Generation, Purification, and Characterization of Cell-invasive DISC1 Protein Species

Protein aggregation is seen as a general hallmark of chronic, degenerative brain conditions like, for example, in the neurodegenerative diseases ...

Medical School Düsseldorf, Germany

&#x4E2D;&#x65AD;&#x5931;&#x8ABF; 1 &#xFF08;DISC1&#xFF09; &#x3068; dysbindin &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x9023;&#x9396;&#x7814;&#x7A76;&#x7D71;&#x5408;&#x5931;&#x8ABF;&#x75C7;&#x5019;&#x88DC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x4E21;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x5931;&#x8ABF;&#x75C7;&#x3084;&#x7CBE;&#x795E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x53CE;&#x675F;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;

2 &#x3064;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x7CBE;&#x795E;&#x75C5;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x53CE;&#x675F;&#x6027;: &#x7D30;&#x80DE;&#x4FB5;&#x8972;&#x4E2D;&#x65AD;-&#x306B;-&#x7D71;&#x5408;&#x5931;&#x8ABF;&#x75C7; 1 aggresomes &#x306B; dysbindin &#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x3002;

&#xC815;&#xC2E0; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC911;&#xB2E8;-&#xC5D0;&#xC11C;-&#xC99D; 1 (DISC1)&#xACFC; dysbindin &#xB3C5;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804; &#xACB0;&#xD569; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC815;&#xC2E0; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC99D;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; subcellular &#xC704;&#xCE58;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD560;&#xB2F9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xC2E0; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC99D; &#xB610;&#xB294; &#xC815;&#xC2E0; &#xC9C8;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC218;&#xB834; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC870;&#xC0AC;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC815;&#xC2E0; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC735;&#xD569;: &#xC815;&#xC2E0; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE68;&#xC785; &#xBC29;&#xD574;-&#xC5D0;&#xC11C;-&#xC99D; 1 aggresomes&#xC5D0; dysbindin&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9;.

Interrumpido en esquizofrenia 1 (DISC1) tanto dysbindin han sido identificados como genes candidatos de esquizofrenia en estudios de ligamiento gen&eacute;tico independiente. Las prote&iacute;nas se han asignado funciones y distintas localizaciones subcelulares. Investigamos si ambas prote&iacute;nas convergen en un camino com&uacute;n espec&iacute;fico para la esquizofrenia o enfermedades mentales.

Convergencia de dos genes independientes de enfermedad mental en el nivel de prote&iacute;na: reclutamiento de dysbindin para celular invasor interrumpido-en-esquizofrenia 1 aggresomes.

Both disrupted-in-schizophrenia 1 (DISC1) and dysbindin have been identified as schizophrenia candidate genes in independent genetic linkage studies. The proteins have been assigned distinct subcellular locations and functions. We investigated whether both proteins converge into a common pathway specific for schizophrenia or mental diseases.

Convergence of two independent mental disease genes on the protein level: recruitment of dysbindin to cell-invasive disrupted-in-schizophrenia 1 aggresomes.

Perturb&eacute;-dans-schizophr&eacute;nie 1 (DISC1) tant obligatoire ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s comme des g&egrave;nes candidats schizophr&eacute;nie dans les &eacute;tudes de liaison g&eacute;n&eacute;tique ind&eacute;pendante. Les prot&eacute;ines ont &eacute;t&eacute; affect&eacute;s &agrave; des fonctions et des emplacements sous-cellulaires distincts. Nous avons examin&eacute; si les deux prot&eacute;ines convergent dans une voie commune sp&eacute;cifique pour la schizophr&eacute;nie ou de maladies mentales.

Convergence des deux g&egrave;nes ind&eacute;pendants de la maladie mentale au niveau de la prot&eacute;ine : recrutement d&#39;obligatoire &agrave; agr&eacute;somes cellulaire invasive perturb&eacute;-dans-schizophr&eacute;nie 1.

Unterbrochen-Schizophrenie-1 (DISC1) und Dysbindin wurden als Schizophrenie Kandidatengene in unabh&auml;ngigen Genkopplung Studien identifiziert. Die Proteine wurden unterschiedliche subzellularen Standorte und Funktionen zugewiesen. Wir wurde untersucht, ob beide Proteine in einen gemeinsamen Weg, die spezifisch f&uuml;r Schizophrenie oder psychischen Krankheiten konvergieren.

Konvergenz von zwei unabh&auml;ngigen Geisteskrankheit-Gene auf die Protein-Ebene: Rekrutierung von Dysbindin zu Zelle-invasive gest&ouml;rt-in-Schizophrenie 1 Aggresomes.

Sia perturbato nella schizofrenia 1 (DISC1) e DBNDD1 sono stati identificati come geni candidati schizofrenia negli studi di linkage genetico indipendente. Le proteine sono state assegnate le funzioni e distinte posizioni subcellulari. Abbiamo studiato se entrambi proteine convergono in un percorso comune specifico per schizofrenia o malattie mentali.

Convergenza di due geni malattia mentale indipendente sul livello della proteina: assunzione di DBNDD1 per cella-invasiva perturbato-in-schizofrenia 1 aggresomes.

