Bimolecular Fluorescence Complementation

Defining the subcellular distribution of signaling complexes is imperative to understanding the output from that complex. Conventional methods such as ...

University of Illinois at Chicago

&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x53D7;&#x4F53;&#x53D1;&#x51FA;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x800C;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x541E;&#x8FD8;&#x5145;&#x5F53;&#x4E86;&#x6761;&#x5757;&#x5206;&#x5272;&#x7684;&#x8702;&#x7A9D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;Intersectin (ITSN) &#x662F;&#x591A;&#x57DF;&#x7684;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5177;&#x6709;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x5316;&#x9014;&#x5F84;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x591A;&#x4E2A;&#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x57DF;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x51B3; ITSN &#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x5728;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x4E0E;&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x90FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x77ED;&#x53D1;&#x5939; Rna &#x7A33;&#x5B9A;&#x5B89;&#x9759; ITSN &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;ITSN &#x8868;&#x8FBE;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x589E;&#x52A0;&#x795E;&#x7ECF;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x521D;&#x7EA7;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;ITSN &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x541E;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x5B9A;&#x7C7B;&#x4E8C;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176; C2beta (&#x808C;&#x9187;-C2beta&#xFF09; &#x4F5C;&#x4E3A; ITSN &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; ITSN &#x53EF;&#x89C4;&#x7BA1;&#x808C;&#x9187;-C2beta-AKT &#x751F;&#x5B58;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;ITSN &#x5185;&#x819C;&#x56CA;&#x6CE1;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x4E0A;&#x7684;&#x4E0E;&#x808C;&#x9187; C2beta &#x5173;&#x8054;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x57FA;&#x5E95;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x523A;&#x6FC0;&#x808C;&#x9187; C2beta &#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4; AKT &#x6D3B;&#x5316;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3001; &#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x5E95;&#x7247;&#x548C;&#x6551;&#x63F4;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x663E;&#x793A;&#x808C;&#x9187;-C2beta &#x548C; AKT &#x4E0A;&#x4F4D;&#x5230; ITSN&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x793A; ITSN&#xFF0C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5176;&#x4F5C;&#x7528;&#x8C03;&#x8282;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9996;&#x6B21;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7; intersectin-&#x78F7;&#x9178;&#x808C;&#x9187; 3-&#x6FC0;&#x9176; C2beta AKT &#x9014;&#x5F84;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;

While endocytosis attenuates signals from plasma membrane receptors, recent studies suggest that endocytosis also serves as a platform for the compartmentalized activation of cellular signaling pathways. Intersectin (ITSN) is a multidomain scaffolding protein that regulates endocytosis and has the potential to regulate various biochemical pathways through its multiple, modular domains. To address the biological importance of ITSN in regulating cellular signaling pathways versus in endocytosis, we have stably silenced ITSN expression in neuronal cells by using short hairpin RNAs. Decreasing ITSN expression dramatically increased apoptosis in both neuroblastoma cells and primary cortical neurons. Surprisingly, the loss of ITSN did not lead to major defects in the endocytic pathway. Yeast two-hybrid analysis identified class II phosphoinositide 3'-kinase C2beta (PI3K-C2beta) as an ITSN binding protein, suggesting that ITSN may regulate a PI3K-C2beta-AKT survival pathway. ITSN associated with PI3K-C2beta on a subset of endomembrane vesicles and enhanced both basal and growth factor-stimulated PI3K-C2beta activity, resulting in AKT activation. The use of pharmacological inhibitors, dominant negatives, and rescue experiments revealed that PI3K-C2beta and AKT were epistatic to ITSN. This study represents the first demonstration that ITSN, independent of its role in endocytosis, regulates a critical cellular signaling pathway necessary for cell survival.

Regulation of neuron survival through an intersectin-phosphoinositide 3'-kinase C2beta-AKT pathway.

