<p class="jove_content">我们要感谢支持沿海和公海水域低氧气地区正在进行的研究创新，不列颠哥伦比亚省知识发展基金和国家科学和工程研究理事会（NSERC），加拿大的加拿大基金会。提高妇女地位司的支持由NSERC，Killam和图拉基金会资助的微生物多样性和进化中心奖学金。 </p>

<ol><li> <strong>设置过滤装置</strong> <ol><li>过滤前，先擦去从满瓶凝露和权衡</li><li>将泵一侧的高压灭菌器斌，其他废物瓶。 </li><li>然后将一个完整的样瓶，在蒸压斌;但是，不要删除瓶盖。 </li><li>通过蠕动泵管，使油管露儿烧瓶中。 </li><li>使用镊子，取出25毫升无菌吸管棉花，和吸管连接油管的另一端。 </li></ol></li><li> <strong>海水过滤</strong> <ol><li>要开始过滤海水，打开瓶盖，插入吸管。打开泵和流动速度设置为1。观察，以确保水是被抽在正确的方向。 </li><li>允许〜100毫升的水，穿过整个油管。 </li><li>关闭泵和一个Sterivex过滤器附着在油管的自由端男性露儿装修。 </li><li>继续筛选，直到没有水在瓶左。 </li></ol></li><li> <strong>储存过滤器</strong> <ol><li>要存储的过滤器，首先驱逐任何剩余的水30-60毫升注射器。 </li><li>用封口膜密封的Sterivex过滤器的底部。使用吸液管，添加1.8毫升裂解液过滤器，保持在后来试剂的过滤器〜200 UL空间。 </li><li>然后，用小块的封口膜的Sterivex过滤器的顶部密封，标签的日期和样品标识过滤器。 </li><li>商店标记的前50毫升猎鹰管过滤器在-80 ° C </li></ol></li><li> <strong>清理</strong> <ol><li> 25毫升吸管插入含有0.1％的盐酸瓶，泵的切换。 </li><li>盐酸清洗后，用灭菌水冲洗管路。 <br /><br />最后，测量和记录现在空1L瓶的质量，以计算体积的水通过过滤器。 </li></ol></li></ol><p class="jove_content"> <strong>代表性的成果：</strong>每1升的水样产生一个Sterivix过滤器，其中包含生物质能大于0.22微米。这是存储在随后的DNA提取和分析裂解缓冲液。最终结果由一个Sterivix过滤裂解缓冲液中，每存储1升的瓶子，并准备提取DNA。该过滤器包含生物质能大于0​​.22微米。过滤器可以储存在-80 ° C之前的eDNA提取。 </p>

<p class="jove_content">The authors have nothing to disclose.</p>

<p class="jove_content">当务之急是盐水中删除任何挥之不去的痕迹，否则将腐蚀设备后，使用湿毛巾擦拭长椅和泵。虽然过程很简单，时间要求，可广泛取决于生物质的浓度或在被筛选的样本碎片。 </p>

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Peristaltic pump</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Masterflex (Cole Palmer)</td>
<td>77913-20, 77200-62, 77200-04</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tygon LFL tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Masterflex (Cole Palmer)</td>
<td>06429-24</td>
<td>For filtration apparatus</td>
</tr>
<tr>
<td>Hose clamps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cole Palmer</td>
<td>0683204</td>
<td>For filtration apparatus</td>
</tr>
<tr>
<td>1/4&#x201D; x 3/16&#x201D;  pipe adaptors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cole Palmer</td>
<td>31702-20</td>
<td>For filtration apparatus</td>
</tr>
<tr>
<td>Polypropylene prefilter housing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ADVANTEC</td>
<td>501200</td>
<td>For filtration apparatus</td>
</tr>
<tr>
<td>Metal luer fitting (Hose end to Male luer lock)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cole Palmer</td>
<td>31507-27</td>
<td>For filtration apparatus</td>
</tr>
<tr>
<td>2&#x201C; Magnets</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For filtration apparatus</td>
</tr>
<tr>
<td>3 port carboy caps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For filtration apparatus</td>
</tr>
<tr>
<td>GV 0.22 &mu;m STERIVIX filters</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Millipore</td>
<td>SVGV01R5</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>47 mm diameter 2.7 &mu;m GF/D filters</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Whatman</td>
<td>1823047</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Lysis buffer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>0.75 M sucrose, 40 mM EDTA, 50 mM Tris (pH 8.3)</td>
</tr>
<tr>
<td>0.1 % HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For post-filtration rinse</td>
</tr>
<tr>
<td>Autoclaved water</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>For post-filtration rinse</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

small volume (1-3l) filtration of coastal seawater samples

<p class="jove_content">工作流程开始与下游微生物群落的沿海海域，养分和微量气体分析的集合。对于今天的示范样本收集从甲板HMS施德Saanich入口经营。此视频文件体积小（约1升）过滤的微生物生物量的水柱。该协议是延长大体积取样协议如前所述，一个主要的区别：在这里，有没有预过滤步骤，让所有大小类生物质收集到0.22微米的过滤器切断。样品收集这种方式，是理想的核酸分析。设置，过滤和清理的每个步骤需时约20-30分钟。如果同时使用两个蠕动泵，最多8个样品，同时可过滤。为了防止生物膜之间的采样人次的形成，所有的过滤设备，必须用稀盐酸和去离子水冲洗，高压灭菌后立即使用。</p>

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Small Volume 1-3L Filtration of Coastal Seawater Samples

<p class="jove_content">此视频文件体积小（约1升）过滤的微生物生物量的水柱。</p>

沿海海水样品的过滤体积小（1 - 3L）

The workflow begins with the collection of coastal marine waters for downstream microbial community, nutrient and trace gas analyses. For today s ...

small-volume-1-3l-filtration-of-coastal-seawater-samples

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Small Volume (1-3L) Filtration of Coastal Seawater Samples

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11.0K 次观看.  University of British Columbia - UBC. 此视频文件体积小（约1升）过滤的微生物生物量的水柱。