用于聚糖识别的微阵列探测

首先从硝酸纤维素膜上切下相同的打印微阵列，并将它们放入合适的容器中进行探测。为了减少非特异性结合，将MP-TBST封闭缓冲液添加到微阵列中，并在旋转振荡器上孵育1小时。孵育后，用新鲜的MP-TBST替换缓冲液。

将阵列与单克隆抗体和MP-TBST在旋转振荡器上孵育2小时。孵育后，取出分子探针溶液。将阵列完全浸没在干净的TBST中。

立即用新鲜体积更换缓冲液以除去残留的探针溶液。将阵列放在旋转的振荡器上五分钟。用新的缓冲液体积更换 TBST，然后将阵列放在振荡器上再放置五分钟。

接下来，将阵列与碱性磷酸酶偶联抗体在旋转振荡器上孵育两个小时。孵育完成并洗涤微阵列后，用硝基蓝四氮唑和 BCIP 显色液覆盖它们以显色检测抗体结合。通过将阵列浸入干净的自来水中来终止反应。

然后将阵列放在吸墨纸之间干燥，在环境温度下过夜。通过将聚糖定向单克隆抗体连接到打印提取物上，检测诊断非纤维素植物细胞壁多糖的 16 种表位的相对丰度。在碱性氢氧化钠馏分中检测到大部分提取的聚糖。

在所有测试的芒果品种的果皮中，记录了代表木聚糖和阿拉伯木聚糖的LM-10和LM-11的强结合信号。LM-10和LM-11与大蒜根组织提取物的优先结合，与叶组织提取物的结合较弱。LM-19代表部分甲基酯化或未酯化的高半乳糖醛酸醛酸与某些芒果品种提取物强结合，并且仅与咖啡果肉馏分结合。