Bien que l&#x26;#39;endocytose att&#xE9;nue les signaux provenant des r&#xE9;cepteurs membranaires, des &#xE9;tudes r&#xE9;centes sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;endocytose sert aussi de plate-forme pour l&#x26;#39;activation compartiment&#xE9;e des voies de signalisation cellulaire. Intersectine (ITSN) est une prot&#xE9;ine d&#x26;#39;&#xE9;chafaudage multidomaine qui r&#xE9;gule l&#x26;#39;endocytose et a le potentiel pour r&#xE9;glementer diff&#xE9;rentes voies biochimiques &#xE0; travers ses multiples domaines modulaires. Pour faire face &#xE0; l&#x26;#39;importance biologique de ITSN dans la r&#xE9;gulation de voies de signalisation cellulaire par rapport &#xE0; l&#x26;#39;endocytose, nous avons r&#xE9;duit au silence l&#x26;#39;expression stable ITSN dans les cellules neuronales en utilisant des ARN en &#xE9;pingle &#xE0; cheveux courts. Diminution de l&#x26;#39;expression ITSN consid&#xE9;rablement augment&#xE9; l&#x26;#39;apoptose dans les cellules de neuroblastome et les deux principaux neurones corticaux. &#xC9;tonnamment, la perte de ITSN n&#x26;#39;a pas conduit &#xE0; des d&#xE9;fauts majeurs dans la voie d&#x26;#39;endocytose. Deux hybrides de levure analyse a identifi&#xE9; la classe II phosphoinositide 3&#x26;#39;-kinase C2beta (PI3K-C2beta) comme une prot&#xE9;ine de liaison ITSN, ce qui sugg&#xE8;re que ITSN peut r&#xE9;glementer un voie de survie PI3K-AKT-C2beta. ITSN associ&#xE9;e &#xE0; la PI3K-C2beta sur un sous-ensemble de v&#xE9;sicules endomembranaire et am&#xE9;lior&#xE9; &#xE0; la fois la base et le facteur de croissance stimul&#xE9;e par la voie PI3K-C2beta activit&#xE9;, r&#xE9;sultant en une activation AKT. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;inhibiteurs pharmacologiques, n&#xE9;gatifs dominants, et des exp&#xE9;riences de sauvetage a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la voie PI3K-AKT et C2beta &#xE9;taient &#xE9;pistatique &#xE0; ITSN. Cette &#xE9;tude repr&#xE9;sente la premi&#xE8;re d&#xE9;monstration que ITSN, ind&#xE9;pendant de son r&#xF4;le dans l&#x26;#39;endocytose, r&#xE9;glemente une voie de signalisation cellulaire critique n&#xE9;cessaire &#xE0; la survie cellulaire.

R&#xE8;glement de la survie des neurones Gr&#xE2;ce &#xE0; un intersectine-phosphoinositide 3&#x26;#39;-kinase Akt-C2beta

Wenn Endozytose Signale von Plasma Membranrezeptoren d&auml;mpft, deuten neuere Studien, dass die Endozytose dient auch als Plattform f&uuml;r die zergliederten Aktivierung der zellul&auml;ren Signalisierung Wege. Intersectin (ITSN) ist ein mit Ger&uuml;sten-Protein, die Endozytose reguliert und hat das Potenzial zur Regulierung von verschiedenen biochemischen Bahnen durch seine mehrere, modulare Dom&auml;nen. Um die biologische Bedeutung der ITSN bei der Regulierung der zellul&auml;re Signalwege in Endozytose im Vergleich zu beheben, haben wir stabil ITSN Ausdruck in Nervenzellen verstummen, mit kurzen Haarnadel RNAs. ITSN Ausdruck drastisch verringern, erh&ouml;ht Apoptosis in den Neuroblastoma Zellen und prim&auml;ren kortikalen Neuronen. &Uuml;berraschenderweise f&uuml;hrte der Verlust von ITSN nicht zu gro&szlig;e M&auml;ngel in der endocytic Weg. Hefe-zwei-Hybrid-Analyse identifiziert die Klasse II Phosphoinositide 3&#39;-Kinase C2beta (PI3K-C2beta) als ein ITSN verbindliches Protein, darauf hindeutet, dass ITSN PI3K-C2beta-AKT &uuml;berleben Weg Regeln kann. ITSN zugeordnete PI3K-C2beta auf einer Untermenge von Endomembrane Bl&auml;schen und zur Verbesserung der basalen und Wachstumsfaktor stimuliert PI3K-C2beta T&auml;tigkeit, was zu AKT Aktivierung. Die Verwendung von pharmakologische Inhibitoren, dominante negative und Rettung Experimente ergaben, dass PI3K-C2beta und AKT zu ITSN epistatic waren. Diese Studie stellt die erste Demonstration, dass ITSN, unabh&auml;ngig von seiner Rolle bei der Endozytose, eine kritische zellular signalisieren Weg notwendig f&uuml;r das &Uuml;berleben der Zelle reguliert.