&#x7CBE;&#x795E;&#x5206;&#x88C2;&#x75C7;&#x4E2D;&#x65AD; 1 (DISC1) &#x548C; dysbindin &#x88AB;&#x5217;&#x4E3A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x8FDE;&#x9501;&#x7814;&#x7A76;&#x7CBE;&#x795E;&#x5206;&#x88C2;&#x75C7;&#x5019;&#x9009;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5DF2;&#x5206;&#x914D;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x662F;&#x5426;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x6C47;&#x805A;&#x6210;&#x7279;&#x5B9A;&#x7CBE;&#x795E;&#x5206;&#x88C2;&#x75C7;&#x6216;&#x7CBE;&#x795E;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x5171;&#x540C;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;

&#x4E24;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7CBE;&#x795E;&#x75BE;&#x75C5;&#x57FA;&#x56E0;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0A;&#x7684;&#x6536;&#x655B;&#x6027;&#xFF1A; &#x5411;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x521B;&#x4E2D;&#x65AD;-&#x4E2D;-&#x7CBE;&#x795E;&#x5206;&#x88C2;&#x75C7; 1 aggresomes dysbindin &#x62DB;&#x8058;&#x3002;

&#x7EC8;&#x7AEF;&#x5BF9;&#x6240;&#x505A;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684; N acetylgalactosamine &beta;4 &#x52A0;&#x7CD6;&#x7684; N-&#x4E59;&#x9170;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4E0E; N&#xFF0C;N-diacetyllactosediamine (LacdiNAc) &#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x5DF2;&#x6709;&#x7FD4;&#x5B9E;&#x6709;&#x597D;&#x51E0;&#x4E2A; N &#x94FE;&#x63A5;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x591A;&#x80BD;&#xFF0C;&#x5982;&#x795E;&#x7ECF;&#x6FC0;&#x7D20;&#x3002;&#x66F4;&#x77E5;&#x4E4B;&#x751A;&#x5C11;&#x7EA6; O-&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x8FD9;&#x65B9;&#x9762;&#x56E0;&#x4E3A;&#x53EA;&#x6709;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5375;&#x900F;&#x660E;&#x5E26;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D; 3 &#xFF08;ZP3) &#x548C;&#x725B;&#x8C03;&#x636E;&#x79F0;&#x88AB; LacdiNAc &#x4FEE;&#x6539;&#x3002;&#x5728;&#x5BFB;&#x627E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4FEE;&#x9970;&#x7684; O &#x94FE;&#x63A5; LacdiNAc &#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x516D;&#x79EF;&#x6781;&#x7269;&#x79CD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x548C;&#x91CD;&#x7EC4; O-&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x3001; &#x6216;&#x77E9;&#x9635;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x90FD;&#x662F; ZP3 &#x548C;&#x4E94;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B; LacdiNAc &#x9633;&#x6027;&#x7269;&#x79CD; ECM1&#xFF0C;AMACO&#xFF0C;&alpha;-&#x808C;&#x3001; &#x5DE2;-1 &#x548C; neurofascin&#x3002;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x62AB;&#x9732;&#x6838;&#x5FC3; 2 &#x57FA;&#x4E8E;&#x56DB; O &#x94FE;&#x63A5; LacdiNAc&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4FEE;&#x6539;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; 2 &#x578B; LacNAc &#x603B;&#x7AD9;&#x3001; &#x5CA9;&#x85FB;&#x7CD6;&#x3001; &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x6216;&#x786B;&#x9178;&#x76D0;&#x7684;&#x5171;&#x540C;&#x7ED3;&#x6784;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7ED3;&#x6784;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x7C7B;&#x578B; O &#x86CB;&#x767D;&#x7CD6;&#x662F;&#x4E25;&#x683C;&#x5177;&#x4F53;&#x7684; LacdiNAc &#x603B;&#x7AD9;&#xFF1A; &#x7CD6;&#x4E0E; GalNAc&beta;1 4(phospho-) &#x5E38;&#x6CF0;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;MS(2) tetralysine &#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x5168;&#x7CD6; alditols MS(n) &#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x9610;&#x660E;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x78F7; LacdiNAc &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;-293 &#x4EE5;&#x53CA;&#x4E0E;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x725B;&#x8111;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;

&#x94FE;&#x63A5; O N&#xFF0C;N&#39;--diacetyllactosamine &#xFF08;LacdiNAc&#xFF09; &#x4FEE;&#x6539;&#x4E2D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x4E13;&#x95E8;&#x5728;&#x6A2A;&#x7684; N-&#x4E59;&#x9170;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x805A;&#x7CD6;&#x3002;

The terminal modification of glycans by Î²4 addition of N-acetylgalactosamine to N-acetylglucosamine with formation of the N,N-diacetyllactosediamine (LacdiNAc) moiety has been well documented for a number of N-linked glycoproteins and peptides, like neurohormones. Much less is known about O-glycoproteins in this regard because only human zona pellucida glycoprotein 3 (ZP3) and bovine proopiomelanocortin were reported to be LacdiNAc-modified. In searching for mammalian proteins modified with O-linked LacdiNAc we identified six positive species among nine endogenous and recombinant O-glycoproteins, which were extracellular matrix, or matrix-related proteins. These are ZP3 and the five novel LacdiNAc-positive species ECM1, AMACO, nidogen-1, Î±-dystroglycan, and neurofascin. The mass spectrometric analyses revealed a core 2-based tetrasaccharide as the common structural basis of O-linked LacdiNAc that could be further modified, similar to the type 2 LacNAc termini, with fucose, sialic acid, or sulfate. Here, we provide structural evidence for a novel type of mucin-type O-glycans that is strictly specific for LacdiNAc termini: sugar phosphorylation with formation of GalNAcÎ²1-4(phospho-)GlcNAc. The structural details of the phosphatase-labile compound were elucidated by MS(2) analysis of tetralysine complexes and by MS(n) measurements of the permethylated glycan alditols. Phospho-LacdiNAc was detected in human HEK-293 as well as in mouse myoblast cells and in bovine brain tissue.

O-linked N,N'-diacetyllactosamine (LacdiNAc)-modified glycans in extracellular matrix glycoproteins are specifically phosphorylated at subterminal N-acetylglucosamine.

