M.-A. Deutsch is supported by Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung f&#252;r Herzforschung and Deutsche Gesellschaft f&#252;r Thorax- Herz- und Gef&#228;&#223;chirurgie. M. Krane is supported by Deutsche Stiftung f&#252;r Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum f&#252;r Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) and Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)

所有实验均批准了德国心脏中心慕尼黑和德国巴伐利亚州（GZ。55.2-1-54-2532.3-17-13）的政府。动物饲养在无特定病原体设施，并与“实验动物保健的原则”，由国家红会的医学研究和“指南实验动物的护理和使用”由美国国家科学院提供的配方获得人文关怀符合科学和美国国立卫生研究院（NIH公开号86-23，1985年修订）出版。 注：一套完整的无菌显微仪器，其中包括两个弯钳和血管扩张器，是必要的过程（ 图2a）。围手术期抗生素预防是不是经常必要的，但可能在免疫功能低下的动物来表示。使用终端异氟烷吸入处死动物。 供体的制备与移植收获 &lt;OL&gt; <li>麻醉通过腹膜内（IP）的动物注射咪达唑仑（5.0毫克/千克），美托咪定（0.5毫克/千克）和芬太尼（0.05毫克/千克体重）。鼠标放置在上术野仰卧位置和确认手术耐受由踏板撤回反射。 </li><li>皮肤消毒三次氯己定和执行中线腹部切口。缩回用湿纱布肠内向左以暴露下腔静脉。 </li><li>注射50 IU肝素通过下腔静脉抗凝稀释0.4ml的生理盐水。切开肝素化后的容器1分钟。 </li><li>打开隔膜和执行双边开胸，露出心脏。前胸壁被优反射并在适当位置的夹紧保持。 </li><li>取出胸腺和直言解剖主动脉和肺动脉主干之间的结缔组织。切开右上腔静脉。 </li><li>穿刺动员升主动脉处的水平装在一个5毫升注射器头臂干与地下30针并缓慢灌注心脏retrogradually而没有过度的压力用3ml 4℃冷心脏停搏液。避免空气进入冠脉循环。掉落冰冷的生理盐水到移植物，以进一步提高心脏骤停。 </li><li>样近端主动脉至头臂干的起源。 </li><li>结扎下，并均优于腔静脉靠近心脏用8-0丝线和远端横切他们的连字。 </li><li>解剖游离肺动脉干的远端越好。结扎接近分叉8-​​0丝绸肺​​动脉和横切其远端。 </li><li>用一个8-0丝线结扎结扎肺静脉一起，横切它们。 </li><li>从供体取出心脏，并将其存储在冰冷的心脏停搏液，直到植入。 </li></ol> 2.收件人准备<ol><li>备通过切割聚酰亚胺管具有11号解剖刀或在显微镜下剪刀的袖口吻合。袖带包括一个圆柱体和一个延伸部分（圆周的1/3），用于安置所述血管夹，每1毫米（图2b）的长度的。 </li><li>麻醉动物，并确认手术耐受如上所述。注入0.25毫升温生理盐水溶液皮下注射（SC）的补液。 </li><li>卸下右颈部区域的使用的电动剃须刀的头发，然后将动物在一个温暖垫仰卧位置。固定双腿的胶带，同时避免过度拉伸的前肢，因为这会危及呼吸链。封面使用眼药膏，以防止干燥的眼睛。消毒手术部位三次洗必泰。 </li><li>做一个横向皮肤切口从右侧下颌角到颈静脉切迹。 </li><li>说白了动员分机ernal颈静脉。烧灼偏科用双极钳和横切它们。 </li><li>划分结扎的颈外静脉与下颌下腺静脉汇合处的水平。 </li><li>通过袖带拉颈外静脉，并通过将一血管钳上的袖带的延伸堵塞血管近侧。取出结扎和灌溉管腔1:10肝素生理盐水。 </li><li>外翻血管壁在压脉袋和与预设的圆周8-0丝线结扎固定。 </li><li>删除胸锁乳突肌的肤浅的一部分。 </li><li>动员的右颈总动脉和横切下面颈动脉分叉连字之间的容器中。 </li><li>通过袖带拉颈动脉和通过将Yasargil夹具上的袖带的延伸堵塞血管近侧。取出结扎和灌溉管腔1:10肝素生理盐水。 </li><li>轻轻dilatE中的动脉管腔与血管扩张器，外翻血管壁在袖口和预设的圆周8-0丝线结扎固定。 </li><li>为了获得足够的空间用于移植植入，取出颌下腺右叶。 </li><li>保持术野湿润，待注入。 </li></ol> 3.植骨<ol><li>放置在收件人颈部接枝与指向内侧主动脉和肺动脉横向倒置。 </li><li>拉移植物的主动脉在与该颈动脉的压脉袋，并固定吻合圆周8-0丝线结扎。 </li><li>切开肺动脉干在其前方面和在与该外部颈静脉压脉袋拉出。再次确保吻合圆周8-0丝线结扎。 </li><li>除去外部颈静脉夹具，通过松开所述颈动脉以下。心中有血立刻填补。提升自主eperfusion下降37℃温生理盐水溶液涂布到移植物。一般情况下，心脏的发展在一分钟内窦性心律。取出袖口延伸静脉部位。 </li><li>确保正确的移植物的位置，吻合口必须是无张力和船只没有扭转。不要在皮肤，因为这烧灼血管可能影响伤口愈合。出血一般自动停止。关闭皮肤用一个8-0连续缝合。 </li></ol> 4.术后护理<ol><li>注入0.25毫升温暖的生理盐水SC补液。 </li><li>为了对抗毒品注射纳洛酮（1.2毫克/千克），氟马西尼（0.5毫克/千克）和atipamezol（2.5毫克/千克体重）SC左动物的保暖垫，直到它已经恢复足够的意识，以保持胸骨斜卧。观察动物的至少一个附加小时到注册任何异常行为。不返回已经历手术给其他动物的公司，直到完全recove动物红色。 </li><li>提供超前镇痛丁丙诺啡（0.05毫克/千克SC每天三次）或根据本地机构协议72小时的步骤后的最小持续时间的替代镇痛。 </li><li>外科医生和一名兽医应定期看动物。如果体重下降&gt; 15％，冷漠，肿胀或手术侧感染动物的使用终端异氟烷吸入安乐死。 </li></ol>

