评估小 球藻 和 雨生红球藻 中的叶绿素含量，以研究 CO₂、光色和强度效应

首先，准备接种物以研究小球藻和雨生红球藻的生长动力学根据标准实验室程序准备所需体积的无菌培养基。将光生物反应器和培养瓶的光源配置为所需的色谱。盖住两个系统以防止外部光线干扰。

调整光周期设置后，将二氧化碳持续时间系统连接到光生物反应器，为小球藻提供 12 小时的二氧化碳。接下来，接种培养容器以达到每毫升 300， 000 个细胞的起始细胞密度或 550 纳米处 0.180 的光密度。定期对培养物进行采样，小球藻 12 小时，雨生红球藻 8 小时。

将 40 mL 样品放入塑料锥形离心管中。将试管在 3000 G 下在 15 摄氏度下离心 20 分钟。倒出上清液，加入 3 毫升 90% 纯丙酮溶液以重悬细胞，然后将细胞转移到覆盖有铝箔以防止氧化的玻璃管中，并使用涡旋混合。

在冰浴中对悬浮样品进行超声处理 2 个循环，每个循环 5 分钟，然后让样品在 4 摄氏度下静置 16 小时。静置后，在相同条件下再次对样品进行两个循环，每个循环 5 分钟，并在 15 摄氏度下以 3000 G 离心样品 20 分钟。使用巴斯德移液管分离色素提取物，并将其转移到另一根避光的干净管中。

然后将色素提取物放入石英池中，并在 600、647 和 664 纳米的分光光度计中读取。使用方程计算叶绿素浓度。小球藻叶绿素含量在高二氧化碳添加量、紫光和高光照强度条件下第 4 处理最高。

主效应图显示，与二氧化碳和紫色光效应相比，光强度的影响较低。在小球藻中，在整个实验过程中观察到叶绿素 A 和 B 的持续增加，叶绿素 A 在 50 小时时超过叶绿素 B。在 50 小时时，雨生红球藻 （Haematococcus pluvialis） 的叶绿素浓度降低，叶绿素 B 显著降低，而叶绿素 A 保持较高水平。