La modification terminale des glycanes par &beta;4 addition de N-ac&eacute;tylgalactosamine de N-ac&eacute;tylglucosamine avec formation de N, N-diacetyllactosediamine (LacdiNAc) portion a &eacute;t&eacute; bien document&eacute;e pour un certain nombre de peptides, comme neurohormones et de glycoprot&eacute;ines N-li&eacute;es. Beaucoup moins sait des O-glycoprot&eacute;ines &agrave; cet &eacute;gard, car seulement humain zone pellucide glycoprot&eacute;ine 3 (ZP3) et la proopiom&eacute;lanocortine bovine ont &eacute;t&eacute; signal&eacute;s &agrave; &ecirc;tre modifi&eacute;s LacdiNAc. &Agrave; la recherche de prot&eacute;ines de mammif&egrave;res modifi&eacute;s avec LacdiNAc O-li&eacute;s, nous avons identifi&eacute; six esp&egrave;ces positives parmi neuf endog&egrave;nes et recombinants O-glycoprot&eacute;ines, qui &eacute;taient de la matrice extracellulaire, ou prot&eacute;ines li&eacute;es &agrave; la matrice. Voici ZP3 et cinq nouveaux s&eacute;ropositifs au LacdiNAc esp&egrave;ces ECM1, AMACO, neurofascin nidogene-1 et &alpha;-dystroglycane. Les analyses par spectrom&eacute;trie de masse a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un t&eacute;trasaccharide 2-en fonction de base comme la base structurelle commune de LacdiNAc O-li&eacute;s qui puisse &ecirc;tre modifi&eacute;e ult&eacute;rieurement, semblables &agrave; des terminaisons de LacNAc de type 2, avec fucose, acide sialique ou sulfate. Ici, nous fournissons des preuves de structure pour un nouveau type de mucine de type O-glycanes strictement sp&eacute;cifique pour LacdiNAc termini : phosphorylation avec formation de GalNAc&beta;1-4(phospho-) GlcNAc du sucre. Les d&eacute;tails de structure du compos&eacute; labile phosphatase ont &eacute;t&eacute; &eacute;lucid&eacute;es par une analyse MS(2) des tetralysine complexes et par des mesures de MS(n) de la perm&eacute;thyl&eacute;s glycan alditols. Phospho-LacdiNAc a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute; dans humain HEK-293, ainsi que dans des cellules myoblastiques souris et dans le tissu de cerveau de boeuf.

N O-li&eacute;s, N&#39;--diacetyllactosamine (LacdiNAc) modification des glycanes dans la matrice extracellulaire glycoprot&eacute;ines sont phosphoryl&eacute;s sp&eacute;cifiquement &agrave; la N-ac&eacute;tylglucosamine subterminale.

Die terminal &Auml;nderung der Glykane von &beta;4 Zusatz von N-Acetylgalactosamin, N-Acetylglucosamin mit Bildung von N, N-Diacetyllactosediamine (LacdiNAc) Teil wurde auch f&uuml;r eine Reihe von N gebundene Glykoproteine und Peptide, wie Neurohormones dokumentiert. Viel weniger ist bekannt &uuml;ber O-Glykoproteine in dieser Hinsicht, da nur menschliche Zona Pellucida Glykoprotein 3 (ZP3) und Rinder Proopiomelanocortin wurde berichtet, dass die LacdiNAc ge&auml;ndert werden. Bei der Suche nach S&auml;ugetierproteine mit O-chromosomale LacdiNAc ge&auml;ndert haben wir sechs positive Arten unter den neun endogene und rekombinante O-Glykoproteine, extrazellul&auml;re Matrix oder Matrix-&auml;hnliche Proteine wurden identifiziert. Dies sind die ZP3 und die f&uuml;nf neuartigen LacdiNAc-positiven Arten ECM1, AMACO, Nidogen-1, &alpha;-Dystroglycan und Neurofascin. Die massenspektrometrische Analyse ergab einen Kern 2 Prozessoren Tetrasaccharide als gemeinsame strukturelle Grundlage f&uuml;r O-chromosomale LacdiNAc, die weitere, &auml;hnlich wie der Typ-2-LacNAc Termini, Fucose, Sialins&auml;ure oder Sulfat ge&auml;ndert werden k&ouml;nnte. Hier bieten wir strukturelle Beweise f&uuml;r einen neuartigen Mucin-Typ O-Glykanen, die streng spezifisch f&uuml;r LacdiNAc Bahnhof Termini: Phosphorylierung mit Bildung von GalNAc&beta;1-4(phospho-)-GlcNAc Zucker. Die strukturellen Details der Phosphatase-zersetzliche Substanz wurden durch MS(2) Analyse der Tetralysine-komplexe und MS(n) Messungen der Permethylated-Glykan-Alditols verdeutlicht. Phospho-LacdiNAc wurde in menschlichen HEK-293 ebenso wie in der Maus Myoblast Zellen und Rinder Hirngewebe erkannt.

O-chromosomale N, N&#39;--Diacetyllactosamine (LacdiNAc) &Auml;nderung Glykane im extrazellul&auml;ren Matrix Glykoproteine sind speziell bei subterminal N-Acetylglucosamin phosphoryliert.