Verordnung von Neuron &Uuml;berleben durch eine intersectin-Phosphoinositid-3&#39;-Kinase-C2beta-AKT-Pathway.

Mentre endocitosi attenua segnali dai recettori di membrana plasmatica, studi recenti suggeriscono che endocitosi serve anche come una piattaforma per l&#39;attivazione delle vie di segnalazione cellulare compartimenti stagni. Intersectin (ITSN) &egrave; una proteina multidominio ponteggi che regolamenta endocitosi e ha il potenziale per regolamentare le varie vie biochimiche attraverso il suo multiplo, domini modulari. Per affrontare l&#39;importanza biologica della ITSN nella regolazione cellulare segnalazione percorsi versus in endocitosi, noi abbiamo messo a tacere stabile espressione ITSN in cellule neuronali tramite short hairpin RNAs. Diminuzione espressione ITSN drammaticamente aumentato apoptosis in cellule di neuroblastoma e neuroni corticali primari. Sorprendentemente, la perdita di ITSN non ha portato ai principali difetti nel percorso endocitico. Lievito analisi dei due ibridi identificata classe II fosfoinositide 3-chinasi C2beta (PI3K-C2beta) come una proteina ITSN, suggerendo che ITSN pu&ograve; disciplinare un percorso di sopravvivenza PI3K-AKT-C2beta. ITSN associato PI3K-C2beta su un sottoinsieme delle endomembrane vescicole e maggiore attivit&agrave; di PI3K-C2beta basale e stimolata dal fattore di crescita, con conseguente attivazione di AKT. L&#39;uso di inibitori farmacologici negativi dominanti ed esperimenti di salvataggio ha rivelato che PI3K-C2beta e AKT erano epistatici a ITSN. Questo studio rappresenta la prima dimostrazione che ITSN, indipendente del suo ruolo nell&#39;endocitosi, regola un critico cellular signaling pathway necessarie per la sopravvivenza delle cellule.

Regolamento di sopravvivenza neurone attraverso un intersectin-fosfoinositide 3&#39;-chinasi AKT C2beta via.

&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x6E1B;&#x200B;&#x200B;&#x8870;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x533A;&#x5206;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Intersectin&#xFF08;ITSN&#xFF09;&#x306F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ITSN&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x77ED;&#x9396;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3;RNA&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ITSN&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6C88;&#x9ED9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6E1B;&#x5C11;ITSN&#x5F0F;&#x304C;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E00;&#x6B21;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;ITSN&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x306F;&#x81F3;&#x3089;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x9175;&#x6BCD;&#x30C4;&#x30FC;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;ITSN&#x306F;&#x3001;PI3K-C2beta-AKT&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;ITSN&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;3&#x26;#39;-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C2beta&#xFF08;PI3K-C2beta&#xFF09;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x5206;&#x6790;&#x3002; ITSN&#x306F;&#x3001;AKT&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x5185;&#x819C;&#x5C0F;&#x80DE;&#x3068;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x57FA;&#x5E95;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x56E0;&#x5B50;&#x523A;&#x6FC0;PI3K-C2beta&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;PI3K-C2beta&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3001;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3001;&#x6551;&#x52A9;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;PI3K-AKT C2beta&#x3068;&#x306F;ITSN&#x306B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;ITSN&#x304C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Intersectin-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;3&#x26;#39;-&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;C2beta-AKT&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;

