这项技术的主要优点是，它允许对鼠标心脏进行快速成像。它可以用来观察基因治疗后空气通道的存在。虽然此方法可以提供对心脏病学发展有深入的见解，但它也可以应用于其他系统，如神经学和肺病学。
一般来说，个人将很难与这种技术，因为安装成人小鼠心脏成像可能很困难，它不同于其他传统技术，如共和和倒置显微镜。放置三个波长为 405 纳米、473 纳米和 532 纳米的连续波激光器。然后，粘贴一面镜子，并在 45 度时将其与镜面对齐。
这将将激光引导到光束分路器，从而形成双面照明设置。接下来，通过一个直径为50毫米的中性密度滤波器、一个光束膨胀器和一个直径为25毫米的针孔，所有位置彼此150毫米。通过 50-50 光束分路器，从针孔放置 150 毫米。
接下来，将两个 150 毫米的镜面从光束分离器放置，在 90 度处放置到正向光束，并对齐它，使其镜面与光束保持 45 度角。然后，将镜子从镜子二处放置三个 100 毫米，并对齐镜子，使其镜面与从镜像二反射的光束保持 45 度角。使用此反射光束形成双照明灯片的一侧。
在梁分离器的远侧，放置镜面 5，以便其镜面在 45 度处，以向前进方向发射的光束。使用镜子五发出的光束形成双照明灯片的第二面。其次，以系统的方式建立双面照明系统。
将圆柱透镜两个 150 毫米远离镜子三，另一个相同的圆柱透镜 150 毫米远离镜子五，在另一侧的双照明设置。接下来，放置两面镜子，每面与圆柱镜一样，距离为 50 毫米，以 90 度反射光束。在光片的两侧，从一对透镜中形成一个无色双片，第一个镜头从前一面镜子放置100毫米，直径1英寸，焦距为100毫米。
第二个镜头应放置在镜头一的160毫米，直径为一英寸，焦距为60毫米。然后，将照明目标从以前的无色双精度线放置 1 和 2 个 150 毫米，以便它们与光束一致。从目标发出的光束形成用于成像样品的光片。
首先，在预热折射率匹配溶液中稀释0.53微米珠溶液（1至15万）来制备荧光珠样品，用1%的低熔体指向阿加糖。接下来，使用一块内径为 12 毫米、外径为 18 毫米、长度为 30 毫米的硅酸盐玻璃管。在硅酸盐管中移液珠子，使红糖在室温下凝固。
现在，用 99.5% 的陀螺仪溶液填充 3D 打印 ABS 腔室。将含有珠子的硅酸盐玻璃管放在室内。将三维电动平移级连接到硅酸盐玻璃管，以控制 ABS 腔室中样品的移动和方向。
然后，使用自定义设计的软件以每秒 30 帧的速度使用 sCMOS 摄像机获取图像。使用电机控制器，将样品在横向方向移动一毫米，并在每一毫米增量中获取图像，直到对整个样品进行成像。使用可视化软件堆叠采集的图像，并使用这些珠子图像测量系统的点传播功能。
使用 pH 为 7.5 的折射率匹配溶液，将 1% 的 agarose 溶解到匹配溶液中。将清除的成年小鼠心脏样本放入折射率匹配溶液中，溶解百分之一的阿加罗斯。然后，将样品插入硅酸盐玻璃管中，使糖在室温下凝固。
将三维电动平移级连接到硅酸盐玻璃管，以控制三维打印 ABS 腔室中样品的移动和方向。放置样品，使样品位于由双照明系统创建的高斯光束的中心。然后，将 sCMOS 摄像机的采集速率设置为每秒 30 帧。
现在，使用电机控制器，将样品在轴向方向上移动一毫米，并在每一毫米增量下获取图像。继续，直到整个样本被成像。使用可视化软件堆叠获取的图像。
使用这些图像堆栈开发三有图像。为此，可以解构以前确定的点传播函数，并用于获取的图像堆栈。最后，设置像素阈值强度值以观察心脏的轮廓，并基于此灰度强度向图像添加伪色。
在产后的第一天，人们可以可视化的阀门，中庭，心室，腹膜肌肉，和撕裂，以及其他功能。在产后第七天，特征更加明确。心房、心室、心室腔尺寸和心室壁厚都很明显。
为了研究心脏内的心肌细胞分化，异质细胞敲击小鼠被贴上了微环标签，以显示心肌细胞。标记的单元格显示在这里，在每个平面方向。三个平面被合并，以创建心脏的三D渲染。
内嵌内的红色圆圈区域显示两个半透明的小鼠心后，通过进行清晰度技术，并插入到硅酸盐玻璃管。除了研究产后小鼠，成像系统还可用于研究成年小鼠心脏。在这里，GFP 标记的 ROMK 频道显示在 7.5 个月。
这些主要发现在心室壁。一旦掌握了，这项技术可以在一到两分钟内完成。尝试此过程时，必须清除管中样品周围的所有气泡。
其他方法（如图像堆栈的自动分段）可以执行，以回答与心血管损伤和再生相关的其他问题。研究者在发育后，利用该技术研究小鼠产后和成人发育阶段的心脏结构。