La modifica terminale dei glicani da &beta;4 aggiunta di N-acetilgalattosamina N-acetilglucosamina con formazione di N, N-diacetyllactosediamine (LacdiNAc) moiety &egrave; stata ben documentata per un numero di glicoproteine N-linked e peptidi, come neurormoni. Molto meno &egrave; conosciuto circa O glicoproteine a questo proposito perch&eacute; solo glicoproteina umana pellucida di zona 3 (ZP3) e Proopiomelanocortina bovino sono stati segnalati per essere modificato in LacdiNAc. Nella ricerca di mammiferi proteine modificate con LacdiNAc O-linked abbiamo individuato sei specie positive tra nove endogene e ricombinante O-glicoproteine, che erano di matrice extracellulare, o proteine correlate a matrix. Questi sono ZP3 e cinque romanzo LacdiNAc-positivi specie ECM1, AMACO, nidogen-1, distroglicano &alpha; e neurofascin. Le analisi di spettrometrihe di massa ha rivelato un nucleo basato su 2 tetrasaccharide come la base strutturale comune di LacdiNAc legata O che potrebbe essere ulteriormente modificato, simile per i termini di LacNAc tipo 2, fucosio, acido sialico, o solfato. Qui, forniamo prove strutturali per un nuovo tipo di mucina-tipo O-glicani strettamente specifico per LacdiNAc termini: fosforilazione con formazione di GlcNAc GalNAc&beta;1-4(phospho-) di zucchero. I dettagli strutturali della fosfatasi-labile mescola furono chiar&igrave; MS(2) analisi dei complessi di tetralysine e di misure MS(n) del permethylated glycan alditols. Fosfo-LacdiNAc &egrave; stato rilevato in umano HEK-293 cos&igrave; come in cellule di topo myoblast e nel tessuto del cervello bovino.

Legata O N, N&#39;--diacetyllactosamine (LacdiNAc) modificato glicani nella matrice extracellulare glicoproteine sono specificamente fosforilate a subterminal N-acetilglucosamina.

N, N-diacetyllactosediamine (LacdiNAc) &#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068; n-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x306B; n-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;, &beta;4 &#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7CD6;&#x9396;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x591A;&#x6570;&#x306E; N &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3001;&#x5C3E;&#x90E8;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x3088;&#x304F;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E; O &#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x70B9;&#x3067;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x3060;&#x3051;&#x4EBA;&#x9593;&#x30AA;&#x30B9;&#x30DF;&#x30A6;&#x30E0;&#x9178;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D; 3 (ZP3) &#x3068;&#x30A6;&#x30B7; &#x30D7;&#x30ED;&#x30AA;&#x30D4;&#x30AA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CE;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30F3; LacdiNAc &#x5909;&#x66F4;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;O &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF; LacdiNAc &#x3067;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x691C;&#x7D22;&#x3067; 6 &#x306E;&#x6B63;&#x7A2E; 9 &#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; O - &#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x7CD6;&#x3001;&#x9593;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F; ZP3 &#x3068; 5 &#x5C0F;&#x8AAC; LacdiNAc &#x6B63;&#x7A2E; ECM1&#x3001;AMACO&#x3001;&#x3067;&#x3059; nidogen 1, &alpha; &#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x3068;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x3002;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x5206;&#x6790; 2 &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30B3;&#x30A2;&#x74B0;&#x72B6;&#x56DB;&#x7CD6;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 2 LacNAc &#x30C6;&#x30EB;&#x30DF;&#x30CB; &#x30D5;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;, &#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x786B;&#x9178;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F; O &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E; LacdiNAc &#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x57FA;&#x76E4;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; LacdiNAc &#x30C6;&#x30EB;&#x30DF;&#x30CB;&#x3092;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30E0;&#x30C1;&#x30F3;&#x578B; O-&#x7CD6;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;: &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; GalNAc&beta;1 4(phospho-) GlcNAc &#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x7802;&#x7CD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30; permethylated &#x7CD6;&#x9396; alditols &#x306E; MS(n) &#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067; tetralysine &#x932F;&#x4F53;&#x306E; MS(2) &#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;.&#x30EA;&#x30F3; LacdiNAc &#x4EBA;&#x9593; HEK-293 &#x540C;&#x69D8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x725B;&#x306E;&#x8133;&#x7D44;&#x7E54;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

O &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF; N, N&#39;--diacetyllactosamine (LacdiNAc) &#x5909;&#x66F4;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8CEA;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x4F53;&#x578B; n-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3;&#x3067;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x7CD6;&#x9396;&#x3002;

N, N-diacetyllactosediamine (LacdiNAc) moiety &#xD615;&#xC131; N acetylglucosamine N acetylgalactosamine&#xC758; &beta;4 &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; glycans&#xC758; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC218;&#xC815; N &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; glycoproteins &#xBC0F; neurohormones&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC798; &#xBB38;&#xC11C;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6E8;&#xC52C; &#xB35C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; O glycoproteins&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC774;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; zona pellucida &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 3 (ZP3)&#xC640; &#xC18C;&#xACFC; proopiomelanocortin LacdiNAc &#xC218;&#xC815; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC84C;&#xB2E4;. O &#xC5F0;&#xACB0; Lacdinac&#xB85C; &#xC218;&#xC815; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC5D0;&#xC11C; 9 &#xAC1C;&#xC758; &#xC0DD; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; O-glycoproteins, &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;, &#xB610;&#xB294; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC911; 6 &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC885; &#xD30C;&#xC545;. &#xC774;&#xB4E4;&#xC740; ZP3 5 &#xC18C;&#xC124; LacdiNAc &#xC591;&#xC131; &#xC885; ECM1, AMACO, nidogen 1, &alpha;-dystroglycan, &#xBC0F; neurofascin. &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xCD94;&#xAC00; &#xC218;&#xC815;&#xD560; &#xC218;, &#xC720;&#xD615; 2 LacNAc &#xD14C;&#xB974;&#xBBF8;&#xB2C8; fucose sialic &#xC0B0; &#xB610;&#xB294; &#xD669;&#xC0B0;&#xACFC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC624; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Lacdinac&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC870; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xCF54;&#xC5B4; 2 &#xAE30;&#xBC18; tetrasaccharide&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; LacdiNAc &#xD14C;&#xB974;&#xBBF8;&#xB2C8; mucin &#xD615; &#xC624; glycans&#xC758; &#xC18C;&#xC124; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xAE30;,: GalNAc&beta;1 4(phospho-) Glcnac&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xC0B0;&#xD654; &#xC124;&#xD0D5;. &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC138;&#xBD80; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; tetralysine &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; MS(2) &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; permethylated glycan alditols&#xC758; MS(n) &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD574;&#xBA85; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC778; Lacdinac&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; HEK-293 &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; myoblast &#xC140;&#xC73C;&#xB85C;&#xC640; &#xC18C; &#xB1CC; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

O &#xB9C1;&#xD06C; N, N&#39;--diacetyllactosamine (LacdiNAc) &#xC218;&#xC815; glycoproteins subterminal N acetylglucosamine&#xC5D0;&#xC11C; phosphorylated &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC5D0; glycans.

