment, excision de 8oxoG a augment&eacute; avec l&#39;&acirc;ge, ce qui sugg&egrave;re une r&eacute;glementation compl&egrave;tement diff&eacute;rente ou adaptation pour l&#39;&eacute;tape de l&#39;initiation de cette connexes, voie de r&eacute;paration sp&eacute;cifique.

Extraits de modifications li&eacute;es &agrave; l&#39;&acirc;ge des activit&eacute;s de Base Excision Repair dans des fibroblastes de peau humaine.

Base Excision Repair (BER) ist die vorherrschende Reparatur verantwortlich f&uuml;r die Entfernung der so genannten kleinen DNA-L&auml;sionen wie abasic Websites (AP-Stelle), Uracil (U), 8-Oxo-7, 8-Dihydroguanine (8oxoG), Thymin Glykol (Tg). In dieser Studie wir untersucht Auswirkungen des Alterns auf Exzision Wirksamkeit mehrere endogene base L&auml;sionen und AP-Sites, die mit einer in-vitro-Multiplex-fluoreszierende Ansatz zur Unterst&uuml;tzung (parallelisierten Oligonukleotid-Dekollet&eacute;-Test). Menschliche Fibroblasten, die nukleare Ausz&uuml;ge aus 29 Spender unterschiedlichen Alters in ihrer F&auml;higkeit, gleichzeitig gekennzeichnet waren Verbrauchsteuern die verschiedenen L&auml;sionen. Klar, drei verschiedene Gruppen von L&auml;sionen entstand nach der Effizienz ihrer Spaltung: ein ausgestellten Spaltbarkeit sehr hohe Effizienz (AP-Standorte und U gepaart mit G), einem zeigte zwischengeschalteten Spaltung Energieeffizienz (U gepaart mit A und Tg). Die dritte Gruppe geh&ouml;rten 8oxoG, A gepaart mit 8oxoG, T am CpG Standort und Hypoxanthin (Hx) und schlechtem Zustand angezeigt. Alterung war deutlich in Zusammenhang mit &Auml;nderung der Exzision Effizienz f&uuml;r AP Sites, Uracil, Tg und 8oxoG. Reparatur-Satz f&uuml;r die ersten drei L&auml;sionen sank und die drastischste Effekte wurden beobachtet, f&uuml;r die Reparatur von U:A. &uuml;berraschend, Exzision der 8oxoG stieg mit dem Alter eine v&ouml;llig andere Verordnung vorschlagen oder Anpassung f&uuml;r den Schritt der Einleitung dieser verwandten bestimmten Reparatur Weg.

Alters-assoziierte Ver&auml;nderungen des Base Excision Repair Aktivit&auml;ten in menschliche Haut Fibroblasten extrahiert.

Base escissione riparazione (BER) &egrave; il percorso di riparazione predominante responsabile per la rimozione delle cosiddette piccole lesioni del DNA quali abasic siti (sito AP), uracile (U), 8-oxo-7,8-dihydroguanine (8oxoG), glicole timina (Tg). In questo studio, abbiamo studiato l&#39;effetto dell&#39;invecchiamento sull&#39;efficacia di escissione delle lesioni base endogene diversi e siti AP utilizzando in vitro multiplexed approccio fluorescente sul supporto (test di clivaggio del oligonucleotide parallelizzata). Fibroblasti umani estratti nucleari da 29 donatori di et&agrave; diverse sono stati caratterizzati contemporaneamente nella loro capacit&agrave; di recidere le diverse lesioni. Chiaramente, tre diversi gruppi di lesioni emersero secondo l&#39;efficienza della loro scissione: l&#39;efficienza di una scissione esposte molto alta (siti AP e U accoppiati con G), una scissione intermedio ha mostrato efficienza (abbinato a U A e GS). Il terzo gruppo incluso 8oxoG, A accoppiato con 8oxoG, T al sito CpG e hypoxanthine (Hx) e visualizzato riparazione poveri. Invecchiamento era significativamente associata con una modifica di efficienza l&#39;escissione per AP siti, uracile, Tg e 8oxoG. Tasso di riparazione &egrave; diminuito per le prime tre lesioni e sono stati osservati gli effetti pi&ugrave; drastici per la riparazione di U:A. sorprendentemente, escissione di 8oxoG aumentata con l&#39;invecchiamento, suggerendo un regolamento completamente diverso o adattamento per la fase di iniziazione di questo correlati riparazione specifico percorso.

