该协议可以在很少用户输入的情况下进行复制微藻实验。它专为希望从手动监测升级到台式烧瓶的研究人员而设计,而无需购买技术和昂贵的商业光生物反应器。这种光生物反应器可实现光比和灵活性、连续生长监测和一式三份复制。
首先,打开数据采集软件。填写配置页面并将校准文件分配给各自的传感器。在目录文件名下,选择相应的数字输入模块端口号文件夹。
单击当前文件夹并对所有端口重复此操作。然后单击"确定"转到日志记录页面。接下来,用培养基将玻璃瓶填充至所需体积,并将培养基在三个平衡的50毫升管中离心以产生三个颗粒。
使用血清移液管和新鲜培养基向每个瓶子添加一个颗粒。然后将一个 25 x 8 毫米的磁力搅拌器放入每个瓶子中,然后用橡胶塞和螺纹孔径螺旋盖密封瓶口。如果安装了任何可选的采样端口,请关闭阀门。
在 PVC 管内找到每根气体管线的末端后,将针头连接到阀门的邮件诱饵端口。通过用相应的针刺穿每个橡胶塞,将每个瓶子连接到其气体传感器。然后,通过选中屏幕左侧的复选框,单击开始并输入文件名,分别启动每个气体传感器。
单击"确定",然后对所有传感器重复此操作。接下来,打开光生物反应器,并确保数字多路复用照明控制器已插入电源。使用数字多路复用控制器上的按钮,在辅助场景和自定义灯光场景之间切换,以确保设备正常运行。
对于瓶子取样,在开始实验之前,再准备500毫升新鲜培养基。要收集样品,请关闭气体管线上的阀门并将 10 毫升注射器连接到采样口阀。连接注射器后,打开采样口阀并取出八毫升培养物。
然后关闭采样口阀并断开注射器。接下来,将装有八毫升新鲜培养基的注射器连接到采样口阀。然后打开阀门并注入新鲜培养基。
最后,关闭取样口阀并断开注射器。若要导出数据,请选择"文件和脱机数据"。选择所有相关日志文件后,将数据导出到电子表格软件并保存。
成功的实验的特点是紧密复制的昼夜产氧模式。氧气流速是培养物生长速率的代表。在照明时段,气体产量稳步增加,而在非照明时段,气体生产停止。
在每秒300微摩尔的光状态下 C.In,四天内产生的氧气总量从处理A的316毫升到处理A的902毫升不等,白天温度最多升高1.4摄氏度。培养温度在一夜之间恢复到基线。尽管它们的初始生物量浓度不同,但处理B和C产生的总生物量相同,导致培养基pH值发生相同的变化。
在线氧气流速数据显示,每种处理的日增长率各不相同,这也反映在每天两次的pH测量中。在第一天,处理B的生长速率低于处理C.而到第三天,处理B的生长速率超过了处理C.氧流速数据表明,在处理B的第三天生长最高。两个例子高估了增长。
这可能是受到晚上结束时确定的实验的影响。大量的夜间呼吸增加了氧气消耗,产生瓶头空间真空,从气体传感器吸入液体。如果呼吸可能很高,我们会在一夜之间打开头部空间。