La modificaci&oacute;n terminal de glicanos sumando &beta;4 N-acetilgalactosamina a N-acetilglucosamina con la formaci&oacute;n de la N, N-diacetyllactosediamine (LacdiNAc) mol&eacute;cula ha sido documentada por una serie de glicoprote&iacute;nas N-ligado y p&eacute;ptidos, como neurohormonas. Mucho menos se conoce O-glicoprote&iacute;nas en este sentido porque s&oacute;lo humano zona pel&uacute;cida glicoprote&iacute;na 3 (ZP3) y bovina proopiomelanocortina se inform&oacute; que por LacdiNAc modificado. En la b&uacute;squeda de prote&iacute;nas mam&iacute;feras modificadas con LacdiNAc O-ligado se identificaron seis especies positivas entre nueve end&oacute;genas y recombinantes O-glicoprote&iacute;nas, matriz extracelular, o prote&iacute;nas relacionadas con la matriz. Se trata de ZP3 y las cinco especies nuevas del LacdiNAc-positivo ECM1, AMACO, nidogen-1, &alpha;-dystroglycan y neurofascin. Los an&aacute;lisis de espectrometr&iacute;a de masa revelan un tetrasac&aacute;rido basadas en 2 de base como la base estructural com&uacute;n de LacdiNAc vinculados O que pod&iacute;a ser m&aacute;s modificada, similares a los t&eacute;rminos de la LacNAc del tipo 2, con fucosa, &aacute;cido si&aacute;lico o sulfato. Aqu&iacute;, nos proporcionan la evidencia estructural para un tipo nuevo de tipo mucina O-glicanos estrictamente espec&iacute;fico para LacdiNAc termini: az&uacute;car fosforilaci&oacute;n con formaci&oacute;n de GlcNAc GalNAc&beta;1-4(phospho-). Los detalles estructurales del compuesto fosfatasa-l&aacute;bil fueron dilucidados por el an&aacute;lisis MS(2) de tetralysine complejos y por medidas de MS(n) de la alditols de permethylated glicanos. Fosfo-LacdiNAc fue detectado en humanos HEK-293, as&iacute; como en las c&eacute;lulas de rat&oacute;n mioblastos y en tejido de cerebro bovino.

Vinculados O N, N&#39;--diacetyllactosamine (LacdiNAc) modificado glycans en matriz extracelular glicoprote&iacute;nas espec&iacute;ficamente son fosforiladas en subterminal N-acetilglucosamina.

&#x79F0;&#x4E3A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x81EA;&#x4F53;&#x8367;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x662F;&#x8111;&#x8001;&#x5316;&#x4E0D;&#x53D8;&#x6807;&#x5FD7;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6750;&#x6599;&#x5DF2;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x4E0D;&#x7279;&#x522B;&#x76F8;&#x5173;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5E9F;&#x65E7;&#x7269;&#x8D44;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E24;&#x884C;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x53EF;&#x80FD;&#x5C1A;&#x672A;&#x88AB;&#x8BBF;&#x8005;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF1A; (i) &#x9057;&#x4F20;&#x79EF;&#x7D2F;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x8FC7;&#x65E9;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8721;&#x6837;&#x8D28;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x6C89;&#x79EF;&#x75C7;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x81EA;&#x4F53;&#x8367;&#x5149;&#x6750;&#x6599;&#x8868;&#x660E;&#x8102;&#x8910;&#x7D20; &#xFF1B; &#x76F4;&#x63A5;&#x75C5;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x94FE;&#x63A5;(&#x4E8C;) &#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x662F;&#x673A;&#x68B0;&#x5316;&#x6302;&#x94A9;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x9EC4;&#x6591;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E24;&#x6B65;&#x5BF9;&#x8517;&#x7CD6;&#x68AF;&#x5EA6;&#x8D85;&#x901F;&#x79BB;&#x5FC3;&#x51C0;&#x5316;&#x81EA;&#x4F53;&#x8367;&#x5149;&#x6750;&#x6599;&#x4ECE;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E2A;&#x4F53;&#x7684;&#x989E;&#x53F6;&#x548C;&#x6D77;&#x9A6C;&#x76AE;&#x5C42;&#x3002;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x4E00;&#x5957;&#x5171;&#x540C;&#x7684; (&#x5176;&#x4E2D; &gt; 200 &#x603B;) 49 &#x4E3B;&#x8981;&#x6765;&#x81EA;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x6B64;&#x8111;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x4E86;&#x83CC;&#x79CD;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5168;&#x8111;&#x5927;&#x9F20;&#x8102;&#x8910;&#x7D20; &#xFF08;&#x603B; &gt; 300 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x540C;&#x4E00;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x4EA7;&#x751F;&#x91CD;&#x53E0;&#x7684; 32 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28; (64%)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x6765;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x8001;&#x9F20;&#x5927;&#x8111;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x548C;&#x6807;&#x8BC6;&#x9AD8;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#xFF0C;&#xFF08;&#x7F8E;&#x56FD;&#xFF09; &#x6307;&#x5411;&#x5E38;&#x89C1;&#x7EC6;&#x80DE; pathomechanisms &#x5C3D;&#x7BA1;&#x5E9E;&#x5927;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x5BFF;&#x547D;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E0D;&#x540C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x73B0;&#x5728;&#x8BA9;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x5B89;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9014;&#x5F84;&#x671F;&#x95F4;&#x4E0E;&#x5E74;&#x9F84;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#x6027;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;