Estrae le modifiche associate all&#39;et&agrave; dell&#39;attivit&agrave; di Base l&#39;escissione riparazione in fibroblasti della pelle umana.

&#x57FA;&#x672C;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x5FA9; (BER) &#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#xFF08;AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#xFF09;&#x3001;&#x30A6;&#x30E9;&#x30B7;&#x30EB; &#xFF08;U&#xFF09;&#x3001;8-&#x30AA;&#x30AD;&#x30BD;-7, 8-dihydroguanine &#xFF08;8oxoG&#xFF09;&#x3001;&#x30C1;&#x30DF;&#x30F3; &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB; (Tg) &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x3044;&#x308F;&#x3086;&#x308B;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A; DNA &#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x306E;&#x512A;&#x52E2;&#x306A;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x5E95;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x5207;&#x9664;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3057;&#x3001;in vitro &#x306B;&#x3088;&#x308B; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x591A;&#x91CD;&#x86CD;&#x5149;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1; (&#x4E26;&#x5217;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x5375;&#x5272;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF09; &#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3002;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x62BD;&#x51FA;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089; 29 &#x306E;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5E74;&#x9F62;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x8005;&#x3067;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5225;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x3092;&#x5207;&#x9664;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3068;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;: 1 &#x3064;&#x5C55;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x958B;&#x88C2;&#x306E;&#x52B9;&#x7387; (AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068; U G &#x3068;&#x5BFE;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;)&#x3001;1 &#x3064;&#x306E;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x4E2D;&#x9593;&#x958B;&#x88C2;&#x306E;&#x52B9;&#x7387; (U &#x3068;&#x5BFE;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F; A &#x3068; Tg&#xFF09;&#x3002;3 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066; 8oxoG A 8oxoG T CpG &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x30D2;&#x30DD;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C1;&#x30F3; (Hx) &#x3068;&#x30DA;&#x30A2;&#x3001;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x4FEE;&#x7406;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x306F;&#x5207;&#x9664;&#x8853;&#x52B9;&#x7387; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3001;&#x30A6;&#x30E9;&#x30B7;&#x30EB;&#x3001;Tg &#x304A;&#x3088;&#x3073; 8oxoG &#x306E;&#x6539;&#x8CEA;&#x3068;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x75C5;&#x5909;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x7387;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x4FEE;&#x7406; U:A. &#x610F;&#x5916;&#x3001;8oxoG &#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x5207;&#x9664;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x6700;&#x3082;&#x629C;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x95A2;&#x9023;&#x3002;

