압력 과부하 심장 비대 모델의 창조를위한 쥐의 대동맥 수축 오름차순

요약

우리는 작은 금속 클립을 사용하여 상행 대동맥의 수축에 의해 위 스타 쥐의 압력 과부하 및 좌심실 비대를 만들기위한 단계별 절차를 설명합니다. 이 모델은 광범위하게 심장 비대 동안 리모델링 변경을 공부하고 이러한 변화의 회귀를위한 전략을 파악하고 평가하기 위해 사용된다.

초록

대동맥 협착을 상승하면 심장 비대 및 심장 마비를 유도 압력 과부하를 만들기위한 가장 일반적이고 성공적인 수술 모델입니다. 여기, 우리는 작은 금속 클립을 사용하여 상행 대동맥의 수축에 의해 쥐의 압력 과부하 및 심장 비대를 만들기위한 자세한 수술 절차를 설명합니다. 마취 후 기관은 기관의 두 연골 고리 사이에 절반 방법의 절개를 통해 정맥을 삽입하여 삽관된다. 이어서 피부 절개는 왼쪽 가슴 벽에 제 늑간의 레벨에서 이루어지고, 근육층은 대동맥의 상승 부​​분을 찾을 클리어된다. 상행 대동맥은 작은 크기의 티타늄 클립을 적용하여 원래의 직경이 50 ~ 60 %로 수축된다. 대동맥 협착 다음, 두 번째 및 세 번째 리브 prolene의 봉합으로 근사화된다. 기관 캐뉼라를 제거 한 번자가 호흡을 다시 설립되었다. 동물은 O를 복구하도록 허용점차적으로 마취를 낮추는 방법으로 가열 패드를 명. 대동맥의 수축에 의해 생성 된 압력 과부하의 강도는 트랜스 흉부 이차원 도플러 초음파 검사를 사용하여 압력 구배를 기록함으로써 결정된다. 전반적으로이 프로토콜은 심장 마비 단계에 보상 심장 비대의 점진적 발병과 진행하는 동안 리모델링 이벤트와 심장의 수축 특성을 연구하는 데 유용합니다.

서문

작은 동물 모델은 심장 비대 및 심장 마비로의 진행의 개발에 만성 변화의 연구에 대한 가장 선호하는 도구입니다. 이 동물이 열려 가슴 수술, 중환자 실의 심 초음파 검사 및 평가에 최적으로 수술 방법에 의한 심장 마비 모델은 원래 쥐에서 개발되었다. 또한 세포 조직 및 분자 수준의 연구 ¹ 적절한 사후 샘플을 제공합니다. 대동맥의 수축 압력 과부하 심부전 ^{2, 3을} 생성하기위한 가장 일반적인 성공적인 수술 모델 중의 하나이다. 이 모델은 잘 비대에서 심장 마비 ^4로 전환하는 동안 세포 및 서브 셀룰러 리모델링 이벤트와 심장의 수축 특성을 연구하기에 적합합니다.

이 모델의 주요 ^이점은, 심장 ⁰⁵ 압력 과부하 점진적 발병 ^</> ⁶ 한모금. 이 모델은 보상 때문에 심장 비대에서 대상성 상에 마지막으로 심장 마비 단계로의 느리지 만 꾸준한 진행의 임상 적으로 관련이 있습니다. 심장 마비와 관련된 생리적 변화에 심장 비대의 진행에 대한 지속 시간은 주로 ^​​7을 생산 협착의 정도에 의해 영향을 받는다. 상행 대동맥 협착이 봉합사를 사용하거나 금속 클립 ^{(8, 9)의인가에}

프로토콜

동물 실험 기관 동물 윤리위원회의 승인을 얻은 후 시행 하였다. 위 스타 쥐 라이트 사이클 (CPCSEA 지침에 따라) 음식과 물을 임의로와 일정한 실내 온도 (24 ± 2 ° C)에 12 시간의 어두운에서 보관 하였다.

1) 수술 전 관리 및 마취

1. (: 물 500 ㎎ / L 용량) 경구 아목시실린을 투여하여 수술 전 항생제 우산 24 시간에서 쥐 (약 200 g 체중)을 유지합니다.
2. 15 분 동안 121 ° C에서 고압 증기 멸균에 의해 (가위, 집게, 클립 도포, 봉합 바늘, 바늘 홀더 등) 모든 수술 도구를 소독.
3. 심박수의 급격한 감소를 방지하기 위해 37 ° C의 주위 동물의 체온을 유지하기 위해 가열 패드를 사용한다.
4. 수술 전과 동안 동물의 탈수를 방지하기 위해주의하십시오.
5. 혼합 3 % 이소 플루 란으로 유도 챔버에서 래트를 마취0.5 ~ 1.0 L / 분 100 % 산소; 1.5 % 이소 플루 란으로 마취를 유지한다.
6. 성공적인 마취를 확인하기 위해 페달 반사를 확인합니다.

수술 부위의 2) 준비

1. 앙와위에서의 온도 제어 난방 패드의 상단에있는

결과

우리의 실험에서 우리는 80 % 이상 생존율을 달성 할 수 있습니다. 대동맥 수축의 효과는 도플러 심 초음파 검사를 수행하여 확인 하였다. 쥐 (N = 6) 대동맥 수축 사이트에서 수은의 약 60 mm의 압력 구배와 8 주 동안 관찰과 심장 비대의 개발 (그림 1)에 대한 분석을 희생했다. 팔주 후 수술 후 심 초음파 평가는 가짜 운영에 비해, 같은 대동맥 협착을받은 동물의 간 심실 중격 두께, 좌심실...

토론

압력 과부하 유도뿐만 아니라 심장 비대 및 심장 마비에 대한 몇 가지 수술 모델이 있습니다. 작은 동물에서 Lorell와 동료는 우리가 여기에서 기술 한 모델을 개발하고 그들이 보상 심장 비대 팔주 후 대동맥 밴딩 ^5의 발생을보고했다. 심장의 변화는 점차적으로 대상 부전 상태로 진행​​ 한 후 심장 마비의 원인. 이 모델의 가장 큰 장점은 좌심실 압력의 증가와 만성 고혈압의 임상 적 상?...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Wistar rats			Maintained at ARF, RGCB
Inhalation anaesthesia systems	VetEquip	AB19276
Rodent ventilator	CWE Inc	SAR- 830/AP
Rat tracheal cannula	CWE Inc	13-21032
Ultrasound system	Philips	HD7
Ultrasound transducer	Philips	S 12
Titanium clip (small)	Horizon	1204
Clip applicator	Weck	137081
Electric shaver	Vinverth	VBT0817
BP blade (size:11)	Surgeon	REF10111	Preparation of surgical site
Tramadol	Orchid health care	OCH043
Amoxycillin Hydrochloride	Ranbaxy
Isoflurane	Piramal health care	A23M10A
Syringes	BD	2015-09
4-0 braided silk	Diamond
3-0 prolene	Johnson&Johnson	NW018
Surgical tape	Romsons	SH 6301
Povidone iodine	Win Medicare
Temp. controlled heating pad	Flamingo	HC1003