&#x4EBA;&#x548C;&#x5927;&#x9F20;&#x8111;&#x8102;&#x8910;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x3002;

The accumulation of an autofluorescent pigment called lipofuscin in neurons is an invariable hallmark of brain aging. So far, this material has been considered to be waste material without particular relevance for cellular pathology. However, two lines of evidence argue that lipofuscin may play a yet unidentified role for pathological cellular functions: (i) Genetic forms of premature accumulation of similar autofluorescent material in neuronal ceroid lipofuscinosis indicate a direct disease-associated link to lipofuscin; (ii) Retinal pigment epithelium cell lipofuscin is mechanistically linked to age-associated macular degeneration. Here, we purified autofluorescent material from the temporal and hippocampal cortices of three different human individuals by a two-step ultracentrifugation on sucrose gradients. For human brain lipofuscin, we could identify a common set of 49 (among > 200 total) proteins that are mainly derived from mitochondria, cytoskeleton, and cell membrane. This brain lipofuscin proteome was validated in an interspecies comparison with whole brain rat lipofuscin (total > 300 proteins), purified by the same procedure, yielding an overlap of 32 proteins (64%) between lipofuscins of both species. Our study is the first to characterize human and rat brain lipofuscin and identifies high homology, pointing to common cellular pathomechanisms of age-associated lipofuscin accumulation despite the huge (40-fold) difference in the lifespan of these species. Our identification of these distinct proteins will now allow research in disturbed molecular pathways during age-associated dysfunctional lysosomal degradation.

Human and rat brain lipofuscin proteome.

L&#39;accumulation d&#39;un pigment auto-fluorescente appel&eacute; lipofuscine dans les neurones est une caract&eacute;ristique invariable de vieillissement c&eacute;r&eacute;bral. Jusqu&#39;&agrave; pr&eacute;sent, ce mat&eacute;riel a &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute; comme d&eacute;chets sans int&eacute;r&ecirc;t particulier pour la pathologie cellulaire. Toutefois, les deux sources de donn&eacute;es soutiennent que lipofuscine pourrait jouer un r&ocirc;le non encore identifi&eacute; pour des fonctions cellulaires pathologiques : formes (i) g&eacute;n&eacute;tique d&#39;accumulation pr&eacute;matur&eacute;e du mat&eacute;riau auto-fluorescente similaire dans c&eacute;ro&iuml;de lipofuscinose neuronale indiquent un lien direct associ&eacute;s &agrave; la maladie de lipofuscine ; (ii) pigmentaire &eacute;pith&eacute;lium cellulaire lipofuscine est m&eacute;caniquement li&eacute;e &agrave; l&#39;&acirc;ge-associ&eacute;es de la d&eacute;g&eacute;n&eacute;rescence maculaire. Ici, nous avons purifi&eacute; auto-fluorescente provenant du cortex temporal et hippocampe de trois diff&eacute;rentes personnes humaines par une ultracentrifugation en deux &eacute;tapes sur des gradients de sucrose. Pour le cerveau humain lipofuscine, nous avons pu identifier un ensemble commun de 49 (entre &gt; 200 au total) des prot&eacute;ines qui sont principalement d&eacute;riv&eacute;es de mitochondries et cytosquelette membranaire de la cellule. Ce cerveau lipofuscine proteome a &eacute;t&eacute; valid&eacute;e dans une comparaison intersp&eacute;cifique avec tout le cerveau rat lipofuscine (total &gt; 300 prot&eacute;ines), purifi&eacute;e par la m&ecirc;me proc&eacute;dure, ce qui donne un chevauchement de 32 prot&eacute;ines (64 %) entre les lipofuscins des deux esp&egrave;ces. Notre &eacute;tude est la premi&egrave;re pour caract&eacute;riser les humains et la lipofuscine de cerveau de rat et identifie une forte homologie, pointant vers des pathom&eacute;canismes cellulaires communs d&#39;accumulation de lipofuscine &acirc;ge-associ&eacute;es malgr&eacute; l&#39;&eacute;norme (40 fois) diff&eacute;rence dans la dur&eacute;e de vie de ces esp&egrave;ces. Notre identification de ces prot&eacute;ines distinctes permettra maintenant de recherche dans les voies mol&eacute;culaires perturb&eacute;s au cours de l&#39;&acirc;ge-associ&eacute;es de d&eacute;gradation lysosomale dysfonctionnelle.

Humain et le cerveau de rat lipofuscine proteome.

