评估缺血再灌注前后冠状动脉血流储备 （CFR） 的动态变化

首先，使用脱毛膏从麻醉小鼠的心前区去除毛发，并将小鼠背部朝下放在生理监测平台上。在生理监测台上的铜片上涂抹少量导电凝胶。将鼠标停顿固定在这种凝胶上，以方便捕获心电图和呼吸数据。

涂抹少量超声透射凝胶，以确保最佳图像质量。在探头和平台之间以小角度将平台横向对准，并获得心脏的胸骨旁长轴视图。然后，在 B 模式下找到合适的心脏部分。

在触摸屏上激活彩色多普勒，然后轻轻移动探头以找到正确的位置。现在，按下相应的按钮切换到脉冲波模式。将黄色指示线平行于血流方向放置在冠状动脉上，然后按 Save Clip 按钮记录基线数据。

将异氟烷浓度增加至3%，等待30秒。确保流速随时间逐渐增加。经常再次按下“保存剪辑”按钮以最高速捕获血流。

完成超声心动图成像后，小心地将动物从平台上移开。使用峰值速度函数工具测量峰值舒张速度，并使用采集的图像评估心脏的收缩功能。通过将最大流量时的舒张峰值冠状动脉流速除以基线时的舒张峰值冠状动脉流速来计算 CFR。

对第四肋间隙进行开胸手术，以暴露心脏。然后，使用 5-0 丝线缝合线结扎 LAD 动脉。通过目视确认缺血性心肌中可视化的下游变色来验证小鼠的缺血。

进行 LAD 动脉闭塞 30 分钟。然后，松开结扎线，并通过监测变色心肌区域的变红一到两分钟来确认再灌注。冠状动脉闭塞和再灌注后，分层闭合胸部，让小鼠恢复约半小时。

如前所述，在再灌注后 1、3、5、8、24 和 48 小时再次测量 CFR。在缺血再灌注手术前，测量了CFR基线，小鼠的CFR值正常。然而，手术后，再灌注一小时后，病死率明显下降。

随着再灌注时间的延长，CFR 值始终保持在低水平，表明灌注不足可能持续至少两天。当小鼠的CFR显着降低时，未观察到左心室心脏功能的显着变化。