The authors declare that they have no competing financial interests.

动物被容纳在阻挡病原体的分类设施。所有的动物都得到人性的关怀符合“校长实验动物照护”，被国家由全国社会医学研究“和”指南编制的国家科学院实验动物“的护理和使用制定并公布卫生研究院（NIH公开号86-23，修订1985）。所有的实验都是由奥地利教育部，科学和文化的批准。 1，收件人准备<ol><li>麻醉受体动物与肌肉注射甲苯噻嗪（5毫克/千克体重）和氯胺酮（100毫克/公斤体重）的。 </li><li>取下动物的颈外侧区的所有头发，擦洗术野用chlorhexdine三次。 </li><li>把鼠标在术野仰卧位。 </li><li>接下来做一个皮肤切口从颈INC8525.10.40.00-0到右下颌骨。 </li><li>随后，直截了当地调动了右颈外静脉（合资企业）与结扎线划分的分支。 </li><li>再除以结扎并确保留出足够的长度，以外翻近端残端在袖口身体之间的合资企业。 </li><li>接着取出颌下腺右叶。 </li><li>对于静脉吻合穿过聚乙烯袖口的合资企业的近端，并修复它在用微钳压脉袋的把手。 </li><li>除去结扎线在容器的端部，外翻的管腔通过压脉袋，并用8-0丝环（ 图1a）固定。 </li><li>随后横切右胸锁乳突肌与双极烧灼来访问颈总动脉。 </li><li>下一动员颈总动脉和切断连字之间的容器。 </li><li>下一动员颈总动脉和切断连字之间的容器。 </li><li>通过DIS通过袖口的容器TAL结束，并修复它与动脉夹。 </li><li>除去结扎线在容器的端部，并使用血管扩张器扩张的管腔。接下来，在类似于实施的合资企业，外翻的动脉上的压脉袋，并用8-0丝环固定。 </li></ol> 2，心脏采购<ol><li>麻醉供体小鼠的肌肉注射甲苯噻嗪（5毫克/千克体重）和氯胺酮（100毫克/公斤体重）的。然后取出动物的腹部区域的所有头发。使用chlorhexdine擦洗手术视野三次。如先前所描述的小鼠在手术视野仰卧位下位。 </li><li>下面正中腹部切口，收回了棉条的左侧内脏，以暴露下腔静脉（IVC）。 </li><li>注入400微升的1:4肝素钠溶液注入下腔静脉的肝素。 </li><li>在颅获得ACC进行开胸手术和折叠前胸壁ESS心脏。 </li><li>接着，取出胸腺和使排气中的左侧和右侧上腔静脉切口。 </li><li>随后，灌注心脏在逆行的方式与4摄氏度HTK在头臂分支的级解决方案的主动脉弓有27G的注射器插管。 </li><li>结扎劣质和上腔静脉与8-0丝绸和远端它们划分到连字。 </li><li>下一个分割的主动脉弓，在先前的插管的水平和解剖游离肺动脉干并把它作为远远侧越好。 </li><li>随后，配合肺静脉与散装结扎远端它们划分到连字。 </li><li>最后，从供体部位取出心脏，将其存储在4摄氏度HTK液（ 图1b）。 </li></ol> 3，植入<ol><li>将心脏移植的受体颈部处于倒挂位置（ 图1c </strong&gt;）。 </li><li>接着拉心脏的肺动脉干上收件人的静脉袖套结构和丝绸循环（ 图1d）修复它。 </li><li>进行接枝的主动脉和受体动物中的相同的方式（ 图1e）的外翻动脉之间的吻合。 </li><li>接着，除去静脉夹紧第一，其次是动脉夹。心脏的再灌注，并开始在1-2分钟跳动。再灌注期间，用温水（35摄氏度），生理盐水滋润的心脏。 </li><li>最后关闭手术伤口用6-0连续缝线（ 图1E）。 </li></ol> 4，术后护理，端点<ol><li>放弃0.3 ml生理盐水IP术后补液。 </li><li>将加热灯下的动物，直到从麻醉中醒来。 </li><li>一旦醒来，回到动物的地方，他们获得食物和水随意的住房设施。 </li><li>为了弥在第7天术后nimize疼痛管理卡洛芬（4毫克/公斤，每12小时皮下（SC），此外，在手术后右给Buprenorphin（0.1毫克/千克），每12小时5天。 </li><li>获得每个收件人的动物每周的重量（克），以评估适当的营养摄入。如果有超过10-15％的重量损失的证据相比，体重在手术至今，冷漠，致残或非常弯曲背部，使用终端异氟醚吸入达到临床终点前牺牲的动物。也牺牲动物后，心脏已被拒绝。 </li></ol>

