在室温下开始生物层干涉测量法或使用链球菌编码传感器的BLI实验。确保传感器在一排中静止不动。将 200 微升样品移液到孔中。
接下来,将传感器浸入含有 VHL 的溶液中 80 秒,以将传感器加载到 1 到 3 纳米。现在浸入缓冲区 60 秒以建立第一个基线阶段。对于固定阶段,将传感器浸入 VHL 蛋白中 80 秒,然后再次浸入缓冲液中 60 秒以建立第二个基线阶段。
接下来,浸入固定浓度的以下注射液中 300 秒。最后,再次将传感器浸入缓冲液中 600 秒以建立解离阶段。使用仪器软件分析数据并估计导通率、关断率和平衡解离常数。
对VHL/MZ1二元配合物和VHL/MZ1 BRD4三元配合物进行了表征。发现MZ1介导三元复合物的形成。