鸡皮外植体培养用于器官发生研究

首先，在 38 摄氏度的潮湿培养箱中孵化受精鸡蛋。然后，将阶段 28 至 32 个鸡胚放入装满 HBSS 的 60 毫米培养皿中。解剖出背胚皮肤和头部后，轻轻拉动肢芽，使身体的腹侧向下重新定位。

现在，沿着胚胎体的两侧，做一个从前到后的切口。用一把镊子纵向握住肢芽以稳定身体。使用制表师的镊子小心地从颈部到尾部区域剥下皮肤。

用锋利的剪刀轻轻去除仍附着在脱皮皮肤上的任何剩余皮下组织，并抚平皮肤边缘。接下来，向六孔培养皿的每个孔中加入 2 毫升补充的 DMEM。向孔中加入抗生素后，将无菌组织培养插入物放入孔内，确保培养基包围培养物插入物的外部。

然后将皮肤浸入 HBSS 中，将皮肤移到刮刀上，以防止起皱和折叠。完成后，将切除的皮肤转移到含有 HBSS 的培养皿中。慢慢地将皮肤从刮刀上滑到培养物插入物上，不要折叠。

使用 200 微升移液器，从插入物中取出任何多余的 HBSS。最后，将皮肤外植体培养物在 37 摄氏度下与 5% 二氧化碳和 95% 空气的混合物一起孵育。每两天更换一次培养基。

羽毛原基在培养两天后发育成短羽毛芽。培养四天后长出长羽芽。真皮斑块在中线比在两侧更成熟。