啮齿动物异位心脏瓣膜移植的简化模型

心脏瓣膜移植被提议为一种新型移植，具有提供耐用心脏瓣膜的潜力，能够在不需要抗凝的情况下进行躯体生长。该技术是实用的，并且比以前研究心脏瓣膜移植免疫生物学的方法更直接。麻醉大鼠后，使用解剖剪刀将皮肤从剑突到胸骨切口。

并通过切除每侧的肋骨进行胸骨切除术，直到达到进入心脏的最佳途径。在左心房注射肝素。牺牲后，切除胸腺以改善大血管的可视化。

然后用升主动脉切除阻塞的心脏，直到无名动脉的水平。将供体心脏放入心脏开孔术后立即的无菌培养皿中后，在冰冷的冷藏缓冲液中，使用镊子和Vannas Spring剪刀解剖心脏，直到只有主动脉根部保留与主动脉瓣近端的一毫米心室袖带。为了打开主动脉瓣，做一个纵向切口以打开左侧和非冠状窦之间的Valsalva窦，以可视化所有三个小叶。

要单独切除每个主动脉瓣小叶，请使用钝镊子抓住小叶的边缘，并使用Vannas弹簧剪刀从一个孔向下切除小叶，然后向下切到环，然后朝向下一个孔。将切除的小叶储存在冰冷储存缓冲溶液中，直到它们准备好植入受体大鼠体内，但在冷藏后四小时内植入所有小叶。一旦接受者大鼠完全麻醉，在整个手术过程中用加热垫将体温保持在36至38摄氏度。

接下来，将大鼠置于右侧侧卧位以进入左侧肾脏。手术前将丁丙诺啡皮下施用于受者大鼠。并用剪刀将皮肤纵向插入侧面一英寸。

同样，切入下面的腹壁。使用拇指和食指，在使用弯曲的镊子时，对背部和腹侧施加轻微的压力。通过腹部和皮肤切口抬起肾脏的尾极。

类似地将肾脏的颅端外化。或者，肾脏可以通过抓住肾周脂肪并以轻微的张力向上拉来外化。外化后，用温热的盐水拭子擦拭肾脏保持肾脏湿润。

为了形成一个囊下袋，首先使用一组钝镊子对肾囊施加轻压，以便可以清楚地将肾囊与下面的实质区分开来。同时使用另一组钝镊子，小心地抓住胶囊并轻轻向上拉，在胶囊上形成一个洞。使用钝镊子，将切口延长，直到形成约两毫米的空间以容纳主动脉瓣小叶。

形成一个比瓣膜小叶稍大的浅囊下袋，同时用一组镊子抬起切口的边缘，并在肾囊下方推进钝探针。通过抬起边缘纤维囊，将主动脉瓣推进到带有钝镊子的包膜下袋中，开始移植取出的主动脉瓣。切口和肾囊可以保持打开状态。

使用施加在切口边缘的反拖法轻轻地将肾脏推回其解剖位置。用运行的无菌手术缝合线关闭腹部切口，并用钉书钉闭合皮肤。手术后，将老鼠放在干净的笼子里，放在加热垫上，以获得食物和水。

如果需要，每六至十二小时向受体大鼠施用丁丙诺啡以减轻疼痛。每天监测动物，以评估常规伤口愈合和疼痛或痛苦的迹象。并在手术七到十天后取下订书钉。

代表性图像显示用于实施的肾囊下主动脉瓣叶的位置。在受体大鼠体内三天，七天和二十八天后，定位和恢复移植的组织变得容易。主动脉瓣小叶在同源动物异位移植后保留了其原生结构。

证明该模型作为比较过敏性移植中免疫反应的基线的效用。苏木精和曙红染色的组织学检查显示，同源移植7天后瓣膜小叶结构完整，无水肿性肿胀迹象。移植后瓣膜小叶的结构完整性通过平滑肌肌动蛋白和CD31的免疫组化进一步证实。

主动脉瓣小叶非常娇嫩。在不损坏阀门的情况下非常小心地处理它们非常重要。肾囊下心脏瓣膜移植可简化异位心脏瓣膜移植。

这将使显微外科能力有限的研究人员能够探索心脏瓣膜移植的免疫生物学。