&#x3072;&#x3068;&#x76AE;&#x819A;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x57FA;&#x5730;&#x9664;&#x53BB;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x62BD;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; (BER) abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (ap = &#xC5F0;&#xD569; &#xB274;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;), uracil (U), 8-&#xC625; &#xC18C;-7, 8-dihydroguanine (8oxoG), thymine &#xAE00;&#xB9AC;&#xCF5C; (Tg) &#xB77C;&#xB294; &#xC791;&#xC740; DNA &#xBCC0;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC774; &#xC8FC;&#xB41C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0DD; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC758; &#xC808;&#xC81C; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xB294; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xC9C0;&#xC6D0; (&#xBCD1;&#xB82C;&#xD654; oligonucleotide &#xBD84;&#xC5F4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;)&#xC5D0; &#xD615;&#xAD11; &#xC811;&#xADFC;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC5F0;&#xB839;&#xB300;&#xC758; 29 &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xD575; &#xCD94;&#xCD9C;&#xC774; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xD588;&#xB2E4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC18C;&#xBE44; &#xC138;. &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC758; &#xC138; &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C;,: (AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC0F; U G&#xC640; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC;) &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD55C; &#xC804;&#xC2DC; &#xD6A8;&#xC728;, &#xC911;&#xAC04; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xC728; (U&#xC640; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; A&#xC640; Tg). &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; 8oxoG A 8oxoG, CpG &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; hypoxanthine (Hx)&#xC5D0;&#xC11C; T&#xC640; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xACE0; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xB178;&#xD654;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, uracil, Tg &#xBC0F; 8oxog&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC808;&#xB2E8; &#xD6A8;&#xC728;&#xC758; &#xC218;&#xC815; &#xB41C;. &#xCC98;&#xC74C; &#xC138; &#xAC1C;&#xC758; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xB9AC; &#xC728; &#xAC10;&#xC18C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xACFC;&#xAC10; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; U:A. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB2E4;&#xB978; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB178;&#xD654;&#xC640; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; 8oxog&#xC758; &#xC808;&#xB2E8;&#xC758; &#xC218;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xC774;&#xAC83;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC751; &#xAD00;&#xB828; &#xD2B9;&#xC815; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xB85C;.

&#xC778;&#xAC04; &#xD53C;&#xBD80; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC790;&#xB8CC; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC218;&#xC815; &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Reparaci&oacute;n de la supresi&oacute;n base (BER) es la v&iacute;a de reparaci&oacute;n predominante responsable de la eliminaci&oacute;n de peque&ntilde;as lesiones de ADN llamadas como un sitios (sitio de AP), uracilo (U), 8-oxo-7, 8-dihydroguanine (8oxoG), glicol de timina (Tg). En este estudio, investigamos el efecto de envejecimiento sobre la eficacia de la supresi&oacute;n de varias lesiones de base end&oacute;genas y sitios de AP utilizando un in vitro hab&iacute;an multiplexado enfoque fluorescente en apoyo (ensayo de escote de oligonucle&oacute;tidos paralelizado). Fibroblastos humanos extractos nucleares de 29 donantes de diferentes edades se caracterizaron en su capacidad al mismo tiempo suprimir las diferentes lesiones. Claramente, tres grupos diferentes de lesiones surgieron seg&uacute;n la eficiencia de su escote: eficacia de un escote muy alta expuestas (AP sitios y U con G), escote intermedio demostr&oacute; una eficacia (U asociado A y Tg). El tercer grupo incluida 8oxoG, A hab&iacute;a emparejado con 8oxoG, T en el sitio de CpG e hipoxantina (Hx) y muestra mala reparaci&oacute;n. Envejecimiento se asoci&oacute; significativamente con la modificaci&oacute;n de la eficacia de la supresi&oacute;n para AP, uracilo, Tg y 8oxoG. Reparaci&oacute;n tasa disminuy&oacute; para las tres primeras lesiones y se observaron los efectos m&aacute;s dr&aacute;sticos para reparaci&oacute;n de U:A. sorprendentemente, supresi&oacute;n de 8oxoG aumentado con la edad, sugiriendo una regulaci&oacute;n diferente o v&iacute;a de reparaci&oacute;n espec&iacute;ficos relacionados con la adaptaci&oacute;n para el paso de la iniciaci&oacute;n de este.

Extractos de modificaciones asociado a la edad de las actividades de reparaci&oacute;n de la supresi&oacute;n de Base en fibroblastos de la piel humana.

Violaine Chapuis

CYTOO Cell Architects

Grenoble, France

Improved Visualization and Quantitative Analysis of Drug Effects Using Micropatterned Cells

Violaine Chapuis

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Grenoble, France

Improved Visualization and Quantitative Analysis of Drug Effects Using Micropatterned Cells

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