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	<li>Brandacher, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tetrahydrobiopterin+compounds+prolong+allograft+survival+independently+of+their+effect+on+nitric+oxide+synthase+activity.">Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity.</a> Transplantation. 81, 583-589 (2006).</li><li>Schneeberger, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+secretory+leukocyte+protease+inhibitor+(SLPI)+on+ischemia/reperfusion+injury+in+cardiac+transplantation.">The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation.</a> Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).</li><li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IDO+and+regulatory+T+cell+support+are+critical+for+cytotoxic+T+lymphocyte-associated+Ag-4+Ig-mediated+long-term+solid+organ+allograft+survival.">IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival.</a> JImmunol. 188, 37-46 (2012).</li><li>Yamashita, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+is+essential+for+and+promotes+tolerance+to+transplanted+organs.">Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs.</a> FASEB J. 20, 776-778 (2006).</li><li>Kienzl, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+profiling+of+acute+cardiac+allograft+rejection.">Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection.</a> Transplantation. 88, 553-560 (2009).</li><li>Aurora, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Registry+of+the+International+Society+for+Heart+and+Lung+Transplantation:+tenth+official+pediatric+lung+and+heart/lung+transplantation+report--2007.">Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report--2007.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).</li><li>H&#228;yry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+allograft+vasculopathy+new+strategies+for+drug+development.">Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development.</a> Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).</li><li>Hosenpud, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+mechanisms+of+cardiac+allograft+vasculopathy+an+update.">Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update.</a> Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).</li><li>Libby, P., Pober, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+rejection.">Chronic rejection.</a> Immunity. 14, 387-397 (2001).</li><li>Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Late+graft+dysfunction+after+prolonged+cold+ischemia+of+the+donor+kidney+inhibition+by+cyclosporine.">Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine.</a> Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).</li><li>Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Etiology+and+pathophysiology+of+chronic+transplant+dysfunction.">Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction.</a> Transpl Int. 13, 385-401 (2000).</li><li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).</li><li>Huang, X., Chen, D., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[A+modified+model+of+cervical+heterotopic+cardiac+transplantation+for+chronic+rejection+research].">[A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research].</a> Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).</li><li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy.">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).</li><li>Wang, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+murine+cardiac+allograft+arteriopathy+by+long-term+blockade+of+CD40-CD154+interactions.">Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions.</a> Circulation. 105, 1609-1614 (2002).</li><li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51, 896-898 (1991).</li><li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).</li><li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant.">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).</li><li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice.+The+role+of+H-2D,+H-2K,+and+non-H-2+antigens+in+rejection.">Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li><li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts.">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+pretreatment+with+tetrahydrobiopterin+saves+pancreatic+isografts+from+ischemia+reperfusion+injury+in+a+mouse+model.">Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model.</a> Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).</li><li>Heron, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+accessory+cervical+heart+transplantation+in+rabbits+and+rats.">A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats.</a> Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).</li></ol>

This study has been supported by grant #207 of the &#8220;Medizinischer Forschungsfond Tirol&#8221;, grant #2010022010 of the &#8220;MUI-START F&#246;rderungsprogramm&#8221; of the Innsbruck Medical University.

