通过飞沫标题细胞封装

摘要

摘要

研究方案

NIH3T3细胞的准备：

A.弹出细胞

1. Trypsinize细胞与细胞媒体，然后稀释1:1，从T75烧瓶中转移到一个15毫升的猎鹰管
2. 分拆成颗粒细胞，离心，吸出上清液，用DPBS细胞
3. 成颗粒细胞再次离心，吸上清
4. 在媒体的悬浮细胞
5. 确定细胞密度与血球（〜200 × 10 ⁴细胞/ mL的容量瓶中每T75）
6. 离心细胞液，吸出上清液，并悬浮在适量的媒体不同的细胞浓度

B.细胞弹射

1. 弹射前使用的涡细胞
2. 转移到注射器200μL细胞液
3. 设置适当的模式脉冲发生器
   1. 弹出的单液滴和多个水滴（连发），设置脉冲发生器的“E BUR”模式
   2. 对于连续液滴抛射，至“NORM”模式设置脉冲发生器
4. 变化的信号设置
   1. 设置高和低电平输出电压：5 V和LOL为0 V，并确保“林先生”LED是上的HIL
   2. 设置为一个方形脉冲信号
   3. 变化的时间液滴弹射电磁阀打开，改变为“妇女参与发展”的价值或改变占空比（“责任”）
   4. 改变改变“市盈率”价值弹射频率
   5. 更改价值水滴喷出一阵改变“BUR”
5. 到准备基板上弹出电池解决方案与显微镜成像

C.染色

1. 染料溶液与0.5μL，钙黄绿素- AM和2μL，乙锭每DPBS毫升二聚体
2. 在染料溶液浸入准备基板
3. 允许样品孵育10分钟，在37 °成像彗星之前

实验验证

1. 在尼康的Eclipse TE - 2000 U荧光显微镜
   1. 现货先进的软件（诊断公司）
   2. 活/死含量

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材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Fluorescent Microscope		Nikon Instruments	Eclipse TE-2000 U
Solenoid valve cell ejector				Operation frequency: 1 KHz, 30psi, 50nl~0.5ul. 12V Valve Driver: 2.5 Amp drive current
5-Gallon Portable air tank		Coleman	Powermate CT5	Pressurized air: 30 PSI
Pressure regulators		Marsh Bellofram
Pulse Generator			HP8112A	Actuation frequency generation: 50 MHz
XYZ-stage		Newmark Systems		With Stepping motor: 6inch travel xy-stage(NLS4-6-25), 2.5inch travel z-stage(NLS4-2.5-25), 3axis controller(NSC-G3), 0.1um resolution
NIH 3T3	Cell-line			fibroblasts
Trypsin				0.05% solution
NIH 3T3 cell medium
DPBS	Buffer
T75				Tissue culture flasks
Plastic conical tubes				15 ml, for tissue culture