首先,使用机械 TissueLyser 以 27 赫兹摇动先前准备好的 AIR CDTA 混合物两分钟,然后以 10 赫兹摇动两小时。接下来,将混合物在 10, 000 G 下在 4 摄氏度下离心 10 分钟。将上清液转移到无菌微量离心管中。
最后,将氢氧化钠和硼氢化钠混合物加入残留颗粒中。振荡和离心颗粒后,用蒸馏水洗涤残留的颗粒两到三次。向沉淀中加入每毫克 30 微升纤维素酶,然后将试管在酶的最佳温度下在加热块中孵育 16 小时。
离心样品并将上清液储存在旋转振荡器上。将所有储存的提取物再次以 10, 000 G 在 4 摄氏度下离心 10 分钟。