首先，使用命运特异性脑类器官生成病毒标记的组合体。为了制备用于 MEA 表面预处理的试剂，将 0.5 克去污剂酶粉溶解在 50 毫升去离子水中。彻底涡旋混合物，直到粉末完全溶解，并使用生物安全柜内的无菌管顶真空过滤器对溶液进行消毒。
稀释 500 μL 7% 聚乙烯亚胺或 PEI 储备液，用 49.5 mL 1X 硼酸盐缓冲液制备 0.07% PEI 溶液。要对溶液进行消毒，请通过生物安全柜内的 0.22 微米过滤装置进行过滤。接下来，将 1 毫升 1% 去污剂酶溶液分配到无菌 MEA 板的每个孔中，并在 37 摄氏度下孵育 2 小时。
然后从每个孔中取出去污剂酶溶液，每孔用 1.5 毫升无菌去离子水洗涤孔五次。在每个孔中填充 1 毫升培养基进行预处理。将 MEA 板放回 37 摄氏度、5% 二氧化碳培养箱中两天。
孵育后，从孔中取出培养基，加入 50 微升 0.07%PEI 溶液以覆盖 MEA 电极以进行初级包被。将板在 37 摄氏度下孵育 1 小时。然后从每个孔中完全吸出 PEI 溶液。
用 1 毫升无菌去离子水清洗每个孔 3 次。吸出水后，打开盖子，在生物安全柜中在室温下干燥板 15 分钟。现在用 50 微升 1 至 20 体积比的基底膜基质覆盖每个孔中的电极区域，这些基质在培养基中稀释，用于二次包被。
将 MEA 板放回 37 摄氏度培养箱中过夜。第二天，吸出稀释的基质溶液，在表面留下一层薄薄的一层。如果形成厚层，请使用 P1000 移液器吸头用培养基用力喷洒电极接触区域。
然后使用宽切口的 P1000 尖端，从培养皿中收集一个组件，并小心地将其放在孔中的电极顶部，同时转移尽可能少的介质。将板放在层流罩中的解剖显微镜下，并使用无菌 P 20 尖端，小心地将组件推到所需位置。使用 P 20 吸头去除组件周围多余的液体。
孵育后，从培养箱中取出板。然后在解剖显微镜下观察，将 2 到 3 小滴 1 到 50 的基底膜基质（用培养基稀释）滴在组合体的顶部，然后将板放回培养箱中再放置 30 分钟。之后，使用解剖显微镜在靠近组合体的位置小心地加入三滴培养基。
第二天，在解剖显微镜下检查组装体是否已经沉淀并稳定下来。加入 750 微升培养基，使总体积达到每孔 1 毫升，并将板在培养箱中至少两天不受干扰。每周，小心地从每个孔中取出 500 微升培养基，并向每个孔中引入新鲜的 700 微升神经生理学基础培养基。
与第 78 天相比，第 92 天观察到网络爆发持续时间增加，这可能是由于神经元成熟。到第 125 天，细胞和网络活动慢慢消失。
