小鼠胶质母细胞瘤模型中纳米颗粒跟踪的体内和离体成像

磁性纳米粒子抗 microRNA 10b 注射后 24 小时，称量小鼠并计算 d-荧光素的体积以每公斤 150 毫克的剂量给药。准备一个 28 号注射器，其体积可保护溶液免受阳光直射。麻醉后，轻轻地刮擦鼠标以避免进一步伤害手术部位，并腹膜内注射 d-荧光素剂量。

让鼠标恢复并等待 10 分钟，然后再进行成像。准备体内成像系统或 IVIS 扫描仪后，将黑色低荧光垫放在成像台上，并配置鼻锥阵列进行成像。在软件中，单击 imaging wizard （映像向导）。

然后，选择 bioluminescence imaging（生物发光成像），然后选择 open filter（打开过滤器）。在下一个屏幕上，选择成像主体和视野。将麻醉的鼠标置于 IVIS 扫描仪上的俯卧位置。

单击“获取序列”，并使用最小信号阈值为 3000 计数的自动曝光设置，捕获用于定位荧光素酶标记的 U-251 胶质母细胞瘤细胞的图像。接下来，在成像向导中，选择荧光，然后选择带落射照明的过滤对。在下一个屏幕中，选择探测器 Cy5.5。

选择成像主体和视野。使用最小信号阈值为 6， 000 计数的自动曝光设置，捕获用于磁性纳米颗粒 anti-microRNA 10b 定位的图像。将麻醉的小鼠俯卧在 MRI 床上。

使用咬杆和耳杆固定并定位头部以进行扫描。安装润滑的直肠温度探头，并确保呼吸和温度监测正常工作。将鼠标床上的钉子安装到线圈上的孔中，将鼠标脑线圈放在头上，然后将线圈用胶带固定到位以减少扫描过程中的移动。

在鼠标顶部放置一个小的温水循环垫以保持体温。将鼠标和成像床移动到扫描位置。在采集软件中，开始摆动设置步骤以调整和匹配 MRI 线圈。

确保跟踪居中并尽可能深入。获取大脑的三平面定位器扫描。使用以下参数，获取二维 T2 加权扫描以检测肿瘤。

获取整个大脑的 b0 映射，以使用 map shim 实用程序计算局部填充码。使用三维 T2 星标图像来可视化纳米颗粒。使用以下参数，获取 T2 星图以使用二维 T2 加权图像作为参考以将扫描定位在肿瘤上以进一步进行纳米颗粒成像。

采集 10 张正回波图像，回波时间间隔为 5 毫秒。在实验终点，称量小鼠，并计算每公斤 150 毫克剂量的 d-荧光素的体积。如前所述，在注射后 10 分钟进行实时生物发光成像。

将培养皿和从安乐死小鼠中切除的大脑放入 IVIS 扫描仪中。使用与体内成像相同的采集设置，使用生物发光和荧光模式对大脑进行成像。磁性纳米颗粒抗 microRNA 10b 注射小鼠的 Cy5.5 荧光和生物发光信号显示出明显的共定位，表明纳米颗粒递送到肿瘤，而对照小鼠没有显示荧光信号。

离体荧光成像显示纳米颗粒位于主要清除器官（如肝脏和肾脏）中。T2 加权 MRI 信号的特征性降低表明磁性纳米颗粒（抗 microRNA 10b）作为 MRI 造影剂穿过血脑屏障及其在肿瘤区域的积累的潜力。