大鼠建立压力超负荷心肌肥厚模型在升主动脉缩窄

摘要

我们描述了使用一个小的金属夹子由升主动脉缩窄建立压力负荷和左心室肥厚大鼠一个逐步的过程。该模型被广泛用于心肌肥厚过程中学习重塑变化，物色及评估策略，这种变化的回归。

摘要

升主动脉缩窄是一个用于创建诱导的心肌肥厚和心脏衰竭压力超负荷最常见和最成功的手术模型。在这里，我们描述了使用一个小的金属夹子由升主动脉缩窄建立压力负荷和心肌肥厚大鼠详细的手术过程。麻醉后，气管是通过一个半路上切口气管2软骨环之间进行插入插管插管。然后一个皮肤切口，在第二肋间水平上的左胸壁和肌肉层被清除，以找出主动脉的上升部分。升主动脉的收缩到其原始直径由应用的小尺寸钛夹的50-60％。以下主动脉缩窄，第二和第三肋近似prolene线缝合。气管插管被删除，一旦自主呼吸被重新建立。动物被允许恢复Ø通过逐渐降低麻醉n为加热垫。通过升主动脉的收缩产生的压力超负荷的强度是通过使用反式胸二维多普勒超声心动图记录的压力梯度来确定。总体来说，这一协议是逐渐发生和发展的代偿性心肌肥厚心脏衰竭阶段时，研究重塑事件和心脏的收缩特性非常有用。

引言

小动物模型是用于在心脏肥大及其进展为心脏衰竭的发展慢性变化的研究最优选的工具。通过手术方法心脏衰竭模型最初是在大鼠为这些动物都是敞胸外科手术，超声心动图血流动力学参数和评估最合适。它们还提供了充足的验尸样本进行组织，细胞和分子水平的研究^1。升主动脉缩窄是最常见的和成功的手术模型用于创建压力超负荷心脏衰竭^2，3中的一个。这种模式是非常适合从肥大心脏衰竭⁴在过渡期间，研究细胞和亚细胞重塑事件和心脏的收缩性能。

这种模式的主要优点是逐渐发生的⁵心脏压力超负荷^，</燮> ^6。这种模式是因为其缓慢但稳定的进展从补偿心肌肥厚到失代偿阶段，最后到心脏衰竭阶段临床相关性。持续时间为心肌肥厚心脏衰竭和相关生理变化的进程主要受狭窄程度产生^7。升主动脉缩窄可以通过两种方式来进行，或者通过使用缝合线或者由应用的金属夹子^8,9。使用金​​属夹，用于主动脉缩窄的主要优点是，外科手术是不太复杂的。在该方法中人们必须找出同上瓣膜升主动脉，插入片段围绕主动脉取得缩颈的期望的水平。胸部牵开器是没有必要在此过程。主动脉缩窄通过缝合需要更多的手术操作用于放置针头升主动脉旁，周围缝合到产生主动脉缩窄的所需的水平。后者的技术是更多的时间时，与使用金属夹子对主动脉缩窄比较耗时。在这个视频中描述的方法演示了外科手术升大鼠主动脉缩窄，使压力超负荷创造左

研究方案

动物实验获得学院动物伦理委员会批准后执行。 Wistar大鼠容纳下一个12小时黑暗的光周期，恒定室温（24±2℃）与食物和水随意（按照CPCSEA准则）。

1）手术前护理和麻醉

1. 根据抗生素伞24小时保持大鼠（约200g体重）术前通过口服阿莫西林（剂量:水500毫克/升）。
2. 通过在121℃下高压灭菌15分钟进行消毒所有外科工具（如剪刀，镊子，夹子施放器，缝合针和缝合针夹持器）。
3. 使用加热垫保持动物的体温约37℃，以避免在心脏速率迅速下降。
4. 注意避免之前和期间手术的动物脱水。
5. 麻醉中的感应腔的大鼠用3％异氟烷与混合0.5-1.0升/分钟100％的氧气;与1.5％异氟醚维持麻醉。
6. 检查踏板反射确认成功麻醉。

2）准备手术部位

1. 保持对大鼠温控加热垫的顶部在仰卧位。
2. 定位橡皮筋在老鼠的门牙，以保持动物的位置，同时维持麻醉用鼻锥。
3. 从领口取下毛皮，离开了大鼠胸部区域（最好使用电动剃须刀）。
4. 消毒手术部位与聚维酮碘溶液，然后用70％的乙醇。
5. 使用无菌悬垂到手术过程中只露出手术部位。
   注:对于照顾动物一个额外的选项，0.25％布比卡因ID（2.5毫克/千克）可结合在每个切口部位切开局部麻醉/镇痛前。
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结果

在我们的实验中，我们能够实现80％以上的存活率。主动脉缩窄的效果是通过执行多普勒超声心动图证实。大鼠（N = 6），其在主动脉狭窄部位约60毫米汞柱的压力梯度，观察8周，处死以便分析心肌肥大的发展（ 图1）。 8周后手术后的超声心动图评价结果显示左心室参数，如跨室间隔厚度，左室后壁厚度及减少左室内径在舒张状态，动物，进行主动脉缩窄显著增加，较假手术对照组（...

讨论

有几种手术的型号为感应压力超负荷以及心肌肥厚和心脏衰竭。在小动物，Lorell和他的同事开发了我们在这里所描述的模型，他们报告的代偿性心肌肥厚后8周主动脉缩窄⁵的发生。心脏的变化逐渐进展到失代偿状态，然后导致心脏衰竭。这种模式的主要优点是逐步发病增加，左心室压力，从而类似于在慢性高血压的临床情况的。它也是一种合适的动物模型用于研究相关 ​​的左心脏衰竭?...

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Wistar rats			Maintained at ARF, RGCB
Inhalation anaesthesia systems	VetEquip	AB19276
Rodent ventilator	CWE Inc	SAR- 830/AP
Rat tracheal cannula	CWE Inc	13-21032
Ultrasound system	Philips	HD7
Ultrasound transducer	Philips	S 12
Titanium clip (small)	Horizon	1204
Clip applicator	Weck	137081
Electric shaver	Vinverth	VBT0817
BP blade (size:11)	Surgeon	REF10111	Preparation of surgical site
Tramadol	Orchid health care	OCH043
Amoxycillin Hydrochloride	Ranbaxy
Isoflurane	Piramal health care	A23M10A
Syringes	BD	2015-09
4-0 braided silk	Diamond
3-0 prolene	Johnson&Johnson	NW018
Surgical tape	Romsons	SH 6301
Povidone iodine	Win Medicare
Temp. controlled heating pad	Flamingo	HC1003