Die Anh&auml;ufung von einem Eigenfluoreszenz Pigment Lipofuszin in Neuronen genannt ist eine unver&auml;nderliche Kennzeichen Gehirn Altern. Bisher wurde dieses Material angesehen werden &uuml;berfl&uuml;ssige Material ohne besondere Relevanz f&uuml;r zellulare Pathologie. Zwei Linien von beweisen jedoch argumentieren, dass Lipofuszin kann eine bisher nicht identifizierten Rolle f&uuml;r pathologischen zellul&auml;ren Funktionen: (i) genetischen Formen der vorzeitigen Akkumulation von &auml;hnlichen Eigenfluoreszenz Material in neuronale Ceroid Lipofuscinosis zeigen Krankheit-verbundenen Direktlink zu Lipofuszin; (Ii) Retinales Pigmentepithel Zelle Lipofuszin ist mechanistisch verkn&uuml;pfte, Alters-assoziierten Makula-Degeneration. Hier wir Eigenfluoreszenz Material aus der zeitlichen und hippocampal Cortices von drei verschiedenen menschlichen Individuen durch einen zweistufigen Ultrazentrifugation auf Saccharose Steigungen gereinigt. F&uuml;r menschliche Gehirn Lipofuszin, konnten wir einen gemeinsamen Satz von 49 (unter &gt; 200 insgesamt) identifizieren Proteine, die haupts&auml;chlich von Mitochondrien, Zytoskelett und Zellmembran abgeleitet werden. Dieses Gehirn Lipofuszin Proteom wurde im Interspezies Vergleich mit ganze Gehirn Ratte Lipofuscin (Gesamt &gt; 300 Proteine), gereinigt nach dem gleichen Verfahren, woraus sich eine &Uuml;berschneidung von 32 Proteine (64 %) zwischen den Lipofuscins beider Arten &uuml;berpr&uuml;ft. Unsere Studie ist der erste zur Charakterisierung von Mensch und Ratte Gehirn Lipofuszin und kennzeichnet hohe Homologie, auf gemeinsame zellul&auml;re Pathomechanismen der Alters-assoziierten Lipofuscin Ansammlung trotz der riesigen (40-fache) Unterschied in der Lebensdauer dieser Arten. Unsere Identifikation dieser unterschiedliche Proteine wird jetzt Forschung gest&ouml;rt Molekulare Bahnen w&auml;hrend Alters-assoziierte dysfunktionalen lysosomalen Abbau erm&ouml;glichen.

Mensch und Ratte Gehirn Lipofuszin Proteome.

L&#39;accumulo di un pigmento autofluorescent chiamato lipofuscina nei neuroni &egrave; una caratteristica invariabile di invecchiamento del cervello. Finora, questo materiale &egrave; stato considerato essere il materiale di scarto senza particolare rilevanza per la patologia cellulare. Tuttavia, due linee di prove sostengono che lipofuscina possa giocare un ruolo ancora non identificato per funzioni cellulari patologici: forme (i) genetico di accumulo precoce di simile materiale autofluorescent in Lipofuscinosi ceroido neuronale indicano un link diretto associato a malattia di lipofuscina; (ii) della retina pigmento epitelio cellulare lipofuscina &egrave; meccanicistico collegata a associate all&#39;et&agrave; degenerazione macula. Qui, abbiamo purificato autofluorescent materiale dalle cortecce temporali e hippocampal di tre diversi individui umani da un due fasi ultracentrifugazione su gradiente di saccarosio. Per il cervello umano lipofuscina, noi potremmo identificare un insieme comune di 49 (tra &amp;gt; 200 totale) proteine che derivano principalmente da mitocondri, citoscheletro e membrana cellulare. Questo cervello lipofuscina proteoma &egrave; stato convalidato in un confronto interspecifica con intero cervello ratto lipofuscina (proteine totale &amp;gt; 300), purificato dalla procedura stessa, producendo una sovrapposizione delle 32 proteine (64%) tra lipofuscine di entrambe le specie. Il nostro studio &egrave; il primo a caratterizzare umana e rat brain lipofuscina e identifica elevata omologia, indicando (40-fold) Pathomechanismen cellulare comune di accumulo di lipofuscina associate all&#39;et&agrave; nonostante l&#39;enorme differenza tra la durata di queste specie. La nostra identificazione di queste proteine distinte permetter&agrave; ora ricerca nelle vie molecolari disturbati durante la degradazione lisosomiale disfunzionali associate all&#39;et&agrave;.