<ol>
	<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice.">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplant Proc. 5, 733-735 (1973).</li><li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).</li><li>Martins, P. 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Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li><li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">Orthotopic liver transplantation in rats.</a> J Vis Exp : JoVE. , (2012).</li><li>Okazaki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+orthotopic+vascularized+aerated+lung+transplantation.">A mouse model of orthotopic vascularized aerated lung transplantation.</a> Am J Transplant. 7, 1672-1679 (2007).</li><li>Suzuki, H., Fan, L., Wilkes, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+obliterative+bronchiolitis+in+a+murine+model+of+orthotopic+lung+transplantation.">Development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation.</a> J Vis Exp : JoVE. , (2012).</li><li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+venous+bypass+graft+arteriosclerosis.">Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis.</a> Am J Pathol. 153, 1301-1310 (1998).</li><li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant.">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).</li><li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice:+experience+of+3000+operations+by+one+surgeon.">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon.</a> J Heart Lung Transplant. 20, 1123-1128 (2001).</li><li>Arras, M., Autenried, P., Rettich, A., Spaeni, D., Rulicke, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+intraperitoneal+injection+anesthesia+in+mice:+drugs,+dosages,+adverse+effects,+and+anesthesia+depth.">Optimization of intraperitoneal injection anesthesia in mice: drugs, dosages, adverse effects, and anesthesia depth.</a> Comp Med. 51, 443-456 (2001).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

我们已经完成了超过200个心脏移植，成功率为90％，在各种实验设置。与这里所描述的技术中，完整的程序，可在60分钟内由有经验的外科医生进行。由器官获取之前制备颈部血管，总接枝缺血时间可以限制到20分钟。时间用于植入（热缺血时间）是显著缩短使用袖套法相比，缝合技术16。 而不是简单地切除如前所述5,17的心脏，我们通过灌注移植与临床使用的?...

在心脏移植模型经常用于研究I / R损伤，移植排斥反应，移植后血管病变和免疫调节剂的效率。小鼠模型结合许多优点，如公知的免疫学和遗传背景，许多近交和转基因品系和相对低的成本的实验的可用性。 1973年，腹部心脏移植小鼠的技术由科里等 [1]首次描述。在此模型中的移植物是由升主动脉到主肺动脉到下腔静脉的收信人的腹主动脉和的端 - 侧吻合术吻合血管。 1991年，宫颈心脏移植小鼠缝合技术由陈等人 2被描述。在此模型中一个逆行冠状动脉灌注由收件人的颈动脉的吻合建立到克的升主动脉船尾。经由冠状窦静脉血液排入右心房，右心室，并通过肺动脉到受体颈外静脉（图1）排出。相较于腹腔移植植入颈椎模型是创伤小，移植物的位置表浅能够很容易获得额外的随访检查（ 如触诊，超声心动图，活体荧光显微镜）3,4。 尽管技术改进5,6，更广泛地使用这种模式已被有限的，由于技术上的困难进行了小血管缝合吻合术吻合口瘘和血栓形成的高发期。 1991年，松浦晃一郎等人 。引入其中血管壁被外翻在一个合成柱面，大大方便了颈部心脏移植7的模型的袖口技术。该技术是福rther通过了各种实验移植模型，包括8肾，胰9，四肢10，11,12肝，肺13,14和血管移植15。相比于缝合技术吻合术的所需时间，因此，热缺血时间较短，有显著较少血管并发症使用袖套法16。此外，它使医生与显微稍加培训与成功率高执行该操作。袖带技术的缺点是在颈总动脉，这可能会改变脑灌注的前提结扎。 在这个视频文章中，我们介绍了宫颈心脏移植小鼠改进和简化套管法。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Forceps JFC-7.2</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>P-00036</td>
			<td>Curved tip 0.20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel dilatator D-5a</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>S-00124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adventita scissor</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>S-00102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clamp B-1V</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>S-00396</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yasargil Clip</td>
			<td>Peter Lazic</td>
			<td>65,097</td>
			<td>3.5 mm lenght</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar forceps</td>
			<td>Micromed</td>
			<td>148-100-011</td>
			<td>tip 0.25 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyimide tubes</td>
			<td>River Tech Medical</td>
			<td></td>
			<td>19-24 gauge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8.0 silk ligatures</td>
			<td>Catgut</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custodiol HTK solution</td>
			<td>Essential Pharmaceuticals</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

heterotopic cervical heart transplantation in mice

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient&#8217;s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

我们的团队经过大约20个训练手术能成功执行所描述的技术。最具挑战性的部分是外翻颈动脉上的压脉袋的血管壁，因为它很容易翻转回来，多次尝试可能导致撕裂壁。训练期间之后，平均总手术时间为60±8分钟。大约20分钟都需要捐助的收获，25分钟准备的颈部血管和15分钟吻合及皮肤缝合的。 心肌I / R损伤的调查，我们进行了200的操作在同系的C57BL / 6小鼠中各种实验设置与92...

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Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

颈椎异位心脏移植小鼠

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

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