血管移植物排斥反应蕴涵A过多的只能用体外模型无法充分评估不同的步骤。像收件人的敏化作用，抗原加工在次级淋巴器官，而且免疫感受态细胞的分化和增殖的现象是较好表征的体内 。动物模型，从而为翻译研究16的理想工具。小鼠模型仍然代表了基本的移植和免疫学研究的黄金标准，因为各种转基因和基因敲除小鼠是可用的，并且有大量的免疫和诊断工具已经开发专门?...

心脏移植代表的首选治疗患者不同的终末期心脏疾病的人。在外科手术技术，感染的更有效的预防，以及新颖的免疫抑制方案的进步导致器官移植6的显着改善的结果。然而，移植物长期存活并没有严格的改进，在过去几年7。慢性排斥反应，其特征在于，移植动脉硬化仍然是一个主要障碍移植物长期存活8-11。 异位心脏移植小鼠模型提供了免疫机制急性分析过程中一个重要而有效的工具，以及慢性排斥12-15。 到目前为止，最常见的移植模型仍然使用缝合技术腹部小鼠心脏移植。供体心脏的升主动脉的吻合了Abdominal主动脉与肺动脉吻合收件人的下腔静脉。多的缝合模式的显微难度是基于血管，这是缝合16,17的小尺寸。 与此相反的缝合模型的心脏被放置在外部颈静脉吻合肺动脉和普通颈动脉供体的主动脉接受者的颈部区域。 颈部心脏移植模型采用套管法的发展的理论基础是有一个动物模型，这使得实现高成功率基本显微外科技能，使这种模式的广泛应用。该方法的主要优点是显著较少发生吻合时相比，缝合模型18相关的像出血和血栓形成并发症。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Yasargil Clip Mini Permanent 7mm</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>FE720K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro vessel clip</td>
			<td>S &#38; T</td>
			<td>B1 00396 V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14075-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Vesseldilatator</td>
			<td rowspan="2">S &#38; T</td>
			<td rowspan="2">D-5a.2 00125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>Dumont 11271- 30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clipapplicator</td>
			<td>S &#38; T</td>
			<td>CAF-4 00072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvessel clip</td>
			<td>S &#38; T</td>
			<td>B1 00396 V</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique

<html>小鼠模型是因为各种各样的单克隆抗体的研究特别感兴趣，并规定商业自交系和基因敲除菌株可以在体内研究进行机械。虽然首次研制成功的心脏移植模型使用缝合技术，翻译成同样广泛使用的小鼠等同由于显微操作的技术复杂性是从来没有实现。与此相反，非缝合袖口技术，还大鼠开发起初，成功地适合于在小鼠1-3使用。这种技术血运重建包括两个主要步骤一）外翻收件人器中的聚乙烯袖口;二）拉在原外翻受区血管的供体船，并与圆周领带拿着到位。这确保了内皮细胞层，手术时间短和非常高的通畅率4的连续性。 T“&gt;使用这种技术的血管吻合我们进行了1000余异位心脏移植手术有95％的成功率。动脉流入颈总动脉和近端主动脉弓进行吻合导致移植心脏的逆行灌注。用于静脉引流的接枝的肺动脉吻合与接受者5的外颈静脉。 在此，我们提供这种技术，以补充视频的额外细节。

图2示出了从BALB / c小鼠供体移植心脏移植后的存活代表数据转换成完全MHC错配的C57BL / 6的收件人。心中都拒绝在移植后7±1天。移植的同种异体移植物的手指触诊是一个敏感的方法来检测移植排斥反应的时间依赖性过程。在我们的系列中执行的所有同种心脏移植存活下去（&gt; 150天）。 <img alt="图1" src="/files/ftp_upload/50753/50753fig1highres.jpg"...

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Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

鼠异位心脏移植模型非常适合于免疫学以及缺血再灌注损伤的研究。我们使用非缝合袖口技术改性的方法，用这种方法进行的1000多个成功的移植。 在此，我们提供这种技术，以补充视频的额外细节。

用改进的袖套法小鼠颈部心脏移植模型

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

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