Umano e rat brain lipofuscina proteome.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x4E0D;&#x5909;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6750;&#x6599;&#x5EC3;&#x68C4;&#x7269;&#x306E;&#x6750;&#x6599;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x75C5;&#x7406;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x307E;&#x3060;&#x6B63;&#x4F53;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306E; 2 &#x884C;&#x3092;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3059;&#x308B;: (i) &#x907A;&#x4F1D;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x81EA;&#x767A;&#x86CD;&#x5149;&#x7269;&#x8CEA;&#x6750;&#x6599;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x30BB;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x75C7;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;; &#x3078;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x75BE;&#x60A3;&#x95A2;&#x9023;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;(ii) &#x7DB2;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x6A5F;&#x68B0;&#x8AD6;&#x7684;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x9EC4;&#x6591;&#x5909;&#x6027;&#x75C7;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2 &#x6BB5;&#x968E;&#x9060;&#x5FC3;&#x30B7;&#x30E7;&#x7CD6;&#x52FE;&#x914D;&#x4E0A;&#x3067; 3 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x500B;&#x4EBA;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x30FB;&#x6D77;&#x99AC;&#x76AE;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x81EA;&#x767A;&#x86CD;&#x5149;&#x7269;&#x8CEA;&#x6750;&#x6599;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x6211;&#x3005; 49 &#xFF08;&#x76EE;&#x5408;&#x8A08; 200) &#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4E3B;&#x306B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8133;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0; 32 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (64%) &#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x3092;&#x964D;&#x4F0F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3092;&#x7A2E;&#x9593;&#x6BD4;&#x8F03;&#x8133;&#x5168;&#x4F53;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; &#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3; (&#x7DCF;&#x76EE; 300 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;) &#x3068;&#x4E21;&#x7A2E;&#x306E; lipofuscins &#x9593;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x9593;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8133;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x304C;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#xFF08;40 &#x500D;) &#x306E;&#x52A0;&#x9F62;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5DE8;&#x5927;&#x306A;&#x5171;&#x901A;&#x7D30;&#x80DE;&#x75C5;&#x614B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6307;&#x3059;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7A2E;&#x306E;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x540C;&#x5B9A;&#x4ECA;&#x7814;&#x7A76;&#x90AA;&#x9B54;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5E74;&#x9F62;&#x95A2;&#x9023;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BD;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0;&#x5206;&#x89E3;&#x4E2D;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D2;&#x30C8;&#x3068;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8133;&#x306E;&#x30EA;&#x30DD;&#x30D5;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x3002;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; lipofuscin &#xB77C;&#xB294; autofluorescent &#xC0C9;&#xC18C;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC740; &#xB1CC; &#xB178;&#xD654;&#xC758; &#xBD88;&#xBCC0; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0;,&#xC774; &#xC790;&#xB8CC; &#xC218; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xAD00;&#xB828;&#xC131; &#xC5C6;&#xC774; &#xD3D0;&#xAE30;&#xBB3C;&#xC744; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC99D;&#xAC70;&#xC758; &#xB450; &#xC904; &#xADF8; lipofuscin &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC544;&#xC9C1; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xC8FC;&#xC7A5; &#xD55C;&#xB2E4;: (i) &#xC720;&#xC804; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; ceroid lipofuscinosis&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; autofluorescent &#xC790;&#xB8CC;&#xC758; &#xC870;&#xAE30; &#xCD95;&#xC801; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; lipofuscin;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xAD00;&#xB828; &#xB9C1;&#xD06C; (ii) &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; lipofuscin mechanistically &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xD669; &#xBC18; &#xBCC0;&#xC131;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC790;&#xB2F9; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xC5D0; 2 &#xB2E8;&#xACC4; ultracentrifugation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; autofluorescent&#xC758; &#xC790;&#xB8CC; 3 &#xB2E4;&#xB978; &#xC778;&#xAC04; &#xAC1C;&#xC778;&#xC758; &#xCE21; &#xB450; &#xC5FD; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; hippocampal &#xC678;&#xD53C;&#xAC00;&#xB97C; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB1CC;&#xB294; lipofuscin&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC; 49 (&#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &amp;gt; &#xCD1D; 200)&#xC758; &#xACF5;&#xD1B5; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;, cytoskeleton, &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;. &#xC774; &#xB1CC; lipofuscin &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; lipofuscins &#xB450; &#xC885; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; 32 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (64%)&#xC758; &#xC911;&#xBCF5; &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC808;&#xCC28;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB1CC; &#xC950; lipofuscin (&#xCD1D; &amp;gt; 300 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;)&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; interspecies &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBC0F; &#xC950; &#xB1CC; lipofuscin &#xCC98;&#xC74C; &#xC774;&#xBA70; (40-fold)&#xB294; &#xAC70; &#xB300; &#xD55C; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB098;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; lipofuscin &#xCD95;&#xC801;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; pathomechanisms&#xB97C; &#xAC00;&#xB9AC;&#xD0A4;&#xB294; &#xB192;&#xC740; homology &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC885;&#xC758; &#xC218;&#xBA85;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2E0;&#xBD84; lysosomal &#xC5ED; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC800;&#xD558; &#xB098;&#xC774; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBC29;&#xD574; &#xBD84;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xC9C0;&#xAE08; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xACFC; &#xC950; &#xB1CC; lipofuscin &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634;.

La acumulaci&oacute;n de un pigmento de autofluorescent llamado lipofuscina en las neuronas es un sello invariable del envejecimiento del cerebro. Hasta ahora, este material se ha considerado que el material de desecho sin relevancia particular para la patolog&iacute;a celular. Sin embargo, dos l&iacute;neas de evidencia argumentan que lipofuscina puede desempe&ntilde;ar un papel a&uacute;n no identificado para las funciones celulares patol&oacute;gicos: formas (i) gen&eacute;tica de la acumulaci&oacute;n de material autofluorescent similar en lipofuscinosis ceroide neuronal indican una relaci&oacute;n directa asociada a la enfermedad a la lipofuscina; (ii) pigmentario epitelio celular lipofuscin es mec&aacute;nico vinculada a asociados con la edad degeneraci&oacute;n macular. Aqu&iacute;, nos purifica autofluorescent material de las cortezas temporales e hipocampales de tres diferentes individuos humanos una ultracentrifugaci&oacute;n de dos etapas en gradientes de sacarosa. Para el cerebro humano lipofucsina, podr&iacute;amos identificar un conjunto com&uacute;n de 49 (entre &gt; 200 total) las prote&iacute;nas que se derivan principalmente de las mitocondrias, citoesqueleto y membrana de la c&eacute;lula. Este cerebro lipofuscina proteoma fue validado en una comparaci&oacute;n entre las especies con todo el cerebro rata lipofuscina (total &gt; 300 prote&iacute;nas), mediante el mismo procedimiento, que rinde una superposici&oacute;n de 32 prote&iacute;nas (64%) entre los lipofuscins de ambas especies. Nuestro estudio es el primero en caracterizar humana y lipofuscina del cerebro de la rata e identifica elevada homolog&iacute;a, se&ntilde;alando (aumentar&aacute;) pathomechanisms celular com&uacute;n de acumulaci&oacute;n de lipofuscina asociados con la edad a pesar de la enorme diferencia en la vida &uacute;til de estas especies. Nuestra identificaci&oacute;n de estas prote&iacute;nas distintas ahora permitir&aacute; investigaci&oacute;n en v&iacute;as moleculares perturbadas durante la degradaci&oacute;n lisosomal disfuncional asociados con la edad.

Philipp Ottis

Department of Neuropathology

Medical School Düsseldorf, Germany

Generation, Purification, and Characterization of Cell-invasive DISC1 Protein Species

Philipp Ottis

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Medical School Düsseldorf, Germany

Generation, Purification, and Characterization of Cell-invasive DISC1 Protein Species

Department of Neuropathology