&#xBC18;&#xBA74; endocytosis &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xC57D;&#xD654;, &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; &#xADF8; endocytosis &#xB610;&#xD55C; &#xD55C;&#xC815;&#xB41C; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xC5ED;&#xD560;. Intersectin (ITSN)&#xC740; endocytosis &#xADDC;&#xC81C; &#xBC0F; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xBC30;&#xC218;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xACBD;&#xB85C;&#xB97C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xB2E4;&#xC911; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBE44; &#xACC4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xD615; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;. Endocytosis&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; ITSN&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC548;&#xC815;&#xC801; RNAs &#xC9E7;&#xC740; &#xBA38;&#xB9AC; &#xD540;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; ITSN &#xC2DD; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCE68;&#xBB35; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; apoptosis &#xC99D;&#xAC00; ITSN &#xC2DD;&#xC744; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, ITSN &#xC190;&#xC2E4; endocytic &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xD568;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II phosphoinositide 3&#39;-&#xB2C8; C2beta (PI3K-C2beta) ITSN PI3K-C2beta-AKT &#xC0DD;&#xC874; &#xD1B5;&#xB85C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xB41C; ITSN &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C;. ITSN PI3K-c2beta&#xC640; endomembrane vesicles&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xBC0F; AKT &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xAE30;&#xC800; &#xBC0F; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC790;&#xADF9; PI3K C2beta &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC15;&#xD654;. &#xC57D;&#xB9AC; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xAD6C;&#xC870; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC0AC;&#xC6A9; PI3K C2beta &#xBC0F; AKT ITSN epistatic &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB370;&#xBAA8;&#xB97C; ITSN, endocytosis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Intersectin-phosphoinositide 3&#39;-&#xD0A4; C2beta-AKT &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;.

Mientras que la endocitosis aten&#xFA;a las se&#xF1;ales de los receptores de la membrana plasm&#xE1;tica, estudios recientes sugieren que la endocitosis tambi&#xE9;n sirve como una plataforma para la activaci&#xF3;n compartimentada de v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular. Intersectin (ITSN) es una prote&#xED;na multidominio andamiaje que regula la endocitosis y tiene el potencial para regular diversas v&#xED;as bioqu&#xED;micas a trav&#xE9;s de sus varios dominios, modulares. Para hacer frente a la importancia biol&#xF3;gica de ITSN en la regulaci&#xF3;n de v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular en comparaci&#xF3;n con en la endocitosis, que han silenciado de forma estable la expresi&#xF3;n ITSN en las c&#xE9;lulas neuronales mediante el uso de ARN de horquilla corta. La disminuci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n dram&#xE1;tica ITSN aumento de la apoptosis en c&#xE9;lulas de neuroblastoma y los dos principales neuronas corticales. Sorprendentemente, la p&#xE9;rdida de ITSN no dio lugar a graves defectos en la v&#xED;a endoc&#xED;tica. Levadura de dos h&#xED;bridos de an&#xE1;lisis identificaron la clase II phosphoinositide 3&#x26;#39;-quinasa C2beta (PI3K-C2beta) como una prote&#xED;na de uni&#xF3;n ITSN, lo que sugiere que ITSN puede regular una v&#xED;a de supervivencia PI3K-AKT C2beta. ITSN asociado con PI3K C2beta en un subconjunto de ves&#xED;culas endomembrane y mejorado tanto basal como factor de crecimiento estimulado PI3K C2beta actividad, lo que resulta en la activaci&#xF3;n de AKT. El uso de inhibidores farmacol&#xF3;gicos, negativos dominantes, y los experimentos de rescate revel&#xF3; que la PI3K-AKT C2beta y fueron epistatic a ITSN. Este estudio representa la primera demostraci&#xF3;n de que ITSN, independiente de su papel en la endocitosis, regula una v&#xED;a de se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular cr&#xED;tica necesaria para la supervivencia celular.

Katy A. Wong

Department of Pharmacology

University of Illinois at Chicago

Bimolecular Fluorescence Complementation

Katy A. Wong

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University of Illinois at Chicago

Bimolecular Fluorescence Complementation

Department of Pharmacology